柴胡加龍骨牡蠣湯“異病同治”冠心病和焦慮癥的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)作用機(jī)制

靳會(huì)會(huì)，黃樂(lè)曦，侯季秋，陳雅麗，史金玉，安 瑩，趙海濱

隨著生物-心理-社會(huì)醫(yī)學(xué)模式的建立，情志因素在疾病發(fā)生發(fā)展中的重要作用逐漸受到重視。冠心病是公認(rèn)的心身疾病，焦慮癥狀或焦慮癥顯著增加冠心病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[1]，影響治療及預(yù)后，兩者病理互損，導(dǎo)致惡性循環(huán)?！半p心”異常已逐漸成為冠心病的重要發(fā)病形式和國(guó)內(nèi)外心血管病學(xué)界的研究熱點(diǎn)[2]。

柴胡加龍骨牡蠣湯出自《傷寒論》，由柴胡、黃芩、人參、茯苓、桂枝、半夏、大黃、龍骨、牡蠣、大棗、鉛丹(現(xiàn)由珍珠母代替)、生姜12味藥組成，是治療情志類疾病的經(jīng)典方劑。近年來(lái)藥理研究及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，柴胡加龍骨牡蠣湯治療雙心疾病療效確切，該方不僅能干預(yù)動(dòng)脈粥樣硬化，對(duì)兒茶酚胺所致的心血管損傷具有保護(hù)作用，還可逆轉(zhuǎn)下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸亢進(jìn)、修復(fù)應(yīng)激導(dǎo)致的海馬神經(jīng)元損傷，并通過(guò)調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)發(fā)揮抗焦慮等作用[3-5]，對(duì)心臟的生理功能和病理狀態(tài)均產(chǎn)生一定的影響。柴胡加龍骨牡蠣湯成分復(fù)雜，現(xiàn)有研究多局限于單一靶點(diǎn)和通路，治療冠心病和焦慮癥共病的作用機(jī)制研究尚不明確。本研究應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，從分子角度分析柴胡加龍骨牡蠣湯的活性成分靶點(diǎn)與疾病之間的關(guān)聯(lián)性，構(gòu)建活性成分、靶點(diǎn)、疾病、通路之間的多種網(wǎng)絡(luò)關(guān)系，旨在為臨床研究提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 中藥活性成分與靶點(diǎn)預(yù)測(cè) 檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)[6](http://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php)，以口服生物利用度(OB)≥30%、類藥性(DL)≥0.18和藥物對(duì)小腸上皮細(xì)胞的穿透性(Caco-2)≥0.4為條件，初步篩選柴胡加龍骨牡蠣湯植物藥(柴胡、黃芩、人參、茯苓、桂枝、半夏、大黃、生姜、大棗)的活性成分及對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)信息，并根據(jù)已發(fā)表的文獻(xiàn)補(bǔ)充未預(yù)測(cè)到的活性成分的已知靶點(diǎn)。登錄BATMAN-TCM數(shù)據(jù)庫(kù)[7](http://bionet.ncpsb.org/batman-tcm/)獲得礦物藥(龍骨、牡蠣、珍珠母)可信度高的蛋白作為候選靶點(diǎn)。通過(guò)Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.uniprot.org/)將上述預(yù)測(cè)靶點(diǎn)進(jìn)行校正和轉(zhuǎn)化操作，最終獲得柴胡加龍骨牡蠣湯活性成分的靶點(diǎn)信息。

1.2 疾病靶點(diǎn)篩選 利用GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.genecards.org/)，以“coronary heart disease”“anxiety disorder”為關(guān)鍵詞檢索與冠心病和焦慮癥相關(guān)的靶點(diǎn)。將上述成分靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)進(jìn)行匹配，分別獲得柴胡加龍骨牡蠣湯治療冠心病和焦慮癥的潛在作用靶點(diǎn)，通過(guò)Venn diagram在線程序繪制韋恩圖進(jìn)行分析。

