腎癌中調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡的新動(dòng)向和未來(lái)展望

曹達(dá)龍 綜述，葉定偉 審校

復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院泌尿外科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032

最新的腫瘤統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，與2018年相比，2020年全球癌癥新發(fā)和死亡病例分別增加了6.6%和4.2%，其中腎癌的發(fā)病和死亡病例數(shù)分別增加了7.5%和5.6%［1-2］。在中國(guó)，腎癌的發(fā)病率和死亡率均呈現(xiàn)顯著上升的趨勢(shì)，提示中國(guó)的腎癌防治形勢(shì)嚴(yán)峻［3-4］。早期腎癌經(jīng)根治性手術(shù)后5年生存率可達(dá)90%。然而，約25%的腎癌在確診時(shí)已是晚期；同時(shí)，約1/3的局限型腎癌在手術(shù)后出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移［5］。盡管近年來(lái)一些新藥（如酪氨酸激酶抑制劑、免疫檢查點(diǎn)抑制劑等）的應(yīng)用改善了進(jìn)展/轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌的預(yù)后，但是這類(lèi)患者的總生存期（overall survival，OS）仍然較短［6-7］。因此，進(jìn)一步探索腎癌發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制并研發(fā)新的治療藥物仍然是目前腎癌防治工作的重點(diǎn)。隨著對(duì)腎癌生物學(xué)行為認(rèn)識(shí)的不斷深入，細(xì)胞死亡在腎癌發(fā)病機(jī)制中的作用和對(duì)新藥研發(fā)的影響正引起研究者的重視。細(xì)胞死亡在維持正常機(jī)體穩(wěn)態(tài)、抑制腫瘤細(xì)胞失控性增殖等生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用［8］。細(xì)胞死亡包括調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡和非調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡。調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡是由基因決定的細(xì)胞主動(dòng)的程序性死亡，近期Science雜志報(bào)道了一種新的調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡方式即銅死亡［9］，進(jìn)一步強(qiáng)化了細(xì)胞死亡在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的重要性。調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡還包括鐵死亡［10］、細(xì)胞焦亡［11］、自噬［12］、細(xì)胞凋亡［13］等。這些發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步揭示了惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的機(jī)制并為尋找新的治療策略提供了更多的理論依據(jù)。本文將對(duì)不同的細(xì)胞死亡的分子機(jī)制及其在腎癌中作用的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 鐵死亡與腎癌

鐵死亡是一種鐵離子依賴(lài)性的調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡［14］。這種死亡方式的特點(diǎn)是無(wú)凋亡小體的形成，無(wú)DNA的斷裂，無(wú)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶（caspase）家族的激活，且無(wú)法被caspase抑制劑逆轉(zhuǎn)［15］。在形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為線粒體萎縮，細(xì)胞核大小正常和完整，細(xì)胞膜密度增加，細(xì)胞膜通透性和流動(dòng)性發(fā)生改變。細(xì)胞外的三價(jià)鐵與轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TF）形成復(fù)合物，隨后與細(xì)胞膜上的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（transferrin receptor，TFR）結(jié)合后形成囊泡并通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。三價(jià)鐵進(jìn)入細(xì)胞后被還原成二價(jià)鐵并與鐵蛋白結(jié)合形成鐵池，一部分以鐵蛋白的形式儲(chǔ)存起來(lái)，另一部分經(jīng)鐵蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入線粒體從而參與三羧酸循環(huán)等生命活動(dòng)。游離二價(jià)鐵的蓄積可以通過(guò)H2O2發(fā)生芬頓反應(yīng)（Fenton reaction）形成羥基自由基和羥基過(guò)氧自由基以及激活脂質(zhì)氧合酶，促進(jìn)脂質(zhì)過(guò)氧化并引起細(xì)胞膜通透性和流動(dòng)性發(fā)生改變從而誘導(dǎo)細(xì)胞鐵死亡。目前，已發(fā)現(xiàn)鐵蛋白的核受體輔激活蛋白4（nuclear receptor coactivator 4，NCOA4）能夠通過(guò)自噬降解等增加細(xì)胞間二價(jià)鐵水平從而促進(jìn)鐵死亡的發(fā)生［16］。谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4（glutathione peroxidase 4，GPX4）是水解脂質(zhì)過(guò)氧化物的關(guān)鍵酶，可依賴(lài)谷胱甘肽將有毒的脂質(zhì)過(guò)氧化物還原為無(wú)毒的脂質(zhì)醇，維持細(xì)胞內(nèi)自由基的穩(wěn)態(tài)，抑制鐵死亡的發(fā)生［14］，所以鐵死亡的本質(zhì)是鐵代謝紊亂和脂質(zhì)過(guò)氧化，核心分子機(jī)制是氧化與抗氧化的動(dòng)態(tài)失衡。

