殺菌劑對(duì)馬鈴薯黑痣病菌的室內(nèi)毒力及田間防效

吳志會(huì) 陸晴 甄志華 張尚卿 彭學(xué)文

摘? ? 要：為解決生產(chǎn)中缺少防治馬鈴薯黑痣病的有效化學(xué)藥劑問題，采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定了10種藥劑對(duì)供試馬鈴薯黑痣病菌立枯絲核菌（Rhizoctonia solani Kühn）菌株的室內(nèi)毒力，并選擇活性較好的5種藥劑進(jìn)行田間防效試驗(yàn)。結(jié)果表明，50%咪鮮胺銅鹽SC、20%吡噻菌胺SC、42.8%氟菌·肟菌脂SC、25 g·L-1咯菌腈FS以及50%異菌脲WP毒力較強(qiáng)，EC50值分別為0.076 2、0.689 9、0.722 1、0.900 3和0.925 1 ?g·mL-1;這5種藥劑對(duì)馬鈴薯黑痣病也具有一定的防效，其中50%咪鮮胺銅鹽SC和25 g·L-1咯菌腈FS對(duì)馬鈴薯黑痣病的防效較好，對(duì)馬鈴薯植株和薯塊黑痣病的防效均在78%以上。

關(guān)鍵詞：馬鈴薯黑痣病;殺菌劑;毒力測(cè)定;田間防效

中圖分類號(hào)：S532 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1673-2871（2021）06-068-05

Toxicity and field control efficacy of fungicides against potato black scurf

WU Zhihui1， LU Qing1， ZHEN Zhihua2， ZHANG Shangqing1， PENG Xuewen1

（1. Tangshan Academy of Agricultural Sciences， Tangshan 063000， Hebei， China; 2. Crop Seed Station of Tangshan City， Tangshan 063000， Hebei， China）

Abstract： In order to solve the problem of lack of the effective fungicides to control the potato black scurf in production， that mycelial growth rate method was applied to determine the toxicity of the 10 kinds of fungicides on Rhizoctonia solani Kühn and 5 kinds of agents among them were selected for further field efficacy trials. The results indicated that the 50% prochloraz copper SC， 20% Penthiopyrad SC， 42.8% Fluopyram·Trifloxystrobin SC， 25 g·L-1 Fludioxonil FS and 50% Iprodione WP showed higher toxicity on Rhizoctonia solani Kühn in laboratory， with the EC50 values of 0.076 2， 0.689 9， 0.722 1， 0.900 3 and 0.925 1 ?g·mL-1， respectively.The results of field trials showed that all of the 5 fungicides had certain control effect on the potato black scurf， among them 50% prochloraz copper SC， and 25 g·L-1 Fludioxonil FS had better control effect than the others， with a control efficacy on the black scurf of potato plants and potatos was above 78%.

Key words： Potato black scurf; Fungicides; Toxicity determination; Field control effect

馬鈴薯黑痣病又稱馬鈴薯立枯絲核菌病、馬鈴薯莖基腐病或馬鈴薯莖潰瘍病，是由立枯絲核菌（Rhizoctonia solani Kühn）引起的一種重要的馬鈴薯真菌性病害[1-4]，世界上各馬鈴薯產(chǎn)區(qū)均有分布，特別是重茬地塊發(fā)病更重、更普遍，一般地塊可造成減產(chǎn)15%左右，嚴(yán)重發(fā)生地塊可引起減產(chǎn)30%～50%，甚至絕收[5-6]，嚴(yán)重影響了馬鈴薯的產(chǎn)量和品質(zhì)。截至目前，包括福建、河北、內(nèi)蒙古、廣東、黑龍江、寧夏、江蘇、陜西、甘肅、山東、青海、云南、貴州、山西、新疆、吉林以及北京等省、區(qū)、市均已報(bào)道有馬鈴薯黑痣病發(fā)生，基本覆蓋了我國(guó)所有馬鈴薯產(chǎn)區(qū)，給馬鈴薯生產(chǎn)造成了巨大損失。近年來隨著“馬鈴薯主糧化戰(zhàn)略”的實(shí)施，馬鈴薯的播種面積大幅增加，馬鈴薯黑痣病的發(fā)病范圍也隨之?dāng)U大，其危害程度呈現(xiàn)加重發(fā)生趨勢(shì)，已成為馬鈴薯產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要限制因素之一。

