昆明山海棠在中藥復(fù)方制劑中的定性與定量分析

因?qū)幤悄戏结t(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院醫(yī)藥專家共同擬定的治療陰虛陽(yáng)亢型甲亢伴肝損害的臨床經(jīng)驗(yàn)處方，是以中醫(yī)藥理論為依據(jù)，注重整體辯證施治。并借助現(xiàn)代科技技術(shù)從藥理學(xué)、藥劑學(xué)等多學(xué)科進(jìn)行深入研究，篩選上百種中草藥經(jīng)科學(xué)配伍精制而成。因?qū)幤饕牲S芪、昆明山海棠、莪術(shù)、五味子等9味中藥材組方而成，作為醫(yī)院制劑在臨床已使用多年，具有益氣養(yǎng)陰、化痰祛瘀、散結(jié)消癭之功效，對(duì)陰虛陽(yáng)亢型甲亢伴肝損害有較好的臨床療效。然而昆明山海棠藥材的定性與定量研究尚不系統(tǒng)與深入，目前昆明山海棠藥材標(biāo)準(zhǔn)只有地方中藥材定性（顯微鑒別）標(biāo)準(zhǔn)并收錄于廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)2004版，無(wú)定量分析質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；無(wú)國(guó)家藥材標(biāo)準(zhǔn)。昆明山海棠藥材在制劑中的定性與定量研究，只有其單味藥制劑片劑的定性（TLC）法與定量（干濕重法）標(biāo)準(zhǔn)，收錄于《中國(guó)藥典》2020版第一部中。迄今尚無(wú)昆明山海棠藥材在中藥復(fù)方制劑中的定性與定量研究報(bào)道。因此，為加強(qiáng)因?qū)幤芯幚ッ魃胶Ｌ馁|(zhì)量控制確保其制劑質(zhì)量，進(jìn)一步完善昆明山海棠藥材在中藥復(fù)方制劑中的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。本研究采用TLC法與HPLC法對(duì)中藥復(fù)方制劑因?qū)幤械睦ッ魃胶Ｌ乃幉倪M(jìn)行了定性與定量研究。

1 材料和方法

1.1 儀器與設(shè)備

5810R高速冷凍離心機(jī)（Eppendorf）；F-060ST福洋牌超聲清洗機(jī)（深圳福洋科技集團(tuán)有限公司）；SHZ-D（III）循環(huán)水式多用真空泵（上海力辰邦西儀器科技有限公司）；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器有限公司；LINOMAT5薄層掃描儀（瑞士卡瑪公司）；BCD-183CM美的冰箱（合肥美的榮事達(dá)電冰箱有限公司）；DGG-9076A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海齊欣科學(xué)儀器有限公司）；Agilentll00液相色譜儀(Agilent)。

1.2 材料與試劑

因?qū)幤ㄅ?hào)20130315、20130408、20130415）共3個(gè)批次，為南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院藥學(xué)部提供；因?qū)幤幮云ㄅ?hào)20130315），為南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院藥學(xué)部提供；昆明山海棠對(duì)照品（批號(hào)121203-201503，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；硅膠G薄層層析板（青島海洋化工廠分廠）；默克（MERCK）薄層層析硅膠板（山東西美技術(shù)有限公司）；雷公藤甲素對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為111567）；中性氧化鋁、乙酸乙酯及甲醇均為分析純（廣東光華科技股份有限公司）；乙腈為色譜純，水為經(jīng)2次蒸餾的去離子水。

1.3 因?qū)幤欣ッ魃胶Ｌ牡谋佣ㄐ苑治?/h3>

1.3.1 定性鑒別方法優(yōu)化

患有穩(wěn)定型心絞痛、不穩(wěn)定型心絞痛的患者，對(duì)QFR風(fēng)險(xiǎn)的容忍度較低，故可以選擇QFR檢查或FFR檢查來(lái)獲得功能學(xué)評(píng)估。雖然QFR評(píng)估存在上述風(fēng)險(xiǎn)，但由于患者病情穩(wěn)定，所以評(píng)估結(jié)果導(dǎo)致即刻血運(yùn)重建或延遲血運(yùn)重建所帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)較低。有臨床試驗(yàn)研究結(jié)果表明，QFR分析一致性并非劣效于FFR，患者將受益于QFR的無(wú)創(chuàng)分析，避免了由微循環(huán)擴(kuò)張藥物帶來(lái)的不適，減少了診斷時(shí)間和費(fèi)用，綜合考慮患者受益大于風(fēng)險(xiǎn)。

