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    焦防風(fēng)炮制工藝優(yōu)化研究

    2022-11-04 07:22:24李余先張俊國
    吉林蔬菜 2022年4期
    關(guān)鍵詞:補骨脂素維斯升麻

    李余先 張俊國

    (1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院中藥學(xué)學(xué)院 吉林 132101 2.吉林省白山本苜藥業(yè)有限公司 長春 130600)

    1 實驗儀器及材料

    1.1 試驗材料

    防風(fēng)(河北福君堂藥業(yè)有限公司)、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品、5-O-甲基維斯阿米醇苷標(biāo)準(zhǔn)品、升麻素苷標(biāo)準(zhǔn)品、升麻素標(biāo)準(zhǔn)品、補骨脂素標(biāo)準(zhǔn)品、(標(biāo)準(zhǔn)品均為上海源葉生物科技有限公司)。

    1.2 試驗儀器

    炒藥機(南京海善制藥設(shè)備有限公司)、2H-200A型手提式粉碎機(西安寶正實業(yè)有限公司)、SB-5200DT型超聲波清洗機(寧波新藝超聲設(shè)備有限公司)、J-HH-6A型精密數(shù)顯恒溫水浴鍋(上海皓莊儀器有限公司)、AUW120D分析天平(日本島津)、高效液相儀器(日本島津)、SHB-IV型循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)、N-1100型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛朗儀器有限公司)、OSB-2100型水浴鍋(上海愛朗儀器有限公司)、SB-5200DT型超聲波清洗機、(寧波新藝超聲設(shè)備有限公司)、TS100恒溫振動儀(杭州瑞誠儀器有限公司)

    2 方法與結(jié)果

    2.1 焦防風(fēng)炮制工藝優(yōu)化研究

    2.1.1 焦防風(fēng)的制備

    將凈選或切制后的防風(fēng)飲片,置炒制容器中,用中火或武火加熱,炒至藥物表面呈焦黃色或焦褐色,內(nèi)部顏色加深,并伴有焦香氣味。

    2.1.2 HPLC法測定防風(fēng)樣品中麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷)、補骨脂素的含量

    2.1.2.1 色譜條件確立:色譜柱為Diamonsil C18柱(4.6mm×250 mm,5μm),流動相為乙腈-水(15∶85),檢測波長為254nm,流速為1.0mL/mim。

    2.1.2.2 對照品溶液制備:用微量分析天平精密稱定0.99mg升麻素、0.72mg5-O-甲基維斯阿米醇苷、0.91mg升麻素苷、0.90mg補骨脂素,混合加入1mL的色譜甲醇制成每1mL含有3.52mg物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

    2.1.2.3 樣品溶液處理:用分析天平分別精密稱定0.2500g生品防風(fēng)、焦防風(fēng)的細(xì)粉,各自放置在25mL具塞錐形瓶中,用移液管精密吸取10.00mL甲醇加入其中,稱定重量,水浴回流2h,靜置放涼,再稱定其重量。缺失的重量用甲醇補足,搖勻靜置,樣品圖譜見圖。

    圖1 對照品(A)、生防風(fēng)(B)、焦防風(fēng)(C)分別在245NM波長下的色譜圖

    2.1.2.4 方法學(xué)考察:線性關(guān)系考察:取2.1.2.2下的對照品溶液,按2.1.2.1的色譜條件進(jìn)行測定,進(jìn)樣體積分別為1、2、5、10和20 uL,進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制,升麻素苷:Y=7.063787e-007X+7.451957e-003,R2=0.9996,濃度范圍(mg/uL)0.091-0.91;升麻素:Y=5.016273e-007X+4.634783e-003,R2=0.9996,濃度范圍(mg/uL)0.099-0.99;5-O-甲基維斯阿米醇苷:Y=1.352315e-006X+7.793854e-003,R2=0.9995。

    精密度實驗:精密吸取混合對照品溶液10μl,按上述色譜條件測定,選擇重復(fù)進(jìn)樣6次,計算各目標(biāo)化合物峰面積的RSD值,結(jié)果表明升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、補骨脂素RSD分別為1.321%、1.019%、0.984%、1.523%。

    重現(xiàn)性實驗:取同一條件炮制的苦參樣品6份,按上述樣品處理方法將其制成供試品溶液,按上述色譜條件,分別進(jìn)行進(jìn)樣檢測,測得各色譜峰峰面積的RSD值,結(jié)果表明升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、補骨脂素RSD分別為0.978%、1.562%、1.041%、1.324%。

    穩(wěn)定性實驗:取上述樣品溶液,分別在0h、4h、8h、12h、24h,按上述液相色譜條件,分別進(jìn)行進(jìn)樣測定,測得各指標(biāo)性成分色譜峰峰面積RSD值,結(jié)果表明升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、補骨脂素RSD分別為1.011%、1.232%、1.541%、1.421%。

    加樣回收率試驗:分別精密稱取焦防風(fēng)樣品3份,分別加入已精密稱定的升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、補骨脂素,按2.1.2.3方法將其制成供試品溶液,按2.1.2.1液相色譜條件測定測定含量,分別計算加樣回收率和RSD值,結(jié)果表明升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、補骨脂素RSD分別為2.011%、2.056%、1.968%、1.894%,平均加樣回收率分別100.5%、99.8%、98.7%、100.2%。

    2.1.3 焦防風(fēng)炮制工藝兩因素試驗

    取大小均勻,色澤均一的焦防風(fēng)9份,每份100g,以炒制溫度,炒制時間為考察因素,每個因素3個水平,通過兩因素方差分析試驗,篩選焦防風(fēng)的最佳炮制工藝。將升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、補骨脂素的總含量作為主要評價指標(biāo),篩選優(yōu)化炮制工藝。

    實驗因素水平:炒制溫度分別為160℃、180℃、200℃;炒制時間分別為7、9、11min。焦防風(fēng)兩因素試驗結(jié)果見表1。

    表1 焦防風(fēng)兩因素試驗結(jié)果

    利用SPSS22.0對其進(jìn)行方差分析。結(jié)果顯示,影響防風(fēng)炒焦工藝因素因素A(炒制溫度),B(炒制時間),A溫度×B時間(交互作用)存在顯著性差異P<0.05,對試驗結(jié)果具有一定的影響。各因素對試驗結(jié)果的影響,優(yōu)選出防風(fēng)炒焦的最佳工藝為A2B1,溫度180℃,炒制7min。

    2.1.4 驗證試驗

    按2.1.3優(yōu)選的工藝制備3份樣品,測定升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、補骨脂素總含量,結(jié)果顯示升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、補骨脂素總含量(%)分別為1.369、1351、1.378。結(jié)果表明焦防風(fēng)炮制工藝穩(wěn)定可行。

    3 結(jié)論與討論

    本實驗對焦防風(fēng)炮制工藝開展研究,利用兩因素實驗設(shè)計優(yōu)選兩種炮制品最佳炮制工藝,優(yōu)選出防風(fēng)炒焦的最佳工藝為A2B1,溫度180℃,炒制7min。比較炮制前后升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、補骨脂素總含量變化,為防風(fēng)炮制工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范化奠定基礎(chǔ)。

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