飼糧能量水平對(duì)白薩?？恕梁騀1羔羊生產(chǎn)性能和脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

張小強(qiáng)，趙雷云，黃曉瑜，楊 晨，田林濤，李 博，張恩平

(西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

羊肉具有高蛋白、低脂肪和低膽固醇等優(yōu)點(diǎn)，隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展和人民追求健康飲食理念的加強(qiáng)，優(yōu)質(zhì)羔羊肉深受市場(chǎng)青睞。2～4月齡的羔羊具有生長(zhǎng)發(fā)育快、飼料轉(zhuǎn)化率高等特點(diǎn)，因此斷奶羔羊快速肥育成為生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)羔羊肉的主要方式。飼糧能量是影響反芻動(dòng)物的第一限制性因素[1]，早期營(yíng)養(yǎng)攝入不足會(huì)嚴(yán)重阻礙其生長(zhǎng)發(fā)育。大量研究發(fā)現(xiàn)，飼糧能量水平顯著影響羔羊的生產(chǎn)性能。呂小康等[2]發(fā)現(xiàn)，增加飼糧能量含量能顯著提高2～4月齡湖羊羔羊的生長(zhǎng)性能。Liu等[3]也發(fā)現(xiàn)，2月齡灘羊羔羊的體重、平均日增重和胴體重隨著飼糧能量水平的升高而顯著改善。血液不僅是動(dòng)物體液最重要的組成部分，也是連接機(jī)體與外界的重要樞紐。Shakeri等[4]認(rèn)為血清生化指標(biāo)的變化與動(dòng)物的能量代謝密切相關(guān)。Song等[5]發(fā)現(xiàn)，飼糧營(yíng)養(yǎng)濃度可影響綿羊的血清生化指標(biāo)。羔羊營(yíng)養(yǎng)不足時(shí)，其血清生化指標(biāo)也會(huì)隨之變化[6-7]。經(jīng)濟(jì)雜交能夠提高肉羊生產(chǎn)性能。有研究表明，薩湖F1代具有良好的育肥、屠宰性能以及上佳的肉質(zhì)性狀[8]，但由于生產(chǎn)中肉綿羊雜交組合較多，目前對(duì)特定雜交羔羊育肥階段營(yíng)養(yǎng)需要的系統(tǒng)研究較少。本文通過對(duì)不同飼糧能量水平下薩湖F1代羔羊的生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)以及脂肪代謝基因表達(dá)的測(cè)定，探究飼糧能量水平對(duì)薩湖F1代羔羊早期育肥的影響，為雜交羔羊早期育肥的營(yíng)養(yǎng)需要提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)

本試驗(yàn)于2020年7月24日-2020年10月10日在甘肅省慶陽(yáng)市環(huán)縣慶環(huán)肉羊制種有限公司進(jìn)行。試驗(yàn)周期為78 d，其中預(yù)試期8 d，正試期70 d。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取2月齡左右、平均體重為20.58±1.47 kg的健康白薩?？搜?♂)×湖羊(♀)F1代雜種羔羊36只，隨機(jī)分為3組，每組4個(gè)重復(fù)(公母各2個(gè)重復(fù))，每個(gè)重復(fù)3只羊，分別飼喂低能組(LE)、標(biāo)準(zhǔn)組(CON)和高能組(HE)試驗(yàn)飼糧。

1.3 試驗(yàn)飼糧

根據(jù)肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T816-2004)[9]中體重為20.0 kg，目標(biāo)日增重為200 g/d的育肥羔羊營(yíng)養(yǎng)設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)組(CON)飼糧，消化能為10.38 MJ/kg，粗蛋白質(zhì)為14.36%；低能組(LE)飼糧設(shè)計(jì)能量水平為標(biāo)準(zhǔn)組的85%，消化能配方計(jì)算值為8.67 MJ/kg；高能組(HE)飼糧設(shè)計(jì)能量水平為標(biāo)準(zhǔn)組的115%，消化能配方計(jì)算值為12.31 MJ/kg，LE組和HE組飼糧蛋白水平與標(biāo)準(zhǔn)組一致。3組飼糧均制成顆粒飼料飼喂。飼糧配方組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Diet composition and nutritional level (air-dry basis)

