基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探究丹參治療慢性肝炎的作用機(jī)制

霍蘇 崔鶴蓉 顧昱昊 戴子琦 李文 劉小靖 韓娜娜 馬濤 王鵬龍 雷海民

摘要 目的：運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法預(yù)測(cè)丹參治療慢性肝炎的主要活性成分、靶點(diǎn)及信號(hào)通路，探究其潛在作用機(jī)制。方法：通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）篩選丹參的有效成分;輸入Pharm Mapper數(shù)據(jù)庫(kù)獲得相應(yīng)基因;檢索GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)獲得慢性肝炎的靶點(diǎn)基因;利用R語言3.6.3截取交集網(wǎng)絡(luò)獲得潛在靶點(diǎn);使用Cytoscape3.7.2將“中藥-化合物-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)可視化處理;在STRING平臺(tái)構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò);利用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)候選靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書（KEGG）通路注釋。結(jié)果：獲得丹參中65個(gè)活性化合物、109個(gè)不重復(fù)的靶標(biāo)信息、89個(gè)慢性肝炎治療靶點(diǎn)。GO功能富集得到GO條目48個(gè)（P<0.05），其中生物過程（BP）條目1 796個(gè)，細(xì)胞組分（CC）條目73個(gè)，分子功能（MF）條目130個(gè);KEGG通路富集得到88條信號(hào)通路（P<0.05）。結(jié)論：丹參中的有效成分異隱丹參酮（Isocryptotanshi-none）、1，2，5，6-tetrahydrotanshinone、丹參醌新酮Ⅰ（MiltiononeⅠ）、二氫丹參內(nèi)酯（Dihydrotanshinlactone）、4-methylenemiltirone、丹參酮Ⅱa（TanshinoneⅡa）、木犀草素等可能作用于ADRB2、OPRM1、PTGS1、CA2、PTGS2等關(guān)鍵靶點(diǎn)通過調(diào)控Hepatitis B、IL-17 signaling pathway、Hepatitis C、T cell receptor signaling pathway、PI3K/AKT signaling pathway等干預(yù)了活性氧代謝過程、循環(huán)系統(tǒng)血管功能、氧化應(yīng)激反應(yīng)、凋亡，從而發(fā)揮治療慢性肝炎的作用。

關(guān)鍵詞 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);丹參;慢性肝炎;藥物作用機(jī)制;靶點(diǎn);信號(hào)通路;生物功能

Abstract Objective：To predict the main active components，targets and signal pathways of Radix Salviae Miltiorrhizae in the treatment of chronic hepatitis and to explore the mechanism of action.Methods：The effective components of Radix Salviae Miltiorrhizae were screened by TCMSP database.The corresponding genes were obtained by entering Pharm Mapper database.The target genes of chronic hepatitis were obtained by searching GeneCards database.We used R language 3.6.3 intercept intersection network to obtain candidate targets; With the help of Cytoscape 3.7.2，the network of “drug-compound-target-disease” was visualized.We built PPI network on STRING platform; the DAVID database was used for GO enrichment analysis and KEGG pathway annotation of the candidate targets.Results：A total of 65 effective compounds，109 non-repeated targets and 89 disease treatment targets were obtained.There were 48 GO items（P<0.05），among which 1796 were biological process（BP） items，73 were cell components（CC） items，and 130 were molecular function（MF） items.There were 88 signal pathways enriched by KEGG pathway（P<0.05）.Conclusion：The effective ingredients of Radix Salviae Miltiorrhizae Isocryptotanshi-none，1，2，5，6-tetrahydrotanshinone，miltionone I，dihydrotanshinlactone，4-methylenemiltirone，Tanshinone IIa，Luteolin may act on key targets such as ADRB2，OPRM1，PTGS1，CA2，and PTGS2 by regulating Hepatitis B，IL-17 signaling pathway，Hepatitis C，T cell receptor signaling pathway，PI3K-AKT signaling pathway，etc.，intervening in the process of reactive oxygen metabolism，circulatory system vascular function，oxidative stress response，apoptosis，and thus play a role in the treatment of chronic hepatitis.