1.3 靶蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 將柴胡加龍骨牡蠣湯治療冠心病和焦慮癥的共有靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING平臺(tái)(https://string-db.org/)進(jìn)行蛋白分析，限定物種為“homo sapiens”，選擇置信度為0.400，其余參數(shù)保持默認(rèn)設(shè)置，結(jié)果以TSV格式導(dǎo)出，根據(jù)分析結(jié)果統(tǒng)計(jì)靶點(diǎn)關(guān)聯(lián)頻次，得到核心靶點(diǎn)信息。其中網(wǎng)絡(luò)的粗細(xì)代表相互作用強(qiáng)弱，靶點(diǎn)的度值表示相互作用的靶點(diǎn)個(gè)數(shù)。

1.4 靶點(diǎn)通路注釋分析 為較好地了解核心靶點(diǎn)的功能及在信號(hào)通路中的作用，利用R語(yǔ)言的org.Hs.eg.db程序包，將基因symbol轉(zhuǎn)化為基因ID，之后安裝colorspace、stringi、DOSE、clusterProfiler、pathview等程序包，對(duì)獲取的基因分別進(jìn)行基因本體(GO)富集分析及京都基因和基因組百科全書(shū)(KEGG)通路富集分析，設(shè)定閾值P<0.05。按照涉及的靶點(diǎn)數(shù)量進(jìn)行排序，繪制柱狀圖和點(diǎn)圖。

1.5 活性成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 利用Cytoscape 3.7.1軟件(http://www.cytoscape.org/)構(gòu)建活性成分-靶點(diǎn)-通路共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)，借助Network Analyzer功能對(duì)網(wǎng)絡(luò)的拓?fù)湫再|(zhì)進(jìn)行分析，研究基于自由度、緊密度、介度中心性等參數(shù)以評(píng)估節(jié)點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中的重要性。

1.6 分子對(duì)接驗(yàn)證 分子對(duì)接是分子通過(guò)能量、化學(xué)環(huán)境等相互識(shí)別找到最佳匹配模式的過(guò)程。采用Auto Dock vina軟件對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)中度值居前3位的靶蛋白與柴胡加龍骨牡蠣湯主要活性成分進(jìn)行分子對(duì)接，從Chem Office軟件和RCSB PDB數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.rcsb.org/)分別獲得化合物和靶蛋白的3D結(jié)構(gòu)，利用PyMOL軟件對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行去水、加氫等處理，借助Auto Dock軟件將化合物和靶蛋白格式轉(zhuǎn)化為＊pdbqt格式，最后通過(guò)Vina進(jìn)行對(duì)接。根據(jù)結(jié)合能值評(píng)估化合物與靶蛋白的結(jié)合強(qiáng)度與活性。

2 結(jié) 果

2.1 活性成分及靶點(diǎn)獲取 經(jīng)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)篩選得到植物藥活性成分共102個(gè)，其中柴胡9個(gè)，黃芩29個(gè)，茯苓5個(gè)，人參17個(gè)，桂枝3個(gè)，大黃5個(gè)，半夏10個(gè)，生姜5個(gè)，大棗19個(gè)。通過(guò)BATMAN-TCM數(shù)據(jù)庫(kù)，在Score cutoff>20條件下，得到礦物藥活性成分共7個(gè)。將上述兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)所得活性成分預(yù)測(cè)產(chǎn)生的靶點(diǎn)合并去重后獲得靶點(diǎn)175個(gè)。

