殺蟲氣霧劑的液相測定方法及對蚊的趨避活性

黃 蕙 楊河川 許杰妤 王 芳 李 婷

(1.成都彩虹電器(集團)股份有限公司，四川成都，610045；2.四川省農(nóng)藥檢定所，四川成都，610041)

高效氯氰菊酯為非內(nèi)吸性但具備觸殺和胃毒作用的殺蟲劑，通過與害蟲鈉離子通道相互作用而破壞其神經(jīng)系統(tǒng)的功能,用于公共衛(wèi)生和畜牧業(yè)中防治多種害蟲，如蠅、蟑螂、蚊、蚤、虱、臭蟲、動物體外寄生蟲如蜱、螨等[1]。右旋反式氯丙炔菊酯外觀為淺黃色晶體，熔點90℃，在水中及其他羥基溶劑中溶解度很小，能溶于甲苯、丙酮、環(huán)己烷等大多數(shù)有機溶劑。對光、熱穩(wěn)定，在中性及微酸性介質(zhì)中穩(wěn)定，堿性條件下易分解。主要應(yīng)用：對蒼蠅和蟑螂有很好的擊倒和殺死活性[2]。

致倦庫蚊(Cuelx pipiens quinquefasciatus)是我國重要的家棲蚊種，作為衛(wèi)生殺蟲劑預(yù)防控制的主要靶標(biāo)生物，是傳播疾病的重要傳播媒介[3]。致倦庫蚊多在夜間出沒，除了具有嚴(yán)重的騷擾性以外，還是傳播乙型腦炎的“兇手”，對人類的健康造成嚴(yán)重威脅。

擬除蟲菊酯類化合物是防治蚊蟲的主要有效成分，具有高效低毒、低殘留的特點，是目前防治衛(wèi)生害蟲的重要殺蟲劑[4-6]。市場上主要常用的昆蟲擊倒劑為胺菊酯、烯丙菊酯，使用量大、使用時間長，蚊蟲易產(chǎn)生抗性。所以使用新型擊倒劑能夠更有效地殺滅害蟲。另外，右旋反式氯丙炔菊酯對蚊、蠅的致死活性較差，故應(yīng)與其他致死劑復(fù)配使用為宜。根據(jù)右旋反式氯丙炔菊酯的卓越擊倒活性、高效氯氰菊酯的觸殺和胃毒作用特點，將兩種擬除蟲菊酯混配在一起作用機制互補，本文即是對采用擬除蟲菊酯化合物為有效成分的氣霧劑進行液相色譜檢測，建立檢測方法進行分離和定量分析，并進一步通過生物測試研究具體有效驅(qū)蚊活性配比。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx

致倦庫蚊(Cuelx pipiens quinquefasciatus)，引種于四川省疾病預(yù)防控制中心，羽化后第3—5天未吸血雌成蟲。進行試驗溫度(26±1)℃，相對濕度65%±10%，保持室內(nèi)空氣流通。

1.2 供試樣品及儀器

供試樣品：殺蟲氣霧劑樣品由我公司配制；正己烷(色譜級)和乙酸乙酯(分析純)均為成都市科隆化學(xué)品有限公司；高效氯氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(已知質(zhì)量分數(shù)≥98%)為江蘇揚農(nóng)化工股份有限公司；右旋反式氯丙炔菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(已知質(zhì)量分數(shù)≥98%)為江蘇揚農(nóng)化工股份有限公司。

儀器：Waters 2695-2996液相色譜儀(帶VWD檢測器，沃特世)；色譜柱(50mm×4.6mm×5μm，Aglient Si不銹鋼色譜柱，安捷倫)；微量注射器(10ul，安捷倫)。

1.3 實驗方法

1.3.1高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯液相色譜分析

準(zhǔn)確稱取0.05g高效氯氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(精確至0.0002g)和0.03g右旋反式氯丙炔菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(精確至0.0002g)于25mL容量瓶中，用正己烷定容，搖勻；準(zhǔn)確移取5.0mL于25mL容量瓶中，用正己烷定容，搖勻備用。取一罐氣霧劑樣品，將其置于約-15℃低溫箱中放置4h取出，在罐的頂部開一個直徑約0.2mm的小孔，在46℃水浴中放置1h，讓拋射劑緩慢揮發(fā)掉，再將孔擴大，倒出料液。準(zhǔn)確稱取氣霧料液5g(精確至0.0002g)于25mL容量瓶中，用正己烷定容，搖勻待分析。色譜條件：柱溫(30±2)℃；流動相：正己烷+乙酸乙酯=98+2(v/v)；流速：1.5ml/min；檢測波長：230nm；進樣量：10ul。公式計算：產(chǎn)品中高效氯氰菊酯或右旋反式氯丙炔菊酯質(zhì)量分數(shù)(%)=(樣品峰面積×標(biāo)準(zhǔn)溶液中標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量×標(biāo)準(zhǔn)品純度質(zhì)量分數(shù)×放完推進劑后藥液質(zhì)量)/(標(biāo)準(zhǔn)品峰面積×稱取氣霧劑樣品的質(zhì)量×(一整罐氣霧劑樣品質(zhì)量-倒出料液后空罐質(zhì)量)×5稀釋因子)。

