• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    替米沙坦對尿酸鹽刺激下HK-2腎小管上皮細(xì)胞干預(yù)研究*

    2021-10-09 04:23:46張繼波龍利覃慧群金晟余建峰徐敏劉浩
    醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2021年10期
    關(guān)鍵詞:列酮羅格米沙坦

    張繼波,龍利,覃慧群,金晟,余建峰,徐敏,劉浩

    (湖北省第三人民醫(yī)院腎病內(nèi)科,武漢 430033)

    高尿酸血癥是引起慢性腎臟疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,并可導(dǎo)致腎臟纖維化。過氧化物酶增殖物激活受體-γ(peroxisome proliferators-activated receptors-γ,PPAR-γ)與配體結(jié)合激活后,主要通過調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)產(chǎn)生生物效應(yīng),包括抑制促炎性遞質(zhì)[如白細(xì)胞介素-6(IL-6)、環(huán)氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)]表達(dá),改善炎癥狀態(tài)[1],降低轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)和單核巨噬細(xì)胞因子-1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)表達(dá),起到抗腎間質(zhì)纖維化作用[2-3]。單鈉尿酸鹽刺激腎小管上皮細(xì)胞可以誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)[4]、自噬表達(dá)增加[5],甚至隨著尿酸鹽濃度增加,HK-2細(xì)胞增殖能力下降,導(dǎo)致小管細(xì)胞凋亡[6]。血管緊張素Ⅱ可下調(diào)PPAR-γ表達(dá)[7],替米沙坦具有激活PPAR-γ受體的作用[8],通過提高血清、腎組織中PPAR-γmRNA表達(dá)而降低肥胖大鼠尿白蛋白,有腎保護(hù)作用[9]。陳艷梅等[10]通過對大鼠腎組織及HK-2細(xì)胞培養(yǎng)研究發(fā)現(xiàn),調(diào)節(jié)人生電型尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(human electric urate transporter,hUAT)表達(dá),替米沙坦能抑制腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1及α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表達(dá),對尿酸性腎病腎臟纖維化有一定的保護(hù)作用。這種保護(hù)作用是否是通過PPAR途徑產(chǎn)生,目前筆者尚未見類似報(bào)道,本研究主要通過PPAR途徑研究替米沙坦對尿酸鹽刺激下HK-2腎小管上皮細(xì)胞的干預(yù)機(jī)制,探討替米沙坦對尿酸性腎病腎保護(hù)作用。

    1 材料與方法

    1.1材料

    1.1.1實(shí)驗(yàn)細(xì)胞 HK-2人腎小管上皮細(xì)胞,購自中國科學(xué)院細(xì)胞庫(中國上海)。

    1.1.2試劑 胎牛血清(FBS,批號:567216)購于GIBCO公司;0.25%胰酶+0.02%乙二胺四醋酸(EDTA)(批號:160526061)、青霉素-鏈霉素(批號:659R063)購于北京索萊寶科技有限公司;PPAR-γ阻斷劑GW9662(批號:062R1598T)、尿酸(批號:STBC0603V)購于美國Sigma公司;TrizolRNA提取試劑(批號:156987)購于美國Invitrogen公司;TaqTMⅡPCR試劑盒(批號:AE265988)、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(批號:AC32659C)購于TaKaRa公司;引物購于上海生工生物工程有限公司;羅格列酮片(規(guī)格:每片1 mg,批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字H20041422),成都恒瑞制藥有限公司;替米沙坦片(規(guī)格:每片40 mg,批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字J20180016),Boehringer Ingelhein Ellas A.E。

    1.1.3儀器 二氧化碳(CO2)細(xì)胞培養(yǎng)箱購置于美國Thermo公司;超凈工作臺(tái)(蘇州凈化設(shè)備有限公司);CK-TKc-3倒置相差顯微鏡(日本OLYMPUS);酶聯(lián)免疫檢測儀(芬蘭Thermol Labsystems);高速冷凍離心機(jī)(德國Eppendorf公司);低速離心機(jī)(上海醫(yī)療儀器廠);磁力攪拌器(蘇州國華儀器廠);電子分析天平(梅特勒-托利多儀器公司);微量移液器(德國Appendorf公司);流式細(xì)胞儀(美國BD亞洲有限公司);紫外分光光度計(jì)(美國Thermo公司);自動(dòng)壓力蒸汽滅菌器(廈門致微儀器有限公司);CFX96TM實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(美國BIO-RAD公司)。

