毛大丁草化學(xué)成分的研究

趙晨旭， 高 哈， 孫彥君， 黃云峰， 張 濤， 鄒忠梅

(1.河南中醫(yī)藥大學(xué)，河南 鄭州 450046；2.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院&北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，藥用植物研究所，北京 100193；3.廣西中醫(yī)藥研究院中藥資源研究所，廣西 南寧 530022)

毛大丁草GerberapiloselloidesCass.為菊科大丁草屬植物，該屬植物在全球約80種，主要分布在非洲，次為亞洲東部[1]，我國約有20種，主要分布于云南、西藏、廣西等省區(qū)。毛大丁草是傣族、白族、彝族等14個(gè)民族的常用藥，具有宣肺止咳、發(fā)汗利水、行氣活血的功效，主治傷風(fēng)咳嗽、腹水脹痛、跌打損傷等癥[2-3]，同時(shí)它是多種驗(yàn)方和民族藥配方(如“骨癆湯”“吉貝咳喘湯”等)的重要組成[4]。此外，壯族、侗族等將該植物作為香料，用以烹制肉類；苗族、水族將毛大丁草研磨與三叉苦根莖混合使用制作酒曲，用以發(fā)酵釀酒，以此提升酒的味道[5]。國內(nèi)外對(duì)毛大丁草的化學(xué)成分研究的報(bào)道表明其主要含有香豆素類、萜類、黃酮類、甾醇類等，但已有成分研究多側(cè)重于揮發(fā)油類成分的GC-MS分析[6]，現(xiàn)代藥理研究表明該植物具有抗腫瘤、血管舒張、抗氧化、鎮(zhèn)咳祛痰、提高免疫等多種活性[7-9]。但總體來看目前對(duì)其化學(xué)成分的研究較少，為豐富該植物中化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)類型，進(jìn)一步明確其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，指導(dǎo)臨床應(yīng)用，本實(shí)驗(yàn)對(duì)毛大丁草95%乙醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究，從其石油醚萃取部位分離得到12個(gè)化合物，其中化合物1～4均為光學(xué)對(duì)映異構(gòu)體組成的外消旋體，化合物5～8為首次從大丁草屬植物中分離得到，化合物9～12為首次從該植物中分離得到，首次報(bào)道了化合物1的單晶數(shù)據(jù)。

1 材料

UV2501紫外分光光度儀(日本Shimadzu公司)；Bio-Rad FTS-65A紅外光譜儀(美國Bio-Rad公司)；Bruker AM 600型核磁共振儀(瑞士Bruker公司)；LTQ Orbitrap XL Mass(美國Thermo公司)；Waters 2535型semi-PHPLC(配置2489型UV檢測(cè)器)(美國Waters公司)；YMC-Pack ODS-A色譜柱、YMC-Pack ODS-A色譜柱(10 mm× 250 mm，5 μm，日本YMC公司)；Chiralpak?IBN-5手性柱(4.6 mm× 250 mm，5 μm，日本Daicel corporation公司)；Buchi Heating Both Ⅱ490型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士Buchi公司)；柱色譜用硅膠(60～80目、100～200目、200～300目)、薄層色譜用硅膠GF254(青島海洋化工廠)；Sephadex LH-20(瑞典GE Healthcare公司)；真空隔膜泵(德國ILMVAC公司)；SHB-B型循環(huán)水式真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)；JY02S型紫外分析儀(北京君意設(shè)備有限公司)。色譜甲醇、乙腈(美國Thermo Fisher公司)；常規(guī)用試劑均為分析純(北京化工廠)。

毛大丁草于2019年11月采自廣西省玉林市，經(jīng)廣西中醫(yī)藥研究院中藥資源研究所黃云峰研究員鑒定為菊科大丁草屬植物毛大丁草GerberapiloselloidesCass.干燥全草。標(biāo)本(SCI-NCL006379-1)現(xiàn)存于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所國家中藥化合物庫。

2 提取與分離

毛大丁草全草30 kg，粉碎后用95%乙醇加熱回流提取2次，每次2 h，合并提取液，減壓濃縮得95%乙醇總浸膏2.1 kg，分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水進(jìn)行萃取，得到石油醚部位Fr.A(171 g)、乙酸乙酯部位Fr.B(1 067 g)、正丁醇部位Fr.C(287 g)、水部位Fr.D(343 g)。

