以Trop-2 為靶點(diǎn)的抗體偶聯(lián)藥物國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展

于東安，吳靜蕓，游 猛，周 偉，梅 菲，譚小釘（通信作者）

（江蘇邁威康新藥研發(fā)有限公司 江蘇 泰州 225300）

Trop-2 由TACSTD2 基因編碼表達(dá)，屬于TACSTD 蛋白家族成員，在上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化中發(fā)揮作用，能賦予腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲潛能，在正常組織中不表達(dá)或低表達(dá)，但在多種惡性腫瘤中過表達(dá)。Trop-2 的過表達(dá)與患者生存率降低以及腫瘤侵襲性和轉(zhuǎn)移性增加相關(guān)。在轉(zhuǎn)移性組織中的過表達(dá)使Trop-2 成為1 個(gè)非常具有吸引力和潛在的治療癌癥的靶點(diǎn)。近年來，多個(gè)基于Trop-2 的靶向抗體偶聯(lián)藥物（antibody-drug conjugate, ADC）已被研發(fā)出來并投入臨床。國(guó)外，先前已進(jìn)入臨床的首款獲FDA 批準(zhǔn)的Trop-2 靶向ADC Sacituzumab govitecanhziy（TRODELVY, IMMU-132, 下稱IMMU-132）于2020 年成功上市，另一款Trop-2 靶向ADC Datopotamab deruxtecan（Dato-DXd, DS-1062a, 下稱Dato-DXd）現(xiàn)也已進(jìn)入臨床階段。國(guó)內(nèi)部分同類藥物也已獲NMPA 批準(zhǔn)。本文將對(duì)國(guó)內(nèi)外以Trop-2 為靶點(diǎn)的ADC 的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1.Trop-2 的結(jié)構(gòu)與功能

1.1 Trop-2 的結(jié)構(gòu)

Trop-2 是一種36-kDa 的細(xì)胞表面糖蛋白，由323 個(gè)氨基酸組成，包括1 個(gè)疏水的前導(dǎo)肽、1 個(gè)胞外結(jié)構(gòu)域、1 個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和1 個(gè)細(xì)胞質(zhì)尾區(qū)。其N 端胞外結(jié)構(gòu)域（transducer 2 ectodomain, Trop2 EC）通過1 個(gè)跨膜螺旋（transmembrane, TM）和1 個(gè)含26 氨基酸殘基的胞內(nèi)疏水多肽短尾（transducer cytosolic regions, Trop2 IC）連接，從而使Trop-2 固定在細(xì)胞膜上。Trop2EC 包括1 個(gè)小N 端半胱氨酸豐富結(jié)構(gòu)域、1 個(gè)甲狀腺球蛋白1 型結(jié)構(gòu)域和1 個(gè)半胱氨酸頻發(fā)結(jié)構(gòu)域，因而可形成1 個(gè)穩(wěn)定的二聚體。EI Sewedy T 等研究發(fā)現(xiàn)Trop-2 的細(xì)胞質(zhì)尾區(qū)含有1 個(gè)高度保守的磷脂酰肌醇4,5-二磷酸（phosphatidylinositol4, 5-bisphosphate, PIP2）結(jié)合序列，該序列與蛋白激酶C 磷酸化位點(diǎn)重疊，推測(cè)PIP2 可能與Trop-2 的磷酸化和信號(hào)傳導(dǎo)有關(guān)。

1.2 Trop-2 的表達(dá)及功能

Trop-2 是重要的腫瘤發(fā)展因子，在多種腫瘤中有高表達(dá)，如肺癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌等，可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移擴(kuò)散等過程，其高表達(dá)也與腫瘤預(yù)后不良相關(guān)。INAMURA 等通過免疫組化試驗(yàn)（Immunohistochemical, IHC）研究了不同亞型肺癌中Trop-2 的表達(dá)，結(jié)果顯示，Trop-2 在腺癌（64%）、鱗狀細(xì)胞癌（75%）和高級(jí)神經(jīng)內(nèi)分泌瘤（18%）中有高表達(dá)。ZHANG 等用IHC 檢測(cè)了非肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌組織中Trop-2 的表達(dá)情況，并分析了Trop-2 與臨床病理因素和預(yù)后的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)Trop-2 在膀胱癌組織中有高表達(dá)（49%），且Trop-2 的高表達(dá)與腫瘤分級(jí)、分期和復(fù)發(fā)顯著相關(guān)。TREROTOLA 等系統(tǒng)地比較了腫瘤及其起源組織中Trop-2 的表達(dá)水平，IHC 分析顯示，與相應(yīng)的Trop-2 低或零表達(dá)的正常組織相比，胃癌（42%）、結(jié)腸直腸癌（41%）、前列腺癌（40%）、乳腺癌（39%）、卵巢癌（38%）、肺癌（31%）、腎癌（29%）、宮頸癌（20%）和子宮內(nèi)膜癌（16%）中，Trop-2 表達(dá)水平均有明顯上調(diào)。