Keywords Network pharmacology; Radix Salviae Miltiorrhizae; Chronic hepatitis; Drug mechanism; Targets; Signaling pathway; Biological function

中圖分類號(hào)：R285;R284文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.20.006

慢性肝炎是一類肝病的統(tǒng)稱，人體被病毒感染，飲食不當(dāng)、過度操勞、情志郁結(jié)等對(duì)肝臟的損害引起的，病程至少持續(xù)6個(gè)月以上的肝臟壞死和炎癥，是對(duì)肝臟慢性變態(tài)性損害過程[1-6]。慢性肝炎主要有慢性乙型肝炎（Chronic Hepatitis B）;慢性丙型肝炎（Chronic Hepatitis C，CHC）;由于體內(nèi)的自身免疫過度造成的，稱為自身免疫性肝炎（Autoimmune Hepatitis，AIH），常見于婦女[4];慢性酒精性肝?。ˋlcoholic Liver Disease，ALD）和由長(zhǎng)期服用某些藥物引起的藥物性肝損傷（Drug-induced Liver Injury，DILI）比如甲基多巴、異煙臍、醋氨酚等[7]。慢性肝炎按病重可分為輕、中、重度慢性重型肝炎。慢性肝炎的共同特征，即：不同程度的肝組織壞死和炎癥，隨后發(fā)生肝纖維化，最終可發(fā)展為肝硬化[8]。

慢性肝炎的治療包括保肝、抗纖維化、抗病毒、預(yù)防肝癌等方面，根據(jù)不同的病因，采取不同的治療手段，為治療慢性肝炎最重要的原則，治療慢性肝炎患者的關(guān)鍵在如何消除肝臟炎癥，使肝臟纖維化減輕[9]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)在治療慢性肝炎方面仍然不足：需要長(zhǎng)期使用藥物，成本高，用藥不方便，臨床應(yīng)用受到一定的限制[10]。中醫(yī)對(duì)慢性肝病是扶正祛邪，常用治法有清熱解毒、化痰通絡(luò)、疏肝理氣、活血化瘀、軟堅(jiān)散結(jié)、益氣養(yǎng)陰、健脾化濕、補(bǔ)腎柔肝、清熱解毒、化濕解毒、活血解毒、扶正解毒等。

丹參，歸心、肝經(jīng)。丹參能改善微循環(huán)，活血化瘀，調(diào)整組織修復(fù)和再生，可以顯著降低肝臟的脯氨酸含量，抑制成纖維細(xì)胞增殖和膠原在細(xì)胞內(nèi)的合成，改善肝臟功能，具有多個(gè)目標(biāo)綜合抗纖維化的藥理作用[11]。近幾年研究顯示，中藥丹參制劑在慢性肝炎的治療中研究較多，它具有保肝作用，能夠有效改善肝組織壞死;可以改善肝臟微循環(huán)，具有抑制細(xì)胞纖維化的作用;丹參為良好的抗氧化劑，具有抑制星狀細(xì)胞的增殖與活化，促進(jìn)肝細(xì)胞的再生等作用[12-14]。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)（Network Pharmacology）是以系統(tǒng)生物學(xué)、藥理學(xué)和計(jì)算機(jī)技術(shù)為基礎(chǔ)，實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物作用的全面網(wǎng)絡(luò)分析，特別適合以多成分、多靶點(diǎn)、多機(jī)制為特點(diǎn)的中藥研究[15]。因此，本研究擬通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法提取丹參抗慢性肝炎潛在有效成分及其作用靶點(diǎn)，分析其作用機(jī)制，為丹參在慢性肝炎上臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料來源

本研究通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）http：//lsp.nwsuaf.edu.cn/tcmsp.php;GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)https：//www.genecards.org/;Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)http：//www.uniprot.org/;Pubchem數(shù)據(jù)庫(kù)https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/;Pharm Mapper數(shù)據(jù)庫(kù)http：//www.lilab-ecust.cn/pharmmapper/submitfile.html;Cytoscape（3.7.2）軟件http：//cytoscapeweb.cytoscape.org/;DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)https：//david.ncifcrf.gov/;String數(shù)據(jù)庫(kù)平臺(tái)https：//string-db.org/cgi/input.pl獲取相關(guān)資料[16]。

1.2 丹參活性成分篩選及其靶點(diǎn)的獲取

在TCMSP中預(yù)測(cè)丹參中化學(xué)成分的吸收、分布、代謝。本研究共收集了丹參中的202個(gè)化合物，并通過口服生物利用度（OB）、類藥性（DL）和藥物藥代動(dòng)力學(xué)篩選高活性化合物，其中，OB是指藥物口服后被人體吸收進(jìn)入血液循環(huán)的相對(duì)數(shù)量和速率;DL反映了化合物中特定官能團(tuán)與已知藥物的相似性，對(duì)評(píng)價(jià)中藥化學(xué)成分的活性具有重要意義。查閱文獻(xiàn)，取OB≥30%，DL≥0.18作為域值篩選高活性區(qū)的關(guān)鍵化合物[17]。