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)開始之前對(duì)圈舍、水槽、料槽以及走廊等進(jìn)行全面清掃和消毒，并對(duì)試驗(yàn)羊按程序免疫(三聯(lián)四防)和體內(nèi)驅(qū)蟲(伊維菌素)。試驗(yàn)期各處理組分別飼喂對(duì)應(yīng)能量水平的顆粒飼糧，每日分別于08:30和17:00投料2次，同時(shí)觀察試驗(yàn)羊的健康狀況，試驗(yàn)羊自由采食，自由飲水。

1.5 樣品采集和指標(biāo)測(cè)定

1.5.1 生產(chǎn)性能的測(cè)定 以試驗(yàn)設(shè)置的重復(fù)為單位記錄各組的飼喂量和剩料量，并測(cè)定試驗(yàn)羊的初始體重和終末體重，計(jì)算干物質(zhì)采食量(DMI)、平均日增重(ADG)和料肉比(F/G)。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取1只試驗(yàn)羊(共12只)進(jìn)行屠宰(空腹24 h)，記錄宰前活重和胴體重，計(jì)算屠宰率。采集皮下脂、尾脂和背最長(zhǎng)肌組織樣品，并做好RNA提取樣品前處理。

1.5.2 胴體重 屠宰后去除頭、蹄、尾、內(nèi)臟，保留腎臟，稱量胴體重。

1.5.3 屠宰率

屠宰率(%)=胴體重/宰前活重×100%

1.5.4 血液生化指標(biāo)的測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束的當(dāng)天晨飼前，所有試驗(yàn)羊頸靜脈采血，靜置30 min，用低速離心機(jī)以3 500 r/min離心10 min，移取上層血清于2 mL離心管內(nèi)，于-20 ℃冰箱內(nèi)保存待測(cè)。采用邁瑞B(yǎng)S-420全自動(dòng)生化儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)測(cè)定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素(BUN)和生長(zhǎng)激素(GH)含量。試劑盒由中生北控股有限公司提供。

1.5.5 相關(guān)基因表達(dá)檢測(cè)

1.5.5.1 RNA的提取和cDNA的合成 將皮下脂、尾脂和背最長(zhǎng)肌組織從裝有保存液的凍存管內(nèi)取出，按照RNA提取試劑盒的說明書提取組織的總RNA，運(yùn)用核酸定量?jī)x(K5800，上海DRAWELL科學(xué)儀器有限公司)測(cè)定總RNA濃度和純度，用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)RNA的完整性。按照反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明進(jìn)行操作將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，于-20 ℃冰箱中保存。

1.5.5.2 引物設(shè)計(jì)與合成 依據(jù)NCBI(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)公布的綿羊脂肪酸合成酶基因(FASN)、乙酰CoA羧化酶基因(ACC)、過氧化物酶激活受體基因(PPARγ)、脂肪酸結(jié)合蛋白4基因(FABP4)、激素敏感脂肪酶基因(HSL)和內(nèi)參基因β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)的mRNA序列使用軟件Primer 5.0 設(shè)計(jì)特異性引物，交由陜西中科羽瞳生物公司合成，引物序列見表2。

表2 引物序列Table 2 Primer sequences

1.5.5.3 熒光定量PCR 反應(yīng)體系為20 μL：2× SYBR qPCR Master Mix 10 μL，cDNA 1 μL，上下游引物各0.4 μL，ddH2O 8.2 μL。PCR擴(kuò)增條件：95 ℃預(yù)變性30 s，95 ℃變性10 s，60 ℃延伸退火30 s，40個(gè)循環(huán)。融解條件：95 ℃下15 s，60 ℃下60 s，95 ℃下15 s，循環(huán)1次，檢測(cè)結(jié)果由LightCyler 96定量?jī)x給出，以β-actin為內(nèi)參基因，各目的基因反轉(zhuǎn)錄強(qiáng)度以基因絕對(duì)拷貝數(shù)/β-actin絕對(duì)拷貝數(shù)表示，通過熔解曲線判斷是否有非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物或引物二聚體出現(xiàn)，采用2-ΔΔCT法進(jìn)行相對(duì)定量。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel 2010對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理，使用GraphPad Primer 8.0 軟件做圖；使用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)軟件中的單因素方差分析(One-Way ANOVA)和Duncan氏法進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗(yàn)羔羊的生產(chǎn)性能

