• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材指紋圖譜的建立、分析及差異成分的含量測定

    2021-09-22 06:55肖丹范東生劉星孔毅雪錦菁高源
    中國藥房 2021年17期
    關(guān)鍵詞:指紋圖譜高效液相色譜含量測定

    肖丹 范東生 劉星 孔毅 雪錦菁 高源

    中圖分類號 R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408(2021)17-2085-06

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.17.07

    摘 要 目的:建立不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材的指紋圖譜,并進(jìn)行化學(xué)計量學(xué)分析和差異成分的含量測定,為鐵線蕨藥材質(zhì)量控制提供參考。方法:采用高效液相色譜-二極管陣列檢測器法(HPLC-DAD)檢測并結(jié)合《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》(2004A版)建立19批不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材(S1~S19)的指紋圖譜,同時進(jìn)行共有峰指認(rèn)和相似度評價。采用聚類分析、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA)等化學(xué)計量學(xué)分析方法對19批不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材的質(zhì)量進(jìn)行評價,篩選差異成分,并對部分差異成分進(jìn)行含量測定。結(jié)果:19批不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材中,共確定22個共有峰,并指認(rèn)了9號峰為綠原酸、17號峰為槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、20號峰為山柰酚-3-O-蕓香糖苷;19批藥材的相似度為0.530~0.962。經(jīng)聚類分析發(fā)現(xiàn),S7、S10聚為一類,S15、S18聚為一類,S1~S6、S8、S9、S11~S14、S16、S17、S19聚為一類;經(jīng)PCA、OPLS-DA發(fā)現(xiàn),S7、S10聚為一類,S15為一類,S18為一類,S1~S6、S8、S9、S11~S14、S16、S17、S19聚為一類;篩選出綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷以及14號峰所代表的化學(xué)成分為該藥材的差異成分。19批鐵線蕨藥材中,綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸和山柰酚-3-O-蕓香糖苷的平均含量分別為0.10~4.25、0.31~7.11、0.61~12.00 mg/g。結(jié)論:本研究建立了不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材的HPLC-DAD指紋圖譜,指認(rèn)了3個共有峰;篩選出了4個影響鐵線蕨藥材質(zhì)量的差異成分,其中綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷在不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材中的含量差異明顯。

    關(guān)鍵詞 鐵線蕨; 高效液相色譜-二極管陣列檢測器;指紋圖譜;化學(xué)計量學(xué)分析;差異成分;含量測定

    Establishment and Analysis of the Fingerprints of Adiantum capillusveneris from Different Producing Areas and Content Determination of Its Differential Components

    XIAO Dan1,F(xiàn)AN Dongsheng2,LIU Xing1,KONG Yi1,XUE Jinjing1,GAO Yuan1(1. Guizhou Provincial Institute for Food Inspection, Guiyang 550004, China; 2. Dept. of Pharmacy, the First Affiliated Hospital of Guizhou University of TCM, Guiyang 550001, China)

    ABSTRACT? ?OBJECTIVE: To establish the fingerprint of Adiantum capillusveneris from different producing areas, and to conduct chemometric analysis and content determination of differential components, so as to provide reference for quality control of A. capillusveneris. METHODS: HPLC-DAD combined with Similarity Evaluation System of TCM Chromatogramtic Fingerprint (2004 A edition) were used to establish fingerprint of 19 batches of A. capillusveneris from different producing areas (S1-S19). Common peaks were confirmed and their similarities were evaluated. Chemometric analysis methods such as cluster analysis, principle component analysis (PCA), orthogonal partial least squares discriminant analysis (OPLS-DA) were used to evaluate the quality of 19 batches of A. capillusveneris from different producing areas, screen the differential components, and determine the contents of some differential components. RESULTS: Among 19 batches of A. capillusveneris from different producing areas, 22 common peaks were confirmed; peak 9 was chlorogenic acid, peak 17 was quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside, peak 20 was kaempferol-3-O-rutoside; the similarity of 19 batches of sample were 0.677-0.962. Through cluster analysis, it was found that S7 and S10 were clustered into one category; S15 and S18 were clustered into one category; and S1-S6, S8, S9, S11-S14, S16, S17 and S19 were clustered into one category. PCA and OPLS-DA found that S7 and S10 were clustered into one category; S15 were clustered into one category; S18 were clustered into one category; S1-S6, S8, S9, S11-S14, S16, S17 and S19 were clustered into one category. Chlorogenic acid, quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside, kaempferol-3-O-rutoside and chemical composition represented by peak 14 were the differential components of the medicinal material. Among 19 batches of A. capillusveneris,? average contents of chlorogenic acid and quercetin-3-O-β-D- glucopyranoside and kaempferol-3-O-rutoside were 0.10-4.25, 0.31-7.11, 0.61-12.00 mg/g, respectively. CONCLUSIONS: HPLC-DAD fingerprints of A. capillusveneris from different producing areas are established in the study, and three common peaks are identified. Four differential components affecting the quality of A. capillusveneris are screened, and the contents of chlorogenic acid, quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside and kaempferol-3-O-rutoside in A. capillusveneris from different producing areas were significantly different.