TREROTOLA 等還發(fā)現(xiàn)Trop-2 表達(dá)水平的上調(diào)是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞更快生長(zhǎng)的充分必要條件，在體外和體內(nèi)均能定量地刺激腫瘤生長(zhǎng)。STOYANOVA 等研究證明了Trop-2 是自我更新、增殖和轉(zhuǎn)化的調(diào)節(jié)因子，其通過β-catenin 信號(hào)通路調(diào)節(jié)增殖和自我更新，從而能夠增強(qiáng)癌細(xì)胞的干細(xì)胞樣特性。

2.國(guó)外Trop-2 靶向ADC 研究進(jìn)展

基于Trop-2 結(jié)構(gòu)和功能特性，其已成為癌癥靶向治療的天然候選蛋白。目前國(guó)外已研發(fā)出多款Trop-2 靶向ADC。其中，IMMU-132 已于2020 年獲FDA 批準(zhǔn)上市，Dato-DXd 也已進(jìn)入Ⅲ期臨床。

2.1 IMMU-132 的研究現(xiàn)況

IMMU-132 是Immunomedics 公司研發(fā)的一款A(yù)DC，由人源化抗Trop-2 單抗hRS7 和伊立替康的活性代謝產(chǎn)物SN-38 偶聯(lián)而成。IMMU-132 可用于治療乳腺癌、尿路上皮癌、前列腺癌等。2020 年4 月，IMMU-132 獲FDA加速批準(zhǔn)，用于治療既往接受過至少2 種療法的轉(zhuǎn)移性三陰性乳腺癌（metastatic triple-negative breast cancer,mTNBC）的成人患者。2021 年4 月，F(xiàn)DA 已完全批準(zhǔn)IMMU-132 治療mTNBC，并批準(zhǔn)其用于局部晚期或轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌（metastatic urothelial carcinoma, mUC）的治療。FDA 批準(zhǔn)的用法用量為：21 d 為1 周期，第1 天和第8 天靜脈輸注10 mg/kg，持續(xù)給藥至疾病進(jìn)展或出現(xiàn)不可接受毒性。2019 年4 月，云頂新耀醫(yī)藥有限公司獲得了IMMU-132（戈沙妥珠單抗）在中國(guó)、韓國(guó)及部分東南亞國(guó)家的獨(dú)家權(quán)益。2021 年5 月，云頂新耀于國(guó)內(nèi)提交戈沙妥珠單抗治療mTNBC 的上市申請(qǐng)，并已被CDE 納入優(yōu)先審評(píng)通道。

最新針對(duì)mTNBC 的Ⅲ期臨床試驗(yàn)（NCT02574455）中，共納入529 例既往接受過治療的患者，按近似1:1的比例分為IMMU-132 給藥組（10 mg/kg，21 d 為1 周期，第1天和第8天靜脈給藥）和化療組（卡培他濱，艾瑞布林，長(zhǎng)春瑞濱或吉西他濱）。臨床結(jié)果顯示，給藥組vs 化療組的中位無進(jìn)展生存期（Median progression free survival,mPFS）為5.6 個(gè)月vs 1.7 個(gè)月，中位總生存期（median overall survival, mOS）為12.1 個(gè)月vs 6.7 個(gè)月，客觀緩解率（objective response rate, ORR）為35% vs 5%。常見不良事件（adverse events, AE）有中性粒細(xì)胞減少、白細(xì)胞減少、腹瀉、貧血等，其中，中性粒細(xì)胞減少為最嚴(yán)重或可威脅生命的AE。上述結(jié)果顯示，與化療組相比，IMMU-132 對(duì)既往接受過治療的mTNBC 患者的臨床療效更顯著。

一項(xiàng)針對(duì)mUC的Ⅱ期臨床試驗(yàn)（NCT03547973）中，113 例患者接受IMMU-132 給藥治療，中位隨訪時(shí)間為9.1 個(gè)月時(shí)，ORR 為27%，臨床獲益率（clinical benefit rate, CBR）為37.2%，中位持續(xù)緩解時(shí)間（median duration of remission, mDOR）為7.2 個(gè)月，mPFS 為5.4 個(gè)月，mOS 為10.9 個(gè)月。≥3 級(jí)的AE 有中性粒細(xì)胞減少、白細(xì)胞減少、貧血、腹瀉等。與歷史對(duì)照組相比，IMMU-132 在尿路上皮癌中也表現(xiàn)出顯著的療效。此外，IMMU-132 針對(duì)其他適應(yīng)證如非小細(xì)胞肺癌（non small cell lung cancer, NSCLC）、前列腺癌、惡性膠質(zhì)瘤的臨床試驗(yàn)也正處于招募中（NCT03337698、NCT03725761、NCT03995706）。