取石油醚部位Fr.A(171 g)進(jìn)行硅膠柱分離，以石油醚-二氯甲烷(100∶0～0∶100)梯度洗脫，通過TLC合并相似成分得到Fr.A1(63 g)、Fr.A2(45 g)、Fr.A3(28 g)共3個(gè)流分。Fr.A3(28 g)經(jīng)硅膠柱，以石油醚-二氯甲烷(10∶0～0∶10)梯度洗脫，通過TLC合并得到Fr.A3.1(2.6 g)、Fr.A3.2(1.6 g)、Fr.A3.3(2.4 g)、Fr.A3.4(1.4 g)、Fr.A3.5(12 g)共5個(gè)亞組分。Fr.A3.1經(jīng)Sephadex LH-20 CH3OH-CH2Cl2(3∶7)洗脫，經(jīng)重結(jié)晶得化合物5(200 mg)、8(51 mg)；Fr.A3.2重結(jié)晶得化合物12(150 mg)；Fr.A3.3經(jīng)Sephadex LH-20 CH3OH-CH2Cl2(1∶1)洗脫，重結(jié)晶得化合物6(83 mg)、7(300 mg)；Fr.A3.4經(jīng)HPLC制備(85%甲醇)得到Fr.A3.4.1～A3.4.5共5個(gè)組分，F(xiàn)r.A3.4.3(300 mg)在二氯甲烷-甲醇(1∶1)的溶劑中析出晶體，得化合物4(120 mg)，經(jīng)手性柱正己烷-異丙醇(90∶10)分析可得到一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體4a/4b；Fr.A3.4.4(220 mg)經(jīng)HPLC制備(70%乙腈)及重結(jié)晶純化得化合物2(45 mg)；經(jīng)手性柱正己烷-異丙醇(80∶20)分析可得到一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體2a/2b；Fr.A3.4.5(60 mg)通過HPLC半制備(70%乙腈)分離純化得化合物3(3 mg)，經(jīng)手性柱正己烷-異丙醇(85∶15)分析可得到一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體3a/3b。Fr.A3.5(12 g)經(jīng)硅膠柱以石油醚-乙酸乙酯系統(tǒng)(100∶0～1∶1)洗脫，經(jīng)TLC合并得到Fr.A3.5.1～A3.5.9，F(xiàn)r.A3.5.1(300 mg)經(jīng)HPLC半制備(70%乙腈)及重結(jié)晶得化合物1(10 mg)，經(jīng)手性柱正己烷-異丙醇(90∶10)分析可得到一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體1a/1b；Fr.A3.5.4(600 mg)經(jīng)HPLC制備(85%甲醇)及 HPLC半制備(77%乙腈)分離純化得化合物9(33 mg)；Fr.A3.5.5(400 mg)經(jīng)HPLC半制備(65%乙腈)分離純化得化合物10(7 mg)、11(12 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色方晶(二氯甲烷-甲醇)。HR-ESI-MSm/z：311.163 2[M + H]+(理論值311.164 7)，提示化合物分子式C20H22O3。1H-NMR(500 MHz，Chloroform-d)δ：7.00(1H，d，J=7.4 Hz，H-6)，7.31(1H，dd，J=8.2，7.4 Hz，H-7)，7.16(1H，d，J=8.2 Hz，H-8)，3.03(1H，d，J=9.5 Hz，H-9)，2.66(1H，dd，J=9.5，7.5 Hz，H-10)，1.82(1H，m，H-12a)，2.06(1H，m，H-12b)，1.64(1H，m，H-13a)，1.77(1H，m，H-13b)，2.45(1H，t，J=7.5 Hz，H-14)，2.71(3H，s，16-CH3)，1.52(3H，s，17-CH3)，1.42(3H，s，18-CH3)，0.88(3H，s，19-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：163.2(C-2)，103.3(C-3)，161.6(C-4)，115.2(C-4a)，136.8(C-5)，127.4(C-6)，130.5(C-7)，115.2(C-8)，154.0(C-8a)，36.3(C-9)，37.7(C-10)，86.6(C-11)，39.7(C-12)，26.1(C-13)，47.0(C-14)，39.6(C-15)，23.7(C-16)，27.5(C-17)，33.9(C-18)，17.7(C-19)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道基本一致，對(duì)化合物1進(jìn)行旋光測(cè)定，其值接近于0，表明化合物1為外消旋體，用手性柱對(duì)其分析，得到一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體(1a/1b)，比例為1∶1，故鑒定為gerbeloid 11a/11b。盡管gerbeloid 11a和11b的相對(duì)構(gòu)型和絕對(duì)構(gòu)型已通過NOESY和圓二色譜(CD)確定，但單晶數(shù)據(jù)未有報(bào)道。本文首次報(bào)道其混晶數(shù)據(jù)。