由于化學(xué)藥劑防治農(nóng)作物病蟲害的便捷性與速效性，因此生產(chǎn)上馬鈴薯黑痣病的防治仍以化學(xué)防治為主。但是，生產(chǎn)中由于施藥人員技術(shù)水平的局限性，對(duì)防治時(shí)機(jī)把握不準(zhǔn)，往往都是見病施藥從而錯(cuò)過最佳防治時(shí)機(jī);同時(shí)對(duì)化學(xué)藥劑的選擇不夠科學(xué)，長(zhǎng)期選用一種或一類藥劑防治，導(dǎo)致黑痣病菌耐藥性和抗藥性的產(chǎn)生，使得防治效果越來越差。因此，篩選與現(xiàn)有馬鈴薯黑痣病防治藥劑無交互抗性的新型殺菌劑，推廣交替使用具有不同作用機(jī)制或不易產(chǎn)生抗性的多作用位點(diǎn)的殺菌劑，建立科學(xué)的馬鈴薯黑痣病化學(xué)防治體系，對(duì)控制馬鈴薯黑痣病的發(fā)生與危害，保障馬鈴薯產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展意義重大。

為此，筆者選取了10種市場(chǎng)上應(yīng)用較為廣泛的殺菌劑，對(duì)馬鈴薯黑痣病菌立枯絲核菌（Rhizoctonia solani Kühn）進(jìn)行了室內(nèi)毒力測(cè)定，并在田間進(jìn)行了馬鈴薯黑痣病的藥效試驗(yàn)，以期能夠篩選出防治馬鈴薯黑痣病的理想藥劑，為馬鈴薯黑痣病的綜合防治提供理論依據(jù)，確保馬鈴薯安全生產(chǎn)[7-10]。

1 材料與方法

1.1 材料

供試菌株：馬鈴薯黑痣病菌立枯絲核菌（Rhizoctonia solani Kühn），由河北農(nóng)業(yè)大學(xué)馬鈴薯病害研究中心提供。馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA培養(yǎng)基）：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，蒸餾水1000 mL。

田間試驗(yàn)馬鈴薯品種為荷蘭7號(hào)，由唐山市玉田縣小強(qiáng)農(nóng)民專業(yè)合作社提供。該品種匍匐莖短、結(jié)薯集中、塊莖膨大速度快、生育期65～70 d，株型直立，株高60 cm左右，屬中早熟高產(chǎn)馬鈴薯品種。薯塊長(zhǎng)橢圓形，芽眼較淺，薯皮光滑，黃皮黃肉，品質(zhì)極佳。

供試藥劑：選取10種殺菌劑進(jìn)行馬鈴薯黑痣病菌毒力試驗(yàn)及田間藥效試驗(yàn)，藥劑詳細(xì)情況見表1。

1.2 方法

室內(nèi)毒力試驗(yàn)于2018年6—12月在唐山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院植保實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行;田間試驗(yàn)于2019年1—7月在唐山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院試驗(yàn)場(chǎng)進(jìn)行。

1.2.1 室內(nèi)毒力測(cè)定 采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定室內(nèi)毒力。首先，將供試菌株在PDA培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)5 d后備用，利用打孔器在培養(yǎng)好的菌落上均勻打取直徑5 mm的菌餅，然后將菌餅分別接種到各供試藥劑不同質(zhì)量濃度處理的含藥培養(yǎng)基平板上，并以加無菌水的PDA培養(yǎng)基平板作對(duì)照（CK），每處理3次重復(fù)，最后將供試處理置于生化培養(yǎng)箱（25 ℃）中培養(yǎng)4～5 d。

