淫羊藿苷劑量對靜脈血栓模型大鼠凝血功能、炎癥因子及纖溶指標(biāo)的影響

楊濤 賈兆晉 宋冀東 王東 張春梅

1唐山市工人醫(yī)院（河北唐山 063000）；2唐山市婦幼保健院（河北唐山 063000）

深靜脈血栓形成作為嚴(yán)重威脅人類健康的常見周圍血管疾病，具有較高的發(fā)病率、致殘率與致死率，其在心腦血管疾病發(fā)病中位列第三，僅次于心肌梗死與腦卒中［1］。癌癥、外科手術(shù)、骨折、產(chǎn)褥期、口服避孕藥等，都是深靜脈血栓形成的常見危險因素［2-3］。目前臨床上預(yù)防深靜脈血栓形成主要通過口服或注射抗凝藥物，然而，抗凝藥物在應(yīng)用中有許多的局限性，因為該類藥物主要是通過降低凝血水平來預(yù)防深靜脈血栓的形成；可是，深靜脈血栓的形成不僅與凝血系統(tǒng)有關(guān)，還與血管內(nèi)膜損傷、炎癥損傷及血液流速具有密切的聯(lián)系［4］。

現(xiàn)代中醫(yī)根據(jù)發(fā)病機制將深靜脈血栓栓塞分為氣虛血瘀型、脾腎陽虛型及濕熱下注型，而“淤血”貫穿于深靜脈血栓的發(fā)生與發(fā)展，因而中醫(yī)內(nèi)治方主要以“清熱利濕、活血通脈”為主，再輔以針灸、外敷、熏洗等外治或綜合療手段。淫羊藿苷是淫羊藿中淫羊藿總黃酮的主要成分，其具有降黏解聚、阻滯血瘀與預(yù)防血栓的作用，在心血管疾病中受到了廣泛關(guān)注［5-7］，但其作用機制還有待研究。本實驗主要觀察淫羊藿苷對靜脈血栓大鼠凝血功能、炎癥因子及纖溶系統(tǒng)的影響，進(jìn)一步明確其作用機制，為中醫(yī)治療臨床預(yù)防與治療深靜脈血栓形成提供實驗室數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 淫羊藿苷（≥98% HPLC，南京廣潤生物制品有限公司），戊巴比妥鈉（北京智杰方遠(yuǎn)科技有限公司），白細(xì)胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、組織型纖溶酶原激活劑（tissue plasminogen activator，tPA）、纖溶酶原激活劑抑制劑-1（plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1）Elisa 試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司），電子天平（華志科學(xué)儀器有限公司），全自動凝血分析儀（南京貝登醫(yī)療股份有限公司），離心管（寧波拓普森科學(xué)儀器有限公司），Power SYBR Green PCR Master Mix 試劑盒（北京雅安達(dá)生物技術(shù)有限公司），cNDA 逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（廣州泛思生物科技有限公司），NF-κB p65、VCAM-1、TF、GAPDH 抗體（碧云天生物技術(shù)有限公司）。

實驗動物：10 周齡SD 大鼠54 只，雌雄各半，體質(zhì)量（230±30）g，清潔級，購自河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心，使用許可SYXK（冀）2020-002。飼養(yǎng)于實驗動物房中，溫度22 ～25 ℃，空氣相對濕度50% ～65%，光暗循環(huán)周期為12 h/12 h，大鼠自由攝食、飲水。實驗過程中對動物的處理嚴(yán)格依照國家對醫(yī)學(xué)實驗動物的相關(guān)要求進(jìn)行。

1.2 實驗分組 采用隨機數(shù)字表法將54只大鼠分為5 組，假手術(shù)組（n=10）、血栓組（n=14）、低劑量淫羊藿苷組（n=10）、中劑量淫羊藿苷組（n=10）、高劑量淫羊藿苷組（n=10），假手術(shù)組開腹后僅游離下腔靜脈，不給予結(jié)扎處理，其余4 組均進(jìn)行靜脈血栓造模。