所獲晶體為斜方晶(0.29 mm×0.25 mm×0.23 mm)，培養(yǎng)溶劑為二氯甲烷-甲醇(1∶1)，晶體數(shù)據(jù)為C20H22O3，M=310.38，T=111.4 K，空間群是P-1，晶胞參數(shù)a=9.330 4(5)?，b=9.822 3(6)?，c=9.846 4(5)?，α=107.981(5)°，β=106.435(5)°，γ=101.815(5)°，V=779.90(7)?3，Z=2，ρ=1.322 mg/mm3，μ(Cu Kα)=0.699 mm-1；最終一致因子[I>2σ(I)]：R1=0.044 3，和wR2=0.123 8；一致性因子R1=0.046 5，wR2=0.126 0；Flack參數(shù)為N。最后，單晶數(shù)據(jù)提交保存至Cambridge Crystallo-graphic Data Centre(CCDC)數(shù)據(jù)庫，CCDC號(hào)為2071358。

圖1 化合物1的X衍射線晶體結(jié)構(gòu)

化合物2：黃色油狀。HR-ESI-MSm/z：311.163 4[M + H]+(理論值311.164 7)，提示化合物分子式C20H22O3。1H-NMR(600 MHz，Chloroform-d)δ：6.97(1H，d，J=7.5 Hz，H-6)，7.29(1H，dd，J=8.3，7.5 Hz，H-7)，7.08(1H，d，J=8.3 Hz，H-8)，3.48(1H，dd，J=6.0，4.8 Hz，H-9)，6.31(1H，dq，J=4.8，1.2 Hz，H-10)，1.89(1H，m，H-12a)，1.94(1H，m，H-12b)，1.35(1H，m，H-13a)，1.87(1H，m，H-13b)，1.71(1H，ddd，J=12.0，6.0，3.0 Hz，H-14)，2.79(3H，s，16-CH3)，1.63(3H，s，17-CH3)，1.45(3H，s，18-CH3)，1.35(3H，s，19-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：160.4(C-2)，99.2(C-3)，180.4(C-4)，121.4(C-4a)，140.4(C-5)，127.5(C-6)，131.3(C-7)，115.0(C-8)，154.3(C-8a)，30.2(C-9)，120.7(C-10)，134.1(C-11)，29.6(C-12)，20.2(C-13)，40.1(C-14)，83.2(C-15)，22.5(C-16)，23.4(C-17)，25.4(C-18)，25.1(C-19)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道基本一致，對(duì)化合物2進(jìn)行旋光測(cè)定，其值接近于0，表明化合物2為外消旋體，用手性柱對(duì)其分析，得到一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體(2a/2b)，比例為1∶1，故鑒定為gerbeloid 5a/5b。

化合物3：黃色油狀。HR-ESI-MSm/z：311.163 5[M + H]+(理論值311.164 7)，提示化合物分子式C20H22O3。1H-NMR(600 MHz，Chloroform-d)δ：6.97(1H，d，J=7.5 Hz，H-6)，7.29(1H，dd，J=8.3，7.5 Hz，H-7)，7.12(1H，d，J=8.3 Hz，H-8)，3.45(1H，t，J=6.0 Hz，H-9)，6.28(1H，dq，J=6.0，1.2 Hz，H-10)，1.96(1H，m，H-12a)，2.02(1H，m，H-12b)，1.37(1H，m，H-13a)，1.94(1H，m，H-13b)，1.81(1H，ddd，J=12.0，6.0，3.0 Hz，H-14)，2.66(3H，s，16-CH3)，1.69(3H，s，17-CH3)，1.55(3H，s，18-CH3)，1.38(3H，s，19-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：162.2(C-2)，103.3(C-3)，160.6(C-4)，115.1(C-4a)，136.7(C-5)，127.3(C-6)，130.4(C-7)，114.9(C-8)，153.8(C-8a)，30.9(C-9)，120.5(C-10)，135.1(C-11)，29.9(C-12)，20.5(C-13)，39.5(C-14)，80.4(C-15)，23.6(C-16)，23.6(C-17)，25.9(C-18)，25.3(C-19)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[10]基本一致，對(duì)化合物3進(jìn)行旋光測(cè)定，其值接近于0，表明化合物3為外消旋體，用手性柱對(duì)其分析，得到一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體(3a/3b)，比例為1∶1，故鑒定為gerbeloid 6a/6b。