    1.2細(xì)胞處理與分組 在培養(yǎng)條件為37 ℃,5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中用完全培養(yǎng)液培養(yǎng)HK-2細(xì)胞,選第3~5代細(xì)胞,取同步處于G0期的細(xì)胞,隨機(jī)分為7組,分別為對照組(培養(yǎng)基,NC組)、模型組[尿酸(600 μmol·L-1),UM組]、高尿酸+替米沙坦組[尿酸(600 μmol·L-1)+替米沙坦(10 μmol·L-1),UT組]、高尿酸+羅格列酮組[尿酸(600 μmol·L-1)+羅格列酮(10 μmol·L-1),UR組]、高尿酸+GW9662組[預(yù)先用5000 nmol·L-1PPAR-γ阻斷劑GW9662 處理30 min,再加入尿酸 (600 μmol·L-1),UG組]、高尿酸+替米沙坦+GW9662組[預(yù)先用5000 nmol·L-1PPAR-γ阻斷劑GW9662 處理30 min,再加入尿酸(600 μmol·L-1)+替米沙坦(10 μmol·L-1),UTG組]和高尿酸+羅格列酮+GW9662組[預(yù)先用5000 nmol·L-1PPAR-γ阻斷劑GW9662 處理30 min,再加入尿酸(600 μmol·L-1)+羅格列酮(10 μmol·L-1),URG組]。各組刺激培養(yǎng)48 h后,細(xì)胞融合90%~95%。

    1.3觀察指標(biāo)與檢測方法

    1.3.1流式細(xì)胞儀檢測HK-2細(xì)胞hUAT、PPAR-γ蛋白表達(dá) 終止培養(yǎng)后收集細(xì)胞(1×106)。離心,洗滌,棄上清液,加1:100稀釋的鼠抗人hUAT、PPAR-γ蛋白單克隆抗體100 μL;37 ℃水浴,離心,棄上清液,加1:20稀釋的羊抗鼠IgG-FITC 100 μL,水浴,離心洗滌,去上清液,除去未結(jié)合熒光抗體,調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1×106·L-1,上機(jī)(FACSCalibur ,BD)檢測。實(shí)驗(yàn)設(shè)正常對照:用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替1:100稀釋的鼠抗人hUAT、PPAR-γ 單抗。陰性對照:只加1:100稀釋的鼠抗人hUAT、PPAR-γ單抗而不加IgG-FITC抗體的陰性對照。結(jié)果以陽性細(xì)胞率表示。

    1.3.2流式細(xì)胞儀檢測HK-2細(xì)胞凋亡情況 終止培養(yǎng),將培養(yǎng)基吸出,用PBS清洗,0.25%胰蛋白酶消化,收集細(xì)胞(1×106)。離心,棄上清液,用70%冰乙醇沉淀,4 ℃懸浮固定24 h。固定細(xì)胞經(jīng)碘化丙啶綜合染料(PI、Rnase、Triton X-100)一步法染色30 min后,300目尼龍篩網(wǎng)濾過,上流式細(xì)胞儀檢測,檢測DNA含量,計(jì)數(shù)在G1峰前出現(xiàn)的DNA含量下降的亞二倍體峰的細(xì)胞數(shù),計(jì)算出細(xì)胞凋亡率。

    1.3.3Q-PCR法檢測HK-2細(xì)胞hUAT、PPAR-γ、COX-2、MCP-1、TGF-β1的表達(dá)情況 Trizol法提取總RNA:RNA溶液在-80 ℃條件下保存。取RNA溶液1 μL,用紫外分光光度法于波長260 nm和280 nm處測定吸光度(A值),A260/A280比值在1.8~2.0。逆轉(zhuǎn)錄cDNA:合成后cDNA在-20 ℃或更低溫度下保存。熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)反應(yīng):通過GenBank查找hUAT、PPAR-γ、COX-2、MCP-1、TGF-β1序列,選取GAPDH作為內(nèi)參。應(yīng)用CFX96TM實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,進(jìn)行熒光定量PCR。每個(gè)樣品設(shè)2個(gè)復(fù)孔,取平均擴(kuò)增循環(huán)次數(shù)Ct值。以內(nèi)參GAPDH為對照,計(jì)算相對定量ΔCt值。以對照組為對照,計(jì)算相對定量ΔΔCt值。采用相對定量2-ΔΔCt法比較三個(gè)基因的mRNA的表達(dá)差異。2-ΔΔCt代表實(shí)驗(yàn)組目的基因相對于對照組的變化倍數(shù)。ΔΔCt值=實(shí)驗(yàn)組(目的基因Ct值-內(nèi)參基因Ct值)-對照組(目的基因Ct值-內(nèi)參基因Ct值)。熒光定量PCR擴(kuò)增基因引物序列,hUAT(NM_001001290.2):上游(5′→3′)GACTTCCTAGTGGGTGTGAA,下游(5′→3′)AATGT-CATTTCCACTGAAGC,產(chǎn)物長度225 bp;PPAR-γ(NM_001127330.2):上游(5′→3′)AGCCAACACTAAACCACA,下游(5′→3′)AGAAACCCTTGCATCCT,產(chǎn)物長度337 bp;COX-2(NM_001124348):上游(5′→3′)TGAAA-CCCACTCCAAACACA,下游(5′→3′)TGGAACA-ACTGCTCATCACC,產(chǎn)物長度301 bp;MCP-1(NM_011333.3):上游(5′→3′)AGCAGCAAGTGTCCCAAAGA,下游(5′→3′)GGTGGTCCATGGAATCCTGA,產(chǎn)物長度103 bp;TGF-β1(NM_011577.2):上游(5′→3′)AGCG-ACTCGCCAGAGTGGTTA,下游(5′→3′)GCAGT-GTGTTATCCCTGCTGTCA,產(chǎn)物長度130 bp;GAPDH(NM_001289726.1):上游(5′→3′)CCTTCCG-TGTTCCTAC,下游(5′→3′)GACAACCTGGTCCTCA,產(chǎn)物長度152 bp。

