鈣基抗菌多肽復合物凝膠治療頭皮脂溢性皮炎的療效觀察

林文君，呂書影，曲保全，王英，崔增慧，陳磊，楊頂權(quán)

[1.北京中醫(yī)藥大學，北京 100029；2.中日友好醫(yī)院 皮膚病與性病科，北京 100029；3.貝殼派創(chuàng)新科技（深圳）有限公司，廣東 深圳 518101]

脂溢性皮炎是皮膚科常見的、以頭面部為主要好發(fā)部位的一種多發(fā)性慢性炎癥性疾病[1]，常見于青壯年或乳兒期。累及頭皮的典型癥狀為紅斑基礎(chǔ)上覆有油膩性鱗屑，同時伴有瘙癢和頭皮異味，嚴重時伴有糜爛、滲出、毛囊炎、脫發(fā)等癥狀，給患者的形象、生活和心理造成一定影響[2]?？凤躐R拉色菌在脂溢性皮炎發(fā)生過程中起重要作用。本研究進行體外抑菌實驗的基礎(chǔ)研究，并通過臨床觀察探討鈣基抗菌多肽復合物凝膠對頭皮脂溢性皮炎的治療效果，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株與菌液制備

糠秕馬拉色菌ATCC44344 購自上海保藏生物技術(shù)中心。用接種鉤挑取適量菌液，加于無菌生理鹽水中攪拌成懸液，不斷調(diào)整菌液使用濃度，直至達到5×105CFU/ml[3]。

1.2 試劑與藥物

鈣基抗菌多肽復合物凝膠[海得寶凱普斯泰冷敷凝膠，貝殼派創(chuàng)新科技（深圳）有限公司，魯濟械備20190008 號，25 g/瓶]，2%酮康唑洗液（采樂洗液，西安楊森制藥公司，國藥準字：H20000588，50 ml/瓶）。

1.3 試管藥基法

①制備1 L 沙氏培養(yǎng)基，并滅菌備用。融化培養(yǎng)基，保持恒溫，使其一直處于融化狀態(tài)。②制備藥樣培養(yǎng)基，設(shè)為陽性對照組。將不同規(guī)格的藥樣（鈣基抗菌多肽復合物凝膠分別為2.0 mg、1.6 mg、1.2 mg、0.8 mg、0.4 mg；2%酮康唑洗液分別為2.0 μg、1.6 μg、1.2 μg、0.8 μg、0.4 μg）分別與1 ml 沙氏培養(yǎng)基均勻融合，得到10 組不同濃度的藥樣培養(yǎng)基：鈣基抗菌多肽復合物凝膠類培養(yǎng)基終濃度為0.5 mg/ml、0.4 mg/ml、0.3 mg/ml、0.2 mg/ml、0.1 mg/ml；2%酮康唑洗液類培養(yǎng)基終濃度為0.5 μg/ml、0.4 μg/ml、0.3 μg/ml、0.2 μg/ml、0.1 μg/ml。對以上10 個藥樣培養(yǎng)基分開儲存，每個試管4 ml，并標記。③制備普通培養(yǎng)基，設(shè)為陰性對照組。取5 個培養(yǎng)基加入等體積的蒸餾水，將其做成普通50%培養(yǎng)基。④加菌培養(yǎng)。取等容量（50 μl）糠秕馬拉色菌菌液加入藥樣培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基試管中，放置于真菌培養(yǎng)箱內(nèi)，32℃條件下培養(yǎng)，2 d 觀察1 次，連續(xù)觀察10 d。⑤結(jié)果判定。培養(yǎng)結(jié)束，若在陽性對照組試管中未觀察到移種過后糠秕馬拉色菌的生長，則說明藥物對該菌種存在抑制作用；若陽性對照組與陰性對照組比較，糠秕馬拉色菌的生長情況相似，則說明藥物對該菌種無抑制作用。根據(jù)兩藥各自5 管中3 管以上菌種的生長情況來判斷抑菌情況。實驗重復3 次，取3 次結(jié)果的平均值[4]。實驗部分過程見圖1、2。

圖1 鈣基抗菌多肽復合物凝膠水溶液體外培養(yǎng)