    KEYWORDS? ?Adiantum capillusveneris; HPLC-DAD; Fingerprint; Chemometric analysis; Differential component; Content determination

    鐵線蕨為鐵線蕨科鐵線蕨屬植物Adiantum capillusveneris L.的新鮮或干燥全草,是貴州少數(shù)民族常用藥材之一;其原植物廣泛分布于貴州、湖北、河北等地,主要生長于流水溪旁石灰?guī)r上、石灰?guī)r洞底或滴水巖壁上,為鈣質(zhì)土的指示植物[1]。研究發(fā)現(xiàn),鐵線蕨具有清熱解毒、利濕消腫、利尿通淋的功效,也具有良好的抗菌、抗癌、抗氧化等藥理作用[2]。目前,以鐵線蕨藥材為主藥的成方制劑已被用于治療前列腺炎或前列腺增生等疾病[3]。由于鐵線蕨藥材來源較多,雖然該藥材已收載于2003年版《貴州中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中,但缺乏對不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材的質(zhì)量控制及其主要成分的定量研究,導(dǎo)致其質(zhì)量控制較為困難[4];且該藥材并未收載于2020年版《中國藥典》中,缺乏權(quán)威的質(zhì)量控制方法。因此,有必要對不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材進(jìn)行質(zhì)量控制。

    基于此,本研究收集了19批不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材,采用高效液相色譜-二極管陣列檢測器法(HPLC-DAD)建立不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材的指紋圖譜,并進(jìn)行化學(xué)計量學(xué)分析及差異成分的含量測定,以期為鐵線蕨藥材的質(zhì)量控制提供參考。

    1 材料

    1.1 主要儀器

    本研究所用主要儀器有:XS205DU型電子天平(瑞士Mettler Toledo公司)、KQ500-DA型超聲儀(昆山市超聲儀有限公司)、DK98-ⅡA型電熱恒溫水浴鍋(天津泰斯特儀器有限公司)、E2695型HPLC儀(美國Waters公司)。

    1.2 主要藥品與試劑

    本研究所用鐵線蕨藥材(編號S1~S19)采自貴州、湖北、河北等地(藥材樣品來源詳見表1),經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥用植物教研室吳之坤副教授鑒定為鐵線蕨科鐵線蕨屬植物A. capillus-veneris L.的新鮮或干燥全草;所有鐵線蕨藥材經(jīng)自然晾曬后,粉碎過四號篩備用。其他藥品與試劑有:綠原酸對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號110753-201817,純度96.8%),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸對照品、山柰酚-3-O-蕓香糖苷對照品(成都普思生物科技股份有限公司,批號分別為MUST-19052825、MUST-19041507,純度均大于98%);甲醇為色譜純,其余試劑為分析純,水為超純水。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 色譜條件

    色譜柱為SHISEIDO CAPCELL PAK C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相為甲醇(A)-0.05%磷酸溶液(B),梯度洗脫(0~10 min,5%A;10~20 min,5%A→20%A;20~60 min,20%A → 40% A;60~75 min,40%A→50%A;75~85 min,50%A→100%A;85~95 min,100%A;95~96 min,100%A →5%A;96~110 min,5%A);流速為1 mL/min;柱溫為35 ℃;二極管陣列檢測器波長為280 nm;進(jìn)樣量為20 μL。

    2.2 不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材的HPLC-DAD指紋圖譜的建立

    2.2.1 供試品溶液的制備 取鐵線蕨藥材粉末1.0 g,精密稱定,置于100 mL具塞錐形瓶中,加入80%甲醇50 mL,加熱回流提取60 min;趁熱過濾,濾液于80 ℃水浴條件下濃縮至浸膏狀;取浸膏,以80%甲醇溶解并定容至10 mL,經(jīng)0.45 μm的微孔濾膜濾過后,即得供試品溶液。

    2.2.2 單一對照品溶液的制備 分別精密稱定綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷的對照品各適量,置于10 mL量瓶中,加80%甲醇溶解并定容,制成質(zhì)量濃度分別為1.001、1.100、1.017 mg/mL的單一對照品溶液。

    2.2.3 混合對照品溶液的制備 分別精密量取“2.2.2”項下單一對照品溶液各適量,置于同一50 mL量瓶中,加80%甲醇定容,搖勻,即得含綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷的質(zhì)量濃度分別為 0.100 1、0.110 0、0.101 7 mg/mL的混合對照品溶液。

    2.2.4 精密度試驗 取鐵線蕨藥材粉末(編號S9)適量,按“2.2.1”項下方法制備供試品溶液,再按“2.1”項下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測定6次,記錄色譜圖。以12號峰(該峰保留時間居中、峰形較好且峰面積穩(wěn)定,下同)為參照峰,計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果顯示,各共有峰相對保留時間的RSD為0.01%~0.26%,相對保留峰面積的RSD為0.30%~2.98%,均小于3%(n=6),表明儀器精密度良好。