飼糧能量水平對(duì)羔羊生產(chǎn)性能的影響數(shù)據(jù)見表3。由表3可知，初始體重各處理組間無差異。試驗(yàn)期羔羊末重和平均日增重HE組和CON組顯著高于LE組(P<0.05)；日均干物質(zhì)采食量CON組顯著高于HE組(P<0.05)；胴體重HE組生產(chǎn)成績(jī)最好，顯著高于LE組(P<0.05)，與CON組無顯著差異。屠宰率HE組較LE組和CON組升高了9.95%和7.09%。該結(jié)果表明，中國(guó)肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 816-2004)[9]適用于薩湖F1代，適當(dāng)提高飼糧能量水平能夠提高飼料轉(zhuǎn)化效率和肉羊屠宰率。

2.2 試驗(yàn)羔羊的血液生化指標(biāo)

由表4可知，飼糧能量水平對(duì)血清TC、TG、LDL、HDL和TP含量有顯著影響， HE組的血清TC含量較CON和LE組升高了35.53%和37.56%(P<0.05)；HE組的血清TG含量較CON組和LE組均升高了33.33%(P<0.05)；HE組的LDL含量較CON組和LE組升高了35.53%和37.56% (P<0.05)；HE組的HDL較CON組和LE組升高了27.78%和23.15%(P<0.05)；HE組的TP較CON組和LE組升高了8.12%和8.35%(P<0.05)；血清GLOB含量隨著能量水平的上升有升高趨勢(shì)(P=0.054)。

表4 飼糧能量水平對(duì)血清生化指標(biāo)的影響Table 4 Effect of dietary energy level on serum biochemical indexes

2.3 試驗(yàn)羔羊脂肪代謝相關(guān)基因mRNA的表達(dá)

飼糧能量水平對(duì)羔羊脂肪代謝相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響見圖1。由圖1A可知，飼糧能量水平對(duì)皮下脂中基因ACC、FABP4和HSLmRNA的表達(dá)有顯著影響。ACCmRNA的表達(dá)隨能量水平的升高而升高，HE組顯著高于LE組(P<0.05)。HSLmRNA的表達(dá)量在3組之間差異顯著，HE組高于CON組高于LE組。CON組FABP4的表達(dá)水平最高，較LE和HE組分別提高了56.90%和58.62%(P<0.05)；飼糧能量水平對(duì)皮下脂肪中FASN和PPARγmRNA的表達(dá)無影響(P>0.05)。

由圖1B可知，飼糧營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)尾脂中基因FASN、ACC、FABP4和HSLmRNA的表達(dá)有顯著影響。FASNmRNA的表達(dá)量HE組最高，顯著高于CON組和LE組(P<0.05)；尾脂中ACCmRNA的表達(dá)模式與皮下脂中的相同，隨著能量水平的升高而逐漸升高，HE組顯著高于LE組(P<0.05)；FABP4 mRNA的表達(dá)量CON組最高，較LE組和HE組升高了31.97%和25.85%(P<0.05)；HSLmRNA的表達(dá)量LE組最高，較CON和HE組升高了18.00%和16.00%(P<0.05)。

由圖1C可知，飼糧能量水平對(duì)背最長(zhǎng)肌中脂肪沉積相關(guān)基因mRNA的表達(dá)均有顯著影響。FASNmRNA的表達(dá)量CON組最高，分別較LE組和HE組提高了40.83%和42.01%(P<0.05)；ACCmRNA的表達(dá)量CON組最低，分別較LE和HE組下降了57.44%和30.55%(P<0.05)；PPARγmRNA的表達(dá)量HE組最低，分別較LE和CON組降低了16.00%和19.00%(P<0.05)；HSLmRNA的表達(dá)量LE組最高，分別較CON和HE組增加了83.00%、82.00%(P<0.05)。FABP4 mRNA的表達(dá)量HE組顯著高于CON組(P<0.05),CON組顯著高于LE組(P<0.05)。

