老年2 型糖尿病合并肺部感染患者外周血免疫指標(biāo)及炎癥因子變化分析

王春華，李春楊，單建芳，朱敏敏，許麗

老年2 型糖尿病患者的感染發(fā)生率增高，尤其是肺部感染［1］。 目前2 型糖尿病的發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，但免疫功能紊亂在2 型糖尿病發(fā)病及并發(fā)癥發(fā)生中的作用已經(jīng)得到了部分研究證實(shí)［2］。 有研究認(rèn)為，免疫功能降低是2 型糖尿病發(fā)生感染的重要因素［3］。 肺部感染是降低2 型糖尿病患者生活質(zhì)量的重要因素，也是患者死亡的重要原因［1］，探索其發(fā)病機(jī)制對指導(dǎo)臨床診療意義重大。 肺部感染后炎癥反應(yīng)水平增加，炎癥反應(yīng)也是肺部感染進(jìn)展的重要機(jī)制［4］。 目前關(guān)于老年2 型糖尿病合并肺部感染患者的免疫功能及其與炎癥水平的關(guān)系報道較少，本研究觀察老年2 型糖尿病合并肺部感染患者外周血免疫指標(biāo)與炎癥因子的變化情況，分析兩者之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 病例資料

選取2019 年1－11 月在阜寧縣人民醫(yī)院就診的60 例老年2 型糖尿病合并肺部感染患者作為合并肺部感染組，將同期收治的60 例無肺部疾病的老年2 型糖尿病患者作為對照組。 合并肺部感染組患者選取標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合2 型糖尿病診斷［5］且年齡＞65 歲；（2）臨床表現(xiàn)、影像學(xué)表現(xiàn)及痰培養(yǎng)均符合肺部感染診斷；（3）資料完整；（4）同意加入研究且簽署知情同意書；（5）依從性可；（6）入院前未接受肺部感染相關(guān)治療；（7）2 型糖尿病的治療均符合臨床指南［5］。 符合上述所有選項者納入本研究。 排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）1 型糖尿病；（2）自行退出研究；（3）正在參與其他研究；（4）合并惡性腫瘤、凝血功能障礙、血液系統(tǒng)疾病、精神疾病、自身免疫性疾病、嚴(yán)重的臟器疾??；（5）存在慢性肺部疾病史；（6）入院前接受過激素治療、免疫調(diào)節(jié)藥物者；（7）心臟功能障礙者。 2 組患者性別、年齡、空腹血糖、糖尿病病程、體質(zhì)量指數(shù)等基礎(chǔ)資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。 見表1。 相關(guān)觀察指標(biāo)和研究過程均經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過，患者均簽署知情同意書。

表1 合并肺部感染組與對照組老年2 型糖尿病患者基礎(chǔ)資料比較

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采集所有研究對象空腹肘靜脈血5 ml，其中2.5 ml 靜脈血以2 000 r／min 離心15 min（離心半徑15 cm），留取上清液放置在－20℃冰箱備用。 另外2.5 ml 靜脈血置于乙二胺四乙酸抗凝試管，用于分離淋巴細(xì)胞。

1.2.2 炎癥因子檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗法［6］被用于檢測白細(xì)胞介素?6（IL?6）、腫瘤壞死因子（TNF）?α，試劑盒購自艾美捷科技有限公司。C?反應(yīng)蛋白（CRP）采用速率散射比濁法［7］，使用全自動特定蛋白分析儀器（儀器購自美國Beckman Ar?ray）進(jìn)行檢測。

1.2.3 免疫球蛋白的檢測 采用免疫比濁法［7］檢測免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白A（IgA）水平，使用IMMAGE 全自動免疫分析儀，儀器購自美國Becton?Dickinson，試劑購自艾美捷科技有限公司。

1.2.4 淋巴細(xì)胞亞群分析 淋巴細(xì)胞亞群（CD3＋、CD8＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋）使用流式細(xì)胞分析儀分析［8］，儀器購自美國Becton?Dickinson，型號BD FAC?SCalibur 型。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 18.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。 計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用獨(dú)立樣本t檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)和率表示，采用χ2檢驗。炎癥因子和免疫指標(biāo)的相關(guān)性分析使用Pearson分析。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 炎癥指標(biāo)