    2.2.5 穩(wěn)定性試驗 取鐵線蕨藥材粉末(編號S9)適量,按“2.2.1”項下方法制備供試品溶液后,分別于室溫下放置0、2、4、8、24、48 h時,再按“2.1”項下色譜條件進(jìn)樣分析,記錄色譜圖。以12號峰為參照峰,計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果顯示,各共有峰相對保留時間的RSD為0.01%~0.21%,相對保留峰面積的RSD為1.00%~2.98%,均小于3%(n=6),表明供試品溶液在室溫下放置48 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.2.6 重復(fù)性試驗 取鐵線蕨藥材粉末(編號S9)適量,按“2.2.1”項下方法平行制備6份供試品溶液,再按“2.1”項下色譜條件進(jìn)樣分析,記錄色譜圖。以12號峰為參照峰,計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果顯示,各共有峰相對保留時間的RSD為0.01%~0.26%,相對保留峰面積的RSD為2.06%~2.99%,均小于3%(n=6),表明該方法重復(fù)性良好。

    2.2.7 鐵線蕨藥材指紋圖譜的生成 取19批鐵線蕨藥材粉末適量,按“2.2.1”項下方法制備供試品溶液,再按“2.1”項色譜條件進(jìn)樣分析,記錄色譜圖。采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》(2004A版),以樣品S8的圖譜為參照圖譜(該圖譜的色譜峰峰形較好),設(shè)定時間窗寬度為0.3 s,采用多點(diǎn)校正的方法和平均數(shù)圖譜生成法,對19批鐵線蕨藥材的指紋圖譜進(jìn)行數(shù)據(jù)整合,生成19批鐵線蕨藥材的疊加指紋圖譜和對照指紋圖譜R,詳見圖1、圖2。

    2.2.8 共有峰指認(rèn) 取“2.2.3”項下混合對照品溶液,按“2.1”項下色譜條件進(jìn)樣分析,記錄色譜圖,詳見圖3。由圖2和圖3比對可知,19批鐵線蕨藥材共有22個共有峰,其中 9號峰為綠原酸、17號峰為槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、20號峰為山柰酚-3-O-蕓香糖苷。

    2.2.9 相似度評價 將19批鐵線蕨藥材的HPLC-DAD指紋圖譜導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》(2004A版)進(jìn)行相似度評價。結(jié)果顯示,19批鐵線蕨藥材的相似度范圍為0.530~0.962,表明不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材間的成分存在一定差異,詳見表2。

    2.3 化學(xué)計量學(xué)分析

    2.3.1 聚類分析 將19批鐵線蕨藥材22個共有峰的相對峰面積導(dǎo)入SPSS 26.0軟件,采用組間連接法,以平方歐氏距離作為樣品的測度進(jìn)行聚類分析[5],詳見圖4。由圖4可知,19批鐵線蕨藥材可聚為3類:S7、S10聚為一類,S15、S18聚為一類,S1~S6、S8、S9、S11~S14、S16、S17、S19聚為一類。

    2.3.2 主成分分析(PCA) 將19批鐵線蕨藥材的22個共有峰的相對峰面積導(dǎo)入SIMCA 14.1軟件中,采用非監(jiān)督模式識別法進(jìn)行PCA[6],并繪制PCA得分散點(diǎn)圖,詳見圖5。由圖5可知,19批鐵線蕨藥材樣品可聚為4類:S7、S10聚為一類,S15為一類,S18為一類,S1~S6、S8、S9、S11~S14、S16、S17、S19聚為一類。

    2.3.3 正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA) 為更好地反映19批鐵線蕨藥材的成分差異,筆者基于PCA結(jié)果,采用監(jiān)督模式識別法進(jìn)行OPLS-DA,并繪制OPLS-DA模型得分圖,詳見圖6。由圖6可知,19批鐵線蕨藥材樣品可聚為4類,與PCA結(jié)果一致。另外,OPLS-DA模型中的擬合參數(shù)R2X=0.854,R2Y=0.918,模型預(yù)測參數(shù)(Q2)=0.776,均大于0.5,表明所建立的模型穩(wěn)定且預(yù)測能力較強(qiáng)[6]。以模型變量投影重要性(VIP)值>1為指標(biāo)篩選19批鐵線蕨藥材的差異成分[6],結(jié)果詳見圖7。由圖7可知,9號峰(綠原酸)、17號峰(槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸)、20號峰(山柰酚-3-O-蕓香糖苷)和14號峰所代表的化學(xué)成分為19批鐵線蕨藥材的差異成分。

    2.4 鐵線蕨藥材中3種差異成分的含量測定

    根據(jù)化學(xué)計量學(xué)分析結(jié)果,選擇已指認(rèn)出的3種差異成分(綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷)為指標(biāo),采用HPLC-DAD法進(jìn)行含量測定。