1.3.1.1 供試品溶液制備 取因?qū)幤m量，去包衣，研磨至粉末狀，稱取因?qū)幤勰? g，加入乙酸乙酯100 mL超聲1 h，另稱取中性氧化鋁15 g按干法裝柱，將超聲后乙酸乙酯溶液離心，上柱，收集流出液，蒸干，加甲醇1 mL制備成供試品溶液。

1.3.1.2 陰性對(duì)照品溶液制備 因?qū)幤幮詫?duì)照品粉末3 g，加入乙酸乙酯100 mL超聲1 h，另稱取中性氧化鋁15 g按干法裝柱，將超聲后乙酸乙酯溶液離心，上柱，收集流出液，蒸干，加甲醇1 mL制備成陰性對(duì)照品溶液。

“文明素養(yǎng)”示范。采用推薦和尋訪相結(jié)合的方法，在全市范圍大力實(shí)施“萬(wàn)千百”工程。展示“萬(wàn)家文明風(fēng)”。在全市各主要媒體開(kāi)辟專欄，發(fā)掘、推出家庭文明新事，用凡人小事打動(dòng)人，用身邊事引領(lǐng)身邊人，將發(fā)動(dòng)的過(guò)程變?yōu)樵俳逃倪^(guò)程，以此帶動(dòng)全社會(huì)風(fēng)氣的不斷好轉(zhuǎn)。選樹(shù)“千人公德榜”。在新聞媒體、大型戶外媒體等設(shè)立“千人公德榜”，及時(shí)宣傳弘揚(yáng)社會(huì)公德的典型，匯聚點(diǎn)滴“善小”，形成強(qiáng)大的道德正能量。上好“百堂道德課”。利用“萬(wàn)家文明風(fēng)”展示和“千人公德榜”設(shè)立的契機(jī)，廣泛收集身邊典型人物的典型事跡，使之成為全市道德教育的生動(dòng)教材。

1.3.1.3 藥材陽(yáng)性對(duì)照品溶液制備 昆明山海棠藥材標(biāo)準(zhǔn)品3 g，加入乙酸乙酯100 mL超聲1 h，另稱取中性氧化鋁15 g按干法裝柱，將超聲后乙酸乙酯溶液離心，上柱，收集流出液，蒸干，加甲醇1 mL制備成對(duì)照藥材溶液。

1.3.1.4 薄層色譜條件 照《中國(guó)藥典》（2020 版）薄層色譜法（通則0502），吸取陰性對(duì)照品溶液（無(wú)昆明山海棠藥材）10 μL、因?qū)幤┰嚻啡芤海?個(gè)不同批次）20 μL和對(duì)照品溶液（昆明山海棠對(duì)照品）1 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷：乙酸乙酯（5∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)后取出晾干，紫外光365 nm下檢視。

1.4.4 含量測(cè)定方法驗(yàn)證

在公路路基加寬工程施工期間，企業(yè)未能編制完善的質(zhì)量管理與控制方案，缺乏綜合性與系統(tǒng)化的管理機(jī)制與模式，未能統(tǒng)一施工質(zhì)量與強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)，缺乏可行性的施工依據(jù)。且在施工過(guò)程中，企業(yè)未能開(kāi)展構(gòu)造物的管理工作，很容易引發(fā)新舊路基之間的穩(wěn)定性問(wèn)題，難以提升整體結(jié)構(gòu)拉應(yīng)力與承載力，嚴(yán)重影響公路路基結(jié)構(gòu)的綜合荷載效果。