1.4 一般臨床資料

選取2019年3月—2019年10月北京中日友好醫(yī)院皮膚病與性病科門診收治的典型頭皮脂溢性皮炎患者60 例。根據(jù)隨機雙盲實驗規(guī)則，將納入的患者隨機分為實驗組和對照組，每組30 例。最終共完成50 例：實驗期間，實驗組3 例脫落，有效27 例；對照組7 例脫落，有效23 例。所有納入患者的性別、年齡、病程比較，差異無統(tǒng)計學意義（P?0.05），具有可比性。納入標準：①年齡5～70 歲；性別不限；②參照《中國臨床皮膚病學（第二版上冊）》[5]頭面部脂溢性皮炎的診斷標準（頭皮有片狀灰白色鱗屑，基底紅斑、瘙癢，油脂溢出明顯或有油膩性鱗屑性斑片），經(jīng)真菌鏡檢查結(jié)合臨床相關(guān)癥狀確診為頭皮脂溢性皮炎；③能按照要求使用鈣基抗菌多肽復合物凝膠或其基質(zhì)，并接受定期隨訪、簽訂知情同意書者；④3 個月內(nèi)沒有進行過系統(tǒng)治療，1 個月內(nèi)未進行過局部治療；⑤沒有嚴重的系統(tǒng)性疾病和精神疾病。排除標準：①對鈣制劑過敏者；②妊娠期婦女；③研究人員認為不適合參加該臨床研究的其他情況。

圖2 鈣基抗菌多肽復合物凝膠水溶液紙片擴散抑菌實驗

1.5 治療方法

實驗組使用鈣基抗菌多肽復合物凝膠，對照組使用鈣基抗菌多肽復合物凝膠的基質(zhì)（成分有水、甘油、羥乙基纖維素、薄荷醇，具有基礎(chǔ)保濕作用）。兩組患者外用相應藥物涂抹于皮膚病變部位，治療4 周，3 次/d。觀察所有患者治療前和治療后的紅斑、脫屑、油脂和瘙癢情況，對各項指標進行評分，并記錄不良事件。選擇皮損最明顯處為靶區(qū)，采集治療前與治療4 周后的毛發(fā)鏡照片，進行真菌直接免疫熒光檢測。根據(jù)靶區(qū)癥狀和真菌直接免疫熒光檢測結(jié)果，對整體的臨床療效進行評估。

1.6 療效評價

1.6.1 癥狀評分參照《中藥新藥臨床研究指導原則》對患者皮損靶區(qū)的紅斑、鱗屑、油脂、瘙癢的癥狀進行評分[6]。紅斑評分標準：沒有癥狀的判定為0 分；有淡褐色紅斑的為輕度，判定為1 分；有淡紅色紅斑的為中度，判定為2 分；有鮮紅色紅斑為重度，判定為3 分。鱗屑評分標準：沒有鱗屑記0 分；有散在鱗屑為輕度，記1 分；有較多且密集鱗屑但數(shù)量可計的為中度，記2 分；有非常密集且融合成片難以計數(shù)的鱗屑為重度，記3 分。油脂評分標準：沒有油脂記0 分；頭發(fā)尚有飄逸感但有輕度油漬的為輕度，記1 分；頭發(fā)有明顯油光感為中度油漬記2 分；發(fā)根黏連固定成型的為重度油漬，記3 分。瘙癢評分標準：沒有瘙癢記0 分；可以正常生活但有輕度瘙癢的記1 分；瘙癢對生活質(zhì)量造成一定的影響但尚可忍耐接受的為中度瘙癢，記2 分；瘙癢導致日常工作與生活極其困難且難以忍受的為重度瘙癢，記3 分。

1.6.2 臨床療效評價按照尼莫地平法，癥狀評分減少率=（治療前評分-治療后評分）/治療前評分×100%。根據(jù)《中醫(yī)病癥診斷療效標準（2017 版）》[7]制定臨床療效的判定方法：痊愈，癥狀評分減少≥95%；顯效，癥狀評分減少70%～<95%；有效，癥狀評分減少30%～<70%；無效，癥狀評分減少<30%。臨床總有效率=痊愈率+顯效率+有效率。

1.6.3 不良反應用藥后，密切監(jiān)測并仔細詢問患者用藥部位及全身是否出現(xiàn)皮損處的紅腫、脫發(fā)、局部刺癢、疼痛及灼熱感，甚至全身過敏反應等，記錄并比較兩組不良事件的發(fā)生率。

1.7 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 17.0 統(tǒng)計軟件。計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，比較用t檢驗；計數(shù)資料以例（%）表示，比較用χ2檢驗；等級資料用等級表示，比較采用秩和檢驗。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 體外抑菌實驗

遵循藥物的最低抑菌濃度（minimum inhibitory concentration,MIC）判定原則，即以肉眼觀察，藥物最低濃度管無細菌生長；通過對兩種藥物的多濃度梯度抑菌實驗得出兩者的MIC 結(jié)果：鈣基抗菌多肽復合物凝膠對糠秕馬拉色菌的MIC 是0.3 mg/ml，2%酮康唑洗液的MIC 為0.2 μg/ml。