    2.4.1 色譜條件 筆者在進(jìn)行鐵線蕨藥材差異成分含量測定研究時發(fā)現(xiàn),若采用“2.1”項下色譜條件,會導(dǎo)致分析時間較長、各成分分離度較差。故筆者在原色譜條件基礎(chǔ)上,調(diào)整梯度洗脫程序為甲醇(A)-0.05%磷酸水溶液(B)(0~30 min,30%A→48%A)。

    2.4.2 專屬性試驗 取“2.2.1”“2.2.3”項下供試品溶液、混合對照品溶液和空白溶液(即溶劑80%甲醇)適量,按“2.4.1”項下調(diào)整后的色譜條件進(jìn)樣分析,記錄色譜圖。結(jié)果顯示,空白溶液不干擾綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷的測定,說明該方法專屬性良好,詳見圖8。

    2.4.3 線性關(guān)系考察 分別精密吸取“2.2.2”項下單一對照品溶液適量,置于同一10 mL量瓶,加80%甲醇定容至刻度,制成同時含綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷的系列線性工作溶液,按“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣分析,記錄色譜圖。以待測成分的質(zhì)量濃度(x,mg/mL)為橫坐標(biāo)、峰面積(y)為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。結(jié)果,上述3種待測成分的回歸方程分別為y=1 308 445x-7 632(R2=0.995 5)、y=724 515x-38 962(R2=0.997 1)、y=806 074x-22 310(R2=0.998 1),檢測質(zhì)量濃度線性范圍分別為10.0~200.2、11.0~220.0、10.2~203.4 μg/mL。

    2.4.4 精密度試驗 取鐵線蕨藥材粉末(編號S9)適量,按“2.2.1”項下方法制備供試品溶液,再按“2.4.1”項下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測定6次,記錄峰面積。結(jié)果顯示,綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷峰面積的RSD分別為0.87%、1.12%、0.29%(n=6),表明儀器精密度良好。

    2.4.5 重復(fù)性試驗 取鐵線蕨藥材粉末(編號S9)適量,按“2.2.1”項下方法平行制備6份供試品溶液,再按“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算待測成分含量。結(jié)果,綠原酸、槲皮素-3-O-β- D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷的平均含量分別為1.483 4、1.218 9、3.542 6 mg/g,RSD分別為1.49%、2.83%、2.56%(n=6),表明該方法重復(fù)性良好。

    2.4.6 穩(wěn)定性試驗 取鐵線蕨藥材粉末(編號S9)適量,按“2.2.1”項下方法制備供試品溶液,分別于室溫下放置0、2、4、8、24、48 h時,再按“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積。結(jié)果顯示,綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷峰面積的RSD分別為1.61%、2.70%、0.87%(n=6),表明供試品溶液在室溫下放置48 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.4.7 加樣回收率試驗 取已知成分含量的鐵線蕨藥材粉末(編號S9)9份,每份0.5 g,分為3組;分別按待測成分已知含量的80%、100%、120%分組加入單一對照品,按“2.2.1”項下方法制備供試品溶液,再按“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積并計算加樣回收率,結(jié)果見表3。

    2.4.8 樣品含量測定 取 19批鐵線蕨藥材粉末1.0 g,精密稱定,按“2.2.1”項下方法制備供試品溶液,再按“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算樣品含量。平行操作2次,取平均值。結(jié)果顯示,19批鐵線蕨藥材中綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷的平均含量分別為0.10~4.25、0.31~7.11、0.61~12.00 mg/g,詳見表4。由表4可見,不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材中上述3種成分的含量差異明顯。

    3 討論

    本研究的前期預(yù)實(shí)驗考察了不同體積分?jǐn)?shù)提取溶劑(25%、50%、80%、100%甲醇)、不同提取時間(30、60、90、120 min)等因素對鐵線蕨藥材供試品溶液制備的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),以80%甲醇加熱回流提取60 min的條件最優(yōu);同時,考察了不同柱溫(25、30、35 ℃)、不同流速(0.8、1.0、1.2 mL/min)和不同流動相系統(tǒng)[水-甲醇、水-乙腈、甲醇-0.05%磷酸溶液、甲醇-0.1%磷酸溶液]對HPLC-DAD色譜圖的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),當(dāng)流動相為甲醇(A)-0.05%磷酸溶液(B)、流速為1 mL/min、柱溫為35 ℃時的色譜條件最優(yōu)。本研究建立了鐵線蕨藥材的HPLC-DAD指紋圖譜,共確定了22個共有峰,并指認(rèn)出9號峰為綠原酸、17號峰為槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、20號峰為山柰酚-3-O-蕓香糖苷;相似度評價結(jié)果顯示,不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材的相似度為0.530~0.962,表明不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材的成分差異較大,其原因可能與該藥材產(chǎn)地環(huán)境差異有關(guān)。