    1.3.4Western blotting檢測正常及高尿酸條件下HK-2上hUAT、PPAR-γ 、COX-2、MCP-1、TGF-β1的表達(dá) 取出相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)處理組的培養(yǎng)瓶,棄培養(yǎng)液,用預(yù)冷的PBS沖洗2次,按照6孔,板每孔加入裂解液100~200 μL(6 cm培養(yǎng)皿200~300 μL)。充分裂解,取上清液,進(jìn)行蛋白質(zhì)定量后貯存于-80 ℃冰箱。全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀中檢測,通過TANONGIS軟件讀取相關(guān)條帶灰度值。

    2 結(jié)果

    2.1各組HK-2細(xì)胞hUAT、PPAR-γ蛋白表達(dá) 通過流式細(xì)胞儀檢測hUAT、PPAR-γ蛋白表達(dá)(以陽性細(xì)胞率表示),PPAR-γ抑制劑聯(lián)合替米沙坦、羅格列酮干預(yù),陽性細(xì)胞率上升(P<0.05),較單用替米沙坦、羅格列酮比例下降(P<0.05),提示替米沙坦無法逆轉(zhuǎn)PPAR-γ抑制后陽性細(xì)胞率減少,替米沙坦有激活PPAR-γ受體作用。見表1。

    表1 7組HK-2細(xì)胞hUAT、PPAR-γ蛋白陽性細(xì)胞率

    2.2各組HK-2細(xì)胞的凋亡 應(yīng)用PPAR-γ抑制劑后聯(lián)合替米沙坦、羅格列酮,凋亡率下降明顯(P<0.05),與單用替米沙坦、羅格列酮比較,凋亡率下降減弱(P<0.05),提示替米沙坦無法逆轉(zhuǎn)PPAR-γ抑制后所致的凋亡率明顯上升。見表2。

    表2 7組HK-2細(xì)胞凋亡情況

    2.3HK-2細(xì)胞hUAT、PPAR-γ、COX-2、MCP-1、TGF-β1的表達(dá) 應(yīng)用PPAR-γ抑制劑聯(lián)合羅格列酮及替米沙坦,hUAT、PPAR-γmRNA表達(dá)增加(P<0.05),COX-2、MCP-1、TGF-β1mRNA表達(dá)減少,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05),與單用替米沙坦、羅格列酮比較,hUAT、PPAR-γ表達(dá)減少,COX-2、MCP-1、TGF-β1mRNA表達(dá)增加(均P<0.05)。提示替米沙坦無法逆轉(zhuǎn)PPAR-γ抑制后所致的hUAT、PPAR-γ表達(dá)減少,COX-2、MCP-1、TGF-β1mRNA表達(dá)增加。見表3。

    表3 7組HK-2細(xì)胞hUAT、PPAR-γ、COX-2、MCP-1、TGF-β1 mRNA的表達(dá)

    Tab.3 HUAT,PPAR-γ,COX-2,MCP-1 and TGF-β1 mRNA levels in seven groups of HK-2 cells

    表3 7組HK-2細(xì)胞hUAT、PPAR-γ、COX-2、MCP-1、TGF-β1 mRNA的表達(dá)

    組別hUATPPAR-γCOX-2MCP-1TGF-β1NC組1.00±0.071.00±0.191.00±0.371.00±0.131.00±0.07UM組0.19±0.25①0.17±0.02①3.65±0.9①4.07±0.55①5.35±0.33①UT組0.46±0.01②0.53±0.1②1.82±0.69②2.24±0.45②2.16±1.18②UR組0.46±0.04②0.83±0.13②1.47±0.31②2.51±0.67②1.99±0.67②UG組0.06±0.04①0.25±0.02①3.07±0.93①3.32±0.92①4.57±0.11①UTG組0.31±0.26③⑤0.5±0.02③⑤2.76±0.58③⑤3.2±0.71③⑤3.72±0.64③⑤URG組0.29±0.09④⑤0.38±0.05④⑤2.96±0.43④⑤3.04±0.89④⑤3.09±0.78④⑤F328.33659.3127.6576.69416.056P0.0000.0000.0010.0020.000

    ①與NC組比較,hUAT:t=-53.525,-421.549;PPAR-γ:t=-56.895,-62.681,COX-2:t=5.235,4.012,MCP-1:t=9.772,4.508,TGF-β1:t=22.846,56.010,P<0.05;②與UM組比較,hUAT:t=10.541,10.548;PPAR-γ:t=7.856,10.583,COX-2:t=-5.139,-5.412,MCP-1:t=-3.167,-5.706,TGF-β1:t=-5.726,-11.917,P<0.05;③與UT組比較,hUAT:t=-5.102;PPAR-γ:t=-3.562,COX-2:t=3.327,MCP-1:t=1.579,TGF-β1:t=4.120,P<0.05;④與UR組比較,hUAT:t=-66.732;PPAR-γ:t=-9.097,COX-2:t=7.431,MCP-1:t=3.036,TGF-β1:t=3.20,P<0.05;⑤與UG組比較,hUAT:t=8.513,16.234;PPAR-γ:t=13.650,7.184,COX-2:t=-3.720,-3.025,MCP-1:t=-3.106,-12.657,TGF-β1:t=-2.275,-3.325,P<0.05。