合并肺部感染組IL?6、CRP、TNF?α 水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。 見表2。

表2 合并肺部感染組和對照組老年2 型糖尿病患者炎癥指標(biāo)水平比較（±s）

表2 合并肺部感染組和對照組老年2 型糖尿病患者炎癥指標(biāo)水平比較（±s）

注：IL 為白細(xì)胞介素，CRP 為C 反應(yīng)蛋白，TNF 為腫瘤壞死因子

組別例數(shù)IL?6（ng／L）CRP（mg／L） TNF?α（ng／L）合并肺部感染組 6055.8±6.918.9±3.553.9±6.1對照組 6035.4±5.210.2±3.038.0±5.4 t 值18.28914.61915.118 P 值0.0000.0000.000

2.2 免疫球蛋白水平

2 組IgM 和IgA 水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；但合并肺部感染組IgG 水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。 見表3。

表3 合并肺部感染組和對照組老年2 型糖尿病患者免疫球蛋白水平比較（g／L，±s）

表3 合并肺部感染組和對照組老年2 型糖尿病患者免疫球蛋白水平比較（g／L，±s）

組別例數(shù)IgGIgMIgA合并肺部感染組 6011.02±2.012.30±0.942.69±1.30對照組 6013.63±2.222.23±0.982.77±1.23 t 值6.7510.3390.346 P 值0.0000.6900.730

2.3 淋巴細(xì)胞比值

2 組CD8＋水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；但合并肺部感染組CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。 見表4。

表4 合并肺部感染組和對照組老年2 型糖尿病患者淋巴細(xì)胞比值比較（±s）

組別例數(shù) CD3 ＋（%）CD8 ＋（%）CD4 ＋（%） CD4 ＋／CD8 ＋合并肺部感染組 6061.25±4.36 24.03±5.92 40.71±6.23 1.22±0.45對照組 6068.94±4.53 23.75±5.84 32.68±6.10 1.45±0.52 t 值9.4740.2617.1342.591 P 值0.0000.7950.0000.011

2.4 相關(guān)性分析

IgG、CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋分別與IL?6、CRP、TNF?α 呈負(fù)相關(guān)（P＜0. 05）；而IgM、IgA 及CD8＋與IL?6、CRP、TNF?α 無相關(guān)性（P＞0.05）。 見表5。

表5 炎癥指標(biāo)與免疫指標(biāo)相關(guān)性分析

3 結(jié)論

2 型糖尿病是由于胰島素分泌受損、葡萄糖耐受不良和高血糖導(dǎo)致血糖水平異常升高的疾病，是全世界醫(yī)療保健系統(tǒng)的主要負(fù)擔(dān)。 目前2 型糖尿病的發(fā)病機(jī)制被認(rèn)為與先天性和適應(yīng)性免疫均密切相關(guān)，后者被認(rèn)為是胰島素抵抗發(fā)展中的重要病因?qū)W成分［9］。 既往研究在2 型糖尿病患者中觀察到自然殺傷（NK）細(xì)胞功能受損，且嚴(yán)重程度與血糖控制情況呈負(fù)相關(guān)［10］。 老年糖尿病患者存在能量代謝障礙及高炎性狀態(tài)，可對機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定產(chǎn)生一定的破壞作用，加之老年患者免疫力低下，病情容易惡化，且容易并發(fā)肺部感染［11］。 繼發(fā)性肺部感染的原因包括營養(yǎng)不良、焦慮等精神健康問題、潛在的慢性疾病、急性炎癥的緩解、原發(fā)性免疫缺陷以及藥物引起的免疫抑制等，老年人群容易受到侵犯。 目前老年2 型糖尿病發(fā)生肺部感染的機(jī)制受到廣泛關(guān)注，已有部分研究顯示，2 型糖尿病合并肺部感染患者中存在顯著淋巴細(xì)胞功能異常及免疫球蛋白水平異常［8］。