1.3.2高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯殺蟲氣霧劑對蚊的趨避活性

按照GB/T 13917-2009相關(guān)規(guī)定進行試驗。

(1)室內(nèi)藥效：采用拉板無色透明有機玻璃圓筒裝置，將致倦庫蚊30只通過放蟲孔分別釋放于帶拉板封蓋的圓筒內(nèi)。待試蟲回復(fù)正常活動后將待測氣霧劑筒放至水平狀，噴嘴垂直向下，通過噴藥孔噴施藥劑(1.0±0.1)g，噴霧后立即用膠塞將噴藥孔塞住。于1min后將拉板抽掉，立即計時，每隔一定時間記錄被擊倒的試蟲數(shù)。20min后將全部供試?yán)ハx轉(zhuǎn)移至清潔的養(yǎng)蟲籠中進行標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)，24h檢查記錄試蟲死亡數(shù)。

(2)模擬現(xiàn)場：在模擬現(xiàn)場距離地面1.5m、兩相鄰墻壁0.5m，垂直相交的4個點及中央共計掛掛籠5個，每個籠內(nèi)釋放試蟲20只。待試蟲恢復(fù)正?；顒雍?，試驗人員穿戴好防護服裝，站于模擬現(xiàn)場的中央，手持氣霧劑罐，按0.3g/m3劑量，噴嘴向上45度進行噴霧，噴霧時應(yīng)轉(zhuǎn)身360度。施藥完畢，試驗人員立即離開現(xiàn)場，關(guān)閉門窗并計時。1h將被擊倒的試蟲收集至清潔養(yǎng)蟲籠中，用5%糖水棉球喂養(yǎng)。未被擊倒的試蟲不收回，計入24h活蟲數(shù)，24h檢查死試蟲數(shù)。

2 結(jié)果與討論

2.1 高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯氣霧劑正相液相色譜法的可靠性驗證

2.1.1 分析方法的線性相關(guān)性

分別配制5個不同質(zhì)量濃度的高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述操作條件分別測定，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線。結(jié)果表明樣品峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。高效氯氰菊酯線性方程：y=6E+06x+17121,R2=0.998；右旋反式氯丙炔菊酯線性方程：y=3E+06x-78927,R2=0.997。

2.1.2 分析方法的精密度試驗和準(zhǔn)確度

高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯的測定采用正相液相色譜法。隨機取一個樣品，對高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯平行測定。本方法對高效氯氰菊酯平行測定的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.003899，變異系數(shù)為3.48%；對右旋反式氯丙炔菊酯的平行測定的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.001967，變異系數(shù)為3.66%，精密度較好。取經(jīng)分析已知高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯準(zhǔn)確含量的樣品，分別加入已知含量高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯，分別測定高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯的回收率。高效氯氰菊酯的添加回收率在99.13%—100.65%之間，平均回收率99.96%，RSD為0.68%；右旋反式氯丙炔菊酯的添加回收率在99.32%—100.55%之間，平均回收率99.8%，RSD為0.55%。

2.2 5個配比高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯殺蟲氣霧劑對蚊的趨避活性

5個濃度高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯殺蟲氣霧劑對蚊的室內(nèi)和模擬現(xiàn)場藥效如表1。根據(jù)試驗結(jié)果，按照GB/T 13917.2-2009、GB/T13917.10-2009規(guī)定的方法及評價標(biāo)準(zhǔn)進行了評價，配方①殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效不合格、模擬現(xiàn)場為B級產(chǎn)品；配方②殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場均為B級產(chǎn)品；配方③殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場均為B級產(chǎn)品；配方④殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場均為A級產(chǎn)品；配方⑤殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效為A級產(chǎn)品、模擬現(xiàn)場為B級產(chǎn)品。0.10%高效氯氰菊酯·0.05%右旋反式氯丙炔菊酯殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊的室內(nèi)藥效和模擬現(xiàn)場試驗最佳。

表1 5個不同配比殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊藥效試驗結(jié)果

3 討論與結(jié)論

本試驗首先建立了液相色譜法檢測殺蟲氣霧劑產(chǎn)品中有效成分高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯的分析方法，該分析方法準(zhǔn)確可靠，可應(yīng)用于生產(chǎn)質(zhì)量控制。另外，按照GB/T 13917.2-2009、GB/T13917.10-2009規(guī)定的方法及評價標(biāo)準(zhǔn)進行了評價，配方①殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效不合格、模擬現(xiàn)場為B級產(chǎn)品；配方②殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場均為B級產(chǎn)品；配方③殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場均為B級產(chǎn)品；配方④殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場均為A級產(chǎn)品；配方⑤殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效為A級產(chǎn)品、模擬現(xiàn)場為B級產(chǎn)品。根據(jù)以上實驗結(jié)果，篩選確定了用于趨避致倦庫蚊殺蟲氣霧劑的最佳配比為高效氯氰菊酯：右旋反式氯丙炔菊酯為0.10%：0.05%，該配比的殺蟲氣霧劑對致倦庫蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場均為A級產(chǎn)品。本文研究的內(nèi)容基本確立了高效氯氰菊酯及右旋反式氯丙炔菊酯經(jīng)復(fù)配后能對致倦庫蚊起到良好的驅(qū)避效果，并且能對其質(zhì)量進行有效把控，可以進一步完善產(chǎn)品，投放市場。