2.2 疾病相關(guān)靶點(diǎn)獲取 從GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)得到冠心病相關(guān)靶點(diǎn)6 567個(gè)，焦慮癥相關(guān)靶點(diǎn)2 887個(gè)，確定疾病共有靶點(diǎn)1 380個(gè)。將柴胡加龍骨牡蠣湯活性成分靶點(diǎn)與兩種疾病共有靶點(diǎn)取交集，利用Venn diagram軟件繪制韋恩圖，得到活性成分-疾病共有靶點(diǎn)92個(gè)，詳見(jiàn)圖1。將共有靶點(diǎn)與活性成分匹配后發(fā)現(xiàn)74個(gè)有效活性成分參與調(diào)控92個(gè)作用靶點(diǎn)，其中豆甾醇為柴胡、黃芩、人參、半夏、生姜、大棗共有化合物；黃芩素為黃芩與半夏共有化合物；谷甾醇為黃芩與桂枝共有化合物等，提示柴胡加龍骨牡蠣湯中相同的化合物對(duì)應(yīng)多種不同藥材，多個(gè)靶點(diǎn)可對(duì)應(yīng)相同化合物，初步推測(cè)上述結(jié)果可能是柴胡加龍骨牡蠣湯發(fā)揮“異病同治”功效的關(guān)鍵。74個(gè)有效活性成分信息詳見(jiàn)表1。

圖1 柴胡加龍骨牡蠣湯與冠心病、焦慮癥交集靶點(diǎn)韋恩圖

表1 柴胡加龍骨牡蠣湯有效活性成分信息

(續(xù)表)

2.3 靶蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)分析及核心靶點(diǎn)結(jié)果 將共有靶點(diǎn)上傳至STRING平臺(tái)，隱藏4個(gè)游離的無(wú)相互作用蛋白，進(jìn)而得到由88個(gè)靶蛋白參與的PPI網(wǎng)絡(luò)，詳見(jiàn)圖2。該網(wǎng)絡(luò)包含88個(gè)節(jié)點(diǎn)、412條邊，其中紫色線代表經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的蛋白間相互作用，淺藍(lán)色線代表從數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得的蛋白間相互作用。分析網(wǎng)絡(luò)中參數(shù)信息，將自由度排名居前30位的節(jié)點(diǎn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)及可視化處理，結(jié)果提示靶標(biāo)中度值排名居前5位的分別為蘇氨酸蛋白激酶(AKT1)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、轉(zhuǎn)錄因子AP-1(JUN)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)、白細(xì)胞介素8(CXCL8)。自由度作為關(guān)鍵的拓?fù)涮卣髦抵?，表示與某點(diǎn)連線的邊的數(shù)量，度值越大說(shuō)明該靶點(diǎn)與更多的靶標(biāo)存在靶向聯(lián)系，因此在網(wǎng)絡(luò)中的作用也越重要，核心靶點(diǎn)柱狀圖詳見(jiàn)圖3。

圖2 靶蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)圖

圖3 核心靶點(diǎn)柱狀圖

2.4 靶點(diǎn)功能與通路富集分析 借助R語(yǔ)言對(duì)92個(gè)交集靶點(diǎn)進(jìn)行GO富集分析和KEGG通路富集分析，根據(jù)P<0.05選取排名居前20位的條目進(jìn)行分析。GO分析確定了118個(gè)生物學(xué)過(guò)程相關(guān)的條目，主要涉及蛋白異源二聚化活性、離子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性、G蛋白偶聯(lián)胺受體活性、神經(jīng)遞質(zhì)受體活性、RNA聚合酶Ⅱ近端啟動(dòng)子序列特異性DNA結(jié)合、類固醇結(jié)合、核受體活性、類固醇激素受體活性等，詳見(jiàn)圖4。KEGG通路分析結(jié)果顯示：神經(jīng)活性配體-受體相互作用、AGE-RAGE信號(hào)通路、心肌細(xì)胞中的腎上腺素能信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、鈣信號(hào)通路、絲裂原活化蛋白激酶B(MAPK)信號(hào)通路、IL-17信號(hào)通路、5-羥色胺能突觸、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶(Akt)信號(hào)通路、cGMP-PKG信號(hào)通路、環(huán)磷酸腺苷(cAMP)信號(hào)通路等在柴胡加龍骨牡蠣湯治療冠心病和焦慮癥共病過(guò)程中均發(fā)揮著重要作用，詳見(jiàn)圖5。