聯(lián)合用藥在抗腫瘤治療中往往療效更佳，因此IMMU-132 的聯(lián)合用藥方案也處于研究中。CARDILLO 等在攜帶BRCA1/2 突變HCC1806 TNBC 腫瘤的小鼠中，將IMMU-132 與三種PARP 抑制劑（Olaparib，Rucaparib 和Talazoparib）聯(lián)用，發(fā)現(xiàn)該療法的抗腫瘤效果顯著，不僅療效高于單藥治療，且耐受性良好。目前，IMMU-132聯(lián)合Talazoparib 的治療方案正處于Ⅰ/Ⅱ期臨床研究中（NCT04039230），與其他藥物聯(lián)用的方案也已進(jìn)入臨床階段（NCT05008510、NCT04434040、NCT04468061、N C T04448886、N C T04826341、N C T05186974、NCT04724018、NCT04863885）。

2.2 Dato-DXd 的研究現(xiàn)況

Dato-DXd 是日本Daiichi Sankyo 公司研發(fā)的一款A(yù)DC，由重組人源化的抗Trop-2 IgG1 單抗和拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑DXd（依喜替康的衍生物）偶聯(lián)而成。其DAR 為4，兼具良好的療效和安全性，在臨床中具有良好的前景。

OKAJIMA 等對(duì)Dato-DXd 進(jìn)行的臨床前研究結(jié)果顯示，Dato-DXd 可與Trop-2 發(fā)生特異性結(jié)合，且對(duì)人和食蟹猴Trop-2 有相似的結(jié)合親和力，但不與大鼠和小鼠Trop-2 的結(jié)合。在NCI-N87 異種移植小鼠模型中，單次靜脈給藥10 mg/kg 即可明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，腫瘤抑制率為96%。在食蟹猴中，Dato-DXd 在劑量為6 mg/kg 時(shí)的最終消除半衰期為（45.12±13.92）h。在多種腫瘤細(xì)胞系（包括FaDu、BxPC-3、Caov-3、NCI-N87、CFPAC-1、HCC1806 和COR-L23）中，發(fā)現(xiàn)Dato-DXd 明顯抑制了Trop-2 高表達(dá)細(xì)胞系的細(xì)胞生長(zhǎng)。同時(shí)，在研究者建立的Calu-3、NCI-H2170、HCC827、EBC-1 等CDX 模型以及CTG-0163、CTG-0838、CTG-1014 等PDX 模型中，Dato-DXd 也顯示出對(duì)Trop-2 高表達(dá)腫瘤生長(zhǎng)的高效抑制作用。大鼠和猴子中的毒性試驗(yàn)顯示，Dato-DXd 的耐受性良好：Dato-DXd 在200 mg/kg 劑量時(shí)都未在大鼠中出現(xiàn)死亡和威脅生命的毒性；在食蟹猴中的最高非嚴(yán)重毒性劑量為10 mg/kg，≥30 mg/kg 時(shí)才會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的肺毒性和可逆的皮膚、眼角膜病變；一般拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑常見的安全問題是胃毒性和骨髓毒性，但Dato-DXd 在大鼠和猴子中僅表現(xiàn)出輕微的腸道或造血毒性。

一項(xiàng)Ⅰ期臨床（NCT03401385）公開的早期結(jié)果顯示，NSCLC 隊(duì)列中，175 例患者接受Dato-DXd 給藥（4 mg/kg、6 mg/kg 或8 mg/kg），中位隨訪時(shí)間為7.4 個(gè)月時(shí)，ORR 分別為23%、21%和25%，mPFS 分別為4.3、8.2 和5.4 個(gè)月，疾病控制率（disease control rate,DCR）分別為73%、67%和80%。最常見的AE 是口腔炎、惡心、黏膜炎等，4 mg/kg 和6 mg/kg 劑量組的耐受性更高，8 mg/kg 劑量組出現(xiàn)了較嚴(yán)重的（包括3 例死亡）藥物相關(guān)性間質(zhì)性肺?。╥nterstitial lung disease, ILD）。最終選擇6 mg/kg 作為最佳劑量。TNBC 隊(duì)列中，24 例患者接受Dato-DXd 給藥（6 mg/kg 或8 mg/kg），截至2021 年1 月8 日，初步ORR 為43%，5 例已完全或部分緩解，DCR 達(dá)到95%，常見AE 與在NSCLC 中的類似，但未出現(xiàn)ILD。Dato-DXd 針對(duì)NSCLC 和TNBC 的II/III 期臨床研究也正在進(jìn)行中（NCT04484142、NCT04940325、NCT04656652、NCT03742102、NCT05104866）。