1.3.2.1 不同薄層板考察 選擇不同廠家薄層板（青島海洋化工有限公司、德國(guó)默克公司），按照1.3.1.4的方法點(diǎn)樣展開(kāi)，顯色。

二是建立完善企業(yè)黨建工作指導(dǎo)機(jī)制。繼續(xù)發(fā)揮各級(jí)黨員領(lǐng)導(dǎo)干部的作用，建立黨員領(lǐng)導(dǎo)干部企業(yè)黨建工作聯(lián)系點(diǎn)，定期或不定期深入企業(yè)調(diào)查研究，指導(dǎo)開(kāi)展黨建工作。另外，完善企業(yè)黨建指導(dǎo)員制度，專職靠上指導(dǎo)企業(yè)組建黨組織和開(kāi)展黨建工作。例如，山東省廣饒縣建立了縣級(jí)領(lǐng)導(dǎo)干部聯(lián)系非公有制企業(yè)抓黨建制度，34名縣級(jí)黨員領(lǐng)導(dǎo)干部每人聯(lián)系一家非公有制企業(yè)和一個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道），指導(dǎo)開(kāi)展企業(yè)黨建工作；同時(shí)，在沒(méi)有黨員或黨員不足3名的非公有制企業(yè)，派駐黨建指導(dǎo)員，幫助建立“兼合式”黨組織，在企業(yè)開(kāi)展黨組織活動(dòng)。

1.3.2.2 不同溫度考察 采用同一廠家的薄層板（青島海洋化工廠分廠），考察不同溫度（4 ℃和40℃）條件對(duì)薄層鑒別方法的影響。

1.4.4.7 含量限度的確定 分別取3批因?qū)幤?，將其研磨成?xì)粉，精密稱取約6.4 g，按1.4.1項(xiàng)下制備供試品溶液；另精密稱取雷公藤甲素對(duì)照品約10 mg，加甲醇溶解并制成每1 mL中約含雷公藤甲素5 μg的溶液，作為對(duì)照溶液。分別吸取供試品溶液及對(duì)照溶液各20 μL注入HPLC儀，記錄色譜圖，量取主峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算含量。

1.3.2.4 展開(kāi)劑考查 在參考相關(guān)文獻(xiàn)后選擇以正己烷：乙酸乙酯：冰醋酸（10∶1.5∶1）進(jìn)行展開(kāi)劑考察。

1.4.4.3 線性 精密稱取雷公藤甲素對(duì)照品10 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，從中精密量取適量，加甲醇稀釋成一系列濃度的溶液，搖勻，精密吸取20 μL，注入HPLC儀，記錄色譜圖，量取主峰面積。

1.4 因?qū)幤欣坠偌姿囟糠治?/h3>

1.4.1 供試品溶液制備 取因?qū)幤?0片，研磨成細(xì)粉，稱取約6.4 g，加乙酸乙酯50 mL，超聲處理60 min，放冷，濾過(guò)，濾液通過(guò)用乙酸乙酯濕法裝柱的中性氧化鋁（8 g，200目，內(nèi)徑1～1.5 cm），用乙酸乙酯100 mL洗脫，收集流出液和洗脫液，減壓回收溶劑，殘?jiān)蛹状糽 mL使溶解，即得。

1.4.2 陰性對(duì)照溶液制備 取除昆明山海棠以外的其他藥材，按因?qū)幤崛」に囍苽潢幮蕴崛∥?，按供試品溶液制備方法處理，?.4.1項(xiàng)下從“加乙酸乙酯50 mL，超聲處理60 min……”開(kāi)始，至使溶解即得。

1.4.4.6 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取因?qū)幤?xì)粉適量，按1.4.1項(xiàng)下制備供試品溶液，另精密稱取雷公藤甲素對(duì)照品適量，加甲醇溶解并稀釋成每l mL中含5 μg的對(duì)照溶液，分別精密吸取20 μL注入HPLC儀，記錄色譜圖，量取主峰面積，以外標(biāo)計(jì)算本品中雷公藤甲素的含量。精密稱取已測(cè)出雷公藤甲素的本品粉末共9份，分高中低3個(gè)劑量，每個(gè)劑量各稱3份，分別準(zhǔn)確加入雷公藤甲素對(duì)照溶液（5 μg/mL）1.0 mL，按1.4.1項(xiàng)下規(guī)定制備供試品溶液，分別吸取20 μL，注入HPLC儀，記錄色譜圖，量取主峰面積。