    ①Compared with NC group,hUAT:t=-53.525,-421.549;PPAR-γ:t=-56.895,-62.681,COX-2:t=5.235,4.012,MCP-1:t=9.772,4.508,TGF-β1:t=22.846,56.010,P<0.05;②Compared with UM group,hUAT:t=10.541,10.548;PPAR-γ:t=7.856,10.583.COX-2:t=-5.139,-5.412,MCP-1:t=-3.167,-5.706,TGF-β1:t=-5.726,-11.917,P<0.05;③Compared with UT group,hUAT:t=-5.102;PPAR-γ:t=-3.562,COX-2:t=3.327,MCP-1:t=1.579,TGF-β1:t=4.120,P<0.05;④Compared with UR group ,hUAT:t=-66.732;PPAR-γ:t=-9.097,COX-2:t=7.431,MCP-1:t=3.036,TGF-β1:t=3.20,P<0.05.⑤Compared with UG group,hUAT:t=8.513,16.234;PPAR-γ:t=13.650,7.184,COX-2:t=-3.720,-3.025,MCP-1:t=-3.106,-12.657,TGF-β1:t=-2.275,-3.325,P<0.05.

    2.4HK-2 hUAT、PPAR-γ 、COX-2、MCP-1、TGF-β1蛋白表達(dá) 應(yīng)用PPAR-γ抑制劑聯(lián)合羅格列酮及替米沙坦發(fā)現(xiàn),hUAT、PPAR-γ蛋白表達(dá)增加(P<0.05),COX-2、MCP-1、TGF-β1蛋白表達(dá)減少(P<0.05);與單用替米沙坦、羅格列酮比較,hUAT、PPAR-γ蛋白相對表達(dá)減少,COX-2、MCP-1、TGF-β1蛋白相對表達(dá)增加(P<0.05)。提示替米沙坦無法逆轉(zhuǎn)PPAR-γ抑制后所致hUAT、PPAR-γ蛋白表達(dá)減少,COX-2、MCP-1、TGF-β1蛋白表達(dá)增加。見圖1。

    1.NC組;2.UM組;3.UT組;4.UR組;5.UG組;6.UTG組;7.URG組。①與NC組比較,P<0.05;②與UM組比較,P<0.05;③與UT組比較,P<0.05;④與UR組比較,P<0.05;⑤與UG組,P<0.05。

    3 討論

    3.1尿酸性腎病腎間質(zhì)纖維化的病理生理機(jī)制 尿酸鹽刺激腎小管上皮細(xì)胞可以通過多種途徑介導(dǎo)腎間質(zhì)纖維化,如上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化[11-13]、自噬[5]、腎小管細(xì)胞凋亡[14]等,其中氧化應(yīng)激反應(yīng)[4]、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[12]為主要誘導(dǎo)機(jī)制。此外,尿酸鹽可破壞腎小管上皮細(xì)胞緊密連接蛋白的結(jié)構(gòu)、功能及分布異常,導(dǎo)致腎小管損傷[15]。TGF-β1是致纖維化因子,通過上調(diào)MCP-1,腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和IL-1β等的表達(dá)[16],誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng),影響小管細(xì)胞轉(zhuǎn)分化[17-18],抑制氧化應(yīng)激,可以減少細(xì)胞凋亡[19-20]。COX-2主要產(chǎn)生部位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和核膜,影響前列腺素的分泌,參與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,產(chǎn)生級聯(lián)炎癥反應(yīng)[21],減少炎癥及氧化損傷能抑制HK-2細(xì)胞凋亡[22-23]。本研究通過單鈉鹽刺激腎小管上皮細(xì)胞模型發(fā)現(xiàn),與正常HK-2細(xì)胞比較,模型組細(xì)胞凋亡率上升,TGF-β1、COX-2及MCP-1mRNA、蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng),提示存在腎間質(zhì)纖維化改變依據(jù)。