1.3 丹參有效成分靶點(diǎn)規(guī)范化

因丹參有效成分靶點(diǎn)來源不統(tǒng)一引起丹參靶點(diǎn)名稱不規(guī)范，因此需要對(duì)篩選得到的靶蛋白和基因信息進(jìn)行校正。將所獲得的靶點(diǎn)在Uniport數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行搜索，將物種設(shè)置為人，獲得靶點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)的Uniport名稱。

1.4 疾病靶點(diǎn)的獲取與交集靶點(diǎn)的篩選

在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)輸入關(guān)鍵詞Chronic hepatitis獲得慢性肝炎的蛋白靶點(diǎn)基因并與1.1篩選出的藥物靶點(diǎn)進(jìn)行韋恩分析，獲取交集靶點(diǎn)。

1.5 中藥-疾病-靶點(diǎn)交互網(wǎng)路建立

本研究將丹參和慢性肝炎的共同靶點(diǎn)與丹參中關(guān)鍵化合物使用Cytoscape3.7.2軟件進(jìn)行繪制網(wǎng)絡(luò)圖，以闡明丹參治療慢性肝炎的機(jī)制。在這個(gè)網(wǎng)絡(luò)圖中，關(guān)鍵化合物和靶點(diǎn)以節(jié)點(diǎn)表示，節(jié)點(diǎn)之間相互作用的關(guān)系以邊來表示。

1.6 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

考慮到靶標(biāo)之間的相互作用，我們將89個(gè)靶標(biāo)基因引入String數(shù)據(jù)庫(kù)平臺(tái)，得到PPI關(guān)系，并以“>0.9”的評(píng)分篩選PPI關(guān)系，隱藏離散點(diǎn)。下載PP網(wǎng)絡(luò)圖，篩選前30個(gè)核心基因。

1.7 基因本體（GO）富集分析

將藥物疾病共有靶點(diǎn)進(jìn)行GO的生物過程（Biological Process，BP）、細(xì)胞組分（Cell Component，CC）、分子功能（Molecular Function，MF）富集[18]，引用String數(shù)據(jù)庫(kù)，將校正P值≤0.05的項(xiàng)目進(jìn)行篩選。使用R 3.6.3軟件，安裝并引用clusterProfiler、enrichplot、ggplot2包，進(jìn)行柱狀圖和氣泡圖繪制。

1.8 京都基因和基因組百科全書（KEGG）富集分析

將藥物疾病共有靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路富集分析，引用String數(shù)據(jù)庫(kù)，將校正P值≤0.05的項(xiàng)目進(jìn)行篩選。使用R 3.6.3，安裝并引用clusterProfiler包后，進(jìn)行柱狀圖和氣泡圖繪制。

2 結(jié)果

2.1 藥物化學(xué)成分及藥物靶點(diǎn)篩選

利用TCMSP篩選丹參中的202種已知成分，通過OB≥30%和DL≥0.18篩選出丹參中65種高活性關(guān)鍵化合物，包括丹參酮、紫杉醇、丹參醛、丹酚等。見表1。其中65種有效成分對(duì)應(yīng)935相關(guān)靶點(diǎn)，有680個(gè)有效相關(guān)靶蛋白和109個(gè)靶基因。

2.2 疾病靶點(diǎn)

查詢丹參中以上65個(gè)化合物的靶標(biāo)信息，并通過Uniprot基因ID注釋獲取丹參的基因ID，在Genecard數(shù)據(jù)庫(kù)中找到慢性肝炎相關(guān)靶點(diǎn)共8 046個(gè)，與丹參共有靶點(diǎn)89個(gè)。見表2。并用R3.6.3繪制維恩圖。見圖1。