1.2.2 田間藥效試驗(yàn) 馬鈴薯田間播種采用雙行高壟覆膜栽培模式，大行距0.8 m，小行距0.2 m，株距0.25 m，土壤為黏土。試驗(yàn)用清水作對(duì)照（CK），共設(shè)6個(gè)處理，4次重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列，小區(qū)面積30 m2（3 m×10 m），共計(jì)720 m2。藥劑采用室內(nèi)毒力篩選出的5種毒力較強(qiáng)的藥劑，所有藥劑的有效成分用量均為田間指導(dǎo)用量，施藥方式均采用播前藥劑拌種薯處理。

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

室內(nèi)毒力測(cè)定待對(duì)照菌落直徑不小于60 mm時(shí)，采用十字交叉法測(cè)量各處理的菌落直徑，取其平均數(shù)并按下列公式計(jì)算抑制率：

抑菌率/%=（對(duì)照菌落直徑凈生長(zhǎng)量-處理菌落直徑凈生長(zhǎng)量）/對(duì)照菌落直徑凈生長(zhǎng)量×100。

田間藥效試驗(yàn)于開花期調(diào)查馬鈴薯植株黑痣病發(fā)病情況，每小區(qū)調(diào)查50株，記錄病株數(shù)。收獲時(shí)調(diào)查馬鈴薯薯塊黑痣病發(fā)病情況，每小區(qū)收獲20株馬鈴薯，調(diào)查薯塊上黑痣病發(fā)病情況，按病斑占整個(gè)薯塊的面積劃分病級(jí)，馬鈴薯黑痣病分級(jí)方法[11]（以薯塊為單位）以及病情指數(shù)、防治效果計(jì)算公式如下：

0級(jí)：薯塊無病斑;

1級(jí)：病斑小，病斑面積占整個(gè)薯塊表面積的5%以下;

3級(jí)：病斑較小，病斑面積占整個(gè)薯塊表面積的6%～10%;

5級(jí)：病斑較小或個(gè)別較大，病斑面積占整個(gè)薯塊表面積的11%～25%;

7級(jí)：病斑大小均有分布，病斑面積占整個(gè)薯塊表面積的26%～50%;

9級(jí)：病斑大小均有分布，病斑面積占整個(gè)薯塊表面積的51%以上。

病株率/%=病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100;

防治效果/%=（對(duì)照區(qū)病株率—處理區(qū)病株率）/對(duì)照區(qū)病株率×100;

病薯率/%=（病薯數(shù)/調(diào)查總薯數(shù)）×100;

病情指數(shù)= Σ（各級(jí)病薯數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值）/（調(diào)查總薯數(shù)×9）×100;

薯塊黑痣病防治效果/%=[（對(duì)照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)）/對(duì)照區(qū)病情指數(shù)]×100。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用IBM SPSS Statistics 22.0版數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行處理分析。分析方法主要運(yùn)用“事后多重比較”中的最小顯著差數(shù)法（LSD）和新復(fù)極差法（Duncan），顯著性水平為0.01和0.05。計(jì)算供試藥劑對(duì)供試菌株的毒力回歸方程y=a+bx、相關(guān)系數(shù)r及有效抑制中濃度（EC50值）;計(jì)算供試藥劑田間防治效果等。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試藥劑對(duì)馬鈴薯黑痣病菌的抑菌效果

從表2可以看出，10種殺菌劑處理后菌落平均生長(zhǎng)量均小于CK，表明10種殺菌劑在PDA培養(yǎng)基平板上對(duì)馬鈴薯黑痣病菌均表現(xiàn)出一定的毒力，對(duì)菌絲生長(zhǎng)均產(chǎn)生了不同程度的抑制作用，同時(shí)各藥劑隨各自處理濃度的增加，對(duì)供試菌株菌絲生長(zhǎng)的抑制作用也逐漸增大。

