煙蚜對6種殺蟲劑敏感基線的建立

王召　楊洪　劉童童

摘要：為研究貴州煙區(qū)煙蚜對常用殺蟲劑的抗性水平，采用浸漬法測定6種殺蟲劑對煙蚜敏感品系的毒力，確定敏感基線。結(jié)果表明：第3、第4年測得該品系對供試藥劑的敏感性由高到低依次為阿維菌素、溴氰菊酯、吡蟲啉、樂果、啶蟲脒、滅多威。第5年測得6種殺蟲劑的LC50由小到大依次為阿維菌素、溴氰菊酯、啶蟲脒、吡蟲啉、樂果、滅多威。說明該敏感基線可用于煙蚜的抗藥性監(jiān)測。

關(guān)鍵詞：煙蚜；煙草；殺蟲劑；毒力測定；敏感基線；抗藥性

中圖分類號： Q965.9；S435.72文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號：1002-1302（2015）11-0195-02

收稿日期：2014-10-28

基金項(xiàng)目：中國煙草總公司貴州省公司科技項(xiàng)目（編號：201022）；凱里學(xué)院規(guī)劃課題（編號：Z1332）；貴州省教育廳優(yōu)秀科研創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（編號：黔教合人才團(tuán)隊(duì)字[2013]26）。

作者簡介：王召（1984—），男，河北永年人，碩士，講師，主要從事動物生態(tài)和有害生物綜合治理研究。Tel：（0855）8511625；E-mail：hdwangzhao@126.com。

通信作者：楊洪，博士，教授，主要從事動物生態(tài)和有害生物綜合治理研究。E-mail：agr.hyang@gzu.edu.cn。煙蚜[Myzus persicae （Sulzer）]別稱桃蚜，屬半翅目（Hemiptera）蚜科（Aphididae）瘤蚜屬（Myzus），是農(nóng)林經(jīng)濟(jì)作物的主要害蟲之一[1]。煙蚜是典型的多食性昆蟲，目前已報(bào)道的可寄居和取食的植物多達(dá)50科400多種[2-3]。有研究表明，煙田煙蚜不僅刺吸煙株汁液，引起煙株?duì)I養(yǎng)物質(zhì)缺失及生長畸形，還可以分泌蜜露污染煙葉，影響光合作用，引起煤污?。桓匾氖瞧淇梢詡鞑煵莼ㄈ~病毒 （tobacco mosaic virus，TMV）、黃瓜花葉病毒 （cucumber mosaic virus，CMV）、馬鈴薯Y病毒 （potato virus Y，PVY）、煙草蝕紋病毒 （tobacco etch virus，TEV）、煙草脈斑駁病毒 （tobacco vein mottling virus，TSV）和煙草叢矮病毒 （tobacco bushy stunt virus，TBSV）等多種煙草病毒病[4-9]。因此，科學(xué)防治煙蚜對煙草生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展極其重要。鑒于煙蚜屬于典型的r-對策型害蟲，具有易暴發(fā)成災(zāi)的特點(diǎn)，在生產(chǎn)上一般采用化學(xué)藥劑防治煙蚜，長期大量地不合理使用化學(xué)殺蟲劑，導(dǎo)致它對有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、菊酯類、煙堿類等多種不同的殺蟲劑產(chǎn)生了抗性[10-13]。

由于抗藥性的增強(qiáng)，一些常用殺蟲劑對煙蚜的防治效果日趨下降，即使加大用藥量，仍不能有效控制煙蚜危害。這不僅增加了煙蚜的防治難度，而且大幅提高了生產(chǎn)成本、縮短了殺蟲劑使用壽命、增加了農(nóng)藥殘留和污染環(huán)境。因此，及時(shí)了解貴州地區(qū)煙蚜抗性情況對尋找克服和延緩抗藥性發(fā)展的有效途徑就顯得十分重要。在抗性研究和治理工作中，獲得相應(yīng)的敏感品系和建立敏感基線是進(jìn)行抗藥性監(jiān)測的基礎(chǔ)。國內(nèi)有關(guān)煙蚜對藥劑的敏感基線研究已有一些報(bào)道[14-15]，但這些研究使用的試蟲代表性不強(qiáng)，不利于界定各地區(qū)品系對藥劑的抗性水平。

