血清自噬相關(guān)蛋白P62在急性胰腺炎患者中的表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系研究

白經(jīng)緯

【摘要】 目的：探究血清自噬蛋白P62在急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）患者中的表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系。方法：選擇2018年1月-2021年1月于佳木斯市中心醫(yī)院接受治療的60例AP患者為研究對(duì)象，將其分為輕度AP組（n=32）和重度AP組（n=28），對(duì)比兩組患者入院時(shí)C反應(yīng)蛋白（CRP）、P62和APACHE-Ⅱ評(píng)分差異。將60例患者按照臨床結(jié)局分組，存活且無器官衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥患者設(shè)為預(yù)后良好組（n=41），死亡或出現(xiàn)器官衰竭患者設(shè)為預(yù)后不良組（n=19），對(duì)比兩組入院時(shí)CRP、P62和APACHE-Ⅱ評(píng)分差異，Pearson相關(guān)性分析探究P62與APACHE-Ⅱ評(píng)分相關(guān)性，繪制P62對(duì)AP不良結(jié)局的ROC曲線圖。結(jié)果：輕度AP組CRP、P62以及APACHE-Ⅱ評(píng)分均明顯低于重度AP組，預(yù)后不良組CRP、P62以及APACHE-Ⅱ評(píng)分均明顯高于預(yù)后良好組（P<0.05）;Pearson相關(guān)性分析顯示P62水平與CRP、APACHE-Ⅱ評(píng)分均呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)性（r=0.933 1、0.950 0，P<0.000 1）;ROC曲線繪制顯示P62對(duì)AP不良結(jié)局評(píng)估AUC為0.957 0[95%CI（0.893 9，1.000 0），P<0.000 1]。結(jié)論：血清自噬相關(guān)蛋白P62與AP患者的病情及預(yù)后存在密切關(guān)聯(lián)，可以考慮將P62作為評(píng)估AP患者病情及預(yù)后的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)應(yīng)用于臨床推廣。

【關(guān)鍵詞】 自噬相關(guān)蛋白 P62 急性胰腺炎

Expression of Serum Autophagy Associated Protein P62 in Patients with Acute Pancreatitis and Its Relationship with Prognosis/BAI Jingwei. //Medical Innovation of China， 2022， 19（04）： -153

[Abstract] Objective： To explore the expression of serum autophagy protein P62 in patients with acute pancreatitis （AP） and its relationship with prognosis. Method： A total of 60 patients with AP who were treated in Jiamusi Central Hospital from January 2018 to January 2021 were selected and divided into mild AP group （n=32） and severe AP group （n=28）. The differences of C-reactive protein （CRP）， P62 and APACHE-Ⅱ scores between the two groups were compared. 60 patients were grouped according to clinical outcomes. Patients who survived without severe complications such as organ failure were set as the good prognosis group （n=41）， and patients who died or had organ failure were set as the poor prognosis group （n=19）. The differences of CRP， P62 and APACHE-Ⅱ scores between the two groups at admission were compared， the correlation between P62 and APACHE-Ⅱ scores score was explored by Pearson correlation analysis， and the ROC curve of P62 on evaluation of the adverse outcome of AP was drawn. Result： The levels of CRP， P62 and APACHE-Ⅱ scores in mild AP group were significantly lower than those in severe AP group， the levels of CRP， P62 and APACHE-Ⅱ scores in poor prognosis group were significantly higher than those in good prognosis group （P<0.05）; Pearson correlation analysis showed that P62 level was positively correlated with CRP and APACHE-Ⅱ scores （r=0.933 1， 0.950 0， P<0.000 1）; ROC curve showed that AUC of P62 for evaluation of adverse outcomes of AP was 0.957 0 [95%CI （0.893 9， 1.000 0）， P<0.000 1]. Conclusion： P62 is closely related to the condition and prognosis of AP patients， so it can be considered as a laboratory index to evaluate the condition and prognosis of AP patients.