圖1 薩湖F1代羔羊脂肪組織脂肪代謝相關(guān)基因mRNA的表達(dá)A.皮下脂肪；B.尾部脂肪；C.背最長(zhǎng)肌脂肪同一基因標(biāo)相同字母或無字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)Fig. 1 mRNA expression of genes related to fat metabolism inadipose tissue of White Suffolk×Hu F1 Lambs A. subcutaneous adipose; B. tail fat; C. fat in longissimus dorsiIn the same gene, the same or no letter superscripts indicateinsignificant difference(P>0.05), while different lowercasesuperscripts mean significant difference (P<0.05)

3 討 論

3.1 飼糧能量水平對(duì)羔羊生產(chǎn)性能的影響

飼糧能量水平是影響反芻動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的第一限制性因素[1]。前人研究發(fā)現(xiàn)飼糧能量水平影響不同品種羔羊的體重、ADG和飼料轉(zhuǎn)化率，但卻存在一定差異。Yagoub等[10]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧能量水平的升高(ME:8.5～11.5 MJ/kg)可極顯著提高蘇丹羊羔羊的末重、ADG和飼料轉(zhuǎn)化率。Ebrahimi等[11]也發(fā)現(xiàn)，低能量飼糧可顯著降低梅赫拉班公羔的ADG和體重。本試驗(yàn)結(jié)果與前人研究一致，羔羊末重和ADG隨營(yíng)養(yǎng)水平的升高而顯著升高。研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物為能而食，可依據(jù)飼糧能量水平自主調(diào)整采食量，進(jìn)而提高飼料報(bào)酬和體重[12]。Brand等[13]發(fā)現(xiàn)，羔羊采食量隨著飼糧能量的提高而降低。在本試驗(yàn)中，高能組的干物質(zhì)采食量最低，且顯著低于標(biāo)準(zhǔn)組?？赡芤?yàn)楦吣茱暭Z更容易滿足羔羊的營(yíng)養(yǎng)需要，動(dòng)物根據(jù)能量水平自主調(diào)整采食量，進(jìn)而造成采食量的下降。料肉比(F/G)反映飼料利用率的高低。呂小康等[2]也發(fā)現(xiàn)，提高飼糧能量水平顯著降低90～120日齡湖羊羔羊的料肉比。這與本試驗(yàn)的結(jié)果一致，料肉比隨著能量的升高而極顯著下降，表明高能量飼糧能顯著促進(jìn)羔羊的飼料轉(zhuǎn)化率，提高經(jīng)濟(jì)效益。

研究發(fā)現(xiàn)，飼料營(yíng)養(yǎng)水平與屠宰性能也有一定聯(lián)系。Wang等[14]發(fā)現(xiàn)不同能量水平的飼糧(ME為9.17～10.82 MJ/kg)可顯著提高20.0 kg肥育湖羊公羔的宰前活重和胴體重。Wang等[15]發(fā)現(xiàn)能量水平(ME為9.17～10.41 MJ/kg)的升高可有效增加4月齡湖羊公羔的宰前活重和胴體重。本試驗(yàn)結(jié)果與前人的一致，HE組(12.31 MJ/kg)的宰前活重和胴體重顯著高于LE組(8.67 MJ/kg)，屠宰率也得到顯著提高。在本試驗(yàn)中，LE組飼糧精粗比為40:60，CON組和HE組的飼糧精粗比一致為50:50，盧盛勇等[16]研究發(fā)現(xiàn)，精粗比為50:50與40:60的日糧對(duì)貴州白山羊(15.96±2.94 kg)的生長(zhǎng)性能和屠宰性能無顯著影響，這與高林青等[17]在湖羊羔羊(15.62±0.01 kg)上的研究結(jié)果相同，這表明可將因飼糧的精粗比差異對(duì)羔羊育肥效果的影響排除在外。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧能量水平的提高可顯著影響白薩湖羔羊的肥育期生產(chǎn)性能，在中國(guó)肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 816-2004)[9]的基礎(chǔ)上增加15%可取得良好飼喂效果。