造模方法：參考以往研究方法［8］復(fù)制靜脈血栓模型。3%戊巴比妥鈉（1.2 mL/kg）腹腔注射麻醉實驗大鼠，將大鼠仰臥位固定于操作臺上，腹中部除毛，碘伏消毒后鋪巾，在劍突下腹正中做一長約6 cm 的切口，暴露腹腔，仔細(xì)游離左腎靜脈與下腔靜脈匯合處，將1 mL 注射器針頭與下腔靜脈平行放置，采用4-0 慕絲線結(jié)扎左腎靜脈下方的下腔靜脈，緩慢抽出針頭?？p合切口。術(shù)后腹腔注射青霉素10 萬U 預(yù)防感染。結(jié)扎24 h 后，從血栓組中隨機選擇4 只大鼠麻醉后處死，打開腹腔，解剖下腔靜脈見血栓形成，說明造模成功。

給藥方法：結(jié)扎1、24、48、72 h 后，低、中、高劑量淫羊藿苷組大鼠舌下靜脈注射10、20、40 mg/kg的淫羊藿苷溶液，假手術(shù)組、血栓組大鼠舌下靜脈注射1 mL/（kg·d）的生理鹽水，每種劑量給藥4 次。

1.3 血液學(xué)指標(biāo)檢測 末次給藥1 h 后，頸總動脈采血，置于含枸櫞酸鈉溶液的離心管內(nèi)，混勻后室溫下3 000 r/min 離心10 min，獲取上清液，采用全自動凝血分析儀檢測凝血功能指標(biāo)部分凝血活酶時間（activated partial thromboplastin time，APTT）、凝血酶原時間（prothrombin time，PT）、凝血酶時間（thrombin time，TT）、D-二聚體（D dimer，D-D）濃度。頸總動脈采血，置于普通離心管內(nèi)靜置30 min，3 000 r/min 離心10 min，獲取上清液，-80 ℃保存，采用Elisa 法檢測上清液中炎癥因子IL-1β、TNF-α濃度，采用Elisa 法檢測上清液中tPA 和PAI-1 的濃度。Elisa 法檢測嚴(yán)格參照試劑盒說明書進(jìn)行相應(yīng)操作。

1.4 血栓重量檢測 處死大鼠后，完整取出兩結(jié)扎點之間的下腔靜脈，小心分離下腔靜脈內(nèi)皮與血栓，取出血栓組織塊，洗去多余水分；隨后轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中，置于干燥器內(nèi)室溫干燥24 h，稱重。計算血栓抑制率，血栓抑制率=（m血栓組重量-m實驗重量）/m血栓組重量×100%。

1.5 RT-PCR 檢測 取下腔靜脈血管組織，勻漿后提取組織總RNA，按照cNDA 逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將血管組織RNA 逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，反應(yīng)條件為：37 ℃1 h，95 ℃3 min。以cNDA 為模板，按Power SYBR Green PCR Master Mix試劑盒說明書配RT-PCR反應(yīng)體系，反應(yīng)條件，95 ℃3 min，93 ℃30 s，55 ℃45 s，共40 個循環(huán)。引物序列：（1）NF-κB p65，上游引物5′-CCGGAGCTGGAGAACAACAAG-3′，下游引物5′-GCACTGGCCGGAGCACACC-3′；（2）VCAM-1，上游引物5′-CCGCGAGCGGGAGCGCAT-3′，下游引物5′-GCCACATCAGCCAGGTTGTACACC-3′；（3）TF，上游引物5′-ACAAACTGTTTTGAAAATCCA-3′，下游引物5′-CGAGTCATTGCATACTGTCC-3′；（4）GAPDH，上游引物5′-GAGGGAAATCGTGCGTGAC-3′，下游引物5′-CTGGAAGGTGGACAGTGAG-3′。