2.2 供試藥劑對(duì)馬鈴薯黑痣病菌立枯絲核菌的毒力比較

從表3可以看出，10種殺菌劑處理的質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)與對(duì)應(yīng)的抑菌率概率值呈正相關(guān)的線性關(guān)系，同時(shí)回歸方程的相關(guān)系數(shù)r均在0.95以上，表明試驗(yàn)設(shè)計(jì)中兩個(gè)變量的擬合優(yōu)度高，試驗(yàn)結(jié)果比較可靠。其中50%咪鮮胺銅鹽SC、20%吡噻菌胺SC、42.8%氟菌·肟菌脂SC、25 g·L-1咯菌腈FS以及50%異菌脲WP等5種藥劑的EC50值均低于1 ?g·mL-1，特別是50%咪鮮胺銅鹽SC的EC50值僅為0.076 2 ?g·mL-1，對(duì)供試菌株的毒力最強(qiáng)。而30%噁霉靈AS和70%甲基硫菌靈WP的EC50值均高于10 ?g·mL-1，表明這兩種藥劑的毒力最弱。

2.3 供試藥劑對(duì)馬鈴薯黑痣病的田間防治效果

由表4可以看出，田間試驗(yàn)過程中，5種藥劑對(duì)馬鈴薯植株和薯塊的黑痣病均有不同程度的防治效果，但是不同藥劑之間防治效果存在一定差異。

開花期，50%咪鮮胺銅鹽SC、20%吡噻菌胺SC、42.8%氟菌·肟菌脂SC、25 g·L-1咯菌腈FS及50%異菌脲WP對(duì)馬鈴薯植株黑痣病的防效分別為：88.74%、77.48%、67.56%、86.95%及65.82%，其中50%咪鮮胺銅鹽SC和25 g·L-1咯菌腈FS 2種藥劑的防效顯著優(yōu)于其他藥劑，50%咪鮮胺銅鹽SC與20%吡噻菌胺SC、42.8%氟菌·肟菌脂SC和50%異菌脲WP等3種藥劑的防效差異呈極顯著水平。結(jié)果表明，馬鈴薯種薯利用5種供試藥劑拌種防治植株黑痣病時(shí)，50%咪鮮胺銅鹽SC和25 g·L-1咯菌腈FS 2種藥劑防治效果最好。

收獲期，50%咪鮮胺銅鹽SC、20%吡噻菌胺SC、42.8%氟菌·肟菌脂SC、25 g·L-1咯菌腈FS及50%異菌脲WP對(duì)馬鈴薯薯塊黑痣病的防效分別為：81.16%、74.55%、62.83%、78.49%及61.38%，其中50%咪鮮胺銅鹽SC和25 g·L-1咯菌腈FS兩種藥劑與42.8%氟菌·肟菌脂SC和50%異菌脲WP等兩種藥劑的防效呈顯著性差異。特別是50%咪鮮胺銅鹽SC對(duì)馬鈴薯黑痣病的防治效果最好，高于80%;其次為25 g·L-1咯菌腈FS，其防效也高達(dá)78.49%。結(jié)果表明，馬鈴薯種薯利用5種供試藥劑拌種防治薯塊黑痣病時(shí)，50%咪鮮胺銅鹽SC和25 g·L-1咯菌腈FS兩種藥劑防治效果最好。

3 討論與結(jié)論

隨著馬鈴薯的長(zhǎng)期連作，馬鈴薯黑痣病的發(fā)生日益嚴(yán)重，制約著馬鈴薯產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。生產(chǎn)上防控馬鈴薯黑痣病除了篩選抗病馬鈴薯外，仍以化學(xué)防治為主，然而，不合理的化學(xué)防治給馬鈴薯生產(chǎn)帶來了一系列的不良影響。生產(chǎn)上用于防治馬鈴薯黑痣病的藥劑比較混亂，同時(shí)使用農(nóng)藥的不科學(xué)、不合理，經(jīng)常連續(xù)使用一種或者一類農(nóng)藥，不僅造成農(nóng)藥殘留超標(biāo)或藥害的出現(xiàn)，而且極易導(dǎo)致病原菌抗藥性的迅速產(chǎn)生，造成了資源浪費(fèi)和環(huán)境污染，更直接影響了馬鈴薯的產(chǎn)量與品質(zhì)。