1.3.2 耐用性考察

1.4.4.1 專屬性試驗(yàn) 分別吸取上述溶液各20 μL，以上述條件考察，記錄色譜圖。

1.4.4.2 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 吸取上述供試品溶液20 μL，注入HPLC儀，記錄色譜圖，量取雷公藤甲素色譜峰及相鄰峰的半峰寬、峰寬和保留時(shí)間，計(jì)算出理論塔板數(shù)，相鄰峰保留時(shí)間與雷公藤甲素峰分離度。

四是以宣傳培訓(xùn)為抓手營(yíng)造良好社會(huì)氛圍。組織部門(mén)應(yīng)把人大制度理論納入領(lǐng)導(dǎo)干部特別是鎮(zhèn)街黨（工）委書(shū)記教育培訓(xùn)的重要內(nèi)容，通過(guò)邀請(qǐng)人大專家授課、開(kāi)展民主法治教育等形式，提高鎮(zhèn)街黨（工）委書(shū)記對(duì)人大工作重要性的認(rèn)識(shí)，提高強(qiáng)化其把黨委決策與人大依法行使職權(quán)相結(jié)合的意識(shí)；宣傳部門(mén)和新聞單位應(yīng)把宣傳人大工作列入年度工作計(jì)劃，開(kāi)展常態(tài)化、有針對(duì)性的宣傳，及時(shí)報(bào)道人大工作中涌現(xiàn)出的好典型、好經(jīng)驗(yàn)，提高全社會(huì)對(duì)人大工作的認(rèn)知度。人大常委會(huì)應(yīng)重點(diǎn)抓好鎮(zhèn)街人大干部和代表的學(xué)習(xí)培訓(xùn)，通過(guò)舉辦學(xué)習(xí)班、交流研討會(huì)等，使其深刻理解人大工作的性質(zhì)和特點(diǎn)，熟悉掌握履職的程序和方法。

1.4.4.4 精密度試驗(yàn) 取因?qū)幤m量，經(jīng)研磨成細(xì)粉，精密稱取適量（共6份），分別按1.4.1項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液；另精密稱取雷公藤甲素對(duì)照品約10 mg，加甲醇溶解并稀釋制成每l mL中含雷公藤甲素5 μg的溶液，作為對(duì)照溶液。分別精密吸取20 μL，注入HPLC儀，記錄色譜圖，量取主峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算含量。

1.4.4.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 按1.4.1項(xiàng)下制備供試品溶液，于室溫條件下放置24 h，分別于0，2，4，8，12，24 h吸取20 μL，注入HPLC儀，記錄色譜圖。

要根據(jù)入學(xué)季、畢業(yè)季不同時(shí)間段的不同特點(diǎn)和讀者對(duì)文獻(xiàn)信息的不同需求，提供不同的信息服務(wù)。如果以往做過(guò)類(lèi)似的分類(lèi)服務(wù)，就需要對(duì)以往的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，根據(jù)受眾面、滿意度等適時(shí)進(jìn)行調(diào)整相關(guān)服務(wù)，爭(zhēng)取各類(lèi)服務(wù)做得更好。若以往沒(méi)有做過(guò)，就要從現(xiàn)在開(kāi)始注意留意這方面的數(shù)據(jù)、資料、方案，為以后更好的開(kāi)展類(lèi)似服務(wù)奠定基礎(chǔ)。

1.4.3 色譜條件的選擇 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙睛-水（30∶70）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)：218 nm；流速l mL/min；理論塔板數(shù)按雷公藤甲素峰計(jì)算不低于5000。