    3.2PPAR-γ表達(dá)、病理生理學(xué)意義及羅格列酮干預(yù)機(jī)制 PPAR-γ屬II型核受體超家族,與配基(或配體)結(jié)合后調(diào)節(jié)相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄。生理情況下,集合管強(qiáng)表達(dá),間質(zhì)細(xì)胞、腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和系膜細(xì)胞弱表達(dá)[24]。腎小管上皮細(xì)胞PPAR-γ表達(dá)活性降低,TGF-β1表達(dá)上調(diào)誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)[25-26],介導(dǎo)細(xì)胞凋亡[27],上調(diào)腎組織中PPAR-γ的表達(dá),降低MMP-9和TGF-β1水平,可以起到抗腎間質(zhì)纖維化的作用[28-30]。此外,激活PPAR-γ受體,可抑制促炎性遞質(zhì)(如IL-6、COX-2、MCP-1)的表達(dá)[1,31]。羅格列酮作為PPAR-γ受體激活劑,通過抑制過度的腎臟局部炎癥因子MCP-1分泌、抑制TLR/NF-KB信號通路激活、下調(diào)趨化因子表達(dá)[32-33],上調(diào)腎組織中PPAR-γmRNA及蛋白表達(dá),發(fā)揮腎臟保護(hù)作用[16,34]。本研究也觀察到UM組PPAR-γmRNA及蛋白表達(dá)明顯低于UT組,通過羅格列酮干預(yù)后,PPAR-γmRNA及蛋白表達(dá)上調(diào),而應(yīng)用PPAR-γ抑制劑后聯(lián)合羅格列酮治療,比較單用羅格列酮,PPAR-γmRNA及蛋白表達(dá)上調(diào)仍然偏低,提示單鈉鹽刺激HK-2細(xì)胞能下調(diào)PPAR-γmRNA及蛋白表達(dá),羅格列酮具有激活PPAR-γ受體作用。本項(xiàng)目是基于PPAR-γ受體通路進(jìn)行研究,而羅格列酮具有明確PPAR-γ受體激活作用,因此,選擇羅格列酮干預(yù)治療作為陽性對照進(jìn)行觀察,如能證明替米沙坦有相似或優(yōu)于羅格列酮的作用,則能進(jìn)一步證實(shí)替米沙坦具有PPAR-γ受體激活機(jī)制。

    3.3替米沙坦干預(yù)尿酸性腎病PPAR-γ表達(dá)立項(xiàng)依據(jù) 血管緊張素能下調(diào)PPAR-γ表達(dá),血管緊張素受體拮抗劑(angiotensin receptor blockers,ARB)能抑制這種作用[7],而且可以減輕HK-2細(xì)胞的凋亡和自噬[35]。早有研究表明,替米沙坦能夠部分激活PPAR-γ受體[36],這種作用不依賴血管緊張素II受體阻滯作用,臨床及實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)能上調(diào)組織中PPAR-γmRNA及蛋白表達(dá),對心梗后心力衰竭、肥胖相關(guān)腎病及5/6腎切除大鼠有保護(hù)作用[9,37-38]。在尿酸性腎病研究中,可以預(yù)防或恢復(fù)尿酸所致NADPH氧化酶/ERK1/2/ET-1途徑的腎小管損傷,并作為尿酸誘導(dǎo)腎纖維化的有前途的治療藥物試驗(yàn)證據(jù)[39]。陳艷梅等[10]通過動(dòng)物及細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn),替米沙坦可以調(diào)節(jié)hUAT蛋白表達(dá),發(fā)揮腎臟保護(hù)作用。但替米沙坦這種降尿酸、腎臟保護(hù)作用是否是通過PPAR-γ途徑來實(shí)現(xiàn),其具體機(jī)制如何?筆者目前還沒有見到相關(guān)報(bào)道,因此展開此項(xiàng)目研究,進(jìn)一步完善替米沙坦對尿酸性腎病的腎臟保護(hù)機(jī)制。

    3.4項(xiàng)目研究的意義 本研究建立尿酸鹽刺激腎小管上皮細(xì)胞模型發(fā)現(xiàn),腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)PPAR-γ減少,羅格列酮、替米沙坦均能上調(diào)PPAR-γ表達(dá),抑制PPAR-γ受體后給予羅格列酮、替米沙坦干預(yù),并不能逆轉(zhuǎn)PPAR-γ減少,因此論證替米沙坦具有羅格列酮相似激活PPAR-γ受體作用。進(jìn)一步對TGF-β1、MCP-1、COX-2、hUAT蛋白表達(dá)及凋亡率研究發(fā)現(xiàn),替米沙坦不能逆轉(zhuǎn)PPAR-γ受體抑制后TGF-β1、MCP-1、COX-2表達(dá)及凋亡率上升,不能使hUAT蛋白表達(dá)的減少。因此得出結(jié)論,替米沙坦具有類似羅格列酮激活PPAR-γ受體機(jī)制,可能通過PPAR-γ途徑調(diào)節(jié)腎小管細(xì)胞凋亡、減少氧化應(yīng)激及改善間質(zhì)纖維化而起到腎臟保護(hù)作用。