3.2 飼糧能量水平對(duì)羔羊血清生化指標(biāo)的影響

能量貯存于飼糧的各種養(yǎng)分中，飼糧能量的消化、轉(zhuǎn)化和利用總是伴隨著物質(zhì)代謝同步進(jìn)行，血液是體內(nèi)循環(huán)流通的代謝池，血液中相關(guān)生化指標(biāo)可間接反映機(jī)體的物質(zhì)代謝情況[18]。霍俊宏等[19]研究發(fā)現(xiàn)，精粗比為40:60與50:50的日糧對(duì)努比亞山羊(20.07±0.57 kg)的血清生化指標(biāo)無顯著影響。本試驗(yàn)中CON組和HE組的飼糧精粗比相同，這說明在本試驗(yàn)中飼糧精粗比的差異對(duì)白薩湖羔羊的育肥效果無影響。血清TC和TG指標(biāo)均與能量攝入有關(guān)，反映脂類的代謝和吸收[20]。江趙寧等[21]研究表明，隨著能量水平的升高，妊娠期母豬血清中的TG和TC含量呈顯著上升趨勢(shì)。本試驗(yàn)的研究結(jié)果與前人一致，血清TC和TG含量隨著飼糧能量水平的升高呈升高趨勢(shì)，血清TC和TG含量HE組顯著高于CON組和LE組，說明高能量飼糧可有效促進(jìn)動(dòng)物的脂代謝過程。

HDL和LDL都是膽固醇的運(yùn)載介質(zhì)，其含量高低與體脂沉積密切相關(guān)。HDL可將血液中的TC和TG運(yùn)輸?shù)礁蝺?nèi)和脂肪組織中進(jìn)行降解，進(jìn)而減少TG的沉積。LDL因能量攝入其水平顯著降低，可以有效防止脂代謝的紊亂[22]。劉爽[23]研究表明，架子牛血清中的HDL和LDL水平均隨能量水平的增加而升高。孫國(guó)虎[24]發(fā)現(xiàn)綿羊血清LDL水平隨能量(ME為7.85～11.67 MJ/kg)的升高而顯著增加。在本試驗(yàn)中，血清HDL和LDL含量HE組極顯著高于CON組和LE組，可能因?yàn)楦吣芰克降娘暭Z先造成機(jī)體TC和TG含量的升高，進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體中HDL和LDL的合成與分泌，用于轉(zhuǎn)運(yùn)TC和TG到肝臟組織和脂肪組織中進(jìn)行降解，最終促進(jìn)機(jī)體脂肪沉積和內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)平衡。

血清葡萄糖水平反映機(jī)體能量代謝水平的高低，動(dòng)物GLU濃度應(yīng)在6.1 mmol/L之下，否則影響機(jī)體的糖代謝運(yùn)轉(zhuǎn)[25]。Chelikani等[26]發(fā)現(xiàn)血清中的GLU隨著飲食能量的增加而增加。在本試驗(yàn)中，血清GLU含量隨著能量水平的升高而呈升高趨勢(shì)，且均在6.1 mmol/L以下，無顯著差異。這表明在本試驗(yàn)中，較高能量水平可促進(jìn)機(jī)體的糖代謝增強(qiáng)，但并未影響糖代謝的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

TP包括ALB和GLOB。TP含量的升高可促進(jìn)動(dòng)物組織的蛋白質(zhì)沉積，ALB能直接反映機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的高低，GLOB可參與機(jī)體的免疫活動(dòng)。鐘港等[27]發(fā)現(xiàn)高能飼糧(16.42 MJ/kg)組湘南黃牛的血清TP水平高于低能組(14.93 MJ/kg)，但低能組的ALB水平要優(yōu)于高能組。田春麗[28]發(fā)現(xiàn)灘羊(22.0～25.0kg)的血清ALB和GLOB在不同飼糧能量水平下(7.45～11.32 MJ/kg)無顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果為血清TP水平隨著能量水平的升高而顯著升高，HE組的血清TP水平顯著高于CON組和LE組。這表明高能飼糧可提高機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝，可能是因?yàn)楦吣茱暭Z為瘤胃微生物提供豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)微生物的繁殖和生長(zhǎng)，進(jìn)而產(chǎn)生更多的菌體蛋白，最終促進(jìn)機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝。而各組的血清ALB和GLOB含量無顯著差異，這與田春麗的研究結(jié)果一致。本試驗(yàn)結(jié)果提示，適當(dāng)提高飼糧能量水平可提高機(jī)體的蛋白質(zhì)利用率。

