生防菌爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾的防效與安全性評(píng)價(jià)

蘇湘寧 劉偉玲 王萌 梁曉宇 黃少華 廖章軒 李傳瑛 章玉蘋

摘要：【目的】明確生防菌爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾的防控效果與安全性，為高效綠色防控斜紋夜蛾提供科學(xué)依據(jù)?！痉椒ā坎捎媒~法測(cè)定爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾的室內(nèi)毒力;采用噴霧法測(cè)定200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)斜紋夜蛾的田間控制效果;通過(guò)藥膜法和噴霧法分別評(píng)價(jià)200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)黑卵蜂和甘藍(lán)的安全性?！窘Y(jié)果】室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明，爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲具有較強(qiáng)的毒殺作用，幼蟲取食經(jīng)1.00×107孢子/mL爪哇棒束孢處理的甘藍(lán)葉片48 h后死亡率達(dá)86.96%。田間防治效果試驗(yàn)結(jié)果表明，甘藍(lán)田噴施900、1125和1350 g/ha濃度的200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑10 d后對(duì)斜紋夜蛾的防治效果分別為73.08%、82.77%和83.69%。安全性評(píng)價(jià)結(jié)果表明，200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)黑卵蜂48 h的致死中濃度（LC50）為2.11×108孢子/mL，對(duì)黑卵蜂安全系數(shù)為5.27（t>5.00），為低風(fēng)險(xiǎn)性生物農(nóng)藥;200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)供試3種甘藍(lán)品種生長(zhǎng)速率抑制率均在10.00%以下，且無(wú)變色、壞死、萎蔫及畸形等任何可見(jiàn)藥害癥狀?！窘Y(jié)論】爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲具有較強(qiáng)的毒殺作用，可作為防治斜紋夜蛾有效且安全的生物農(nóng)藥使用。建議在甘藍(lán)斜紋夜蛾低齡幼蟲盛發(fā)期使用200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑1125～1350 g/ha進(jìn)行防治。

關(guān)鍵詞： 爪哇棒束孢;斜紋夜蛾;室內(nèi)毒力;防治效果;安全性評(píng)價(jià)

中圖分類號(hào)： S433.4;S476.12? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：2095-1191（2021）04-0995-07

Control effects of biocontrol strain Isaria javanica on Spodoptera litura（Fabricius） and evaluation safety

SU Xiang-ning1， LIU Wei-ling1， WANG Meng2， LIANG Xiao-yu2，HUANG Shao-hua1， LIAO Zhang-xuan1， LI Chuan-ying1， ZHANG Yu-ping1*

（1Plant Protection Research Institute， Guangdong Academy of Agricultural Sciences/Guangdong Provincial Key Laboratory of High Technology for Plant Protection， Guangzhou? 510640， China; 2College of Plant

Protection， Hainan University， Haikou? 570228， China）

Abstract：【Objective】To evaluate the effects of prevention and control on Spodoptera litura（Fabricius）and the safety of Isaria javanica biocontrol strain and to provide scientific basis for its extensive application. 【Method】The indoor toxi-city of I. javanica to S. litura was tested with leaf immersion method. Field control effects of 2.0×1010 conidia/mL I. javanica WP to S. litura were carried out using the spray method. To evaluate the safety of 2.0×1010 conidia/mL I. javanica WP on Telenomus remus and Brassica oleracea var. capitata L. were carried out using the drug film method and the spray method， respectively. 【Result】The results showed that I. javanica had a strong toxicity to the 3rd instar larvae of S. litura. The mortality rate of larvae fed on B. oleracea leaves treated with 1.00×107 conidia/mL I. javanica for 48 h reached 86.96%. The results of control effects showed that after spraying 2.0×1010 conidia/mL I. javanica WP at 900，1125 and 1350 g/ha concentrations for 10 d， the control effects on S. litura were 73.08%， 82.77% and 83.69%， respectively. The results of safety evaluation showed that the medial lethal concentration（LC50） of 2.0×1010 conidia/mL I. javanica WP for T. remus was 2.11×108 conidia/mL（48 h）. The safety coefficient to T. remus was 5.27（t>5）， which was a low risk biological pesticide. The inhibition rate of 2.0×1010 conidia/mL I. javanica WP on the growth rate of the three cabbage varieties was less than 10.00%， and there were no visible symptoms of discoloration， necrosis，wilting，deformity，etc. 【Conclusion】I. javanica has strong toxic effect on 3rd instar larvea of S. litura， can be used as an effective and safe biological pesticide for the control of S. litura. It is suggested that 1125-1350 g/ha 2.0×1010 conidia/mL I. javanica WP can be used at occurrence period of S. litura larvea on cabbage to control the damage.