3.國(guó)內(nèi)Trop-2 靶向ADC 研究進(jìn)展

Trop-2 作為一大熱門靶點(diǎn)，近些年，國(guó)內(nèi)也開展了對(duì)此靶點(diǎn)的研究，出現(xiàn)了幾款很具臨床價(jià)值的Trop-2靶向ADC。（1）SKB264 是四川科倫藥業(yè)研發(fā)的一款Trop-2 靶向的注射用ADC，由新型Trop-2 單克隆抗體和毒性小分子偶聯(lián)而成。2019 年8 月，SKB264 獲FDA批準(zhǔn)開展臨床試驗(yàn)，2020 年4 月獲NMPA 批準(zhǔn)開展臨床試驗(yàn)，是第2 個(gè)實(shí)現(xiàn)中美雙報(bào)的ADC。2020 年3 月，SKB264 啟動(dòng)了在局部晚期或轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤患者中開展的國(guó)際多中心Ⅰ～Ⅱ期首次人體試驗(yàn)，國(guó)內(nèi)臨床試驗(yàn)登記號(hào)為CTR20201069，ClinicalTrial 臨床試驗(yàn)登記號(hào)為NCT04152499。2021 年，在ESMO 和CSCO 大會(huì)上公開的SKB264 的Ⅰ期臨床數(shù)據(jù)顯示，中美共入組18 例患者，在2 ～6 mg/kg 劑量范圍內(nèi)，單次給藥后總抗和ADC 的暴露量與劑量的增加基本呈線性關(guān)系，多次給藥后的PK 暴露與單次給藥后無顯著差異，提示藥物在血液循環(huán)中無蓄積。在接受療效評(píng)估的17 例患者中，ORR 為35.3%，DCR 為70.6%。常見1 ～2 級(jí)的AE 有惡心、脫發(fā)、嘔吐，≥3 級(jí)的AE 有中性粒細(xì)胞減少、白細(xì)胞減少、貧血，但經(jīng)治療后均可恢復(fù)。（2）JS108 是由君實(shí)生物研發(fā)的一款注射用重組人源化抗Trop-2 單抗-Tub196 偶聯(lián)劑。2020 年7 月，JS108 獲得NMPA 批準(zhǔn)開展臨床試驗(yàn)，啟動(dòng)了在晚期實(shí)體瘤患者中開展的Ⅰ期臨床試驗(yàn)，國(guó)內(nèi)臨床試驗(yàn)登記號(hào)為CTR20201860。（3）ESG-401 是上海詩(shī)健和聯(lián)寧（蘇州）聯(lián)合研發(fā)的一款重組人源化抗Trop-2 單抗-SN-38 偶聯(lián)物。2021 年7 月，ESG-401 獲得NMPA 批準(zhǔn)開展臨床試驗(yàn)。2021 年9 月，ESG-401 啟動(dòng)了在局部晚期轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤患者中開展的Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗(yàn)，國(guó)內(nèi)臨床登記號(hào)為CTR20212074。（4）FDA018 是上海復(fù)旦張江研發(fā)的一款注射用抗體偶聯(lián)劑。2021 年6 月，F(xiàn)DA018 獲NMPA 批準(zhǔn)開展臨床試驗(yàn)，啟動(dòng)了在晚期實(shí)體瘤患者中開展的Ⅰ期臨床試驗(yàn)，國(guó)內(nèi)臨床試驗(yàn)登記號(hào)為CTR202112293。

4.結(jié)語

隨著對(duì)Trop-2 的不斷研究深入，Trop-2 已成為一種癌癥治療的理想靶點(diǎn)。先前多數(shù)研究表明，以Trop-2 為靶點(diǎn)的藥物的臨床價(jià)值較高。近年來，已上市的IMMU-132 和其他正處于臨床階段的Trop-2 靶點(diǎn)ADC 均在臨床中表現(xiàn)出良好的療效，證明了Trop-2 靶向治療的有效性和可行性。然而，Trop-2 靶點(diǎn)ADC 的作用機(jī)制、聯(lián)合治療方案以及副作用仍需進(jìn)一步研究。期待未來出現(xiàn)更多更有效的Trop-2 靶向ADC 和治療方案，以及越來越多的患者從中獲益。