血清BUN含量反映動(dòng)物機(jī)體的氮代謝情況，與蛋白合成率和氨基酸平衡呈負(fù)相關(guān)[29]。呂小康等[2]指出，提高能量水平可顯著降低4月齡湖羊羔羊的血清BUN含量，這與本試驗(yàn)結(jié)果相似。在本試驗(yàn)中，血清BUN水平與能量呈負(fù)相關(guān)，隨著能量水平的升高而下降，當(dāng)能量水平提高到12.31 MJ/kg 時(shí)，可促進(jìn)機(jī)體的氮沉積和氨基酸利用效率。

GH的主要作用是促進(jìn)脂肪分解與蛋白質(zhì)合成，進(jìn)而控制動(dòng)物的生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝。崔原年等[30]發(fā)現(xiàn)，高營(yíng)養(yǎng)水平可降低反芻動(dòng)物的GH濃度，而限飼時(shí)血漿GH濃度顯著高于自由采食的。在本研究中，HE組血清GH水平分別較CON組和LE組下降了24.86%和18.30%，與前人研究一致。因此提高飼糧能量水平會(huì)促進(jìn)羔羊的脂代謝和蛋白質(zhì)代謝。

3.3 飼糧能量水平對(duì)脂肪組織中脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

體脂沉積與動(dòng)物自身的營(yíng)養(yǎng)代謝密切相關(guān)，不僅可以緩解因能量過度攝入而造成的器官損傷，在必要時(shí)還可以作為機(jī)體的主要能量來源。脂肪組織的生長(zhǎng)發(fā)育主要通過細(xì)胞的增殖與分化，并由多種脂肪代謝基因共同調(diào)控，其中包括FASN、ACC、PPARγ、FABP4和HSL等基因。大量研究表明，飼糧能量水平與體脂沉積有一定相關(guān)性。高良霜[31]發(fā)現(xiàn)，高能飼糧(0.75 MJ/W0.75×d-1)顯著促進(jìn)阿勒泰羊皮下脂和尾脂中基因ACC和PPARγ的表達(dá)。劉培峰等[32]發(fā)現(xiàn)，隨著能量水平(NE：9.84～10.67 MJ/kg)的增加，38.00 kg丹系三元豬的背膘厚度呈線性增加。

Liu等[3]發(fā)現(xiàn)，4月齡灘羊的皮下脂肪和尾脂中FASN隨著能量水平的升高而顯著升高，而HSL表達(dá)量則顯著下降。Zhang等[33]在雜交牛皮下脂肪中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)ASN、ACC、PPARγ隨著能量水平的增加而顯著升高，而HSL的表達(dá)量則顯著下降。在本試驗(yàn)中，低飼糧營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)脂肪組織中ACC和FABP4mRNA表達(dá)影響相同，表達(dá)量均降低，與前人研究一致。但HE組基因FABP4的表達(dá)有降低趨勢(shì)，可能是因?yàn)轱暭Z營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)其的影響已達(dá)到閾值，再提高能量水平，反而會(huì)降低其基因的表達(dá)；能量水平對(duì)皮下脂和尾脂中PPARγ表達(dá)的影響差異不顯著，但隨著營(yíng)養(yǎng)水平的升高而呈升高趨勢(shì)。在本試驗(yàn)中，飼糧能量對(duì)脂肪組織中基因PPARγ和FABP4表達(dá)的影響趨勢(shì)相同，這與王小芳[34]提出的飼糧營(yíng)養(yǎng)對(duì)FABP4基因的調(diào)控可能由PPARγ來實(shí)現(xiàn)的觀點(diǎn)一致。飼糧能量對(duì)皮下脂和尾脂中FASN基因表達(dá)的影響不同，在尾脂中顯著升高，而在皮下脂肪中無顯著影響，可能是因?yàn)楦嵫蚱は轮臀仓练e存在空間上的差異。