1.3.2.3 不同濕度考察 采用同一廠家的薄層板（青島海洋化工廠有限公司），考察不同濕度（10%，90%）條件對(duì)薄層鑒別的影響。

2 結(jié)果

2.1 薄層色譜鑒別

除陰性對(duì)照品外，因?qū)幤鹘M與陽(yáng)性對(duì)照組，均在相應(yīng)色譜處顯色（R=0.6），斑點(diǎn)清晰可見(jiàn)。

LIETDOS-BIO是一款用來(lái)評(píng)價(jià)立陶宛核電站所產(chǎn)生的污染問(wèn)題的軟件。該模型使用兩種濃集因子數(shù)據(jù)庫(kù)：因場(chǎng)地而異的數(shù)據(jù)庫(kù)以及通用數(shù)據(jù)庫(kù)(主要基于歐盟FASSET中的數(shù)據(jù)以及源自俄語(yǔ)文獻(xiàn)的數(shù)據(jù))。該軟件采用蒙特卡洛輻射轉(zhuǎn)移模型，一種經(jīng)特殊衍變而來(lái)的描述有機(jī)體模型的方法使得用戶能夠針對(duì)任何大小和形狀的有機(jī)體計(jì)算劑量轉(zhuǎn)換因子。該模型中參數(shù)的不確定性用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法來(lái)進(jìn)行處理。

2.2 耐用性考察

2.2.1 不同薄層板考察 青島海洋薄層板與MERCK薄層板展開(kāi)比移值分別為R=0.6、R=0.46，兩種硅膠G板均可以達(dá)到較好的分離效果，斑點(diǎn)清晰。

2.2.2 不同溫度考察 在溫度4 ℃和40 ℃條件下展開(kāi)比移值分別為R=0.62、R=0.68，陰性對(duì)照品溶液、供試品溶液及陽(yáng)性對(duì)照藥材溶液薄層色譜圖斑點(diǎn)無(wú)明顯拖尾現(xiàn)象，分離度較好。

在城市軌道交通領(lǐng)域大多基于事故致因理論建立安全評(píng)價(jià)模型，且通常在人員、設(shè)備、管理和環(huán)境中選擇要素。例如，針對(duì)城市軌道交通運(yùn)營(yíng)安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)，有些采用人員單要素建立評(píng)價(jià)模型[12]，有些采用人員和環(huán)境二要素建立評(píng)價(jià)模型[13]，更多的是采用人員、設(shè)備、管理和環(huán)境四要素進(jìn)行建模[14-15]。

2.2.3 不同濕度考察 相對(duì)濕度10%及90%條件下展開(kāi)比移值分別為R=0.6、R=0.51，陰性對(duì)照品、供試品溶液及陽(yáng)性對(duì)照藥材溶液的TLC斑點(diǎn)均能實(shí)現(xiàn)分離，分離度較好。

2.2.4 展開(kāi)劑考查 色譜斑點(diǎn)產(chǎn)生偏移；供試品及陽(yáng)性對(duì)照藥材相應(yīng)色譜斑點(diǎn)無(wú)法出現(xiàn)在同一水平線。

2.3 含量測(cè)定方法驗(yàn)證

2.3.1 專屬性試驗(yàn) 雷公藤甲素的保留時(shí)間在14 min處，此位置供試品溶液色譜存在一明顯的色譜峰，而陰性對(duì)照溶液在此處無(wú)任何色譜峰，對(duì)供試品溶液測(cè)定無(wú)任何干擾。

2.3.2 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 理論塔板數(shù)N為11320，相鄰峰保留時(shí)間為14.13 min，與雷公藤甲素峰分離度R為1.26，達(dá)到了基線分離，該色譜條件能夠滿足分析要求。

1.提升核心素養(yǎng)是提升我國(guó)教育國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力的迫切需要。隨著世界多極化、經(jīng)濟(jì)全球化、文化多樣化、社會(huì)信息化深入發(fā)展，各國(guó)都在思考21世紀(jì)的學(xué)生應(yīng)具備哪些核心素養(yǎng)才能成功適應(yīng)未來(lái)社會(huì)這一前瞻性戰(zhàn)略問(wèn)題，核心素養(yǎng)研究浪潮席卷全球。面對(duì)日趨激烈的國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)，我國(guó)要深入實(shí)施人才強(qiáng)國(guó)戰(zhàn)略，提升教育國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力，也必須解決這一關(guān)鍵問(wèn)題。