1.6 Western blot 檢測 取100 mg 下腔靜脈血管組織，加入組織裂解液1 mL，勻漿，4 ℃下14 000×g離心10 min，獲取上清液。利用BCA 法檢測蛋白濃度。將蛋白樣本置入沸水中煮沸5 min，冷卻后置于-20 ℃冰箱內(nèi)保存。配制分離膠、濃縮膠，拔梳子，加入蛋白樣品20 μL/孔，上層濃縮膠恒壓80 V電泳30 min，下層分離膠恒壓120 V 電泳100 min，轉(zhuǎn)至PVDF 膜上，轉(zhuǎn)膜50 ～100 min；洗膜3 次，置入5%BSA 中慢速封閉2 h，再次洗膜3 次，將膜浸泡于一抗（1∶1 000）中4 ℃孵育過夜，一抗分別為NF-κB p65、VCAM-1、TF、GAPDH；洗膜3 次，將膜浸泡于羊抗兔二抗（1∶500）中室溫孵育1 h；洗膜3 次，ECL 顯影。

1.7 統(tǒng)計學(xué)方法 采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 23.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料采取均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的表達(dá)方式，多組間比較進(jìn)行單因素方差分析，兩組之間作獨立樣本t檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 術(shù)后實驗動物一般情況 假手術(shù)組大鼠術(shù)后精神狀態(tài)良好，飲食、活動正常；血栓組大鼠術(shù)后飲食及活動量減少，下肢紅腫，皮溫增高，經(jīng)過藥物治療后上述癥狀逐漸好轉(zhuǎn)。假手術(shù)組大鼠術(shù)后精神狀態(tài)良好，飲食、活動正常；血栓組大鼠術(shù)后飲食及活動量減少，下肢紅腫，皮溫增高，經(jīng)過藥物治療后上述癥狀逐漸好轉(zhuǎn)。

2.2 大鼠血栓重量 5 組大鼠靜脈血栓大體觀見圖1。相較于血栓組，低、中、高劑量淫羊藿苷大鼠血栓干重量明顯下降（P＜0.05），并且中劑量組血栓干重量低于低劑量淫羊藿苷組（P＜0.05），高劑量淫羊藿苷組低于中劑量淫羊藿苷組（P＜0.05）。見表1。

圖1 大鼠靜脈血栓大體觀Fig.1 General view of venous thrombosis in rats

表1 大鼠血栓干重量Tab.1 Thrombus dry weight in rats ±s

表1 大鼠血栓干重量Tab.1 Thrombus dry weight in rats ±s

注：aP ＜0.05，vs.血栓組；bP ＜0.05，vs.低劑量淫羊藿苷組；c P ＜0.05，vs.中劑量淫羊藿苷組

?

2.3 大鼠血液學(xué)指標(biāo)檢測

2.3.1 凝血功能 相較于假手術(shù)組，血栓組APTT、PT、TT 減少（P＜0.05），D-D 濃度升高（P＜0.05）。相較于血栓組，低、中、高劑量淫羊藿苷組大鼠血清APTT、PT、TT 增加（P＜0.05），D-D 濃度降低（P＜0.05），并且該作用具有淫羊藿苷劑量依賴性，淫羊藿苷劑量越大作用越顯著。見表2。

表2 大鼠凝血功能指標(biāo)Tab.2 Coagulation function indexes of rats ±s

表2 大鼠凝血功能指標(biāo)Tab.2 Coagulation function indexes of rats ±s

注：aP ＜0.05，vs.血栓組；bP ＜.05，vs.低劑量淫羊藿苷組；cP ＜0.05，vs.中劑量淫羊藿苷組

分組假手術(shù)組血栓組低劑量淫羊藿苷組中劑量淫羊藿苷組高劑量淫羊藿苷組F值P值A(chǔ)PTT（s）28.73±2.38a 14.94±3.15 17.08±2.21a 20.62±1.78b 24.85±2.19c 8.276 0.031 PT（s）14.54±0.27a 9.63±0.17 10.38±0.38 11.57±0.43b 13.64±0.51c 14.894 0.013 TT（s）22.66±2.16a 14.72±0.19 16.29±0.17a 18.56±0.11b 20.98±0.15c 17.235 0.011 D-D（μg/L）49.85±4.25a 132.09±9.17 103.08±5.61a 88.33±3.68b 65.19±1.27c 19.512 0.008