2.3 活性成分-潛在靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖

網(wǎng)絡(luò)共涉及節(jié)點(diǎn)（Nodes）114個(gè)，其中紅色為疾病，即慢性肝炎，藍(lán)色部分為丹參高活性成分，紫色為丹參，黃色為疾病的預(yù)測(cè)靶點(diǎn)，邊線表示化合物、靶點(diǎn)、藥物、疾病之間存在相關(guān)性。通過插件cytoNCA按照度（Degree）、緊密度（Closeness）2種屬性分別取排序靠前的成分或者靶點(diǎn)。成分有異隱丹參酮（Isocryptotanshi-none）、1，2，5，6-tetrahydrotanshinone、丹參醌新酮Ⅰ（MiltiononeⅠ）、二氫丹參內(nèi)酯（Dihydrotanshinlactone）、4-methylenemiltirone、丹參酮Ⅱa（TanshinoneⅡa）、木犀草素等，靶點(diǎn)有ADRB2、OPRM1、PTGS1、CA2、PTGS2。見圖2。

2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將潛在治療靶點(diǎn)基因?qū)隨TRING數(shù)據(jù)庫(kù)，物種選擇人類，篩選評(píng)分>0.9的蛋白質(zhì)相互作用關(guān)系，構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)。見圖3。其中藍(lán)線代表基因共同進(jìn)化的證據(jù)，紅線代表基因融合的證據(jù)，黃線代表文本挖掘的證據(jù)。完成PPI網(wǎng)絡(luò)。見圖4。該網(wǎng)絡(luò)包含263條邊，59個(gè)節(jié)點(diǎn)。其中，評(píng)分≥0.99的PPI蛋白為CDKN1A-CCND1、AKT1-NOS3、TP53-MDM2、NCOA2-AR、CDKN1A-CCNA2、CDKN1A-PCNA、AKT1-GSK3B、JUN-FOS、CDKN1A-TP53、EDN1-EDNRA、NCOA2-NR3C1、CCNA2-CCNB1、PTPN1-INSR、EGFR-STAT3、IL10-IL6、RXRA-NCOA2、IL10-TNF、IL6-STAT3、MYC-CDKN1A、IL6-IL4、AKT1-CDKN1A、ESR1-NCOA2、JUN-MAPK14、IL10-STAT3、VEGFA-STAT3、AKT1-STAT3、AKT1-CASP9、AKT1-TP53、VEGFA-NOS3、STAT3-CCND1、CDKN1A-CCNB1、TNF-NFKBIA、TNF-IL4、MYC-JUN、MYC-AKT1、JUN-TP53、AKT1-MDM2、AKT1-ESR1、CCNA2-TP53、ESR1-CCND1、GSK3B-CCND1、TP53-MAPK14、MYC-STAT3。RBl-CCNDl;ESR1-CCNDl;USK3B-CCNDl。通過計(jì)算每個(gè)基因節(jié)點(diǎn)數(shù)的連接，找到前30個(gè)核心PPI。見圖4。即：STAT3、JUN、AKT1、TNF、TP53、MAPK14、CCND1、CDKN1A、IL6、MYC、EDN1、ESR1、FOS、VEGFA、IL2、IL4、GSK3B、CASP3、EGFR、IL10、NR3C1、CCNA2、ERBB2、MMP9、NCOA2、NFKBIA、NOS2、NOS3、、PTPN1、AR。見圖4。

2.5 GO富集分析結(jié)果

將藥疾病共有靶點(diǎn)進(jìn)行GO的生物過程（BP）、細(xì)胞組分（CC）富集、分子功能（MF），引用String數(shù)據(jù)庫(kù)，將校正P≤0.05的項(xiàng)目進(jìn)行篩選，總共富集到1 796條生物過程，130項(xiàng)與分子功能相關(guān)，73項(xiàng)與細(xì)胞組成相關(guān)，結(jié)果可視化繪制柱狀圖和氣泡圖。見圖5。

2.6 KEGG通路富集

將藥物疾病共有靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路富集分析，引用String數(shù)據(jù)庫(kù)，將校正P值≤0.05的項(xiàng)目進(jìn)行篩選，總共富集到88條信號(hào)通路，根據(jù)P值由小到大篩選排名前20的通路繪制柱狀圖和氣泡圖。見圖6。經(jīng)分析的得到乙型肝炎、IL-17信號(hào)通路、丙型肝炎、HIF-1信號(hào)通路、內(nèi)分泌的阻力、T細(xì)胞受體信號(hào)通路、PI3K/AKT信號(hào)通路，這7條信號(hào)通路是治療慢性肝炎的主要通路。