隨著研究的深入，有報(bào)道［17］稱(chēng)鐵死亡參與了包括腫瘤等在內(nèi)的多種疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，同時(shí)越來(lái)越多的證據(jù)提示，啟動(dòng)腫瘤細(xì)胞鐵死亡有望成為新的腫瘤治療靶點(diǎn)。目前，鐵死亡在腎癌發(fā)生、發(fā)展中的作用也得到了廣泛研究。與其他腫瘤細(xì)胞株相比，erastin更容易介導(dǎo)表達(dá)CPX4的腎癌細(xì)胞株產(chǎn)生脂質(zhì)活性氧從而誘導(dǎo)細(xì)胞鐵死亡，而這種鐵死亡可以被親脂抗氧化劑（如維生素E）抑制；同時(shí)發(fā)現(xiàn)單純使用siRNA沉默GPX4可有效誘導(dǎo)這些細(xì)胞鐵死亡，即腎癌細(xì)胞更容易受到GPX4調(diào)控的鐵死亡的攻擊［18］。GPX4依賴(lài)輔因子谷胱甘肽（glutathione，GSH）可去除細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化物，修復(fù)受損的細(xì)胞膜，從而抑制細(xì)胞鐵死亡的發(fā)生。Miess等［19］發(fā)現(xiàn)腎透明細(xì)胞癌對(duì)谷氨酰胺或胱氨酸剝奪引起的死亡高度敏感，因?yàn)檫@兩種氨基酸是GSH合成所必需的；此外，Miess等［19］還發(fā)現(xiàn)沉默GSH生物合成途徑的酶或者GPX，可以選擇性地抑制腎透明細(xì)胞癌的活力而不影響腎正常上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)。腎癌的發(fā)生、發(fā)展與多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活密切相關(guān)。Hippo-YAP/TAZ信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與腎癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，TAZ能夠通過(guò)調(diào)節(jié)EMP1的表達(dá)誘導(dǎo)活性氧（reactive oxygen species，ROS）產(chǎn)生酶NOX4，從而增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)鐵死亡的敏感性［20］。能量應(yīng)激效應(yīng)分子腺苷酸活化蛋白激酶（AMPactivated protein kinase，AMPK）的激活可以介導(dǎo)乙酰輔酶A羧化酶磷酸化和多不飽和脂肪酸生物合成，從而降低腎癌Caki-1細(xì)胞株對(duì)鐵死亡的敏感性［21］。盡管針對(duì)晚期腎癌的治療方法不斷被研發(fā)和處于迭代中，晚期腎癌的OS仍然不夠理想，因此探索腎癌侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制并尋找新的治療靶點(diǎn)是改善腎癌預(yù)后的關(guān)鍵。Lu等［22］發(fā)現(xiàn)低表達(dá)KLF2與腎癌的轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后密切相關(guān)。低表達(dá)KLF2可以通過(guò)下調(diào)GXP4的表達(dá)抑制細(xì)胞鐵死亡，進(jìn)而促進(jìn)腎癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。除了散發(fā)性腎癌外，約有10%的腎癌屬于遺傳性腎癌。對(duì)于此類(lèi)患者，也需要不斷探索治療方式進(jìn)而提高療效。如在遺傳性平滑肌瘤病和腎細(xì)胞癌中發(fā)現(xiàn)延胡索酸水合酶的失活可以引起細(xì)胞內(nèi)延胡索酸的蓄積，進(jìn)而增強(qiáng)這類(lèi)細(xì)胞對(duì)鐵死亡的敏感性［23］。據(jù)此，鐵死亡作為一種新的細(xì)胞死亡方式，為闡明腎癌的發(fā)病機(jī)制和尋找其新的治療靶點(diǎn)提供了新的思路，也為最終進(jìn)行轉(zhuǎn)化應(yīng)用和提高腎癌患者的生存率提供了理論依據(jù)。