[Key words] Autophagy related protein P62 Acute pancreatitis

First-author’s address： Jiamusi Central Hospital， Heilongjiang Province， Jiamusi 154002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.04.035

急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是臨床上較為常見的急腹癥之一[1]，是指在各類因素的作用下，導(dǎo)致胰酶在胰腺內(nèi)被激活，進(jìn)而對(duì)胰腺組織進(jìn)行自身消化，導(dǎo)致胰腺發(fā)生水腫、出血甚至壞死等炎癥癥狀的一類疾病[2-3]。AP的臨床癥狀包括腹痛、惡心、嘔吐、發(fā)熱、血胰酶升高等[4]，AP患者病情輕重不等，輕者以胰腺水腫為主要癥狀，病情多呈自限性，一般3～5 d后可恢復(fù)，預(yù)后較好，重度AP患者可發(fā)生出血、壞死等癥狀，常伴全身炎癥反應(yīng)或局部并發(fā)癥（感染性壞死、假性囊腫等），部分患者胰腺周邊臟器受累，會(huì)發(fā)生多器官功能障礙綜合征[5-6]。雖然重度AP僅占全部AP的10%～25%，但由于重度AP起病急、發(fā)展快，其病死率高達(dá)20%～30%[7]。近些年隨著我國診療技術(shù)的進(jìn)步，AP的總病死率有下降趨勢(shì)，一般重度AP病死率可控制在10%～20%[8]。及早準(zhǔn)確對(duì)病情的評(píng)估是后續(xù)治療開展的關(guān)鍵，也是改善患者預(yù)后、降低患者死亡率的重要手段，當(dāng)前AP病情的評(píng)估多依賴于各類量表評(píng)分，此類方式雖然較為直觀，但應(yīng)用周期長，對(duì)患者配合度要求較高，且難以實(shí)現(xiàn)病情動(dòng)態(tài)、快速、早期的評(píng)估[9-10]，因而尋找一類能夠準(zhǔn)確反映AP病程及預(yù)后的生物學(xué)指標(biāo)尤為重要。近些年隨著臨床上對(duì)AP研究的深入，胰蛋白酶原的病理性激活以及后續(xù)的胰腺組織自我消化性損傷已成為AP重要發(fā)病機(jī)制[11]，研究指出，胰蛋白酶原的異常激活以及其酶原顆粒的形態(tài)變化同自噬活性有密切關(guān)聯(lián)，自噬受損已成為公認(rèn)的AP中突出的病理事件[12]。本研究擬通過將60例AP患者納入研究，并將其分別按照病情和預(yù)后進(jìn)行分組后對(duì)照分析的方式，探究血清自噬相關(guān)蛋白P62在AP中的表達(dá)與預(yù)后關(guān)聯(lián)，以期為AP的診療提供新的思路和方向?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年1月-2021年1月于佳木斯市中心醫(yī)院接受治療的60例AP患者為研究對(duì)象，其中男41例，女19例;年齡33～59歲，平均（46.32±3.65）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有入組對(duì)象均符合《急性胰腺炎診治指南（2014）》中AP的診斷標(biāo)準(zhǔn)[13];（2）意識(shí)清晰能夠配合調(diào)研;（3）起病時(shí)間≤24 h;（4）均為首次發(fā)病患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并精神障礙者;（2）合并惡性腫瘤者;（3）近1個(gè)月內(nèi)實(shí)施外科手術(shù)者;（4）合并全身性炎癥患者;（5）妊娠期及哺乳期女性;（6）藥物或酒精依賴者。調(diào)研經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)會(huì)批準(zhǔn)實(shí)施;患者及其家屬對(duì)本次調(diào)研過程、方法、原理知曉并簽署知情同意書。