在肺部感染患者的病情進(jìn)展中，炎癥因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)發(fā)揮著重要作用。 IL?6、CRP、TNF?α 均是常見的炎癥反應(yīng)指標(biāo)。 研究證實(shí)，CRP 在檢測不同類型感染引起的肺炎、監(jiān)測肺炎治療效果及病情進(jìn)展方面具有重要價值［12］，而IL?6 和TNF?α 在促進(jìn)肺部炎癥發(fā)生和進(jìn)展中的效果已被大量研究證實(shí)［13?14］。 因此，本研究選取CRP、IL?6 和TNF?α 作為肺部病變的炎癥指標(biāo)，結(jié)果顯示，2 型糖尿病合并肺部感染患者存在炎癥反應(yīng)水平異常增加，與既往研究結(jié)果相符［12?14］。

本研究顯示，合并肺部感染組IgG、CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋水平顯著低于對照組，證實(shí)老年2 型糖尿病合并肺部感染患者中IgG 及T 淋巴細(xì)胞亞群水平降低，說明患者存在嚴(yán)重免疫功能紊亂。薛建紅等［15］研究觀察了2 型糖尿病合并肺部感染患者免疫功能變化，也證實(shí)患者外周血中T 淋巴細(xì)胞亞群水平降低，與本研究結(jié)果相符。 IgA 主要分布在呼吸道、腺體中，參與黏膜免疫反應(yīng)；IgM 是初次免疫反應(yīng)出現(xiàn)較早的抗體，提示近期感染；IgG 是血清中分布最多的免疫球蛋白，由淋巴結(jié)和脾臟產(chǎn)生，具有親和力高、作用時間較長等特點(diǎn)，是二次免疫的主要抗體；免疫球蛋白反應(yīng)體液免疫的功能。本研究發(fā)現(xiàn)，老年2 型糖尿病合并肺部感染患者IgG水平降低，說明患者體液免疫功能低下。

近年來，研究已經(jīng)報道了T 細(xì)胞亞群在2 型糖尿病的進(jìn)展中起關(guān)鍵作用［16］。 這表明2 型糖尿病的發(fā)展與過度活化的T 細(xì)胞和炎性途徑的激活有關(guān)。 CD4＋效應(yīng)T 細(xì)胞可進(jìn)一步細(xì)分為促炎性Th1和Th17 以及抗炎性Th2 和Foxp3＋調(diào)節(jié)性T（Treg）細(xì)胞亞型，Th2 或Treg 與效應(yīng)T 細(xì)胞亞群（例如Th1或Th17 細(xì)胞）之間的平衡對于免疫穩(wěn)態(tài)和免疫反應(yīng)非常重要［17］。 CD8＋T 細(xì)胞通過分泌諸如TNF?α 等細(xì)胞因子，對感染的適應(yīng)性免疫反應(yīng)產(chǎn)生重要影響。CD8＋T 細(xì)胞還可以合成并表達(dá)促炎細(xì)胞因子IL?17，該因子存在于各種人類炎癥性疾病的炎癥組織中［18］。 CD3＋是指成熟的T 淋巴細(xì)胞，具有分泌細(xì)胞因子調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的功能［19］。 本研究中老年2 型糖尿病合并肺部感染患者的T 淋巴細(xì)胞亞群水平降低，說明存在細(xì)胞免疫功能紊亂。 相關(guān)性分析顯示，IgG、CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋分別與IL?6、CRP、TNF?α 呈負(fù)相關(guān)，證實(shí)老年2 型糖尿病合并肺部感染患者細(xì)胞免疫和體液免疫的功能與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，炎癥反應(yīng)水平較高時，老年2 型糖尿病合并肺部感染患者細(xì)胞免疫和體液免疫的功能越低，這提示免疫功能下降可能是老年2 型糖尿病患者發(fā)生肺部感染的重要機(jī)制。

目前，老年2 型糖尿病合并肺部感染患者的免疫功能及其與炎癥水平的關(guān)系報道較少，本研究采用前瞻性研究方法進(jìn)行研究，結(jié)果更加可靠，但本研究為單中心研究，且病例數(shù)有限，結(jié)果仍需大樣本多中心研究進(jìn)一步證實(shí)。 綜上所述，老年2 型糖尿病合并肺部感染患者的體液免疫和細(xì)胞免疫功能均受損傷，且老年2 型糖尿病肺部感染的免疫功能受到炎癥水平的影響，隨著炎癥水平的增加而降低。