2.3.2 炎癥因子 相較于假手術(shù)組，血栓組IL-1β、TNF-α 濃度顯著升高（P＜0.05）；相較于血栓組，低、中、高劑量淫羊藿苷組IL-1β、TNF-α 濃度顯著降低（P＜0.05）；中劑量淫羊藿苷組IL-1β、TNF-α 濃度低于低劑量淫羊藿苷組（P＜0.05），高劑量淫羊藿苷組IL-1β、TNF-α 濃度低于中劑量淫羊藿苷組（P＜0.05）。見表3。

表3 5 組大鼠血清的炎癥因子與纖溶系統(tǒng)濃度Tab.3 Serum inflammatory factors and fibrinolytic system concentrations in 5 groups ±s

表3 5 組大鼠血清的炎癥因子與纖溶系統(tǒng)濃度Tab.3 Serum inflammatory factors and fibrinolytic system concentrations in 5 groups ±s

注：aP ＜0.05，vs.血栓組；bP ＜0.05，vs.低劑量淫羊藿苷組；cP ＜0.05，vs.中劑量淫羊藿苷組

分組假手術(shù)組血栓組低劑量淫羊藿苷組中劑量淫羊藿苷組高劑量淫羊藿苷組F 值P 值IL-1β（ng/L）58.01±8.21a 118.29±13.18 102.14±9.43a 88.37±6.81b 71.09±4.97c 11.743 0.003 TNF-α（ng/L）109.24±18.33a 145.93±20.07 136.28±14.24a 124.79±15.26b 113.07±10.62c 9.351 0.001 tPA（μg/L）13.56±3.07a 6.67±1.46 8.99±2.52a 10.37±2.88b 11.79±3.38c 16.672＜0.001 PAI-1（μg/L）35.35±7.23a 96.37±19.13 82.03±11.05a 69.38±9.76b 49.07±8.22c 14.357＜0.001

2.3.3 纖溶系統(tǒng)指標(biāo) 相較于假手術(shù)組，血栓組tPA 濃度顯著降低（P＜0.05），PAI-1 濃度顯著升高（P＜0.05）；相較于血栓組，低劑量淫羊藿苷組tPA濃度顯著升高（P＜0.05），PAI-1 濃度顯著降低（P＜0.05）；相較于低劑量淫羊藿苷組，中劑量淫羊藿苷組tPA 濃度顯著升高（P＜0.05），PAI-1 濃度顯著降低（P＜0.05）；相較于中劑量淫羊藿苷組，高劑量淫羊藿苷組tPA 濃度顯著升高（P＜0.05），PAI-1 濃度顯著降低（P＜0.05）。見表3。

2.4 RT-PCR 檢測 相較于假手術(shù)組，模型組NFκB p65、VCAM-1、TF mRNA 表達(dá)量顯著增加（P＜0.05）；相較于血栓組，低、中、高劑量淫羊藿苷組NF-κB p65、VCAM-1、TF mRNA 表達(dá)量顯著減少（P＜0.05），中劑量淫羊藿苷組NF-κB p65、VCAM-1、TF mRNA表達(dá)量少于低劑量淫羊藿苷組（P＜0.05），高劑量淫羊藿苷組NF-κB p65、VCAM-1、TF mRNA表達(dá)量少于中劑量淫羊藿苷組（P＜0.05）。見圖2。

圖2 大鼠靜脈血管NF-κB p65、VCAM-1、TF 的基因表達(dá)量Fig.2 Gene expression levels of NF-κB P65，VCAM-1 and TF in rat veins

2.5 Western blot 檢測 相較于假手術(shù)組，模型組NF-κB p65、VCAM-1、TF 的蛋白表達(dá)量顯著增加（P＜0.05）；相較于血栓組，低、中、高劑量淫羊藿苷組NF-κB p65、VCAM-1、TF 的蛋白表達(dá)量顯著減少（P＜0.05），中劑量淫羊藿苷組NF-κB p65、VCAM-1、TF 的蛋白表達(dá)量少于低劑量淫羊藿苷組（P＜0.05），高劑量淫羊藿苷組NF-κB p65、VCAM-1、TF 的蛋白表達(dá)量少于中劑量淫羊藿苷組（P＜0.05）。見圖3。