    化學(xué)計量學(xué)分析可解析和發(fā)掘中藥材指紋圖譜中的特征信息,建立有效的鑒定模型[7]。本文采用該方法分析,識別了不同產(chǎn)地藥材的聚類相關(guān)性,篩選出主要影響藥材質(zhì)量的差異成分,對提升藥材質(zhì)量具有重要意義。經(jīng)聚類分析發(fā)現(xiàn),19批鐵線蕨藥材可聚為3類,其中S7、S10聚為一類,S15、S18聚為一類,S1~S6、S8、S9、S11~S14、S16、S17、S19聚為一類;經(jīng)PCA、OPLS-DA發(fā)現(xiàn),19批鐵線蕨藥材可聚為4類,其中S7、S10聚為一類,S15為一類,S18為一類,S1~S6、S8、S9、S11~S14、S16、S17、S19聚為一類;篩選得出9號峰(綠原酸)、17號峰(槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸)、20號峰(山柰酚-3-O-蕓香糖苷)以及14號峰所代表的化學(xué)成分為該藥材的差異成分。為進(jìn)一步評價鐵線蕨藥材質(zhì)量,筆者又對上述3種已指認(rèn)成分進(jìn)行了定量分析。結(jié)果顯示,19批鐵線蕨藥材中綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷的平均含量分別為0.10~4.25、0.31~7.11、0.61~12.00 mg/g,表明不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材中上述3種成分的含量差異明顯。

    綜上所述,本研究建立了不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材的HPLC-DAD指紋圖譜,共指認(rèn)了3個共有峰;篩選出了4個影響鐵線蕨藥材質(zhì)量的差異成分,其中綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷在不同產(chǎn)地鐵線蕨藥材中的含量差異明顯,可為鐵線蕨藥材質(zhì)量控制提供參考。

    參考文獻(xiàn)

    [ 1 ] 高源,方燦,彭源,等.苗藥豬鬃草研究進(jìn)展綜述[J].海峽藥學(xué),2020,32(1):42-45.

    [ 2 ] 汪金梅,于旭東,蔡澤坪,等.鐵線蕨屬植物的研究進(jìn)展[J].分子植物育種,2019,17(1):255-263.

    [ 3 ] 何偉,孫自學(xué),王光策. 磁振磁電治療儀聯(lián)合前列倍喜膠囊治療慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛綜合征的臨床療效觀察[J]. 中華男科學(xué)雜志,2020,26(5):452-456.

    [ 4 ] 貴州省市場監(jiān)督管理局.貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[S]. 2003年版.貴陽:貴州科技出版社,2003:347.

    [ 5 ] 楊浩.基于SPSS的聚類分析在行業(yè)統(tǒng)計數(shù)據(jù)中的應(yīng)用[D].長春:吉林大學(xué),2013.

    [ 6 ] 徐鋒,楊瀾,成婷婷,等.地瓜藤的UPLC指紋圖譜建立及聚類分析、主成分分析[J].中國藥房,2019,30(24):3388-3392.

    [ 7 ] 荊文光,張權(quán),鄧哲,等.指紋圖譜、多成分定量與化學(xué)計量學(xué)相結(jié)合的厚樸藥材質(zhì)量評價[J].中國中藥雜志,2019,44(5):975-982.

    (收稿日期:2021-04-18 修回日期:2021-07-19)

    (編輯:唐曉蓮)