2.3.3 線性 雷公藤甲素濃度在1.01、2.02、5.05、10.1、20.2、50.5、101(μg/mL)時(shí)，對(duì)應(yīng)峰面積為17.7、33.6、85.3、204.4、406.2、1112.6、2224.9。濃度以峰面積對(duì)雷公藤甲素濃度進(jìn)行線性擬合，得回歸方程A=22.219C-19.165，=0.9999。結(jié)果表明：濃度在1～100 μg/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.3.4 精密度試驗(yàn) 對(duì)同一批供試品進(jìn)行測(cè)定結(jié)果存在一定差異，RSD%為3%左右，試驗(yàn)的時(shí)間對(duì)結(jié)果影響不大。

通過(guò)對(duì)路段實(shí)測(cè)交通量調(diào)查數(shù)據(jù)的處理，依據(jù)式 （2）得出道路雙向日交通當(dāng)量軸載軸次約為230785.6次；結(jié)合式（1）（4）（5）可得該路段最大交通荷載為267kN。根據(jù)式 （9）可得東段頂管總頂力1852kN，經(jīng)對(duì)比實(shí)測(cè)東段頂管總頂力1673kN，與實(shí)際值相對(duì)誤差10.7%；理論計(jì)算得西段頂管總頂力1877kN，實(shí)測(cè)西段頂管總頂力1658kN，與實(shí)際值相對(duì)誤差13.2%。經(jīng)計(jì)算，西段頂管工程總頂力，與實(shí)際值對(duì)比并求得相對(duì)誤差，如表5。

2.3.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 從錄色譜圖得到對(duì)應(yīng)主峰面積是90.4，94.1，88.2，93.3，85.0，90.9；峰面積平均值90.3，RSD為3.4%。供試品溶液于室溫條件下放置24 h。結(jié)果表明：峰面積有一定變化，RSD為3.4%，溶液穩(wěn)定性不好。

2.3.6 加樣回收率試驗(yàn) 計(jì)算結(jié)果如下表2。

2.3.7 含量限度的確定 3批樣品雷公藤甲素含量分別為0.34 μg/片、0.34 μg/片、0.28 μg/片，范圍在0.28～0.34 μg/片內(nèi)。因此，初步制訂雷公藤甲素的含量標(biāo)準(zhǔn)為：因?qū)幤忻科坠偌姿夭坏酶哂?.6 μg。

3 討論

昆明山海棠原藥材標(biāo)準(zhǔn)，目前只有地方省級(jí)標(biāo)準(zhǔn)并收錄于廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)2004版，藥材的定性鑒別為顯微鑒別且無(wú)定量研究。昆明山海棠藥材制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，《中國(guó)藥典》2020版收載其TLC定性鑒別與定量分析（干濕重分析）。然而昆明山海棠藥材在中藥復(fù)方制劑中的定性與定量研究迄今尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道。本文采用TLC法和HPLC法進(jìn)行了昆明山海棠藥材在中藥復(fù)方制劑中的定性與定量研究，研究結(jié)果表明：該方法技術(shù)穩(wěn)定，方法簡(jiǎn)便，較好地反映了昆明山海棠藥材在中藥復(fù)方制劑中的定性與定量情況，起到了控制其在中藥復(fù)方制劑中質(zhì)量的作用，同時(shí)也填補(bǔ)了昆明山海棠藥材在中藥復(fù)方制劑中定性與定量研究之空白。