Key words： Isaria javanica; Spodoptera litura（Fabricius）;? indoor toxicity; control effects; safety evaluation

Foundation item： National Key Research and Development Program of China（2019YFD0300104）; Applied Scien-ce and Technology Research and Development Project of Guangdong（2016B020234005）; Key-Area Research and Development Project of Guangdong（2020B020223004）; Modern Agricultural Industrial and Technology System Innovation Team Project of Guangdong（2019KJ113）

0 引言

【研究意義】斜紋夜蛾[Spodoptera litura（Fabricius）]隸屬鱗翅目（Lepidopetera）夜蛾科（Noctuidae），是一種分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)的世界性害蟲，在我國(guó)各地均有分布，其寄生范圍極廣，已知寄主植物有99科290多種，是十字花科蔬菜的重要害蟲（Ahmad et al.，2013;叢勝波等，2020）。斜紋夜蛾在我國(guó)蔬菜主產(chǎn)區(qū)常年均有發(fā)生為害，具有間歇暴發(fā)成災(zāi)的特性，可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)農(nóng)作物造成重大損失，嚴(yán)重影響我國(guó)蔬菜產(chǎn)業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展。目前斜紋夜蛾的防治主要依賴化學(xué)農(nóng)藥，但斜紋夜蛾對(duì)多種化學(xué)農(nóng)藥已產(chǎn)生不同程度的抗性，甚至對(duì)蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis）也產(chǎn)生了抗性，如何高效綠色地防控斜紋夜蛾成為植保領(lǐng)域關(guān)注的熱點(diǎn)（Kranthi et al.，2002;許忠順等，2020）。蟲生真菌具有易分離培養(yǎng)、能持續(xù)控制害蟲、對(duì)環(huán)境友好及不易引起抗性等優(yōu)點(diǎn)，在害蟲生物防治中發(fā)揮著重要作用。其中，爪哇棒束孢（Isaria javanica）是一種重要的蟲生真菌，其作用機(jī)理是通過(guò)分生孢子接觸蟲體后，適宜條件下進(jìn)入昆蟲體內(nèi)并大量繁殖，破壞昆蟲組織器官，同時(shí)分泌毒素或次生代謝物，影響昆蟲血液，干擾其新陳代謝，從而殺死昆蟲（Shah and Pell，2003）。因此，進(jìn)一步研究爪哇棒束孢對(duì)害蟲的防控效果與生態(tài)安全性，對(duì)高效綠色防控害蟲具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前，已有較多爪哇棒束孢對(duì)害蟲致病力的研究報(bào)道，且主要集中于室內(nèi)毒力測(cè)定方面。Muhammad（2018）在田間分離了2株爪哇棒束孢菌株，采用菌株接種方法表明，2株爪哇棒束孢菌株對(duì)在柑橘黃龍病病株上的亞洲柑橘木虱（Diaphorina citri）若蟲和成蟲具有一定的致病死亡效果。胡瓊波等（2020）篩選出1株對(duì)黃曲條跳甲（Phyllotreta striolata）活性較高的爪哇棒束孢IJH6102菌株，通過(guò)生物測(cè)定的方法表明，在處理14 d后IJH6102對(duì)黃曲條跳甲成蟲和幼蟲的致死率較高，致死中濃度（LC50）分別為8.2×106和6.8×106分生孢子/mL。Wang等（2020）從死亡的美國(guó)白蛾（Hyphantria cunea）幼蟲蟲體表面分離和鑒定爪哇棒束孢BE01，采用室內(nèi)生物測(cè)定方法表明，1 mL 1×104～1×108的BE01孢子懸浮液對(duì)3、4和5齡美國(guó)白蛾幼蟲的致死率均有顯著影響。Zhao等（2020）采用室內(nèi)生物測(cè)定方法表明，爪哇棒束孢對(duì)水稻害蟲褐飛虱（Nilaparvata lugens）若蟲的致死率較高，影響其存活率和繁殖力，同時(shí)也降低了成蟲的存活率和繁殖力。隨著對(duì)爪哇棒束孢防治害蟲研究的深入，人們開始研究其田間防效。鄧嘉茹等（2019）從被侵染的埃及吹綿蚧（Icerya aegyptiaca）蟲體表面分離和鑒定獲得爪哇棒束孢IJID003，采用室內(nèi)生物測(cè)定和室外噴霧侵染的方法表明，1 mL 1×106～1×108的IJID003孢子懸浮液對(duì)埃及吹綿蚧若蟲和雌成蟲有較強(qiáng)的致病力。張志春等（2020）采用室內(nèi)生物測(cè)定和田間防效試驗(yàn)的方法發(fā)現(xiàn)，爪哇棒束孢含量為1 mL 1×106孢子以上對(duì)非洲菊煙粉虱（Bemisia tabaci）成蟲即具有很高的致病力，3 d后校正死亡率達(dá)90%以上，7 d后非洲菊煙粉虱成蟲全部死亡?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】前人研究多集中在爪哇棒束孢對(duì)一些害蟲的致病力方面，而關(guān)于爪哇棒束孢及其制劑對(duì)斜紋夜蛾的毒力、田間防效，以及制劑對(duì)作物和田間天敵的影響鮮見(jiàn)報(bào)道。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】采用室內(nèi)生物試驗(yàn)測(cè)定爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾的室內(nèi)毒力，通過(guò)田間藥劑噴霧方法探討爪哇棒束孢可濕性粉劑在防治斜紋夜蛾中的最佳使用劑量和防治效果，并評(píng)價(jià)爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)天敵和甘藍(lán)的安全性，為高效綠色防控斜紋夜蛾提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