2 細(xì)胞焦亡與腎癌

細(xì)胞焦亡又稱(chēng)細(xì)胞炎性壞死，是一種程序性細(xì)胞死亡。與細(xì)胞凋亡不同的是，細(xì)胞焦亡發(fā)生時(shí)可以釋放出大量促炎性物質(zhì)，激活機(jī)體的天然免疫反應(yīng)。2001年，這種既有細(xì)胞壞死特性又有細(xì)胞凋亡特性的細(xì)胞死亡被命名為細(xì)胞焦亡［24］。目前較為確切的細(xì)胞焦亡分子機(jī)制分為依賴(lài)caspase-1的經(jīng)典焦亡途徑和依賴(lài)caspase-4、caspase-5和caspase-11的非經(jīng)典焦亡途徑［25-28］。經(jīng)典焦亡途徑：首先包含有caspase-1前體、細(xì)胞質(zhì)模式識(shí)別受體、黑色素瘤缺失因子2、凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白等的炎性小體激活caspase-1；其次，激活的caspase-1在Asp275位點(diǎn)將焦孔素（gasdermins，GSDM）-D切割成C-GSDM-D和N-GSDM-D；然后具有親脂性的N-GSDM-D與質(zhì)膜中的磷酸肌醇結(jié)合并形成內(nèi)徑10～ 14 nm的非選擇性膜孔導(dǎo)致細(xì)胞腫脹和裂解，同時(shí)經(jīng)caspase-1剪切前體白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-1β和IL-18成為成熟的IL-1β和IL-18；此外，亦通過(guò)N-GSDM-D形成的膜孔釋放到細(xì)胞外并招募大量的炎性細(xì)胞、擴(kuò)大炎性反應(yīng)、提高機(jī)體的天然免疫能力。非經(jīng)典焦亡途徑：脂多糖激活caspase-4、caspase-5和caspase-11，其次激活的活caspase-4、caspase-5和caspase-11將GSDM-D切割成C-GSDM-D和N-GSDM-D，然后N-GSDM-D與質(zhì)膜中的磷酸肌醇結(jié)合并形成內(nèi)徑為10～ 14 nm的非選擇性膜孔導(dǎo)致細(xì)胞焦亡。總之，屬于GSDM蛋白家族中的GSDM-D是經(jīng)典和非經(jīng)典焦亡途徑的共同效應(yīng)蛋白，在細(xì)胞焦亡中發(fā)揮著重要的生物學(xué)功能［28］。除此之外，一些新的機(jī)制研究［29-30］也陸續(xù)被報(bào)道，如被化療藥物激活的caspase-3通過(guò)切割GSDM-E再誘發(fā)細(xì)胞凋亡轉(zhuǎn)為細(xì)胞焦亡，同時(shí)激活機(jī)體抗腫瘤天然免疫能力［29］。在缺氧條件下，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）可以促進(jìn)GSDM-C表達(dá)，GSDM-C再被caspase-8切割成C-GSDM-C和N-GSDM-C，從而誘發(fā)細(xì)胞焦亡［30］，并招募大量的炎性物質(zhì)、擴(kuò)大炎性反應(yīng)、提高機(jī)體的免疫能力。