圖4 柴胡加龍骨牡蠣湯治療冠心病合并焦慮癥共有靶點(diǎn)的GO生物過(guò)程

圖5 柴胡加龍骨牡蠣湯治療冠心病和焦慮癥共有靶點(diǎn)的KEGG通路富集分析

2.5 活性成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建 利用Cytoscape 3.7.1軟件構(gòu)建活性成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖，詳見(jiàn)圖6，借助其插件Network Analyzer進(jìn)行分析。該網(wǎng)絡(luò)包括186個(gè)節(jié)點(diǎn)和982條邊，深綠色節(jié)點(diǎn)代表靶點(diǎn)，粉色節(jié)點(diǎn)代表活性成分，紫色節(jié)點(diǎn)代表通路，網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)大小與自由度呈正相關(guān)，節(jié)點(diǎn)越大表明度值越高。網(wǎng)絡(luò)分析表明，β-谷甾醇自由度為140，緊密度為0.421 2，介度為0.076 4，因此，預(yù)測(cè)β-谷甾醇是柴胡加龍骨牡蠣湯治療冠心病和焦慮癥共病的主要活性成分，其次為豆甾醇(自由度為108，緊密度為0.402 6，介度為0.086 5)、黃芩素(自由度為30，緊密度為0.380 7，介度為0.049 8)，詳見(jiàn)表2。從靶點(diǎn)角度分析，度值較大的靶點(diǎn)包括PTGS2、SCN5A、NCOA2、ADRB2、ADRA1B、CASP3、BCL2等，可能是柴胡加龍骨牡蠣湯發(fā)揮作用的主要靶點(diǎn)。該網(wǎng)絡(luò)圖表明柴胡加龍骨牡蠣湯通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)、多通路協(xié)同調(diào)控而發(fā)揮“異病同治”的作用。

表2 柴胡加龍骨牡蠣湯主要活性成分的拓?fù)鋵傩詤?shù)

圖6 活性成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖

2.6 分子對(duì)接結(jié)果 將PPI網(wǎng)絡(luò)中度值排名居前3位的靶蛋白與柴胡加龍骨牡蠣湯主要活性成分進(jìn)行分子對(duì)接驗(yàn)證，詳見(jiàn)表3。當(dāng)結(jié)合能<0說(shuō)明配體和受體可自發(fā)結(jié)合，結(jié)合能<-5 kcal/mol，表示有較好結(jié)合活性，結(jié)合能分值越低對(duì)接效果越佳[8]。分子對(duì)接結(jié)果顯示，柴胡加龍骨牡蠣湯的主要活性成分β-谷甾醇、黃芩素與3個(gè)靶蛋白的對(duì)接親和力均<-5 kcal/mol，表明篩選出的活性成分與靶蛋白均能較好的結(jié)合，其中β-谷甾醇與受體AKT1的結(jié)合活性最強(qiáng)，詳見(jiàn)圖7。

表3 柴胡加龍骨牡蠣湯主要活性成分與核心靶點(diǎn)的結(jié)合度

3 討 論

近年來(lái)，雙心醫(yī)學(xué)日益受到重視，心臟合并心理異?！半p心”疾病?；橐蚬?，冠心病與焦慮癥共病的病人當(dāng)以“雙心同治”為治療原則[9]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為冠心病屬“胸痹”“心痛”范疇，焦慮癥屬“郁證”范疇?！秲?nèi)經(jīng)》中已記載“心主血脈”與“心主神明”的雙心理論，而中醫(yī)“形神合一”與“雙心醫(yī)學(xué)”理念不謀而合。中醫(yī)藥治療雙心疾病療效確切，尤其改善癥狀方面具有極大潛力。王克鵬[10]通過(guò)臨床試驗(yàn)證實(shí)采用柴胡加龍骨牡蠣湯聯(lián)合常規(guī)西藥治療穩(wěn)定型心絞痛伴焦慮，治療后病人胸痛、胸悶癥狀積分升高，同時(shí)焦慮癥狀顯著減輕，療效優(yōu)于對(duì)照組，顯示出安神除煩的功效。許國(guó)磊等[11]研究顯示，柴胡加龍骨牡蠣湯加減治療的治療組焦慮評(píng)分、生活質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)、療效等均優(yōu)于對(duì)照組。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，柴胡加龍骨牡蠣湯能改善病人心絞痛癥狀，緩解焦慮狀態(tài)；促進(jìn)心肌梗死大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞動(dòng)員、歸巢及旁分泌，抑制炎癥反應(yīng)和心肌梗死后交感重構(gòu)，從而改善心肌梗死后心肌損傷及焦慮程度[12-13]。