圖3 大鼠靜脈血管NF-κB p65、VCAM-1、TF 的蛋白表達(dá)量Fig.3 Protein expression levels of NF-κB p65，VCAM-1 and TF in rat veins

3 討論

作為我國的傳統(tǒng)中藥，淫羊藿具有補肝腎、強筋骨、祛風(fēng)濕的功效，是補腎壯陽與強陽起瘺方劑的常用中藥，多用于腎陽不足、風(fēng)濕痹痛與骨瘺的治療［9-11］。而作為淫羊藿中的主要化學(xué)成分，淫羊藿苷可用于治療骨質(zhì)疏松癥、心血管系統(tǒng)疾病、免疫性疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等［12-13］。研究證明淫羊藿苷可以阻止不利因素對心肌細(xì)胞與血管內(nèi)皮的損傷。WANG 等［14］過氧化氫誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷為模型，發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷可抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中GRP78、ATF4 和eIF2α 蛋白表達(dá)減輕氧化應(yīng)激損傷，發(fā)揮保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用。HU 等［15］以氧化低密度脂蛋白誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷為模型，發(fā)現(xiàn)淫羊藿可通過調(diào)節(jié)Bcl-2 和caspase-3 的蛋白和mRNA 表達(dá)水平減少人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，發(fā)揮血管內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用。以上結(jié)果證實，淫羊藿苷具有血管內(nèi)皮保護(hù)作用。

本實驗采用下腔靜脈狹窄法復(fù)制深靜脈血栓模型，在該造模過程中，血栓形成于下腔靜脈遠(yuǎn)心端的上游，雖然血栓生長方向與臨床中的患者相反，但是形成的血栓結(jié)構(gòu)與人體血栓類似；另外，該法造模后在不損傷靜脈內(nèi)皮的情況下可允許少量血流通過，更加貼近人體內(nèi)血栓區(qū)域靜脈內(nèi)皮完整的病理狀態(tài)，進(jìn)一步判斷藥物的治療作用與作用途徑［16］。靜脈狹窄法誘導(dǎo)的深靜脈血栓形成是一個動態(tài)的病理過程，血栓重量是評價其成熟的典型指標(biāo)。本實驗結(jié)果顯示，采用下腔靜脈狹窄法成功復(fù)制了深靜脈血栓模型，而淫羊藿苷治療可顯著降低血栓重量，表明淫羊藿苷不但能抑制血栓的形成，還能促進(jìn)血栓的溶解，3 種劑量下的藥物均可顯著抑制血栓的形成，并且具有劑量依賴性，淫羊藿苷劑量越大抑制效果越明顯。

人體的凝血途徑主要有外源性凝血途徑、內(nèi)源性凝血途徑及共同途徑，PT 是評估外源性凝血系統(tǒng)狀態(tài)的重要指標(biāo)，APTT 是評估內(nèi)源性凝血系統(tǒng)狀態(tài)的重要指標(biāo)，二者時間的減少提示血液高凝狀態(tài)與血栓性疾病［17-18］。D-D 是交聯(lián)纖維蛋白水解產(chǎn)物，是一種特異性降解產(chǎn)物，是繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)的標(biāo)志物［19］，當(dāng)其濃度升高時說明血漿凝血因子活化與纖維蛋白溶解系統(tǒng)啟動，因此，血漿中檢測D-D 對于血栓性疾病的早期診斷、療效評估和預(yù)后判斷具有重要意義。本實驗結(jié)果顯示，復(fù)制深靜脈血模型后，大鼠血液處于高凝狀態(tài)，全身凝血系統(tǒng)受到較大影響；而淫羊藿苷可改善造模大鼠的血液高凝狀態(tài)，并且具有劑量依賴性，淫羊藿苷劑量越大抑制改善越明顯。韓丹等［20］研究發(fā)現(xiàn)40 mg/kg 的淫羊藿苷可延長深靜脈血栓大鼠血漿的APTT、PT、TT，減少血漿纖維蛋白原濃度，改善血液高凝狀態(tài)，與本實驗結(jié)果基本一致。

tPA、PAI-1 是主要由內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的衡量纖溶系統(tǒng)的重要指標(biāo)，如果二者之間的平衡遭到破壞，將引發(fā)血栓的形成［21-22］。tPA 主要是誘導(dǎo)纖維蛋白降解，PAI-1 是纖溶酶原活化物抑制物，其主要作用是抑制tPA。本實驗結(jié)果顯示，淫羊藿苷可通過調(diào)節(jié)纖溶系統(tǒng)抑制血栓的形成。