由此可見(jiàn)，細(xì)胞焦亡不僅可以誘導(dǎo)細(xì)胞死亡還可以激活抗腫瘤免疫應(yīng)答［31-33］，其在腎癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的作用已有一些初步的研究結(jié)果。腎癌是一種富含免疫細(xì)胞浸潤(rùn)的腫瘤。在對(duì)公共數(shù)據(jù)庫(kù)中腎癌數(shù)據(jù)分析后發(fā)現(xiàn)，根據(jù)細(xì)胞焦亡相關(guān)基因等構(gòu)建的預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)模型將腎癌分為高危和低危組，高危組的免疫細(xì)胞浸潤(rùn)更高、腫瘤純度更低、預(yù)后更差和免疫檢查點(diǎn)標(biāo)志物表達(dá)更高，提示這些患者可能更容易從免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療中獲益［32］。GSDM是一組介導(dǎo)細(xì)胞焦亡的關(guān)鍵蛋白，在細(xì)胞死亡中發(fā)揮著重要作用。有研究［33］發(fā)現(xiàn)，GSDM-A～ GSDM-E在腎癌組織中的表達(dá)水平明顯高于正常組織，GSDM-E表達(dá)上調(diào)與腎癌較差的OS和無(wú)復(fù)發(fā)生存期（relapse-free survival，RFS）有關(guān)，GSDM家族蛋白在不同腎癌免疫亞型中的表達(dá)也存在顯著差異。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）屬于非編碼RNA之一，不僅具有基因調(diào)控功能，還在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要調(diào)控作用。已有研究［34］發(fā)現(xiàn)，基于細(xì)胞焦亡相關(guān)的14個(gè)lncRNA可以將腎癌分為高危與低危組，高危組患者的預(yù)后明顯差于低危組，同時(shí)高危組與低危組之間免疫檢查點(diǎn)如PD-1、LAG3、CTLA4也存在明顯差異。這些間接顯示細(xì)胞焦亡相關(guān)lncRNA可以預(yù)測(cè)腎癌患者的預(yù)后和治療的效果，可能成為腎癌的治療靶點(diǎn)之一。溴結(jié)構(gòu)域蛋白4（bromodomain containing protein 4，BRD4）參與多種癌癥的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。在腎癌中，已有研究［35］發(fā)現(xiàn)BRD4可以通過(guò)核因子κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）去磷酸化增強(qiáng)NLRP3的轉(zhuǎn)錄活性，進(jìn)而啟動(dòng)caspase-1依賴(lài)性細(xì)胞焦亡，同時(shí)抑制腎癌細(xì)胞增殖和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transformation，EMT）。因此，BRD4可能成為誘導(dǎo)腎癌細(xì)胞焦亡的潛在治療靶點(diǎn)，溴結(jié)構(gòu)域抑制劑JQ1有望成為治療腎癌的藥物。細(xì)胞焦亡在腎癌發(fā)生、發(fā)展和治療中的作用正在不斷被發(fā)現(xiàn)，為探索基于細(xì)胞焦亡的腎癌治療策略并進(jìn)行轉(zhuǎn)化應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

3 自噬與腎癌

細(xì)胞自噬又稱(chēng)Ⅱ型程序性細(xì)胞死亡，可分為3種類(lèi)型：微自噬、分子伴侶介導(dǎo)的自噬和巨自噬。微自噬即溶酶體膜直接包裹并降解待降解物的過(guò)程。分子伴侶介導(dǎo)的自噬即通過(guò)分子伴侶熱激蛋白70同源物特異性結(jié)合包含KFERQ基序的靶蛋白并引導(dǎo)其進(jìn)入溶酶體進(jìn)行降解。巨自噬即在細(xì)胞內(nèi)外各種刺激下，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)膜結(jié)構(gòu)包裹部分細(xì)胞質(zhì)、受損細(xì)胞器、蛋白等成分形成自噬體，再與溶酶體融合形成自噬溶酶體，然后溶酶體水解酶降解其所包裹的內(nèi)容物，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞本身的代謝需要和細(xì)胞器的更新。通常，細(xì)胞自噬是指巨自噬。隨著自噬理論的不斷完善，細(xì)胞自噬一般經(jīng)歷誘導(dǎo)、自噬體形成、自噬體與溶酶體結(jié)合和溶酶體降解并利用自噬體內(nèi)容物4個(gè)階段。在細(xì)胞自噬過(guò)程中，研究者已發(fā)現(xiàn)諸多自噬相關(guān)基因（autophagy-related gene，ATG），如ATG13、ATG101、ULK1/2、FIP200等。這些基因的表達(dá)產(chǎn)物組成ULK復(fù)合體后將啟動(dòng)細(xì)胞自噬［36-37］。上游調(diào)控信號(hào)如哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）被抑制后會(huì)使ATG13去磷酸化，激活ULK復(fù)合體并將其定位在自噬前體的質(zhì)膜上，再激活PI3K復(fù)合體（PI3K complex，PI3KC），PI3KC介導(dǎo)磷脂酰肌醇磷酸化產(chǎn)生PI3P完成自噬前體膜的延伸。ATG4將LC3加工成LC3-Ⅰ，再在ATG7和ATG3的共同作用下將其共價(jià)鏈接到磷脂酰乙醇胺形成脂溶性LC3-Ⅱ，進(jìn)而參與膜的延伸，促進(jìn)自噬體的成熟。然后在溶酶體相關(guān)蛋白LAMP1/2、UVRAG等［38］參與下，成熟自噬體通過(guò)微管骨架系統(tǒng)與溶酶體融合形成自噬溶酶體。最后，溶酶體水解酶降解自噬體所包裹的內(nèi)容物，所產(chǎn)生的氨基酸等將被重復(fù)利用［39］。在正常生理狀態(tài)下，細(xì)胞通過(guò)自噬清除有毒或致癌物質(zhì)、受損的細(xì)胞器等維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。