化合物4：黃色油狀。HR-ESI-MSm/z：311.163 2[M + H]+(理論值311.164 7)，提示化合物分子式C20H22O3。1H-NMR(600 MHz，Chloroform-d)δ：7.05(1H，d，J=7.5 Hz，H-6)，7.36(1H，t，J=8.3，7.5 Hz，H-7)，7.15(1H，d，J=8.3 Hz，H-8)，3.23(1H，dd，J=10.8，7.2 Hz，H-9)，6.34(1H，dq，J=7.2，1.8 Hz，H-10)，2.17(2H，m，H-12)，1.45(1H，m，H-13a)，1.86(1H，m，H-13b)，1.71(1H，ddd，J=12.6，10.8，2.4 Hz，H-14)，2.86(3H，s，16-CH3)，1.68(3H，s，17-CH3)，1.53(3H，s，18-CH3)，1.25(3H，s，19-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：162.0(C-2)，98.6(C-3)，180.1(C-4)，121.7(C-4a)，140.7(C-5)，127.7(C-6)，131.4(C-7)，115.1(C-8)，154.6(C-8a)，32.7(C-9)，122.2(C-10)，133.6(C-11)，31.4(C-12)，24.5(C-13)，45.9(C-14)，85.1(C-15)，22.7(C-16)，23.2(C-17)，27.0(C-18)，20.1(C-19)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道基本一致，對(duì)化合物4進(jìn)行旋光測(cè)定，其值接近于0，表明化合物4為外消旋體，用手性柱對(duì)其分析，得到一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體(4a/4b)，比例為1∶1，故鑒定為gerbeloid 7a/7b。

化合物5：白色針晶(二氯甲烷-甲醇)。1H-NMR(600 MHz，Chloroform-d)δ：0.88(3H，d，J=7.3 Hz，23-CH3)，0.73(3H，s，24-CH3)，0.87(3H，s，25-CH3)，1.01(3H，s，26-CH3)，1.05(3H，s，27-CH3)，1.18(3H，s，28-CH3)，1.00(3H，s，29-CH3)，0.95(3H，s，30-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：22.3(C-1)，41.5(C-2)，29.7(C-3)，58.2(C-4)，42.1(C-5)，41.3(C-6)，18.2(C-7)，53.1(C-8)，37.4(C-9)，59.4(C-10)，35.6(C-11)，30.5(C-12)，39.7(C-13)，38.3(C-14)，32.7(C-15)，36.0(C-16)，30.0(C-17)，42.8(C-18)，35.3(C-19)，28.2(C-20)，32.4(C-21)，39.2(C-22)，6.8(C-23)，14.6(C-24)，17.9(C-25)，20.2(C-26)，18.6(C-27)，32.1(C-28)，31.8(C-29)，35.0(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道基本一致，故鑒定為木栓烷。

化合物6：白色針晶(二氯甲烷-甲醇)。1H-NMR(600 MHz，Chloroform-d)δ：4.48(1H，dd，J=11.0，5.3 Hz，H-3)，2.05(3H，s，-CH3CO)，0.85(6H，s，23，28-CH3)，0.83(6H，s，24，28-CH3)，1.03(3H，s，27-CH3)，0.97(3H，d，J=6.8 Hz，29-CH3)，0.91(3H，d，J=6.8 Hz，30-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：38.6(C-1)，23.8(C-2)，81.1(C-3)，37.9(C-4)，55.5(C-5)，18.4(C-6)，33.5(C-7)，41.8(C-8)，50.9(C-9)，37.2(C-10)，21.5(C-11)，24.1(C-12)，49.4(C-13)，42.1(C-14)，31.9(C-15)，20.2(C-16)，140.0(C-17)，49.9(C-18)，41.8(C-19)，27.6(C-20)，136.2(C-21)，26.5(C-22)，28.1(C-23)，16.5(C-24)，16.4(C-25)，18.4(C-26)，15.0(C-27)，19.2(C-28)，21.4(C-29)，22.1(C-30)，21.2(CH3CO-)，171.2(CH3CO-)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道基本一致，故鑒定為hop-17(21)-en-3β-yl acetate。