本研究通過室內(nèi)連續(xù)飼養(yǎng)3年以上獲得相對敏感品系，并采用浸漬法測定煙蚜對6種殺蟲劑的敏感性，建立煙蚜的敏感基線，旨在為進(jìn)一步深入調(diào)查煙蚜在貴州地區(qū)對常用藥劑的抗性水平打下基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1供試蟲源2008年4月采自貴州省長順縣馬路鄉(xiāng)烤煙生產(chǎn)基地，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)以未接觸藥劑的盆栽煙草進(jìn)行連續(xù)飼養(yǎng)3年以上獲得相對敏感品系的煙蚜種群。飼養(yǎng)條件：溫度為室溫，相對濕度為60%～75%，光周期14 L ∶10 D。

1.1.2供試殺蟲劑及其來源40%滅多威可濕性粉劑（泰山現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技有限公司），5%啶蟲脒乳油（河北野田農(nóng)用化學(xué)有限公司），25 g/L溴氰菊酯乳油（拜耳作物科學(xué)有限公司），70%吡蟲啉水分散粒劑（華北制藥集團(tuán)愛諾有限公司），2%阿維菌素乳油（河北野田農(nóng)用化學(xué)有限公司），40%樂果乳油（重慶農(nóng)藥化工集團(tuán)有限公司）。

1.2試驗(yàn)方法

采用聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）推薦的浸漬法[16]。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果將供試殺蟲劑稀釋至試驗(yàn)所需的5個濃度，另設(shè)蒸餾水為對照，將帶有煙蚜的煙葉放入準(zhǔn)備好的藥液中浸泡10 s，取出后用吸水紙將葉片上的藥液吸干，并用細(xì)毛筆將大小均勻（4齡期若蚜和無翅成蚜）的煙蚜挑到準(zhǔn)備好的葉片上，用棉花包住葉柄基部浸水保濕，放入直徑15 cm的培養(yǎng)皿中并用紗布和橡皮筋將內(nèi)皿封好后罩上外皿，以防煙蚜逃逸。每個濃度設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)處理煙蚜30頭，24 h后檢查死亡蟲數(shù)，檢查時(shí)用毛筆觸動蚜蟲，無反應(yīng)視為死亡。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

所有數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析均采用Microsoft Excel 2003 和SPSS 13.0 軟件進(jìn)行，擬合毒力回歸方程（y=a+bx），并計(jì)算相關(guān)系數(shù)（r） 、致死中濃度（LC50） 及其95%的置信區(qū)間等值。

2結(jié)果與分析

煙蚜敏感品系是煙蚜抗藥性研究的重要試驗(yàn)材料，是評價(jià)煙蚜種群對殺蟲劑抗性水平的重要依據(jù)。通過6種殺蟲劑對飼養(yǎng)不同年份煙蚜相對敏感品系的毒力測定，得到6種殺蟲劑的毒力方程和致死中濃度（LC50）（表1）。從測定結(jié)果可以看出，不同年份測定滅多威、吡蟲啉、阿維菌素和樂果的LC50值差別不大，滅多威的LC50值在第3、第4、第5年分別為82.395、81.096、93.974 mg/L，吡蟲啉為16.148、19.553、9635 mg/L，阿維菌素為5.890、6.134、2.387 mg/L，樂果為39.456、42.239、62.861 mg/L。

3結(jié)論與討論

殺蟲劑對害蟲毒力敏感基線的建立是進(jìn)行害蟲抗藥性監(jiān)測、抗藥性機(jī)制、抗藥性生物學(xué)、抗藥性遺傳及抗藥性分子生物學(xué)等研究的基礎(chǔ)和前提[17]。我國國內(nèi)在研究煙蚜的抗藥性時(shí)，一般都選擇河北廊坊桃蚜或甘肅宕昌桃蚜作為敏感種群[14-15]，但不同地區(qū)煙蚜的抗性是有差別的，在實(shí)際研究中應(yīng)當(dāng)選擇本地敏感品系[3]。因此，要開展貴州煙蚜抗藥性研究，只有獲得當(dāng)?shù)叵鄬γ舾衅废?、建立毒力敏感基線，才能準(zhǔn)確研究該地區(qū)煙蚜是否產(chǎn)生抗性及其抗性水平。本研究結(jié)果表明，不同年份測定滅多威、吡蟲啉、阿維菌素和樂果的LC50值相差不超過5倍。表明該品系相對較敏感，可用于該地區(qū)抗性監(jiān)測。