在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中，有研究［40］報(bào)道，腫瘤細(xì)胞可通過(guò)自噬降解細(xì)胞內(nèi)的變性蛋白質(zhì)或受損細(xì)胞器等為癌細(xì)胞提供豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而促進(jìn)癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。近年來(lái)，細(xì)胞自噬參與腎癌發(fā)生、發(fā)展和作為治療靶點(diǎn)的作用均廣受關(guān)注。在探索人類(lèi)癌組織標(biāo)本中自噬通路相關(guān)分子的變化譜時(shí)，發(fā)現(xiàn)腎癌組織中自噬相關(guān)基因ATG16L2的轉(zhuǎn)錄水平明顯升高并與患者預(yù)后密切相關(guān)［41］。饑餓狀態(tài)下腎癌細(xì)胞的自噬體中谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶2（transglutaminase 2，TGase 2）可以與HDM2競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合P53并導(dǎo)致P53降解，從而抑制腎癌細(xì)胞死亡［42］。也有研究［43-44］發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自噬可抑制腎癌細(xì)胞生長(zhǎng)。Turcotte等［43］發(fā)現(xiàn)自噬誘導(dǎo)劑STF-62247可以抑制腎癌異種移植模型中腫瘤的生長(zhǎng)。過(guò)表達(dá)miR-338-3p可以增加細(xì)胞自噬并抑制細(xì)胞增殖、遷移和侵襲［44］。這些研究表明自噬在腎癌中具有“雙向”作用，發(fā)揮著“雙刃劍”的功能。因此，已有研究［45-46］探索了是否可以通過(guò)抑制自噬或者誘導(dǎo)自噬達(dá)到治療的目的。例如，有研究者［45］發(fā)現(xiàn)抑制自噬與現(xiàn)有的治療藥物有一定的協(xié)同作用。在探索自噬抑制劑氯喹聯(lián)合IL-2對(duì)腎癌小鼠模型的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，氯喹的引入可以增強(qiáng)IL-2抑瘤能力和降低IL-2的不良反應(yīng)，這些結(jié)果顯示抑制自噬可以增強(qiáng)IL-2免疫治療的效果。聯(lián)合自噬抑制劑羥化氯喹和mTOR抑制劑替西羅莫司可以進(jìn)一步增強(qiáng)替西羅莫司對(duì)腎癌細(xì)胞的抑制作用。還有研究發(fā)現(xiàn)使用siRNA干擾ATG13抑制自噬可以增強(qiáng)舒尼替尼誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡。而另一部分研究［46］卻發(fā)現(xiàn)自噬是免疫原性細(xì)胞殺傷的一個(gè)必要條件，增強(qiáng)自噬可以刺激腫瘤抗原交叉呈遞和增強(qiáng)抗腫瘤免疫應(yīng)答，因此認(rèn)為在腫瘤治療期間應(yīng)該增強(qiáng)自噬而不是抑制自噬。自噬在腎癌發(fā)生、發(fā)展中的調(diào)控機(jī)制不斷被研究和完善，對(duì)攻克腎癌具有重要的意義，為確立基于自噬的靶向治療策略奠定了理論基礎(chǔ)。