1. 1. 1 供試藥劑 1000億孢子/克爪哇棒束孢母藥（保藏號(hào)CCTCC NO： M20817，菌株代號(hào)Ij0l）和200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑，由廣東大豐植?？萍加邢薰咎峁?95%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽原藥，黑龍江省大慶志飛生物化工有限公司產(chǎn)品;60億PIB/mL斜紋夜蛾核型多角體病毒原藥和10億PIB/mL斜紋夜蛾核型多角體病毒懸浮劑，由廣州市中達(dá)生物工程有限公司提供。

1. 1. 2 供試作物 供試甘藍(lán)（Brassica oleracea var. capitata L.）品種：潤(rùn)夏甘藍(lán)、農(nóng)場(chǎng)主紫甘藍(lán)和富蘭克林抱子甘藍(lán)，種子購(gòu)自廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所。選取生長(zhǎng)大小一致的甘藍(lán)健壯苗移栽于花盆中，在室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度（25±1）℃、濕度（60%～85%）、光周期L∶D=12 h∶12 h，水肥條件良好，試驗(yàn)過(guò)程中未施用其他農(nóng)藥。

1. 1. 3 供試?yán)ハx 斜紋夜蛾室內(nèi)種群由武漢楚強(qiáng)生物科技有限公司提供，在室內(nèi)未接觸任何藥劑人工飼養(yǎng)多年，對(duì)多種殺蟲劑敏感。試驗(yàn)前用新鮮、未施藥的甘藍(lán)葉片飼養(yǎng)初孵幼蟲至3齡，選取發(fā)育整齊的3齡幼蟲，使之飽食后禁食4 h供試。斜紋夜蛾天敵黑卵蜂（Telenomus remus）采集于廣東省廣州市鐘落潭蔬菜地，采集后于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飼養(yǎng)，用斜紋夜蛾卵塊繁殖。以上供試?yán)ハx置于溫度（25±1）℃、濕度（70±10）%、光周期L∶D=14 h∶10 h的光照培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)。