1.2 方法 采集入組60例AP患者的空腹靜脈血樣，離心機(jī)3 000 r/min離心5 min后留血清備用，置于-80 ℃條件下保存，待樣本采集完畢后統(tǒng)一采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測患者血清P62及CRP水平。將入組的60例AP患者分為輕度AP組（32例）和重度AP組（28例），輕度AP標(biāo)準(zhǔn)：患者出現(xiàn)AP典型臨床癥狀和生化改變，但并未出現(xiàn)器官功能障礙或局部并發(fā)癥，應(yīng)用液體補(bǔ)充治療效果較好，且Ranson評(píng)分<3分;重度AP標(biāo)準(zhǔn)：具備AP典型癥狀和生化改變，同時(shí)發(fā)生局部并發(fā)癥或器官衰竭，Ranson評(píng)分≥3分[14]，對(duì)比兩組自噬受體蛋白P62、C反應(yīng)蛋白（CRP）以及急性生理與慢性健康評(píng)分（APACHE-Ⅱ）差異。將60例患者按照臨床結(jié)局分組，存活且無器官衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥患者設(shè)為預(yù)后良好組（n=41），死亡或出現(xiàn)器官衰竭患者設(shè)為預(yù)后不良組（n=19），對(duì)比兩組P62、CRP以及APACHE-Ⅱ評(píng)分差異。APACHE-Ⅱ量表由急性生理學(xué)評(píng)分（APS）、年齡及慢性健康狀況評(píng)分（CPS）三個(gè)維度組成，其中APS有12項(xiàng)指標(biāo)，在臨床上應(yīng)用較廣，主要用于對(duì)ICU患者病情評(píng)估及病死率預(yù)測方面，量表理論最高分為71分，得分越高表示受試者病情越嚴(yán)重[15]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 選擇SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)研究采集數(shù)據(jù)開展分析，其中計(jì)量資料采用（x±s）的方式表示，開展正態(tài)分布以及方差齊性檢驗(yàn)，對(duì)滿足正態(tài)分布或方差齊性的數(shù)據(jù)組間差異使用t檢驗(yàn)，方差不齊數(shù)據(jù)應(yīng)用非參數(shù)檢驗(yàn)中的Mann-Whitney U檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)推斷，對(duì)組間的計(jì)數(shù)資料差異性使用字2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同病情患者P62、CRP及APACHE-Ⅱ評(píng)分差異比較 輕度AP組患者的血清P62、CRP水平以及APACHE-Ⅱ評(píng)分均明顯低于重度AP組患者，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 不同預(yù)后患者P62、CRP及APACHE-Ⅱ評(píng)分差異比較 預(yù)后良好組AP患者的血清P62、CRP水平以及APACHE-Ⅱ評(píng)分均明顯低于預(yù)后不良組AP患者，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.3 血清P62與CRP、APACHE-Ⅱ評(píng)分相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，AP患者血清P62水平與CRP水平、APACHE-Ⅱ評(píng)分均呈現(xiàn)正相關(guān)性（r=0.933 1、0.950 0，P<0.000 1），見圖1。

2.4 血清P62對(duì)AP預(yù)后不良預(yù)測價(jià)值分析 以3.0 ng/L為截?cái)帱c(diǎn)，繪制血清P62對(duì)AP患者預(yù)后不良的預(yù)測ROC曲線，計(jì)算可得其AUC為0.957 0[95%CI（0.893 9，1.000 0），P<0.000 1]，見圖2。

3 討論

隨著近些年我國居民飲食結(jié)構(gòu)的調(diào)整及生活方式的改變，AP的發(fā)病率有逐年遞增趨勢(shì)[16]，在人群中發(fā)病率達(dá)到約5～80/10萬[17]。目前AP的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，已有的研究證實(shí)過多飲酒、膽結(jié)石、胰腺外傷、高鈣血癥、藥物過敏等均可誘發(fā)AP的出現(xiàn)[18]。輕度AP患者一般病程呈自限性，常規(guī)治療1周后可恢復(fù)正常，重癥AP患者則需要加大干預(yù)力度，防止器官功能衰竭或局部并發(fā)癥等事件的出現(xiàn)[19]。隨著近些年診療技術(shù)的進(jìn)步，AP的病死率有下降趨勢(shì)，但準(zhǔn)確的診斷和及時(shí)的干預(yù)仍是加快AP患者轉(zhuǎn)歸，改善其預(yù)后的重要手段。