3 討論

近年來越來越多的研究表明，治療慢性肝炎的關(guān)鍵在如何消除肝臟炎癥，肝臟纖維化。丹參可使肝細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體具有顯著的恢復(fù)和更新作用，顯著增加肝細(xì)胞DNA和RNA含量，有利于肝細(xì)胞的修復(fù)和再生，從而抑制細(xì)胞內(nèi)膠原的合成和肝纖維化?，F(xiàn)已從丹參中分離得到丹參酮llA、丹參酮I、丹參酮、隱式丹參酮等脂溶性成分;丹酚酸等水溶性成分;木犀草素等黃酮類成分共100余種。本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，首先通過OB和DL篩選丹參的有效成分，通過與慢性肝炎相關(guān)的有效成分靶區(qū)預(yù)測(cè)丹參治療慢性肝炎的有效成分。最終分析活性成分與疾病是受生物過程影響并參與信號(hào)通路的共同靶點(diǎn)。從信號(hào)通路的角度探討丹參治療慢性肝炎的可能機(jī)制。

通過PPI篩選發(fā)現(xiàn)STAT3、JUN、AKT1、TNF，TP53、MAPK14、CCND1、CDKN1A、IL6、MYC等是丹參治療慢性肝炎的關(guān)鍵靶點(diǎn)。STAT3作為STAT家族的主要成員之一，是介導(dǎo)細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的經(jīng)典轉(zhuǎn)錄因子，最初被發(fā)現(xiàn)是作為對(duì)IL-6等炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生應(yīng)答的關(guān)鍵胞內(nèi)分子。正常情況下存在于細(xì)胞質(zhì)中，被磷酸化Tyr705激活后調(diào)控基因的表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)STAT3介導(dǎo)分化、凋亡、免疫和炎癥反應(yīng)在內(nèi)的多等種生物學(xué)過程，STAT3可與核因子κB交互作用，有助于核因子κB活化，上調(diào)多種炎癥介質(zhì)，而活化的核因子κB可產(chǎn)生白細(xì)胞介素-6（Interleukin 6，IL-6），進(jìn)一步激活STAT3，上述正反饋過程，促進(jìn)炎癥發(fā)生發(fā)展。肝炎病毒感染可誘導(dǎo)肝細(xì)胞合成大量TNF，TNF也可誘導(dǎo)體內(nèi)產(chǎn)生IL-6，二者關(guān)系密切。因此在肝組織中可以發(fā)現(xiàn)大量的炎癥介質(zhì)。這些炎癥介質(zhì)參與肝臟促炎癥反應(yīng)，肝細(xì)胞損傷，多種肝細(xì)胞分化和增殖，從而導(dǎo)致永久肝臟慢性炎癥，并導(dǎo)致纖維化的形成。JUN是JNK的下游產(chǎn)物，當(dāng)JNK被活化后，JUN磷酸化，JUN的激活依賴于轉(zhuǎn)錄的凋亡信號(hào)通路，肝細(xì)胞凋亡是導(dǎo)致肝損傷的一個(gè)重要機(jī)制，促進(jìn)肝臟炎癥及纖維化的發(fā)展，抑制JUN磷酸化可抑制細(xì)胞的凋亡與自噬，抑制肝臟炎癥及纖維化的發(fā)展。MAPK14是絲裂原活化蛋白激酶14，可介導(dǎo)多種炎癥介質(zhì)的激活如TNF、IL-6等，促進(jìn)肝細(xì)胞炎癥的產(chǎn)生;同時(shí)MAPK14可磷酸化P53，是細(xì)胞周期阻滯在G1、G2期，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，促進(jìn)肝臟炎癥的發(fā)展。TP5是細(xì)胞腫瘤抗原，通過調(diào)控DNA修復(fù)基因的轉(zhuǎn)錄等相關(guān)通路，達(dá)到抗炎、抗病毒、增強(qiáng)免疫力的作用。AKT1（蛋白激酶），在調(diào)控細(xì)胞成活和凋亡中有重要作用，激活A(yù)KT1可保護(hù)肝細(xì)胞，抑制肝臟受損。

依據(jù)GO富集分析結(jié)果可知，BP主要涉及活性氧代謝過程、循環(huán)系統(tǒng)血管功能、氧化應(yīng)激反應(yīng)、凋亡等。肝細(xì)胞凋亡是導(dǎo)致慢性肝炎的重要機(jī)制之一，丹參通過調(diào)控肝細(xì)胞凋亡過程，減輕肝損傷，抑制肝臟炎癥的發(fā)展。乙醇代謝過程中產(chǎn)生的大量活性氧，氧自由基的毒性反應(yīng)使人體發(fā)生氧化應(yīng)激，是酒精性肝病發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵機(jī)制之一，丹參通過參與調(diào)控活性氧代謝過程和氧化應(yīng)激反應(yīng)，治療慢性酒精性肝炎，調(diào)控涉及CCNA2、CCKN1、JUN等。肝內(nèi)血管的炎癥、破壞、阻塞及增生病變，引起肝供血障礙，這貫穿慢性肝炎發(fā)展的整個(gè)階段。丹參通過調(diào)控循環(huán)系統(tǒng)血管功能，促進(jìn)肝臟內(nèi)皮細(xì)胞增殖、提高血管通透性從而達(dá)到治療慢性肝炎的目的，調(diào)控涉及EGFR、AKT1、VEGFA等。