1. 1. 4 主要儀器 人工氣候箱（寧波江南儀器RXZ-160）、電子分析天平（賽多利斯BSA124S）和背負(fù)式電動(dòng)噴霧器（M9W-315207）。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 爪哇棒束孢室內(nèi)生物測(cè)定 采用浸葉法測(cè)定爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的殺蟲活性（蔣興川等，2019）。用清水將1000億孢子/克爪哇棒束孢母藥稀釋成1.00×107、2.50×106、6.25×105、1.56×105和3.91×104孢子/mL共5個(gè)濃度;將甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽原藥用少量丙酮溶解，再用0.1%吐溫水溶液稀釋成0.2500000、0.0625000、0.0312500、0.0156250和0.0078125 mg/L共5個(gè)濃度作為化學(xué)藥劑對(duì)照;用清水將60億PIB/mL斜紋夜蛾核型多角體病毒原藥稀釋成1.00×107、1.00×106、1.00×105、1.00×104和1.00×103 PIB/mL共5個(gè)濃度作為生物藥劑對(duì)照;另設(shè)清水對(duì)照。隨后用口徑與12孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)徑相同的打孔器將備用甘藍(lán)葉打成圓片后浸于待測(cè)藥劑溶液中，20 s后取出晾干置于12孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔2片葉，每孔接入1頭斜紋夜蛾3齡幼蟲。每處理4個(gè)重復(fù)。處理后48 h分別檢查試驗(yàn)組與對(duì)照組幼蟲存活情況，以毛刷輕觸幼蟲體表，5 s內(nèi)幼蟲軀體和附足不動(dòng)即視為死亡，對(duì)照組死亡率小于10%視為有效試驗(yàn)。記錄斜紋夜蛾幼蟲死亡數(shù)和存活數(shù)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，計(jì)算毒力回歸方程、LC50及95%置信區(qū)間、相關(guān)系數(shù)和校正死亡率。相關(guān)計(jì)算公式如下：

死亡率（%）=（死亡蟲數(shù)/供試蟲數(shù)）×100

校正死亡率（%）=（處理死亡率-對(duì)照死亡率）/

（1-對(duì)照死亡率）×100

1. 2. 2 田間藥效試驗(yàn) 試驗(yàn)在中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)上莊試驗(yàn)站北區(qū)進(jìn)行，供試甘藍(lán)品種為潤(rùn)夏甘藍(lán)，試驗(yàn)時(shí)甘藍(lán)長(zhǎng)勢(shì)均勻，試驗(yàn)地土質(zhì)為中性土壤，所有試驗(yàn)小區(qū)栽培條件（水肥管理、移栽期、種植密度、生育期、水層管理）均勻一致，且符合當(dāng)?shù)乜茖W(xué)的農(nóng)業(yè)實(shí)踐。試驗(yàn)時(shí)田間斜紋夜蛾以2～3齡幼蟲為主。200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑設(shè)900、1125和1350 g/ha 3個(gè)處理，以10億PIB/mL斜紋夜蛾核型多角體病毒懸浮劑1125 g/ha為藥劑對(duì)照，清水為空白對(duì)照（CK）。每處理4個(gè)重復(fù)，共20個(gè)小區(qū)，每小區(qū)面積20 m2，完全隨機(jī)排列，小區(qū)間設(shè)1 m寬的保護(hù)行。采用噴霧法，藥劑兌水噴霧，每公頃施藥液量750 L。調(diào)查采用五點(diǎn)取樣，每點(diǎn)調(diào)查10棵甘藍(lán)上斜紋夜蛾幼蟲數(shù)。分別于藥前調(diào)查蟲口基數(shù)，藥后3、7和10 d調(diào)查殘余活蟲數(shù)，根據(jù)藥后的蟲口減退率計(jì)算防治效果。計(jì)算公式如下：