本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法初步篩選出柴胡加龍骨牡蠣湯治療冠心病和焦慮癥共病的主要活性成分包括β-谷甾醇、黃芩素、谷甾醇、黃連素、人參二醇等。有研究顯示，β-谷甾醇具有抗氧化、抗炎癥、降低膽固醇、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤等作用[14]。黃芩素預(yù)處理可能通過(guò)激活內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)信號(hào)通路和抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，對(duì)急性心肌梗死產(chǎn)生心臟保護(hù)作用[15]。黃芩素抗氧化應(yīng)激和抗炎的機(jī)制主要通過(guò)改善超氧化物歧化酶(SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)的抗氧化酶活性，減少活性氧(ROS)和丙二醇產(chǎn)生，抑制白細(xì)胞介素1(IL-1)、IL-6和腫瘤壞死因子(TNF)1等炎性因子表達(dá)[16]。Yadav等[17]研究發(fā)現(xiàn)，豆甾醇能明顯減少氯胺酮誘發(fā)的小鼠自發(fā)活動(dòng)、刻板行為及潛伏期等精神病癥狀，增加γ-氨基丁酸和谷胱甘肽水平，降低多巴胺、丙二醛、TNF-α水平和乙酰膽堿酯酶活性，顯示出豆甾醇對(duì)精神病癥狀有一定的改善作用。

冠心病和焦慮癥具有AKT1、IL-6、JUN等92個(gè)共有靶點(diǎn)，74個(gè)活性成分，121條共同通路，冠心病與焦慮癥相似的作用功效是柴胡加龍骨牡蠣湯對(duì)兩個(gè)不同系統(tǒng)疾病“異病同治”的作用基礎(chǔ)。PPI網(wǎng)絡(luò)分析發(fā)現(xiàn)各靶標(biāo)之間關(guān)聯(lián)密切，自由度越大表明該靶點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中參與調(diào)控的可能性越大，預(yù)測(cè)到共有靶點(diǎn)是冠心病和焦慮癥治療的重要靶點(diǎn)。AKT1、IL-6、JUN是PPI網(wǎng)絡(luò)中度值排名較高的關(guān)鍵靶點(diǎn)，分子對(duì)接證實(shí)這3個(gè)受體蛋白與β-谷甾醇、黃芩素具有較好的結(jié)合活性。AKT1是3種密切相關(guān)的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶的亞型(AKT1、AKT2、AKT3)之一，處于多條信號(hào)通路的交叉點(diǎn)，通過(guò)影響下游多種因子活化，介導(dǎo)細(xì)胞存活、增殖與凋亡、新生血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化及細(xì)胞周期調(diào)控等多種生理過(guò)程[18-19]。IL-6是一種炎性因子，主要由活化的成纖維細(xì)胞和T細(xì)胞產(chǎn)生，參與炎癥反應(yīng)。IL-6通過(guò)與其他促炎因子形成級(jí)聯(lián)反應(yīng)，是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[20]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，焦慮、抑郁病人IL-1、IL-6和C反應(yīng)蛋白等炎性因子水平較對(duì)照組升高，免疫炎癥反應(yīng)增強(qiáng)[21]。JUN蛋白(v-Jun、c-Jun、JunB和JunD)是核轉(zhuǎn)錄因子AP-1家族的成員，AP-1復(fù)合物典型結(jié)構(gòu)是由c-Fos與c-Jun結(jié)合形成的異源二聚體，AP-1與DNA結(jié)合后調(diào)控多種基因的表達(dá)，主要通過(guò)調(diào)節(jié)VEGF誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞遷移、增殖與血管生成[22-23]。神經(jīng)元凋亡過(guò)程中JNK/c-Jun通路激活發(fā)揮著重要作用，c-Jun持續(xù)性表達(dá)和磷酸化是神經(jīng)細(xì)胞凋亡所必需的，應(yīng)用特異性阻斷劑阻斷JNK/c-Jun通路，結(jié)果表現(xiàn)出抑制凋亡的保護(hù)效應(yīng)[24-25]。上述相關(guān)重要靶標(biāo)的作用與分子對(duì)接結(jié)果表明，AKT1、IL-6、JUN可能是柴胡加龍骨牡蠣湯發(fā)揮藥效作用的關(guān)鍵靶點(diǎn)，間接驗(yàn)證網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，柴胡加龍骨牡蠣湯主要通過(guò)抗凋亡、抗炎、血管新生、調(diào)節(jié)焦慮及抗動(dòng)脈粥樣硬化等作用充分體現(xiàn)“異病同治”的治療思想。