2.2 兩組治療前后癥狀評分差值的比較

兩組患者治療前后各癥狀評分差值的比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。治療4 周時，實驗組鱗屑（見圖3A、B）、紅斑（見圖3C、D）、油脂（見圖3E、F）的改善直觀可視。

表1 兩組患者治療前后各癥狀評分差值的比較（±s>）

表1 兩組患者治療前后各癥狀評分差值的比較（±s>）

組別實驗組對照組t 值P 值紅斑1.15±0.51 0.45±0.65 4.231 0.000鱗屑1.20±0.54 0.49±0.50 4.771 0.000油脂1.15±0.50 0.52±0.57 4.139 0.000瘙癢1.25±0.52 0.55±0.48 4.917 0.000

圖3 實驗組各癥狀治療前后比較（毛發(fā)鏡×40）

2.3 兩組真菌抑制率比較

兩組患者治療前真菌鏡檢結(jié)果均顯示陽性，治療4 周時，實驗組的真菌鏡檢陰性率為66.67%（18 例），對照組的真菌鏡檢陰性率為17.19%（4 例），兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=12.239，P=0.000）。實驗組患者真菌直接免疫熒光檢測結(jié)果見圖4。

圖4 實驗組患者真菌直接免疫熒光檢測圖（×40）

2.4 兩組臨床療效比較

治療4 周時，實驗組臨床治療有效率為85.18%，對照組臨床治療有效率為52.17%。兩組臨床治療有效率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）（見表2）。治療過程中兩組均無不良反應。

表2 兩組臨床療效比較 例（%）

3 討論

脂溢性皮炎病因復雜，目前公認的主要原因是皮脂分泌過多，糠秕馬拉色菌增殖過度，進而誘發(fā)局部炎癥[8-9]。治療以抗真菌藥物為主。口服和外用制劑起效快，但停藥后復發(fā)率高，長期使用有一定的副作用[2，10]。因此，尋找治療脂溢性皮炎安全、有效的方法成為近年來的研究熱點。

鈣基抗菌多肽復合物凝膠主要成分為凱普斯泰，由多種抗菌多肽和活性鈣通過核心包埋技術(shù)結(jié)合在一起。其中，抗菌多肽主要在生物體抵御外界侵襲時產(chǎn)生，在對抗多種病原微生物的侵入時顯示出良好的抗菌活性；不同抗菌譜抗菌多肽的組合方式使得凱普斯泰凝膠具備優(yōu)良的廣譜抗菌效果[11-16]?；钚遭}是由海洋貝類經(jīng)改性而成的天然鈣，其在收縮毛細血管、增強毛細血管壁致密性及降低毛細血管通透性等方面有著良好的臨床效果，能夠很好地保護細胞膜，抑制炎癥介質(zhì)釋放，減少滲出，具有良好的消腫、抗炎、抗過敏的作用[17-19]。這使凱普斯泰凝膠對濕疹類皮炎的紅斑、水腫和瘙癢具有良好的治療作用。另外，凱普斯泰凝膠產(chǎn)品使用的原材料均取自天然，無激素、抗生素或防腐劑，易于清洗，藥性溫和、無刺激性，不損傷幼嫩皮膚，適于孕婦、嬰幼兒和肌膚敏感人群長期使用[20]。

真菌和細菌是濕疹和皮炎的重要致病因素[21-23]。本研究的體外抑菌實驗顯示，鈣基抗菌多肽復合物凝膠對糠秕馬拉色菌具有抑制性，最小抑菌濃度為0.3 mg/ml，抑菌效果與2%酮康唑洗劑相似。此外，有研究[21]發(fā)現(xiàn)，鈣基抗菌多肽復合物凝膠也能夠抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念珠菌的活性；根據(jù)本研究臨床研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實驗組真菌的抑制率優(yōu)于對照組，且實驗組治療前后紅斑、鱗屑、油脂、瘙癢癥狀評分的差值較對照組大，證明實驗組治療效果更佳。結(jié)合本研究兩種結(jié)果可以看出，鈣基抗菌多肽復合物凝膠具有良好的抑制糠秕馬拉色菌的作用，對頭皮脂溢性皮炎的主要癥狀有效，發(fā)揮抗炎抑菌作用。本研究過程中，兩組患者均無任何不良反應，證明治療方法安全可靠。

綜上所述，鈣基抗菌多肽復合物凝膠是治療脂溢性皮炎安全有效的輔助方法之一，具有良好的抗炎抑菌效果，這也為其輔助治療其他常見的濕疹類皮炎提供了一定的理論支持。