蟲口減退率（%）=（處理前蟲口數(shù)量-處理后蟲

口數(shù)量）/處理前蟲口數(shù)量×100

防治效果（%）=（處理區(qū)蟲口減退率-對(duì)照區(qū)蟲

口減退率）/（100-對(duì)照區(qū)蟲口減

退率）×100

1. 2. 3 爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)黑卵蜂的安全性評(píng)價(jià) 采用藥膜法測(cè)定供試藥劑對(duì)黑卵蜂成蜂的毒力。用清水將200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑稀釋成有效濃度為6.40×108、1.60×108、4.00×107、1.00×107和2.50×106孢子/mL共5個(gè)濃度，用滴管吸取藥液滴入玻璃試管中，搖晃均勻后倒出多余的藥液，待藥液充分形成藥膜后，挑選同一天羽化且健康的黑卵蜂成蟲10頭放入試管中，每處理5個(gè)重復(fù);清水為空白對(duì)照。用少量5%蜂蜜水潤(rùn)濕脫脂棉封口，置于溫度（25±1）℃、濕度（70±10）%、光周期L∶D=14 h∶10 h的光照培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)。于48 h后統(tǒng)計(jì)黑卵蜂成蟲的死亡數(shù)，以日光照射下輕敲試管，黑卵蜂不動(dòng)記為死亡。計(jì)算公式如下：

安全系數(shù)（t）=天敵的LC50/田間推薦使用有效

濃度

根據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》，t>5.00為低風(fēng)險(xiǎn)性生物農(nóng)藥;0.50

1. 2. 4 爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)甘藍(lán)的室內(nèi)安全性評(píng)價(jià) 供試甘藍(lán)品種為潤(rùn)夏甘藍(lán)、農(nóng)場(chǎng)主紫甘藍(lán)和富蘭克林抱子甘藍(lán)，試驗(yàn)時(shí)甘藍(lán)長(zhǎng)勢(shì)均勻。200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑設(shè)1350、2700和5400 g/ha（有效成分）3個(gè)處理，使用背負(fù)式噴霧器（壓力45 Pa，噴霧速度0.45 L/min）均勻噴施于甘藍(lán)葉片的正反面，并設(shè)清水對(duì)照。每處理4個(gè)重復(fù)，每重復(fù)20株甘藍(lán)。試驗(yàn)過(guò)程中未施用其他農(nóng)藥。分別于噴藥前和噴藥后3、7、14和21 d調(diào)查各處理甘藍(lán)株高（莖長(zhǎng)）、生長(zhǎng)速率、植株形態(tài)和葉色變化。處理21 d內(nèi)作物未見(jiàn)任何藥害癥狀為很安全;生長(zhǎng)抑制率在10.00%以內(nèi)為安全，11.00%～20.00%為輕微藥害，21.00%～50.00%為中度藥害，50.00%以上為嚴(yán)重藥害。計(jì)算公式如下：

生長(zhǎng)速率抑制率（%）=（空白對(duì)照植株新生高

度-藥劑處理植株新生高

度）/空白對(duì)照植株新生高

度×100

1. 3 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和整理，計(jì)算各試驗(yàn)處理濃度下48 h斜紋夜蛾幼蟲的死亡率、蟲口減退率、校正死率和生長(zhǎng)速率抑制率，計(jì)算毒力回歸方程和LC50及其95%置信區(qū)間;采用SPSS 20.0中的鄧肯氏新復(fù)極差法對(duì)校正死亡率數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2. 1 爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的殺蟲活性

由表1可知，不同濃度爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲的致死率存在顯著差異（P<0.05，下同），隨著濃度的降低幼蟲的校正死亡率顯著下降。斜紋夜蛾3齡幼蟲取食經(jīng)1.00×107孢子/mL爪哇棒束孢處理的甘藍(lán)葉片48 h后死亡率達(dá)86.96%，顯著高于其他處理，經(jīng)計(jì)算得到爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾的室內(nèi)毒力回歸方程為y=0.9132x-0.3147，48 h的LC50為6.60×105孢子/mL，95%置信區(qū)間為4.24×105～1.03×106孢子/mL，相關(guān)系數(shù)為0.9892;斜紋夜蛾3齡幼蟲取食經(jīng)1.00×107 PIB/mL斜紋夜蛾核型多角體病毒處理的甘藍(lán)葉片48 h后死亡率為76.67%，經(jīng)計(jì)算得到斜紋夜蛾核型多角體病毒對(duì)斜紋夜蛾的室內(nèi)毒力回歸方程為y=0.5070x-2.8344，48 h的LC50為3.89×105 PIB/mL，95%置信區(qū)間為1.42×105～1.34×106 PIB/mL，相關(guān)系數(shù)為0.9165;斜紋夜蛾3齡幼蟲取食經(jīng)0.2500000 mg/L甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽處理的甘藍(lán)葉片48 h后校正死亡率為78.26%，經(jīng)計(jì)算得到甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽對(duì)甘藍(lán)斜紋夜蛾的室內(nèi)毒力回歸方程為y=1.3642x+6.6437，48 h的LC50為0.0624 mg/L，95%置信區(qū)間為0.0461～0.0845 mg/L，相關(guān)系數(shù)為0.9801。結(jié)果表明爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲具有較高的殺蟲活性。