    猜你喜歡
    指紋圖譜高效液相色譜含量測定
    栽培黃芩與其對照藥材的HPLC指紋圖譜及近紅外圖譜比較研究
    中藥譜效學(xué)在中藥質(zhì)量評價中的應(yīng)用概況
    HPLC法測定不同產(chǎn)地爬山虎莖中白藜蘆醇的含量
    山苓祛斑凝膠劑提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
    空氣中氧氣含量測定實(shí)驗的改進(jìn)與拓展
    高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法測定檳榔中9種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留
    高效液相色譜—二極管陣列檢測器法測定膠囊殼中20種禁用工業(yè)染料
    基于高分離度和高色譜峰純度的紅參UPLC指紋圖譜研究
    高效液相色譜概述及其在藥品檢驗中的應(yīng)用
    金銀花SSR指紋圖譜的構(gòu)建及遺傳多樣性分析
    2021少妇久久久久久久久久久| 成年版毛片免费区| 欧美又色又爽又黄视频| 成人特级av手机在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 特大巨黑吊av在线直播| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 国产中年淑女户外野战色| 久久人妻av系列| 国产探花极品一区二区| 中文欧美无线码| 一边亲一边摸免费视频| 最后的刺客免费高清国语| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产在线男女| 中文天堂在线官网| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 午夜福利在线观看吧| 久久精品国产亚洲网站| 欧美变态另类bdsm刘玥| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产精品一及| 毛片女人毛片| 国产成人精品一,二区| 亚洲成色77777| 国产三级中文精品| 久久久精品94久久精品| 少妇熟女欧美另类| 中文资源天堂在线| 村上凉子中文字幕在线| 18禁在线播放成人免费| 日本黄色片子视频| 不卡视频在线观看欧美| 美女大奶头视频| 一级毛片电影观看 | 黄色配什么色好看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 免费搜索国产男女视频| 如何舔出高潮| 搞女人的毛片| 国产一区二区在线观看日韩| 性插视频无遮挡在线免费观看| 色视频www国产| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 日韩av在线免费看完整版不卡| 长腿黑丝高跟| 熟女人妻精品中文字幕| 免费av观看视频| 久久久久久九九精品二区国产| 美女黄网站色视频| av国产久精品久网站免费入址| 中文字幕制服av| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 亚洲电影在线观看av| 国产午夜福利久久久久久| 我的老师免费观看完整版| 国产精品综合久久久久久久免费| 深夜a级毛片| 91av网一区二区| 看非洲黑人一级黄片| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 18禁动态无遮挡网站| 国产91av在线免费观看| 国产成人精品一,二区| 99久久精品一区二区三区| 99热精品在线国产| 国产毛片a区久久久久| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 人体艺术视频欧美日本| 免费看a级黄色片| 少妇人妻一区二区三区视频| 日韩大片免费观看网站 | 最近最新中文字幕大全电影3| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 黑人高潮一二区| 最近手机中文字幕大全| 亚洲在线观看片| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 成人性生交大片免费视频hd| 高清视频免费观看一区二区 | 日本五十路高清| 床上黄色一级片| 久久久国产成人免费| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 日本五十路高清| 18禁在线播放成人免费| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲色图av天堂| 精品一区二区免费观看| 人妻少妇偷人精品九色| 国产探花极品一区二区| 亚洲av.av天堂| 久久久久九九精品影院| 午夜视频国产福利| 亚洲精品日韩av片在线观看| av国产久精品久网站免费入址| 国产av一区在线观看免费| 人体艺术视频欧美日本| 国产精品日韩av在线免费观看| 能在线免费观看的黄片| 伦精品一区二区三区| 日本午夜av视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 精品久久久久久成人av| 精品熟女少妇av免费看| 久久精品综合一区二区三区| 免费看日本二区| 国产精品.久久久| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 日韩av在线大香蕉| 亚洲图色成人| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲成人中文字幕在线播放| 最后的刺客免费高清国语| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 一本一本综合久久| 亚洲成av人片在线播放无| 深夜a级毛片| 色播亚洲综合网| 午夜久久久久精精品| 国内精品美女久久久久久| 亚洲欧洲日产国产| 久热久热在线精品观看| 伦理电影大哥的女人| 色综合亚洲欧美另类图片| 最后的刺客免费高清国语| 欧美97在线视频| 久久精品人妻少妇| 成人午夜高清在线视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 久久精品人妻少妇| 亚洲国产精品成人综合色| 国产在线一区二区三区精 | 一夜夜www| 国产久久久一区二区三区| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲av免费在线观看| 欧美色视频一区免费| 亚洲三级黄色毛片| 久久国产乱子免费精品| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产一区有黄有色的免费视频 | 人妻夜夜爽99麻豆av| 成年女人永久免费观看视频| 午夜福利成人在线免费观看| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产精品日韩av在线免费观看| 韩国av在线不卡| 人人妻人人看人人澡| 久久99精品国语久久久| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产免费一级a男人的天堂| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 亚洲久久久久久中文字幕| 99视频精品全部免费 在线| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 51国产日韩欧美| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 午夜福利在线在线| 丰满少妇做爰视频| 欧美日本视频| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产精品熟女久久久久浪| 看片在线看免费视频| 国产精品福利在线免费观看| 能在线免费看毛片的网站| 国产精品野战在线观看| 亚洲精品成人久久久久久| 能在线免费看毛片的网站| 日韩一区二区视频免费看| 婷婷色麻豆天堂久久 | 在线天堂最新版资源| 长腿黑丝高跟| 极品教师在线视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 久久久久久国产a免费观看| 婷婷色av中文字幕| 亚洲av日韩在线播放| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 成年女人看的毛片在线观看| 综合色丁香网| 精品久久久久久久久久久久久| 97超碰精品成人国产| 91av网一区二区| 亚洲欧美清纯卡通| 高清视频免费观看一区二区 | 国产伦精品一区二区三区视频9| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 