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    液相色譜法測定茶筍中的阿斯巴甜和阿力甜

    2021-11-07 03:11:44王攀峰薛曉偉鄧文輝
    中國食品 2021年21期
    關(guān)鍵詞:阿斯巴甜檢出限標準溶液

    王攀峰 薛曉偉 鄧文輝

    阿斯巴甜(Aspartame,天門冬酰苯酸甲酯)由兩種不同的氨基酸即天門冬氨酸和苯丙氨酸合成,甜度為蔗糖的200倍,可以有效地降低熱量,而且攝入后的消化、吸收和代謝過程不會造成牙齒齲壞,安全性高。阿力甜(Alitanme,L-2-天冬氨酰-D-丙氨酰胺),甜度是蔗糖的2000倍,對酸、對熱的穩(wěn)定性好。阿斯巴甜和阿力甜均為人工合成的非碳化合物類的人造甜味劑,因為甜度高、熱量低,多被廣泛應(yīng)用于各類食品中作為糖的替代品。人工合成甜味劑也要限量使用,若超范圍使用或者濫用則可能引起不同程度的毒性表現(xiàn),因此采取科學(xué)方法準確測定食品中阿斯巴甜和阿力甜的含量至關(guān)重要。

    目前GB5009.263-2016《食品安全國家標準 食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定》規(guī)定了部分食品中阿斯巴甜和阿力甜的檢測方法,茶筍可參考執(zhí)行,但需要對檢驗方法進行優(yōu)化并驗證。根據(jù)阿斯巴甜和阿力甜易溶于水、甲醇和乙醇等極性溶劑的特點設(shè)計提取方法,經(jīng)過多次試驗后發(fā)現(xiàn)在制備好的茶筍混勻樣品中加入50%甲醇水溶液并過夜泡發(fā)后,離心提取試樣中的阿斯巴甜和阿力甜效果最佳。

    本實驗參考國標GB 5009.263-2016《食品安全國家標準 食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定》中蔬菜及其制品的檢測方法,建立了一種測定茶筍中的阿斯巴甜和阿力甜的高效液相色譜方法,即:用50%甲醇水溶液提取試樣中的阿斯巴甜和阿力甜,以乙腈-水(20︰80)為流動相,流速0.8mL/min,在200nm波長下檢測。結(jié)果表明,阿斯巴甜和阿力甜的低濃度線性和高濃度線性均良好,檢出限、精密度、回收率均滿足要求,而且靈敏度高、重復(fù)性良好、操作簡單,可以準確測定茶筍中的阿斯巴甜和阿力甜,完全能夠滿足檢驗機構(gòu)日常檢測任務(wù)的要求。

    一、儀器與試劑

    1.儀器。熱電U3000高效液相色譜儀(DAD檢測器);梅特勒XS204電子天平;梅特勒-托利多MS105DU電子天平;HC-3018高速離心機;FLUKO均質(zhì)器;KQ-500DE超聲波清洗器;IKA?MS3漩渦混合器。

    2.試劑。阿斯巴甜(BePure,純度95.0%);阿力甜(BePure,純度99.4%);乙腈(色譜純,迪馬);甲醇(色譜純);乙醇(優(yōu)級純);純化水。

    3.儀器條件。檢測器:DAD檢測器,檢測波長:200nm,流動相:乙腈-水(20︰80);色譜柱:戴安C18色譜柱,250mm×4.6mm,5μm;流速:0.8mL/min,柱溫:30℃,進樣量:20μL。

    二、試驗與方法

    1.標準液線性考察。(1)分別準確稱取阿斯巴甜0.01089g、阿力甜0.01060g于10mL容量瓶中,用水定容,得到濃度分別為1.0346mg/mL、1.0536mg/mL的標準儲備液,于4℃條件下貯存?zhèn)溆谩#?)分別準確吸取阿斯巴甜、阿力甜標準儲備液各1mL于10mL容量瓶中,用水定容。(3)分別精密移取阿斯巴甜和阿力甜溶液30μL、50μL、60μL、80μL、100μL、600μL、1000μL于10mL容量瓶中,加水定容至10mL,進行液相色譜分析,記錄色譜峰面積,并繪制標準工作曲線。

    阿斯巴甜線性方程:y=1.2583x-0.0729,r=0.9999。

    阿力甜線性方程:y=0.9318x+0.0225,r=1。

    2.樣品制備。取適量茶筍樣品剪成顆粒狀后混勻,稱取混勻樣品約2g(精確到0.001g)于50mL塑料離心管中,加入25mL濃度為50%的甲醇水溶液,蓋上蓋子搖勻,超聲10min,過夜泡發(fā)(16h)。用均質(zhì)器以10000r/min的速度均質(zhì)1min后,離心取上清液,過濾,濾液經(jīng)0.45μm有機系濾膜過濾后用于色譜分析。

    三、結(jié)果與分析

    1.檢出限確定。稱取茶筍混勻樣品,分別加入濃度為103.455μg/mL的阿斯巴甜標液0.10mL和濃度為105.364μg/mL的阿力甜標液0.1mL,按上述樣品制備方法處理后上機測試。結(jié)果表明,2種色譜峰高度均大于其3倍噪音,故在茶筍樣品中阿斯巴甜的檢出限為0.005g/kg,阿力甜的檢出限為0.005g/kg。

    2.精密度試驗。取茶筍樣品中回收試驗1份,連續(xù)測定6次,記錄峰面積,計算RSD值。試驗結(jié)果詳見表1。

    3.回收率試驗。稱取茶筍混勻樣品9份,進行3個水平的9次加標回收試驗。1、2、3號樣品加入濃度為103.455μg/mL的阿斯巴甜標準溶液0.3mL和濃度為105.364μg/mL的阿力甜標準溶液0.3mL,4、5、6號樣品加入濃度度為103.455μg/mL的阿斯巴甜標準溶液0.6mL和濃度為105.364μg/mL的阿力甜標準溶液0.6mL,7、8、9號樣品入濃度為1034.55μg/mL的阿斯巴甜標準溶液0.2mL和濃度為1053.64μg/mL的阿力甜標準溶液0.3mL,按上述樣品制備方法處理后上機測試。以1、2、3、4、5、6、7、8、9號樣品測試結(jié)果計算回收率,均大于95%,符合國家標準GB/T 27404-2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢驗》附錄F要求。

    按照本試驗中的方法對茶筍中阿斯巴甜和阿力甜進行線性、檢出限、精密度、回收率、重復(fù)性的驗證,均滿足相關(guān)要求,有利于日常檢驗工作的開展,也為后續(xù)阿斯巴甜和阿力甜檢測方法的改進提供了新的思路。

    作者簡介:王攀峰(1988-),女,漢族,山西平遙人,碩士研究生,中級工程師,研究方向為食品安全。

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