因?qū)幤瑸槟戏结t(yī)院院內(nèi)制劑，因其制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中昆明山海棠鑒別方法穩(wěn)定性不高。我們借鑒《中國(guó)藥典》2010版昆明山海棠片定性鑒別方法對(duì)其進(jìn)行鑒別時(shí)發(fā)現(xiàn)陰性對(duì)照品有干擾，無(wú)法達(dá)到定性鑒別目的。通過(guò)查閱文獻(xiàn)［24-27］較正后，在原方法基礎(chǔ)上，我們改變優(yōu)化了提取溶劑，使用乙酸乙酯進(jìn)行提取，提取液經(jīng)氧化鋁柱吸附，收集流出液，蒸干，再加甲醇溶解成樣品溶液進(jìn)行鑒別，達(dá)到預(yù)期目標(biāo)。

在選擇正己烷∶乙酸乙酯∶冰醋酸（10∶1.5∶1）作為展開(kāi)劑時(shí)發(fā)現(xiàn)：各個(gè)色譜斑點(diǎn)無(wú)法整齊出現(xiàn)在一條水平線上，考慮到樣品溶液以乙酸乙酯作為提取溶劑進(jìn)行提取，極性相對(duì)于冰醋酸較小，且冰醋酸揮發(fā)性非常強(qiáng)，因此，在優(yōu)化展開(kāi)劑時(shí)將冰醋酸去除。同時(shí)發(fā)現(xiàn)以正己烷和乙酸乙酯作為展開(kāi)劑時(shí)色譜斑點(diǎn)的高度會(huì)隨乙酸乙酯的比例大小變化而變化，而在以正己烷：乙酸乙酯（5∶1）進(jìn)行展開(kāi)時(shí)色譜斑點(diǎn)居中，且色譜斑點(diǎn)清晰、分離度較好，因此，選擇該比例作為最佳配比進(jìn)行展開(kāi)。系統(tǒng)耐用性試驗(yàn)表明：該方法對(duì)溫度、濕度、不同廠家薄層板的耐用性均良好，達(dá)到研究預(yù)期目標(biāo)。

在藥品質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)中定量分析亦是重要組成部分，本次定量研究采用HPLC法，本方法較本品從前的干濕重法定量，其技術(shù)更先進(jìn)、準(zhǔn)確性更高，更符合現(xiàn)行藥品質(zhì)量控制要求。我們選擇對(duì)照品色譜峰掃描，選擇檢測(cè)波長(zhǎng)為218 nm；選擇流動(dòng)相時(shí)，選擇乙睛-水（30∶70）為流動(dòng)相，色譜14 min處出現(xiàn)樣品峰且陰性對(duì)照品無(wú)干擾，色譜峰基線平穩(wěn)，峰形對(duì)稱，同時(shí)供試品中雷公藤甲素色譜峰分離度良好，說(shuō)明該方法具有良好的專屬性；雷公藤甲素濃度在1～100 μg/mL范圍內(nèi)時(shí)得到回歸方程A=22.219C-19.165，=0.9999，表明線性關(guān)系良好；最終測(cè)得3批樣品中雷公藤甲素含量分別為0.34 μg/片、0.34 μg/片、0.28 μg/片，確定每片因?qū)幤欣坠偌姿叵蘖坎坏酶哂?.6 μg。

(2)八達(dá)嶺野生動(dòng)物園安裝監(jiān)控?cái)z像頭共106個(gè)，東北虎園東北門(mén)、西北門(mén)各有1個(gè)監(jiān)控?cái)z像頭，運(yùn)行狀況良好。由此可見(jiàn)，假若動(dòng)物園工作人員隨時(shí)查看監(jiān)控錄像，應(yīng)該可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)危險(xiǎn)的發(fā)生并且采取措施。

綜上所述，經(jīng)優(yōu)化的TLC法專屬性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便，是中藥復(fù)方制劑中昆明山海棠定性鑒別的可借鑒的方法之一；采用HPLC法對(duì)中藥復(fù)方制劑中昆明山海棠藥材進(jìn)行定量分析。有專屬性強(qiáng)、線性關(guān)系良好，操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，且更符合現(xiàn)行藥品質(zhì)量控制之要求。本研究結(jié)果可為含有該藥材的中藥復(fù)方制劑產(chǎn)品定性與定量研究提供參考與借鑒。