    猜你喜歡
    列酮羅格米沙坦
    曾擔(dān)任過12年國際奧委會(huì)主席的雅克·羅格逝世,享年79歲
    英語文摘(2021年11期)2021-12-31 03:25:24
    氫氯噻嗪聯(lián)合替米沙坦用于高血壓治療的有效性分析
    你看到的是美,我看到的是責(zé)任
    對不起
    金山(2016年9期)2016-10-12 14:22:23
    吡格列酮對肥胖小鼠血清抵抗素的影響及其對腎臟的作用
    吡格列酮對肥胖小鼠腎臟中TNF-α表達(dá)的影響
    替米沙坦對慢性腎臟病患者血清BMP-7的影響
    替米沙坦和纈沙坦治療原發(fā)性高血壓的臨床效果及最小成本分析
    吡格列酮對膀胱癌患者機(jī)體炎癥因子抑制作用的分析
    替米沙坦聯(lián)合卡維地洛治療充血性心力衰竭療效觀察
    亚洲精品乱码久久久久久按摩| 波野结衣二区三区在线| 精品亚洲成国产av| 精品视频人人做人人爽| 91精品一卡2卡3卡4卡| 欧美激情国产日韩精品一区| 男女免费视频国产| 最黄视频免费看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 桃花免费在线播放| 亚洲国产精品一区三区| 久久6这里有精品| 99九九在线精品视频 | 国产色婷婷99| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 国内揄拍国产精品人妻在线| 日韩av免费高清视频| 国产精品一区二区在线不卡| 男人和女人高潮做爰伦理| 国内精品宾馆在线| 亚洲人成网站在线播| 午夜影院在线不卡| 性高湖久久久久久久久免费观看| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 观看美女的网站| 亚洲综合精品二区| 国产视频内射| 日韩电影二区| 久久久久久久久久成人| 日韩av不卡免费在线播放| 日韩中字成人| 一级a做视频免费观看| 午夜福利视频精品| 日本黄色片子视频| 国产成人精品一,二区| 久久av网站| 欧美区成人在线视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久久国产一区二区| av在线播放精品| 亚洲精品国产成人久久av| 久久午夜福利片| 久久人人爽人人片av| videos熟女内射| 成人二区视频| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 久久 成人 亚洲| 婷婷色综合www| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 国产一区二区三区综合在线观看 | 国产精品秋霞免费鲁丝片| 777米奇影视久久| 日本爱情动作片www.在线观看| 国内精品宾馆在线| av黄色大香蕉| 国产在线免费精品| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 成人特级av手机在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 熟女人妻精品中文字幕| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲人成网站在线观看播放| 久久热精品热| 亚州av有码| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲成人一二三区av| 在线观看一区二区三区激情| 国产熟女欧美一区二区| 视频区图区小说| 欧美国产精品一级二级三级 | 亚洲第一av免费看| 国产免费又黄又爽又色| 色94色欧美一区二区| 这个男人来自地球电影免费观看 | 高清不卡的av网站| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 女性生殖器流出的白浆| 欧美bdsm另类| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产 精品1| 乱人伦中国视频| 中国美白少妇内射xxxbb| 天堂中文最新版在线下载| 国产欧美日韩综合在线一区二区 | 国产精品女同一区二区软件| 最近的中文字幕免费完整| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 下体分泌物呈黄色| videos熟女内射| 精品国产露脸久久av麻豆| 99热国产这里只有精品6| 国产亚洲最大av| 老司机影院成人| 91精品国产九色| 久久精品国产亚洲网站| 秋霞伦理黄片| 高清黄色对白视频在线免费看 | 老司机亚洲免费影院| 纯流量卡能插随身wifi吗| 看十八女毛片水多多多| 女人精品久久久久毛片| 欧美xxxx性猛交bbbb| 在线播放无遮挡| 亚洲成色77777| 久久99蜜桃精品久久| 精品久久久久久久久av| 春色校园在线视频观看| 久久久久久人妻| 97超碰精品成人国产| 久久这里有精品视频免费| 大香蕉久久网| 色网站视频免费| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 免费观看的影片在线观看| 香蕉精品网在线| 国产成人午夜福利电影在线观看| 在线观看av片永久免费下载| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产成人91sexporn| 国产黄片视频在线免费观看| 免费看av在线观看网站| a级片在线免费高清观看视频| 大话2 男鬼变身卡| 五月玫瑰六月丁香| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产深夜福利视频在线观看| 国产黄片美女视频| 我的老师免费观看完整版| 亚洲av.av天堂| 美女国产视频在线观看| 只有这里有精品99| 成人特级av手机在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| 伦理电影大哥的女人| 在线观看人妻少妇| av在线app专区| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 成年人免费黄色播放视频 | 午夜av观看不卡| 一边亲一边摸免费视频| 国产精品熟女久久久久浪| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 波野结衣二区三区在线| 一级毛片 在线播放| 日日摸夜夜添夜夜爱| 老司机亚洲免费影院| 新久久久久国产一级毛片| 黄色一级大片看看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲精品日韩av片在线观看| 十分钟在线观看高清视频www | 97精品久久久久久久久久精品| 高清在线视频一区二区三区| 成人免费观看视频高清| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产精品女同一区二区软件| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 在线播放无遮挡| 欧美精品人与动牲交sv欧美| a级毛片免费高清观看在线播放| 五月天丁香电影| 老女人水多毛片| 黄色日韩在线| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 校园人妻丝袜中文字幕| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲在久久综合| 一级,二级,三级黄色视频| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲人与动物交配视频| 最近的中文字幕免费完整| 丝袜脚勾引网站| 久久99一区二区三区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 午夜福利网站1000一区二区三区| 男女免费视频国产| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲伊人久久精品综合| 