欧美3d第一页| 免费av不卡在线播放| 国产男人的电影天堂91| 一级黄片播放器| 国产毛片a区久久久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久久久久久国产电影| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 美女内射精品一级片tv| 午夜免费男女啪啪视频观看| 婷婷六月久久综合丁香| 美女高潮的动态| 国产av码专区亚洲av| 国产精品日韩av在线免费观看| 91精品国产九色| 亚洲欧美精品自产自拍| 一二三四中文在线观看免费高清| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 日韩欧美精品v在线| 一区二区三区免费毛片| 免费av观看视频| 亚洲国产精品专区欧美| 桃色一区二区三区在线观看| 我的老师免费观看完整版| 国产黄色小视频在线观看| 久久人妻av系列| 国产精品福利在线免费观看| 成人av在线播放网站| 大香蕉久久网| 欧美性猛交黑人性爽| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 欧美一区二区精品小视频在线| 91在线精品国自产拍蜜月| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 午夜福利在线在线| 99在线视频只有这里精品首页| 色5月婷婷丁香| 高清日韩中文字幕在线| 晚上一个人看的免费电影| 天堂中文最新版在线下载 | 久久久午夜欧美精品| 国产精品久久视频播放| 亚洲,欧美,日韩| 五月玫瑰六月丁香| 在线播放国产精品三级| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国内精品宾馆在线| 国产精品一区二区在线观看99 | 亚洲av一区综合| 成人亚洲精品av一区二区| 日本免费在线观看一区| 听说在线观看完整版免费高清| 99久国产av精品| 三级国产精品欧美在线观看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 一级毛片aaaaaa免费看小| 少妇被粗大猛烈的视频| 人妻系列 视频| 精品国产露脸久久av麻豆 | 99国产精品一区二区蜜桃av| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 草草在线视频免费看| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 99久国产av精品国产电影| 国产亚洲精品av在线| 美女黄网站色视频| 欧美成人午夜免费资源| 日韩av在线免费看完整版不卡| 欧美成人一区二区免费高清观看| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产av一区在线观看免费| av播播在线观看一区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 国产欧美日韩精品一区二区| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲国产精品久久男人天堂| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 国产熟女欧美一区二区| 美女内射精品一级片tv| 搞女人的毛片| a级毛片免费高清观看在线播放| 国产91av在线免费观看| 国产三级在线视频| 精品一区二区三区视频在线| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲人成网站在线观看播放| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 老司机福利观看| 在线观看av片永久免费下载| 性色avwww在线观看| 内射极品少妇av片p| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲不卡免费看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 久久国内精品自在自线图片| 国产av码专区亚洲av| 91在线精品国自产拍蜜月| 中文字幕av在线有码专区| 色吧在线观看| 级片在线观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 久久亚洲精品不卡| 午夜精品国产一区二区电影 | 国产精品野战在线观看| 天堂√8在线中文| 久热久热在线精品观看| 亚洲欧美精品专区久久| 国产亚洲一区二区精品| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产真实乱freesex| 熟女电影av网| 亚洲va在线va天堂va国产| 欧美+日韩+精品| 男女国产视频网站| 波多野结衣巨乳人妻| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 亚洲国产精品国产精品| 国内揄拍国产精品人妻在线| 久久草成人影院| 中文字幕av成人在线电影| 久久久久九九精品影院| 插逼视频在线观看| 一区二区三区免费毛片| 成人亚洲欧美一区二区av| 日本免费a在线| 麻豆一二三区av精品| 97超视频在线观看视频| 乱码一卡2卡4卡精品| 国内揄拍国产精品人妻在线| 精品久久久久久成人av| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久99蜜桃精品久久| 人妻少妇偷人精品九色| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲av免费高清在线观看| h日本视频在线播放| 我要搜黄色片| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美一区二区亚洲| 亚洲,欧美,日韩| 久久久精品欧美日韩精品| 国产精品野战在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久久精品大字幕| 欧美精品国产亚洲| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产精品av视频在线免费观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 欧美一区二区精品小视频在线| 大香蕉97超碰在线| 成年女人看的毛片在线观看| 男人的好看免费观看在线视频| 亚洲成色77777| 色播亚洲综合网| 欧美激情久久久久久爽电影| 久久韩国三级中文字幕| 伦理电影大哥的女人| 国产高清有码在线观看视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 综合色丁香网| 亚洲国产精品合色在线| 日本av手机在线免费观看| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 久久综合国产亚洲精品| 日本熟妇午夜| 99久久无色码亚洲精品果冻| 老司机影院毛片| 亚洲av熟女| 国产免费男女视频| 久久6这里有精品| 国产精品99久久久久久久久| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲欧美日韩东京热| 超碰av人人做人人爽久久| kizo精华| 综合色丁香网| 插阴视频在线观看视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 能在线免费观看的黄片| ponron亚洲| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产爱豆传媒在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 欧美精品一区二区大全| 午夜激情福利司机影院| 村上凉子中文字幕在线| 韩国av在线不卡| 久久99精品国语久久久| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲国产成人一精品久久久| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 亚洲av中文av极速乱| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 午夜激情欧美在线| 中文字幕av成人在线电影| 午夜激情欧美在线| 日韩欧美精品v在线| 嘟嘟电影网在线观看| eeuss影院久久| 欧美极品一区二区三区四区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产精品久久电影中文字幕| 色综合亚洲欧美另类图片| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 