而營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)皮下脂和尾脂中HSL的表達(dá)影響相反，在皮下脂中顯著提高，但在尾脂中則顯著下降。這與Zhang等[33]和Liu等[3]的研究結(jié)果不同，分析其原因可能有二：一是本試驗(yàn)采樣時(shí)羔羊皮下脂可能已經(jīng)沉積完全， FASN是脂肪從頭合成的關(guān)鍵酶，當(dāng)皮下脂的脂肪酸從頭合成已經(jīng)達(dá)到飽和時(shí)，過多的能量對(duì)皮下脂而言成為負(fù)擔(dān)，因此脂解基因HSL的表達(dá)顯著升高用于維持皮下脂中的正常代謝；二是因?yàn)楦吣芰匡暭Z的攝入先引起機(jī)體血液中的TC和TG含量的顯著升高，進(jìn)而促使機(jī)體合成與分泌大量的LDL和HDL，用于轉(zhuǎn)運(yùn)TC和TG到肝臟和脂肪組織中進(jìn)行降解，以維持自身的健康穩(wěn)態(tài)和營(yíng)養(yǎng)代謝平衡。皮下脂肪是最先沉積的[35]，因此很大可能是將過多的TC和TG轉(zhuǎn)運(yùn)到皮下脂肪中進(jìn)行降解，最終促進(jìn)皮下脂肪中HSL基因的表達(dá)。本試驗(yàn)表明，提高飼糧能量水平可促進(jìn)薩湖F1代羔羊育肥期的皮下脂肪和尾脂的沉積。

3.4 飼糧能量水平對(duì)背最長(zhǎng)肌中脂肪代謝基因表達(dá)的影響

肌內(nèi)脂肪的沉積可以改善羊肉的品質(zhì)和風(fēng)味特征，提高肌內(nèi)脂的沉積也是高檔羊肉生產(chǎn)過程中的關(guān)鍵技術(shù)難點(diǎn)和突破點(diǎn)。Zhang等[36]報(bào)道稱，西門塔爾牛×黃種牛肌肉中的FASN和FABP4的表達(dá)隨著能量的升高而顯著升高。Kang等[37]也發(fā)現(xiàn)基因FASN表達(dá)隨能量的升高而顯著增加。這與本試驗(yàn)的結(jié)果一致，F(xiàn)ABP4隨著飼糧能量水平的升高而極顯著升高，F(xiàn)ASN隨著能量的升高而先升高后下降，可能是能量水平對(duì)其的影響已達(dá)到最大，能量水平的再升高，其表達(dá)水平反而會(huì)降低。郝稱莉[38]發(fā)現(xiàn)4月齡后的湖羊PPARγ與IMF含量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.441)。Huang等[39]在雄性薩?？搜蛏弦沧C明了PPARγ的表達(dá)對(duì)IMF含量有負(fù)面作用。這與前人的結(jié)果一致，可能是因?yàn)镻PARγ主要表達(dá)在脂肪組織中，是脂肪胞質(zhì)內(nèi)特定性轉(zhuǎn)錄因子[38]。而肌內(nèi)脂肪是最后沉積的，故PPARγ在肌肉組織中其表達(dá)水平較低，且飼糧營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)其的影響與肌內(nèi)脂肪沉積呈負(fù)相關(guān)。

在本試驗(yàn)中，LE組的ACC表達(dá)水平最高，這與Zhang等[36]的研究結(jié)果不同。有研究發(fā)現(xiàn)，ACC有兩種亞型(ACC1和ACC2)，ACC1主要存在于肝臟和脂肪組織中，促進(jìn)脂肪酸的合成，ACC2主要存在于骨骼肌和心肌中，促進(jìn)脂解供能[40]。在本試驗(yàn)中，LE組ACC表達(dá)水平較高，可能是因?yàn)長(zhǎng)E組的飼糧能量供給難以滿足動(dòng)物自身的生長(zhǎng)需要，總體表現(xiàn)為脂解功能，進(jìn)而維持機(jī)體的正常發(fā)育。Kim等[41]研究表明，隨著飼糧能量的升高，HSL表達(dá)顯著降低。Zhang等[36]研究發(fā)現(xiàn)，西門塔爾?！咙S種牛的背肌中HSL的表達(dá)隨著能量水平的升高而顯著下降。這與本試驗(yàn)的研究結(jié)果一致，脂解基因HSL的表達(dá)隨著能量攝入的增加而顯著降低，說明飼糧營(yíng)養(yǎng)水平通過下調(diào)脂解基因HSL的表達(dá)促進(jìn)背最長(zhǎng)肌中的脂肪沉積。

4 結(jié) 論

在本研究中，綜合生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)和脂肪沉積相關(guān)基因的表達(dá)，飼糧能量水平為12.31 MJ/kg時(shí)更適用于白薩?？恕梁騀1肥育期羔羊的生長(zhǎng)發(fā)育和體脂沉積。