化合物7：白色針晶(二氯甲烷-甲醇)。1H-NMR(600 MHz，Chloroform-d)δ：4.68(1H，d，J=2.0 Hz，H-29a)，4.61(1H，d，J=2.0 Hz，H-29b)，3.21(1H，dd，J=11.5，4.8 Hz，H-3)，1.68(3H，s，30-CH3)，1.02(3H，s，26-CH3)，0.97(3H，s，23-CH3)，0.94(3H，s，27-CH3)，0.82(3H，s，25-CH3)，0.79(3H，s，28-CH3)，0.72(3H，s，24-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：38.9(C-1)，29.9(C-2)，79.2(C-3)，39.0(C-4)，55.4(C-5)，18.5(C-6)，34.4(C-7)，41.0(C-8)，50.6(C-9)，37.3(C-10)，21.1(C-11)，25.3(C-12)，38.2(C-13)，43.0(C-14)，27.6(C-15)，35.7(C-16)，43.2(C-17)，48.4(C-18)，48.1(C-19)，151.1(C-20)，30.0(C-21)，40.2(C-22)，28.1(C-23)，15.5(C-24)，16.3(C-25)，16.1(C-26)，14.7(C-27)，18.2(C-28)，109.5(C-29)，19.5(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道基本一致，故鑒定為羽扇豆醇。

化合物8：白色粉末。1H-NMR(600 MHz，Chloroform-d)δ：2.32(2H，dd，J=7.6 Hz，H-2)，1.64(2H，m，H-3)，1.26(24H，brs)為一系列CH2質(zhì)子信號(hào)，0.88(3H，t，J=7.1 Hz，16-CH3)，8.56(1H，brs，-COOH)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：178.3(C-1)，41.0(C-2)，34.0(C-3)，32.1(C-4)，29.7(C-5)，29.7(C-6)，29.6(C-7)，29.6(C-8)，29.5(C-9)，29.4(C-10)，29.3(C-11)，29.2(C-12)，29.1(C-13)，24.9(C-14)，22.8(C-15)，14.3(C-16)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道基本一致，故鑒定為十六烷酸。

化合物9：黃色油狀。HR-ESI-MSm/z：311.163 9[M-H]-(理論值311.164 7)，提示化合物分子式C20H24O3。1H-NMR(600 MHz，Chloroform-d)δ：6.97(1H，d，J=7.5 Hz，H-6)，7.32(1H，t，J=8.3，7.5 Hz，H-7)，7.13(1H，d，J=8.3 Hz，H-8)，4.85(1H，q，J=6.6 Hz，H-9)，1.68(1H，m，H-11a)，1.88(1H，m，H-11b)，1.90(1H，m，H-12a)，2.00(1H，m，H-12b)，5.06(1H，t，J=6.6 Hz，H-13)，2.62(3H，s，15-CH3)，1.42(3H，d，J=6.6 Hz，16-CH3)，1.27(3H，s，17-CH3)，1.60(3H，s，18-CH3)，1.53(3H，s，19-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：166.6(C-2)，109.2(C-3)，160.1(C-4)，112.2(C-4a)，136.3(C-5)，126.1(C-6)，131.4(C-7)，114.7(C-8)，156.0(C-8a)，89.1(C-9)，46.3(C-10)，38.2(C-11)，23.5(C-12)，123.8(C-13)，131.8(C-14)，21.4(C-15)，15.9(C-16)，19.1(C-17)，25.7(C-18)，17.6(C-19)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道基本一致，故鑒定為cycloisobrachycoumarin。

化合物10：無色油狀。HR-ESI-MSm/z：285.184 7[M-H]-(理論值285.185 5)，提示化合物分子式C19H26O2。1H-NMR(500 MHz，Chloroform-d)δ：2.97(2H，t，J=7.0 Hz，H-3)，6.72(1H，d，J=7.5 Hz，H-6)，7.25(1H，dd，J=8.3，7.5 Hz，H-7)，6.82(1H，d，J=8.3 Hz，H-8)，11.59(1H，brs，8a-OH)，2.58(3H，s，9-CH3)，2.44(2H，q，J=7.0 Hz，H-1′)，5.13(1H，tq，J=7.0，1.1 Hz，H-2′)，1.97(2H，dd，J=8.0，5.0 Hz，H-4′)，2.06(2H，m，H-5′)，5.07(1H，tq，J=7.0，1.4 Hz，H-6′)，1.67(3H，s，8′-CH3)，1.59(3H，s，9′-CH3)，1.63(3H，s，10′-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：44.7(C-3)，208.8(C-4)，122.5(C-4a)，138.8(C-5)，122.5(C-6)，134.2(C-7)，116.5(C-8)，161.9(C-8a)，24.4(C-9)，23.5(C-1′)，123.3(C-2′)，136.9(C-3′)，39.8(C-4′)，26.7(C-5′)，124.3(C-6′)，131.6(C-7′)，25.8(C-8′)，17.8(C-9′)，16.2(C-10′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]報(bào)道基本一致，故鑒定為mutisiphenone A。