2. 2 200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)斜紋夜蛾的田間防治效果

不同處理對(duì)斜紋蛾的田間防治效果試驗(yàn)結(jié)果（表2）表明，4個(gè)藥劑處理對(duì)斜紋夜蛾的速效性較差，藥后3 d，200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑3個(gè)濃度處理及10億PIB/mL斜紋夜蛾核型多角體病毒懸浮劑處理對(duì)斜紋夜蛾的防治效果均在60.00%左右，不同處理間防效差異不顯著（P>0.05，下同）;藥后7 d，4個(gè)藥劑處理對(duì)斜紋夜蛾的防治效果較藥后3 d均有大幅提升，其中以200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑1350 g/ha處理的防治效果最高，達(dá)85.81%，以200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑900 g/ha處理的防治效果最低，為74.15%，顯著低于其他3個(gè)處理，而其他3個(gè)處理間差異不顯著;藥后10 d，200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑900、1125和1350 g/ha處理及10億PIB/mL斜紋夜蛾核型多角體病毒懸浮劑1125 g/ha處理對(duì)斜紋夜蛾的防治效果較穩(wěn)定，分別為73.08%、82.77%、83.69%和84.34%，與藥后7 d的防治效果相近。

2. 3 200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)黑卵蜂的安全性評(píng)價(jià)

由表3可知，200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)黑卵蜂的室內(nèi)毒力回歸方程為y=0.8893x-7.4026，48 h的LC50為2.11×108孢子/mL，95%置信區(qū)間為6.22×107～4.82×109孢子/mL。根據(jù)田間推薦使用有效濃度計(jì)算得安全系數(shù)為5.27（t>5.00）。因此，200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)黑卵蜂為低風(fēng)險(xiǎn)性生物農(nóng)藥，在田間使用對(duì)天敵黑卵蜂較安全。

2. 4 200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)3種甘藍(lán)的安全性評(píng)價(jià)

由圖1可知，施用1350、2700和5400 g/ha的200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑后，3種甘藍(lán)品種的生長(zhǎng)速率抑制率均在10.00%以下，且無(wú)變色、壞死、萎蔫和畸形等任何可見(jiàn)藥害癥狀。其中，施用5400 g/ha的200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑3 d后，富蘭克林抱子甘藍(lán)的生長(zhǎng)速率抑制率最高，為5.63%，但施藥7、14和21 d后，其生長(zhǎng)速率抑制率分別降至3.23%、3.49%和3.99%。表明200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)常見(jiàn)類型甘藍(lán)均安全。

3 討論

農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有重要作用。隨著現(xiàn)代社會(huì)人類對(duì)環(huán)境保護(hù)和生態(tài)安全意識(shí)的提高，人們認(rèn)識(shí)到大量使用合成農(nóng)藥會(huì)造成難以克服的弊病，如3R問(wèn)題等（王永強(qiáng)等，2019）。生物農(nóng)藥由于其不可比擬的優(yōu)越性而日益受到人們的重視和青睞。蟲生真菌作為重要的生物農(nóng)藥種類，具有活性高、選擇性強(qiáng)、對(duì)人畜安全、對(duì)生態(tài)環(huán)境友好、易于規(guī)模生產(chǎn)、害蟲難以產(chǎn)生抗性等優(yōu)點(diǎn)。由于長(zhǎng)期使用化學(xué)農(nóng)藥，斜紋夜蛾對(duì)一些常用化學(xué)藥劑及多種作用機(jī)制獨(dú)特的新型藥劑產(chǎn)生了不同程度的抗性，利用生物農(nóng)藥可很好地解決這些問(wèn)題（桑松等，2013）。國(guó)內(nèi)外已有昆蟲病原真菌爪哇棒束孢在自然條件下感染鱗翅目昆蟲的報(bào)道（黃渤等，2008;Specht et al.，2009; Shimazu and Takatsuka，2010），但關(guān)于爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾的室內(nèi)活性以及田間條件下對(duì)斜紋夜蛾的防治效果評(píng)價(jià)未見(jiàn)報(bào)道。