依據(jù)KEGG富集分析結(jié)果可知，在治療過程中相關(guān)度較高的通路有乙型肝炎、IL-17信號(hào)通路、丙型肝炎、HIF-1信號(hào)通路、內(nèi)分泌的阻力、T細(xì)胞受體信號(hào)通路、PI3K/AKT信號(hào)通路等。PI3K/AKT信號(hào)通路為生物體內(nèi)重要的生存信號(hào)通路。在PI3K/AKT信號(hào)通路中，可介導(dǎo)AKT的活化，活化的AKT可促進(jìn)肝損傷細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)慢性肝炎的發(fā)展，丹參可通過抑制PI3K/AKT信號(hào)通路，抑制AKT的活化，降低肝細(xì)胞損傷、氧化應(yīng)激及凋亡，減輕肝炎癥的發(fā)生。IL-17參與肝細(xì)胞損傷和炎癥的發(fā)病機(jī)制，IL-17具有強(qiáng)的中性粒細(xì)胞募集和活化，可誘導(dǎo)T細(xì)胞活化，刺激成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞生成IL-1、IL-6等多種炎癥介質(zhì)和化學(xué)激活素從而誘導(dǎo)炎癥，丹參可直接介導(dǎo)IL-17信號(hào)通路，減輕其活性從而控制炎癥的擴(kuò)大化。T細(xì)胞受體（TCR）在T細(xì)胞的功能和免疫突觸的形成中起著關(guān)鍵作用。它在T細(xì)胞和抗原呈遞細(xì)胞（APC）之間提供連接。激活T淋巴細(xì)胞是免疫系統(tǒng)有效反應(yīng)的關(guān)鍵事件。TCR的激活受多種共刺激受體調(diào)控。丹參激活TCRT通路，通過免疫反應(yīng)直接殺死乙型肝炎和丙型肝炎病毒，抑制慢性乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒的發(fā)展。缺氧誘導(dǎo)因子1（HIF-1）是調(diào)節(jié)氧穩(wěn)態(tài)的主要因子，HIF-1的靶基因編碼增加氧氣輸送的蛋白質(zhì)，并介導(dǎo)對(duì)缺氧的適應(yīng)性反應(yīng)。HIF-1不僅是由于氧利用率降低而引起的，而且是由其他刺激物（如一氧化氮）或各種生長(zhǎng)因子引起的，丹參介導(dǎo)HIF-1信號(hào)通路，通過調(diào)控一系列缺氧相關(guān)基因的表達(dá)，增強(qiáng)肝細(xì)胞在低氧環(huán)境下的代謝適應(yīng)能力，并參與肝病惡性轉(zhuǎn)化的生物過程。

綜上所述，丹參治療慢性肝炎的作用機(jī)制可能是其有效成分通過STAT3、、JUN、AKT1、TNF，TP53、MAPK14、CCND1、CDKN1A、IL6、MYC等關(guān)鍵蛋白介導(dǎo)乙型肝炎、IL-17信號(hào)通路、丙型肝炎、HIF-1信號(hào)通路、內(nèi)分泌的阻力、TCR信號(hào)通路、PI3K/AKT信號(hào)通路等協(xié)作產(chǎn)生凋亡、免疫殺傷、抑制炎癥產(chǎn)生等直接作用以及增加肝細(xì)胞的低氧代謝能力來防治慢性肝炎。本研究揭示了丹參治療慢性肝炎是多成分，多靶點(diǎn)，多生物過程的，體現(xiàn)了中醫(yī)藥治病的整體理念，為后期的臨床應(yīng)用奠定了理論基礎(chǔ)。但網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)尚存在局限性，有待后期更多的基礎(chǔ)及臨床實(shí)驗(yàn)的進(jìn)一步證實(shí)。

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（2020-05-20收稿 責(zé)任編輯：楊覺雄）