亚洲av.av天堂| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 免费大片18禁| 高清不卡的av网站| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 99久久综合免费| 简卡轻食公司| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲精品色激情综合| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 国产成人免费观看mmmm| 伊人亚洲综合成人网| 国产精品成人在线| 欧美少妇被猛烈插入视频| 春色校园在线视频观看| 国产一区有黄有色的免费视频| 高清视频免费观看一区二区| 国产精品无大码| 久久久久人妻精品一区果冻| 97精品久久久久久久久久精品| 国产精品国产av在线观看| 日韩av不卡免费在线播放| 久久影院123| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 97超碰精品成人国产| 街头女战士在线观看网站| 好男人视频免费观看在线| 午夜免费观看性视频| 视频区图区小说| 最近2019中文字幕mv第一页| 熟女电影av网| 91精品国产国语对白视频| 男人添女人高潮全过程视频| 日韩制服骚丝袜av| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产av国产精品国产| 精品久久久噜噜| 中文欧美无线码| 国产精品熟女久久久久浪| 免费看光身美女| 国产精品无大码| 国产免费一区二区三区四区乱码| 日韩精品免费视频一区二区三区 | av播播在线观看一区| 久久6这里有精品| 99久久人妻综合| 国产精品一区二区在线观看99| 极品人妻少妇av视频| 综合色丁香网| 亚洲人成网站在线播| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 综合色丁香网| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲天堂av无毛| 精品一区在线观看国产| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 一级二级三级毛片免费看| 99视频精品全部免费 在线| 黄色视频在线播放观看不卡| 色视频www国产| 少妇精品久久久久久久| 午夜免费观看性视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 久久热精品热| 国产成人91sexporn| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 日日爽夜夜爽网站| 一二三四中文在线观看免费高清| 美女福利国产在线| 日本欧美国产在线视频| 99久国产av精品国产电影| 午夜精品国产一区二区电影| 男女国产视频网站| 国产一区二区在线观看av| 亚洲综合色惰| 久久久国产一区二区| 高清不卡的av网站| 高清欧美精品videossex| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 欧美+日韩+精品| 亚洲欧洲国产日韩| 老司机亚洲免费影院| 久久久欧美国产精品| 哪个播放器可以免费观看大片| 嫩草影院入口| 国产免费又黄又爽又色| 深夜a级毛片| 午夜福利视频精品| 日本欧美视频一区| 这个男人来自地球电影免费观看 | av国产久精品久网站免费入址| 免费少妇av软件| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 丝袜在线中文字幕| 男女免费视频国产| 色视频在线一区二区三区| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲av欧美aⅴ国产| 偷拍熟女少妇极品色| 国产深夜福利视频在线观看| 老司机影院毛片| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产乱来视频区| 国产成人精品福利久久| 中国三级夫妇交换| 久久精品夜色国产| 亚洲中文av在线| 久久久久久伊人网av| 久久国内精品自在自线图片| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产乱来视频区| 国产av码专区亚洲av| 久久国产乱子免费精品| 丰满少妇做爰视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 日本av免费视频播放| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 老熟女久久久| 精品国产露脸久久av麻豆| 人人妻人人澡人人看| 日本欧美国产在线视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 久久精品久久久久久久性| 国产伦理片在线播放av一区| av免费在线看不卡| 99热全是精品| 国产男女超爽视频在线观看| 丰满迷人的少妇在线观看| 又爽又黄a免费视频| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 插阴视频在线观看视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 欧美精品亚洲一区二区| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚州av有码| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲成色77777| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲第一av免费看| 亚洲国产av新网站| 十八禁高潮呻吟视频 | av线在线观看网站| 日韩制服骚丝袜av| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲国产av新网站| 亚洲不卡免费看| 观看av在线不卡| 久久精品久久久久久久性| 国产精品国产三级专区第一集| 最近2019中文字幕mv第一页| freevideosex欧美| 欧美xxxx性猛交bbbb| 免费观看在线日韩| 老司机影院成人| 欧美xxⅹ黑人| 老司机影院成人| 国产免费福利视频在线观看| 老司机亚洲免费影院| 欧美xxⅹ黑人| a 毛片基地| 国产成人精品无人区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 伊人亚洲综合成人网| 国产淫片久久久久久久久| 国产免费一级a男人的天堂| 一本一本综合久久| 人妻夜夜爽99麻豆av| 99久久精品国产国产毛片| 全区人妻精品视频| 99久久精品国产国产毛片| 免费观看av网站的网址| 亚洲av免费高清在线观看| 制服丝袜香蕉在线| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国国产精品蜜臀av免费| 成人午夜精彩视频在线观看| 男女国产视频网站| 高清视频免费观看一区二区| 日日爽夜夜爽网站| 黑丝袜美女国产一区| 人妻人人澡人人爽人人| 久久人妻熟女aⅴ| 午夜福利影视在线免费观看| 永久网站在线| 国产黄色视频一区二区在线观看| 亚洲精品视频女| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 午夜日本视频在线| 久久99热6这里只有精品| 久久99蜜桃精品久久| 免费看av在线观看网站| 国产欧美日韩综合在线一区二区 | 国产精品.