久久99热这里只有精品18| 天堂影院成人在线观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 看黄色毛片网站| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 高清视频免费观看一区二区 | 亚洲精品456在线播放app| 亚洲成人精品中文字幕电影| 成年av动漫网址| 搡女人真爽免费视频火全软件| 直男gayav资源| av免费在线看不卡| 一级爰片在线观看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲精品影视一区二区三区av| 白带黄色成豆腐渣| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲精品aⅴ在线观看| 能在线免费观看的黄片| 黄片无遮挡物在线观看| 午夜福利成人在线免费观看| 国产私拍福利视频在线观看| 欧美潮喷喷水| 激情 狠狠 欧美| 国产午夜精品论理片| 久久久久久久久中文| 高清av免费在线| 欧美潮喷喷水| 一级毛片久久久久久久久女| 欧美激情久久久久久爽电影| 最近手机中文字幕大全| 精品人妻偷拍中文字幕| 成人二区视频| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲在线自拍视频| 91久久精品国产一区二区三区| 欧美日本视频| 色播亚洲综合网| 九九在线视频观看精品| 麻豆成人午夜福利视频| 一区二区三区高清视频在线| 国产亚洲一区二区精品| 婷婷六月久久综合丁香| 免费观看精品视频网站| 免费看美女性在线毛片视频| 女人久久www免费人成看片 | 2022亚洲国产成人精品| 老司机福利观看| 久久久久久久久大av| 免费观看精品视频网站| 一级毛片久久久久久久久女| 夫妻性生交免费视频一级片| 成人av在线播放网站| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 午夜精品国产一区二区电影 | 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 成年av动漫网址| 美女黄网站色视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 人体艺术视频欧美日本| 最近2019中文字幕mv第一页| 日韩中字成人| 亚洲人成网站高清观看| 乱人视频在线观看| .国产精品久久| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲av中文av极速乱| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 卡戴珊不雅视频在线播放| 日本-黄色视频高清免费观看| 成人av在线播放网站| 国产精品无大码| 亚洲不卡免费看| 久久精品影院6| 伦精品一区二区三区| 亚洲高清免费不卡视频| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产69精品久久久久777片| 久久亚洲精品不卡| 成人一区二区视频在线观看| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产黄片美女视频| 国产真实乱freesex| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 一夜夜www| 熟女电影av网| 人妻系列 视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产成人a区在线观看| 综合色av麻豆| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 国产69精品久久久久777片| 99久久精品热视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产黄片视频在线免费观看| av.在线天堂| 99热6这里只有精品| 3wmmmm亚洲av在线观看| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 欧美性感艳星| 中文亚洲av片在线观看爽| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产不卡一卡二| 国产日韩欧美在线精品| 在线观看美女被高潮喷水网站| 小说图片视频综合网站| 99热全是精品| 亚洲av男天堂| 中文资源天堂在线| 亚洲综合精品二区| 日本五十路高清| 级片在线观看| 青春草亚洲视频在线观看| h日本视频在线播放| 精品人妻熟女av久视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 中文字幕久久专区| 日韩成人av中文字幕在线观看| 高清午夜精品一区二区三区| 国产精品一二三区在线看| www.色视频.com| 国产激情偷乱视频一区二区| 国产成人a∨麻豆精品| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲不卡免费看| 久久久精品94久久精品| 亚洲经典国产精华液单| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 搡女人真爽免费视频火全软件| 日韩一区二区视频免费看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 欧美成人免费av一区二区三区| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 亚洲国产欧美在线一区| 内射极品少妇av片p| 日本欧美国产在线视频| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲在线观看片| 久久精品久久精品一区二区三区| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲av不卡在线观看| 亚洲av成人av| 国产精品乱码一区二三区的特点| 免费观看的影片在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 日本爱情动作片www.在线观看| 精品一区二区三区人妻视频| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久人人爽人人爽人人片va| 精品酒店卫生间| 国产精品一区www在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 成人欧美大片| 美女内射精品一级片tv| 亚洲精品亚洲一区二区| 99久久成人亚洲精品观看| 我要看日韩黄色一级片| 九九在线视频观看精品| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产一区亚洲一区在线观看| 国内精品一区二区在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 亚洲四区av| eeuss影院久久| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 嫩草影院入口| 日日啪夜夜撸| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产高清视频在线观看网站| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 热99在线观看视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 午夜老司机福利剧场| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频 | 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲乱码一区二区免费版| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 男女啪啪激烈高潮av片| 最近最新中文字幕大全电影3| 日本av手机在线免费观看| 午夜福利高清视频| 99久久人妻综合| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 国产久久久一区二区三区| 乱人视频在线观看| 国产精品一区二区性色av| 亚洲不卡免费看| 免费看美女性在线毛片视频| 1000部很黄的大片| 国产精品永久免费网站| 免费观看人在逋| 日本免费一区二区三区高清不卡| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美精品一区二区大全| 天堂影院成人在线观看|