炎癥參與了血栓的形成與發(fā)展。在IL-1β 的刺激下，單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞黏附于血管內(nèi)皮，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞合成IL-8 和相關(guān)趨化因子，誘導(dǎo)白細(xì)胞遷移至炎癥區(qū)域［23-24］；另外，IL-1β 還會促進(jìn)單核細(xì)胞表達(dá)TF，促進(jìn)血栓形成［25］。TNF-α 是由活化的單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種強烈促炎癥因子，其可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)TF，促進(jìn)血栓形成；其還可促進(jìn)多種炎性介質(zhì)的釋放，影響血栓的發(fā)展［26］。本實驗證實其在靜脈血栓模型中同樣發(fā)揮了抗炎作用。

NF-κB 是調(diào)控DNA 轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞存活的一種蛋白復(fù)合物，近年來的相關(guān)研究顯示其在靜脈血栓形成中的炎癥機制中扮演著中重要角色，其在內(nèi)皮細(xì)胞、血小板、炎性反應(yīng)間的相互作用中發(fā)揮調(diào)控作用，打破凝血-纖溶的平衡狀態(tài)，因而誘發(fā)血栓的形成［27-28］。LDENG 等［29］研究發(fā)現(xiàn)，血小板激動劑（Pam3CSK4）介導(dǎo)的血小板活化與NF-κB 信號通路有關(guān)，血小板激動劑或脂多糖可導(dǎo)致NF-κB IκBα 降解和NF-κB p65 磷酸化，阻斷血小板的活化。在血管內(nèi)皮細(xì)胞中，NF-κB通路激活后分泌出的炎性細(xì)胞因子（TNF-α、IL-1等）會損傷內(nèi)皮細(xì)胞，促使其進(jìn)一步釋放有害的黏附分子、細(xì)胞因子、酶類等介質(zhì)，這些物質(zhì)又進(jìn)一步加重內(nèi)皮細(xì)胞的損傷。NARITA 等［30］研究認(rèn)為作為凝血因子的TF 能夠影響機體凝血功能，其高表達(dá)和NF-κB 通路調(diào)控密切相關(guān)。在多種炎性反應(yīng)中，NF-κB 信號通路是中心環(huán)節(jié)，該信號通路激活后可提升促炎癥因子的濃度，反過來，炎癥反應(yīng)又通過該通路促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)單核細(xì)胞趨化蛋白-1、血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子、VCAM-1 等黏附分子和細(xì)胞因子，進(jìn)一步激活NF-κB 信號通路，如此反復(fù)，促進(jìn)炎癥的級聯(lián)反應(yīng)，激活血小板聚集和凝血反應(yīng)，形成高凝狀態(tài)。本實驗結(jié)果顯示，NFκB 信號通路被激活；淫羊藿苷可抑制F-κB 信號通路的激活，降低血管內(nèi)皮損傷。

本實驗顯示，在10 ～40 mg/kg 的劑量范圍內(nèi)，淫羊藿苷可通過調(diào)節(jié)凝血功能、纖溶系統(tǒng)、炎癥反應(yīng)來抑制靜脈血栓的形成，并且該作用可能與調(diào)節(jié)控NF-κB p65 信號通路有關(guān)。但是，本實驗還存在很多不足之處，例如：關(guān)于淫羊藿苷的最佳作用劑量還有待進(jìn)一步的驗證，接下來的實驗應(yīng)進(jìn)一步增加藥物作用劑量；實驗周期僅設(shè)置了一個觀察時間點，未進(jìn)行動態(tài)觀察，未來將增加時間點，進(jìn)一步觀察各指標(biāo)的動態(tài)變化。