久久久| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 欧美精品国产亚洲| 高清毛片免费看| 国产极品天堂在线| 亚洲四区av| 免费看不卡的av| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 午夜激情福利司机影院| 久久国产精品大桥未久av | 成人亚洲精品一区在线观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久婷婷青草| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲真实伦在线观看| 热99国产精品久久久久久7| 一个人免费看片子| 精品久久久久久久久亚洲| 国产视频内射| 久久热精品热| 大香蕉97超碰在线| av有码第一页| 我要看日韩黄色一级片| 日韩电影二区| 中国三级夫妇交换| 99久久人妻综合| 看非洲黑人一级黄片| 三级国产精品片| 国产精品国产三级专区第一集| 国产黄色视频一区二区在线观看| 黑丝袜美女国产一区| 免费大片18禁| 人妻 亚洲 视频| 婷婷色综合大香蕉| 久久人人爽人人片av| 天天操日日干夜夜撸| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 看免费成人av毛片| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 老熟女久久久| 日本午夜av视频| 久久人人爽人人片av| 伊人亚洲综合成人网| 99久国产av精品国产电影| h日本视频在线播放| 高清不卡的av网站| 久久久久久久久久成人| 久久ye,这里只有精品| 国产高清三级在线| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 晚上一个人看的免费电影| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国产在线男女| 啦啦啦在线观看免费高清www| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲av欧美aⅴ国产| 毛片一级片免费看久久久久| 在线观看免费视频网站a站| xxx大片免费视频| 97在线人人人人妻| av福利片在线| 久久人人爽人人片av| 久久久久久久久久久久大奶| 中文字幕av电影在线播放| 人人妻人人看人人澡| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久久久久久国产电影| 免费人妻精品一区二区三区视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲欧美清纯卡通| 久久久国产精品麻豆| 校园人妻丝袜中文字幕| 久久av网站| 亚洲成色77777| a级毛片在线看网站| 国产成人免费无遮挡视频| 国产伦在线观看视频一区| 午夜久久久在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲综合色惰| 日本91视频免费播放| av免费在线看不卡| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产欧美日韩综合在线一区二区 | 免费大片黄手机在线观看| 久久ye,这里只有精品| 亚洲人成网站在线观看播放| 多毛熟女@视频| 成人午夜精彩视频在线观看| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 精品一区二区三区视频在线| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 18禁在线播放成人免费| 久久av网站| 天美传媒精品一区二区| 久久久欧美国产精品| 精品一区在线观看国产| 久久毛片免费看一区二区三区| 欧美国产精品一级二级三级 | av天堂久久9| 少妇的逼水好多| 桃花免费在线播放| a级毛色黄片| 日日啪夜夜撸| 日韩亚洲欧美综合| 看免费成人av毛片| 一级二级三级毛片免费看| 伦精品一区二区三区| av天堂久久9| 精品亚洲成a人片在线观看| 成人国产av品久久久| 在线播放无遮挡| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 精品久久久噜噜| 国产精品人妻久久久影院| 日韩视频在线欧美| 高清av免费在线| 美女中出高潮动态图| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 亚洲美女视频黄频| 免费黄网站久久成人精品| 日韩中字成人| 亚洲人成网站在线播| 欧美bdsm另类| 国产91av在线免费观看| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 日韩亚洲欧美综合| 国产免费一级a男人的天堂| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲av日韩在线播放| 老司机亚洲免费影院| 制服丝袜香蕉在线| 色婷婷久久久亚洲欧美| 三级国产精品欧美在线观看| 国产在视频线精品| 免费观看在线日韩| 国产精品熟女久久久久浪| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 美女cb高潮喷水在线观看| 插逼视频在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 香蕉精品网在线| 久久99精品国语久久久| 少妇 在线观看| 在线观看av片永久免费下载| 少妇人妻精品综合一区二区| 久久热精品热| 一级黄片播放器| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产美女午夜福利| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 欧美xxxx性猛交bbbb| av在线观看视频网站免费| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 欧美精品一区二区大全| 曰老女人黄片| a级毛片在线看网站| 国产黄色视频一区二区在线观看| 久久久午夜欧美精品| 在线免费观看不下载黄p国产| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲精品成人av观看孕妇| 中文天堂在线官网| 在线 av 中文字幕| 久久国产精品大桥未久av | 九草在线视频观看| 青青草视频在线视频观看| 黄色配什么色好看| 99久久综合免费| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲av欧美aⅴ国产| 麻豆成人午夜福利视频| 日韩欧美 国产精品| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲一区二区三区欧美精品| 性色av一级| 又大又黄又爽视频免费| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 人人妻人人澡人人看| 久久精品国产a三级三级三级| 大码成人一级视频| 免费看不卡的av| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 蜜桃在线观看..| 精品少妇久久久久久888优播| www.av在线官网国产| 在线观看免费高清a一片| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 中文欧美无线码| 高清在线视频一区二区三区| 午夜激情久久久久久久| 亚洲欧美成人精品一区二区| 91精品国产国语对白视频| 精品少妇黑人巨大在线播放| 一区二区三区免费毛片| 久久久久久久久久久久大奶| 美女视频免费永久观看网站| 久久久久久伊人网av| 两个人免费观看高清视频 | 欧美人与善性xxx| 亚洲色图综合在线观看| 免费观看av网站的网址| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 日韩精品有码人妻一区| 国产色婷婷99| 一级二级三级毛片免费看| .国产精品久久| 下体分泌物呈黄色| 日本午夜av视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 女性生殖器流出的白浆| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲熟女精品中文字幕| av在线老鸭窝| 久久ye,这里只有精品|