10種殺菌劑對(duì)馬鈴薯黑痣病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定試驗(yàn)結(jié)果表明，50%咪鮮胺銅鹽SC、20%吡噻菌胺SC、42.8%氟菌·肟菌脂SC、25 g·L-1咯菌腈FS以及50%異菌脲WP等5種藥劑對(duì)供試病菌的抑菌效果較好，可作為防治該病的首選藥劑。趙曉雨[12]報(bào)道了咪鮮胺、咯菌腈、異菌脲對(duì)馬鈴薯黑痣病具有很好的抑制作用，本研究結(jié)果與其一致。

在馬鈴薯黑痣病菌室內(nèi)毒力試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，篩選出5個(gè)毒力最強(qiáng)的藥劑進(jìn)行馬鈴薯黑痣病田間藥效試驗(yàn)。其中，50%咪鮮胺銅鹽SC的防治效果最好，對(duì)馬鈴薯植株和薯塊的防效均在80%以上，其次為25 g·L-1咯菌腈FS，而50%異菌脲WP的田間防治效果相對(duì)較差，這與室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果基本一致。

在馬鈴薯生產(chǎn)過程中，多種馬鈴薯病害常?；旌习l(fā)生，建議驗(yàn)證50%咪鮮胺銅鹽SC對(duì)早疫病、枯萎病等的生物活性，擴(kuò)大其應(yīng)用范圍，同時(shí)應(yīng)加快篩選出其他類型或種類的馬鈴薯黑痣病高效防控藥劑，藥劑之間輪換使用，減緩或降低抗藥性產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)，滿足馬鈴薯安全生產(chǎn)需求。

綜上所述，50%咪鮮胺銅鹽SC和25 g·L-1咯菌腈FS對(duì)馬鈴薯黑痣病菌具有較高的毒力和田間防治效果，可作為馬鈴薯黑痣病的替代或輪換用藥。

參考文獻(xiàn)

[1] 李夏隆.馬鈴薯主要病蟲害預(yù)測(cè)及綜合防治技術(shù)[J].陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，60（8）：118-121.

[2] ANDERSON N A.Thegenetics and pathology of Rhizoctonia solani[J]. Annual Review of Phytopathology，1982，20：329-347.

[3] OGOSHI A.Ecology and pathogenicity of anastomosis andintraspecific groups of Rhizoctonia solani Kühn[J].Annual Review of Phytopathology，1987，25：125-143.

[4] 李乾坤，孫順娣，李敏權(quán).馬鈴薯立枯絲核菌病的研究[J].馬鈴薯雜志，1988，2（2）：79-84.

[5] 彭振紅.馬鈴薯黑痣病生防菌的篩選及抑菌機(jī)理的初步研究[D].呼和浩特：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

[6] 劉寶玉，蒙美蓮，胡俊，等.5 種殺菌劑對(duì)馬鈴薯黑痣病的病菌毒力及田間防效[J].中國(guó)馬鈴薯，2010，24（5）：306-310.

[7] 劉霞，馮蕊，高達(dá)芳，等.云南省馬鈴薯黑痣病病原菌融合群鑒定及8種藥劑對(duì)其的毒力[J].植物保護(hù)，2016，42（2）：165-170.

[8] 關(guān)小敏.馬鈴薯黑痣病生防細(xì)菌的篩選及其生防作用機(jī)理研究[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2014.

[9] 崔巖，王蒂，柴兆祥，等.中國(guó)木霉新記錄種俄羅斯木霉的分離鑒定及對(duì)馬鈴薯干腐病菌和黑痣病菌的拮抗作用[J].草業(yè)學(xué)報(bào)，2014，23（1）：276-282.

[10] 安婧婧.寧夏青霉屬（Penicillium Link）分類及馬鈴薯黑痣病生防青霉篩選[D].銀川：寧夏大學(xué)，2016.

[11] 方中達(dá).植病研究方法[M].3版.北京：農(nóng)業(yè)出版社，1998.

[12] 趙曉雨.馬鈴薯黑痣病的有效防治藥劑篩選及田間防效試驗(yàn)[D].山東泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2019.