宋春滿等采用浸漬法測得的煙蚜敏感品系對滅多威、樂果、溴氰菊酯的LC50值分別為80.3、51.0、1.1 mg/L[18]，與本試驗(yàn)測得結(jié)果基本一致。劉筱兵等采用浸漬法測定室內(nèi)飼養(yǎng)2年且不接觸藥劑的敏感品系對滅多威、吡蟲啉的LC50分別為20.23、14.25 mg/L[3]，與之相比，本試驗(yàn)所用相對敏感品系對這2種藥劑相差不超過5倍。因此，本試驗(yàn)所獲得的煙蚜敏感品系可以作為今后監(jiān)測貴州煙蚜抗藥性的對照。

參考文獻(xiàn)：

[1]張廣學(xué)，鐘鐵森. 中國經(jīng)濟(jì)昆蟲志第二十五冊：同翅目 蚜蟲類（一）[M]. 北京：科學(xué)出版社，1983：30.

[2]Weber G. Genetic-variability in host plant adaptation of the green peach aphid，myzus-persicae[J]. Entomologia Experimentalis et Applicata，1985，38（1）：49-56.

[3]劉筱兵，劉長明. 福建主要煙區(qū)煙蚜抗藥性[J]. 華東昆蟲學(xué)報(bào)，2008，17（4）：254-258.

[4]杜進(jìn)平，王蘭珍. 煙草病毒病介體昆蟲的研究現(xiàn)狀與展望[J]. 中國煙草，1991（2）：17-21.

[5]秦?zé)ň眨豕鸱? 我國煙田蚜蟲與病毒病害[J]. 中國煙草學(xué)報(bào)，1996，3（2）：75-78.

[6]古勤生. 葫蘆科作物主要病毒病防治研究進(jìn)展[J]. 中國西瓜甜瓜，2002（4）：27-30.

[7]Brault V，Uzest M，Monsion B，et al. Aphids as transport devices for plant viruses[J]. Comptes Rendus Biologies，2010，333（6/7）：524-538.

[8]黃婷，袁治禮，成巨龍，等. 煙草對蝕紋病毒和馬鈴薯Y病毒的抗病性鑒定[J]. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2012，40（6）：107-113，119.

[9]盧訓(xùn)，丁銘，方琦，等. 馬鈴薯Y病毒云南昭通煙草分離物的檢測及年度間差異比較[J]. 植物保護(hù)，2013，39（3）：56-60.

[10]Moores G D，Devine G J，Devonshire A L. Insecticide-Insensitive acetylcholinesterase can enhance Esterase-based resistance in Myzus persicae and Myzus nicotianae[J]. Pesticide Biochemistry and Physiology，1994，49（2）：114-120.

[11]顧春波，王開運(yùn)，馬惠，等. 我國西南煙區(qū)煙蚜的抗藥性水平[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2006，33（1）：77-80.

[12]Margaritopoulos J T，Skouras P J，Nikolaidou P，et al. Insecticide resistance status of Myzus persicae （Hemiptera：Aphididae） populations from peach and tobacco in mainland Greece[J]. Pest Management Science，2007，63（8）：821-829.

[13]Srigiriraju L，Semtner P J，Bloomquist J R. Monitoring for imidacloprid resistance in the tobacco-adapted form of the green peach aphid，Myzus persicae （Sulzer） （Hemiptera：Aphididae），in the eastern United States[J]. Pest Management Science，2010，66（6）：676-685.

[14]高希武，鄭炳宗，曹本鈞. 北京及河北廊坊地區(qū)桃蚜對擬除蟲菊酯類殺蟲劑抗性研究[J]. 農(nóng)藥，1993，32（2）：8-9，14.

[15]胡冠芳，劉敏艷，張新瑞，等. 桃蚜敏感種群的篩選及其抗藥性演化的研究[J]. 植物保護(hù)，2004，30（4）：50-53.

[16]FAO. Plant production and protection 21 recommended methods for measurement of resistant to pesticides[M]. Rome：FAO，1980：49-51.

[17]李秀環(huán)，高明，周超，等. 甜菜夜蛾敏感品系的獲得及其對12種殺蟲劑的敏感基線[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2012，39（4）：376-380.

[18]宋春滿，吳興富，鄧建華，等. 云南主要煙區(qū)煙蚜抗藥性的監(jiān)測[J]. 昆蟲知識，2006，43（4）：500-503.張愛華，任志成，王壯，等. 不同生物源農(nóng)藥對西洋參主要病害的室內(nèi)抑菌活性及田間防效[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（11

：197-200.