本研究通過將60例AP患者納入研究并分別按照病情及預(yù)后差異進(jìn)行分組比較的方式，就自噬相關(guān)蛋白P62在AP患者中的表達(dá)與預(yù)后關(guān)系進(jìn)行了探究，結(jié)果顯示，將患者按照不同病情進(jìn)行分組對(duì)比，重癥AP組患者的血清P62、CRP水平以及APACHE-Ⅱ評(píng)分均明顯高于輕度AP組患者，預(yù)后不良組AP患者的血清P62、CRP水平以及APACHE-Ⅱ評(píng)分均明顯高于預(yù)后良好組AP患者，提示P62同AP患者的病情及預(yù)后具有一定的關(guān)聯(lián)性。王兵兵等[20]通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方式，就自噬進(jìn)程對(duì)AP小鼠的影響進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示，與模型AP組小鼠相比，應(yīng)用自噬消退素D1組小鼠自噬通路被明顯修復(fù)，自噬進(jìn)程對(duì)小鼠細(xì)胞影響明顯減輕，血清P62、自噬相關(guān)蛋白微管相關(guān)蛋白輕鏈3-II（LC3-II）水平出現(xiàn)明顯降低，認(rèn)為P62可以作為代表蛋白，用以標(biāo)記AP小鼠的自噬進(jìn)程嚴(yán)重程度。張國英等[21]也通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，使用不同濃度的Bafiomycin A1誘導(dǎo)小鼠AP模型，結(jié)果顯示，高劑量Bafiomycin A1誘導(dǎo)組小鼠的血清P62和自噬相關(guān)蛋白微管相關(guān)蛋白輕鏈3（LC3）水平明顯的低于低劑量Bafiomycin A1誘導(dǎo)組小鼠，認(rèn)為Bafiomycin A1能夠抑制AP小鼠胰腺組織的自噬水平，進(jìn)而起到較好的胰腺保護(hù)作用。本研究認(rèn)為，自噬進(jìn)程與AP病情之間的相關(guān)性已經(jīng)得到較多的臨床研究證實(shí)，其機(jī)制可能與AP能夠激活多種應(yīng)激因素，同時(shí)在AP早期胰腺腺泡細(xì)胞內(nèi)的自噬空泡或自噬小體內(nèi)含有的胰蛋白酶原顆粒會(huì)主動(dòng)釋放，對(duì)胰腺細(xì)胞產(chǎn)生破壞有關(guān)。P62作為自噬相關(guān)蛋白，其水平可以昭示機(jī)體自噬進(jìn)程的嚴(yán)重程度，因而P62水平的高下與AP患者的病情和預(yù)后存在密切的相關(guān)性。

本研究通過相關(guān)性分析，探究了血清P62水平與CRP、APACHE-Ⅱ評(píng)分的相關(guān)性，結(jié)果顯示血清P62水平與CRP、APACHE-Ⅱ評(píng)分均呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)性。張乃等[22]的研究結(jié)果顯示，血清CRP水平與AP患者的器官功能衰竭存在密切關(guān)聯(lián)，以CRP=0.24 mg/L為臨界值計(jì)算顯示，CRP對(duì)AP出現(xiàn)器官功能衰竭的敏感度、特異度和準(zhǔn)確度分別為78.43%、80.61%和79.50%。王冠等[23]的研究則指出，AP患者血清中CRP相比正常個(gè)體呈現(xiàn)異常高表達(dá)，且CRP水平與AP患者病情密切相關(guān)，血清CRP與血清PCT、TNF-α均為正相關(guān)。田阿各等[24]的研究則通過對(duì)101例AP患者臨床開展分析指出，APACHE-Ⅱ評(píng)分是影響AP患者死亡結(jié)局的重要危險(xiǎn)因素。而本研究中P62與CRP、APACHE-Ⅱ評(píng)分的相關(guān)性則說明了P62同AP患者病情及預(yù)后相關(guān)的科學(xué)性，最后自噬蛋白P62對(duì)AP患者不良預(yù)后的ROC曲線則進(jìn)一步印證了該觀點(diǎn)。

綜上所述，血清自噬相關(guān)蛋白P62與AP患者的病情及預(yù)后存在密切關(guān)聯(lián)，可以考慮將P62作為評(píng)估AP患者病情及預(yù)后的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)應(yīng)用于臨床推廣。

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（收稿日期：2021-03-05） （本文編輯：占匯娟）