GO富集分析結(jié)果表明，相關(guān)作用靶點(diǎn)主要參與蛋白異源二聚化活性、離子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性、G蛋白偶聯(lián)受體活性、神經(jīng)遞質(zhì)受體活性、RNA聚合酶Ⅱ近端啟動(dòng)子序列特異性DNA結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子活性等生物學(xué)過(guò)程。KEGG富集分析發(fā)現(xiàn)，柴胡加龍骨牡蠣湯作用靶點(diǎn)富集度最高的相關(guān)通路中MAPK信號(hào)通路是生物體中重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之一，存在于多數(shù)細(xì)胞內(nèi)，其在細(xì)胞增殖、分化、轉(zhuǎn)化和凋亡等過(guò)程中發(fā)揮重要的作用[26]。PI3K/AKT信號(hào)通路激活可誘導(dǎo)炎性細(xì)胞的聚集促進(jìn)炎癥反應(yīng)從而加速動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展，AKT是PI3K信號(hào)通路下游的一個(gè)重要靶蛋白，活化的AKT通過(guò)磷酸化作用，調(diào)控下游多個(gè)靶蛋白促凋亡分子Bcl-2/Bcl-xL相關(guān)的死亡啟動(dòng)因子、eNOS等，進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、凋亡、分化及遷移等[27-28]。5-羥色胺能突觸通路是由5-羥色胺和分布于腦內(nèi)不同部位的突觸前后膜上各類5-羥色胺受體組成，可影響γ-氨基丁酸、多巴胺等其他神經(jīng)遞質(zhì)釋放，介導(dǎo)情感、學(xué)習(xí)、記憶、行為等大腦高級(jí)活動(dòng)，其功能改變引起焦慮癥、抑郁癥和老年癡呆等情志疾病發(fā)生[29]。柴胡加龍骨牡蠣湯可調(diào)節(jié)其他多條通路，在神經(jīng)活性配體-受體相互作用、內(nèi)分泌抵抗、心肌細(xì)胞中的腎上腺素能信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面發(fā)揮重要的作用，這與中醫(yī)藥治療的整體觀念一致，符合中藥多成分、多靶點(diǎn)、多通路協(xié)調(diào)治療疾病的特點(diǎn)。

綜上所述，本研究在生物信息學(xué)基礎(chǔ)上，對(duì)柴胡加龍骨牡蠣湯“異病同治”冠心病和焦慮癥的作用機(jī)制進(jìn)行探討，為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用提供了新思路。本研究存在的不足：僅從理論方面對(duì)柴胡加龍骨牡蠣湯作用機(jī)制進(jìn)行了預(yù)測(cè)，未明顯提示活性成分對(duì)關(guān)鍵基因表達(dá)的上調(diào)與下調(diào)關(guān)系，但未考慮藥物、靶點(diǎn)、疾病之間作用強(qiáng)度的差異，今后仍需進(jìn)一步研究驗(yàn)證。