甲維鹽是1984年美國(guó)Merk & Co.公司合成的一種新型高效抗生素類殺蟲、殺螨劑，是目前已知?dú)⑾x劑中對(duì)鱗翅目昆蟲殺蟲活性最高的殺蟲劑（Mrozik，1984）。核型多角體病毒是斜紋夜蛾的主要病原微生物，室內(nèi)對(duì)斜紋夜蛾具有較強(qiáng)的毒力（鄒金城等，2016）。本研究利用甲維鹽和核型多角體病毒作為室內(nèi)活性測(cè)定的對(duì)照藥劑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲的殺蟲活性高于2種對(duì)照藥劑，可進(jìn)一步評(píng)價(jià)其田間防治效果。斜紋夜蛾核型多角體病毒對(duì)斜紋夜蛾種群具有良好的控制作用，是有效防治斜紋夜蛾的生物制劑（鄒金城等，2016）。本研究利用10億PIB/mL斜紋夜蛾核型多角體病毒懸浮劑作為田間防效的對(duì)照藥劑，發(fā)現(xiàn)200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)斜紋夜蛾也具有很好的田間防治效果，其中、高劑量（有效成分用量1125和1350 g/ha）處理對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的防治效果與10億PIB/mL斜紋夜蛾核型多角體病毒懸浮劑的防治效果相當(dāng)，二者間無(wú)顯著差異，對(duì)斜紋夜蛾的防治潛力較大。

廣譜類化學(xué)殺蟲劑在防治害蟲的同時(shí)也可能殺死天敵生物并破壞生態(tài)平衡。有研究報(bào)道，甲維鹽雖然對(duì)鱗翅目害蟲具有較高毒力，但對(duì)天敵昆蟲松毛蟲赤眼蜂（Trichogramma dendrolimi Matsumura）也具有很高毒力，對(duì)赤眼蜂科昆蟲成蟲存活和繁殖具有顯著影響（Hussain et al.，2010; Sattar et al.，2011）。某些化學(xué)農(nóng)藥還會(huì)對(duì)天敵的寄生率、壽命、搜尋和寄生能力等產(chǎn)生負(fù)面影響（陳德錕，2014; 田俊策等，2017）。本研究發(fā)現(xiàn)，200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑對(duì)黑卵蜂安全系數(shù)較高，為低風(fēng)險(xiǎn)性生物農(nóng)藥。然而，200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑田間施用濃度下是否會(huì)對(duì)天敵的生長(zhǎng)發(fā)育、壽命及對(duì)寄主搜尋與寄生能力產(chǎn)生影響還有待進(jìn)一步探究?；诒狙芯拷Y(jié)果，爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾的生物防治潛力較大，可替代市面上風(fēng)險(xiǎn)較高的化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)品，也可在甘藍(lán)生產(chǎn)上進(jìn)行組合交替使用。由于殺蟲真菌見(jiàn)效較化學(xué)農(nóng)藥緩慢，建議在甘藍(lán)斜紋夜蛾低齡幼蟲盛發(fā)期使用200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑進(jìn)行防治。

4 結(jié)論

爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲具有較強(qiáng)的毒殺作用，可作為防治斜紋夜蛾有效且安全的生物農(nóng)藥使用。建議在甘藍(lán)斜紋夜蛾低齡幼蟲盛發(fā)期使用200億孢子/克爪哇棒束孢可濕性粉劑進(jìn)行防治，推薦制劑用量為1125～1350 g/ha。

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（責(zé)任編輯 麻小燕）