4 其他細(xì)胞死亡與腎癌

細(xì)胞凋亡是指一種由基因控制的主動(dòng)啟動(dòng)的程序性細(xì)胞死亡，形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為細(xì)胞體積縮小、核濃縮、染色質(zhì)凝固、DNA降解成180～ 200 bp片段、mRNA衰變、凋亡小體形成等。壞死性凋亡是新發(fā)現(xiàn)的另外一種具有壞死特征的非caspase依賴(lài)的程序性細(xì)胞死亡，主要由受體交互作用蛋白1/3（receptor-interacting protein 1/3，RIP1/3）和混合鏈接激酶結(jié)構(gòu)域樣蛋白（mixed lineage kinase domain-like protein，MLKL）活化介導(dǎo)。當(dāng)細(xì)胞受到外界刺激時(shí)，腫瘤壞死因子受體可募集下游分子形成復(fù)合物Ⅰ（包含RIP1、腫瘤壞死因子受體相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域、凋亡蛋白抑制因子1/2等），然后復(fù)合物Ⅰ中的RIP1在去泛素化酶等作用下發(fā)生去泛素化并引起復(fù)合物Ⅰ降解從而釋放出RIP1，游離的RIP1與細(xì)胞內(nèi)Fas相關(guān)死亡域蛋白、caspase-8結(jié)合形成復(fù)合物Ⅱa并激活caspase-8及其下游的caspase，激活的caspase-8再切割包括RIP1/3在內(nèi)的多種底物蛋白從而啟動(dòng)細(xì)胞凋亡。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)caspase-8激活受阻時(shí)，RIP1/3則不能被caspase-8切割，而是形成包含RIP1和RIP3的復(fù)合物Ⅱb，并激活下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

在腎癌的發(fā)生、發(fā)展交互網(wǎng)絡(luò)中均可見(jiàn)細(xì)胞凋亡和壞死性凋亡的作用［47］。例如，microRNA（miRNA）作為一類(lèi)非編碼小RNA參與許多生物學(xué)過(guò)程，包括細(xì)胞增殖、分化和死亡，miR-381-3p作為一種腫瘤壞死因子誘導(dǎo)凋亡的抑制因子，過(guò)表達(dá)miR-381-3P能夠抑制caspase-8和caspase-3的活化，進(jìn)而抑制腎癌細(xì)胞凋亡，同時(shí)通過(guò)抑制RIPK3和MLKL的激活阻斷腫瘤壞死因子誘導(dǎo)的壞死性凋亡［48］。miR-124在腎癌中過(guò)表達(dá)可以負(fù)向調(diào)節(jié)CAPN4的表達(dá)，CAPN4低表達(dá)可以減弱其與CNOT3相互作用和減弱CNOT3降解，最終抑制鉑類(lèi)藥物化療誘發(fā)的壞死性凋亡［49］。也有研究者［50］發(fā)現(xiàn)Emodin可以通過(guò)ROS介導(dǎo)JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活并誘導(dǎo)腎癌細(xì)胞發(fā)生壞死性凋亡。癌癥干細(xì)胞（cancer stem cell，CSC）很少處于細(xì)胞周期中，是一種非增殖細(xì)胞，故對(duì)大多數(shù)藥物產(chǎn)生抗性。腎透明細(xì)胞癌中也含有表達(dá)CD133的CSC，選擇性結(jié)合腫瘤壞死因子1和2的突變蛋白可以與這種CSC的線粒體中的腫瘤壞死因子受體2結(jié)合并誘導(dǎo)STAT3磷酸化，激活VEGFR2、PI3K、Akt和mTOR磷酸化的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，并抑制細(xì)胞壞死性凋亡。抑制任何一種激酶或siRNA敲除腫瘤壞死因子受體2或STAT3可促進(jìn)與線粒體形態(tài)改變、細(xì)胞色素C釋放、ROS生成和表達(dá)MLKL的TUNEL+細(xì)胞相關(guān)的壞死性凋亡［51］。不斷探索細(xì)胞凋亡和壞死性凋亡在腎癌發(fā)生、發(fā)展中的分子機(jī)制，將為研發(fā)相應(yīng)的腎癌靶向治療藥物提供新的思路。

5 展望

腎癌嚴(yán)重威脅人類(lèi)的健康，在腎癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中，調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡發(fā)揮著重要的作用。目前，銅死亡、鐵死亡、細(xì)胞焦亡、自噬等在腎癌中的作用逐步被發(fā)現(xiàn)，但是它們?cè)谀I癌中的具體作用和分子機(jī)制仍需要進(jìn)一步闡明。未來(lái)的研究不僅要聚焦調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡在腎癌中的機(jī)制，還需要注重聯(lián)合研究成果轉(zhuǎn)化應(yīng)用的探索（如臨床試驗(yàn)），以研發(fā)療效確切及不良反應(yīng)較小的基于調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡的新型腎癌治療藥物，最終使腎癌患者獲益。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。