化合物11：黃色油狀。HR-ESI-MSm/z：285.185 0[M-H]-(理論值285.185 5)，提示化合物分子式C19H26O2。1H-NMR(500 MHz，Chloroform-d)δ：2.97(2H，dd，J=23.4，15.2 Hz，H-3)，6.71(1H，d，J=7.5 Hz，H-6)，7.21(1H，dd，J=8.3，7.5 Hz，H-7)，6.79(1H，d，J=8.3 Hz，H-8)，10.38(1H，brs，8a-OH)，2.52(3H，s，9-CH3)，4.96(2H，ddd，J=17.9，10.8，1.0 Hz，H-1′)，5.83(1H，dd，J=17.9，10.8 Hz，H-2′)，1.49(2H，m，H-4′)，1.89(2H，q，J=7.5 Hz，H-5′)，5.05(1H，tq，J=7.5，1.5 Hz，H-6′)，1.15(3H，s，8′-CH3)，1.65(3H，s，9′-CH3)，1.56(3H，s，10′-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：53.5(C-3)，208.6(C-4)，125.1(C-4a)，137.7(C-5)，123.2(C-6)，133.5(C-7)，116.0(C-8)，159.6(C-8a)，23.9(C-9)，112.1(C-1′)，145.9(C-2′)，41.0(C-3′)，41.1(C-4′)，23.0(C-5′)，124.5(C-6′)，131.7(C-7′)，23.5(C-8′)，25.8(C-9′)，17.7(C-10′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]報(bào)道基本一致，故鑒定為norbrachycourmarin。

化合物12：白色針晶(二氯甲烷-甲醇)。1H-NMR(600 MHz，Chloroform-d)δ：1.18(3H，s，28-CH3)，1.05(3H，s，27-CH3)，1.00(6H，s，26，29-CH3)，0.95(3H，s，23-CH3)，0.88(3H，s，30-CH3)，0.87(3H，s，25-CH3)，0.72(3H，s，24-CH3)；13C-NMR(150 MHz，Chloroform-d)δ：22.4(C-1)，41.7(C-2)，213.4(C-3)，58.3(C-4)，42.3(C-5)，41.4(C-6)，18.8(C-7)，53.2(C-8)，37.6(C-9)，59.6(C-10)，35.5(C-11)，28.3(C-12)，39.4(C-13)，38.4(C-14)，30.6(C-15)，36.1(C-16)，32.5(C-17)，42.9(C-18)，35.7(C-19)，30.1(C-20)，32.9(C-21)，39.8(C-22)，14.8(C-23)，7.0(C-24)，18.4(C-25)，18.1(C-26)，20.4(C-27)，31.9(C-28)，35.2(C-29)，32.2(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]報(bào)道基本一致，故鑒定為木栓酮。

4 討論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)毛大丁草全草的石油醚部位進(jìn)行分離鑒定，得到12個(gè)化合物，其中，4個(gè)化合物為首次從該植物中分離得到，化合物9～12為首次從該植物中分離得到。香豆素類為大丁草屬植物的特征性成分，該類化合物具有良好的抗癌、抗菌、降糖、抗氧化、抗病毒、抗HIV等藥理活性[18]?；衔?～4顯示有降糖的活性，可能與α-葡萄糖苷酶和PTP1B的抑制活性相關(guān)[10]。此外，推測(cè)毛大丁草石油醚部位可能含有較多如1～4類型香豆素類化合物，均為一對(duì)光學(xué)異構(gòu)體組成的外消旋體，需用相關(guān)手性柱做進(jìn)一步的手性拆分，以確定其絕對(duì)構(gòu)型。鑒于其化學(xué)成分的復(fù)雜性和藥理活性的多樣性，需要做深入的植物化學(xué)研究，以期發(fā)現(xiàn)更多結(jié)構(gòu)新穎的化合物，為后續(xù)展開相關(guān)生物活性研究提供物質(zhì)基礎(chǔ)，也為該植物資源的開發(fā)利用提供重要的科學(xué)依據(jù)。