分子生物學(xué)技術(shù)在檢測轉(zhuǎn)基因食品中的應(yīng)用分析

張元元

摘要：最近幾年，我國食品行業(yè)在不斷進(jìn)步和發(fā)展，尤其是轉(zhuǎn)基因食品行業(yè)，給人們帶來了諸多經(jīng)濟效益，但是與此同時也存在一些安全隱患問題?，F(xiàn)如今，注重檢測轉(zhuǎn)基因食品成為了重點工作內(nèi)容。在檢測轉(zhuǎn)基因食品中，分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用較為廣泛，且獲得了不錯的效果。下文針對分子生物學(xué)技術(shù)在檢測轉(zhuǎn)基因食品中的應(yīng)用進(jìn)行深入分析，希望可以有效提升檢測水平，保證轉(zhuǎn)基因食品安全。

關(guān)鍵詞：分子生物學(xué)技術(shù);檢測應(yīng)用;轉(zhuǎn)基因食品

引言：轉(zhuǎn)基因食品，主要通過基因工程技術(shù)，把有助于人們的外源基因進(jìn)行轉(zhuǎn)移，轉(zhuǎn)移到受體生物體中，對其遺傳特性進(jìn)行改變，獲的原有不具備的特性和品質(zhì)。近幾年我國非常注重開發(fā)與生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因作物。在轉(zhuǎn)基因食品研究過程中，有關(guān)轉(zhuǎn)基因食品過敏性、抗生素抗性、有無毒性等安全問題成為了人們關(guān)注的熱點話題。因為轉(zhuǎn)基因食品和人們的身體健康、生態(tài)環(huán)境有著一定的聯(lián)系，我國應(yīng)頒布了相關(guān)法規(guī)，提出了跟蹤標(biāo)識轉(zhuǎn)基因食品。而想要滿足該要求，需要不斷優(yōu)化和完善各種基因食品檢測方法，尤其是分子生物學(xué)技術(shù)，其應(yīng)用廣泛，種類較多，包括基因水平檢測、轉(zhuǎn)錄水平檢測、翻譯水平檢測等，有效保證了轉(zhuǎn)基因食品的安全性。

一、基因水平檢測

轉(zhuǎn)基因食品中，加工原料生物體內(nèi)具有導(dǎo)入的外源DNA，因此可以直接尋找被導(dǎo)入的外源DNA序列?，F(xiàn)階段，常見的基因水平檢測方法有以下幾種：

1.基因芯片法

該種方法融合了諸多種學(xué)科，如計算機科學(xué)、化學(xué)、統(tǒng)計學(xué)、生命科學(xué)、生命信息學(xué)、微電子技術(shù)等?；蛐酒?，主要是利用微加工、微電子技術(shù)，把大量經(jīng)過人工設(shè)計的基因片段，高密度、有序的在玻璃片或者是纖維膜等載體上進(jìn)行排列，進(jìn)而得出信息監(jiān)測芯片。從本質(zhì)上來講，其屬于脫氧核糖核酸微陣列[1]。實際上，該種檢測方法的原理就是堿基配對，對樣品基因進(jìn)行檢測，利用PCR擴增和體外轉(zhuǎn)錄等技術(shù)，把待測DNA摻入標(biāo)記分子，然后和在芯片中的DNA探針雜交，利用掃描系統(tǒng)，檢測探針雜交信號強度情況，通過計算機技術(shù)綜合性分析信號，便可以對樣品中的表達(dá)信息、基因序列進(jìn)行獲取，最終進(jìn)行定性和定量。從中可以看出，該種檢測方法自動化程度較高，且還有較高的檢測效率、較低的檢測成本等特點?，F(xiàn)階段，基因芯片發(fā)被廣泛應(yīng)用到轉(zhuǎn)基因食品定性檢測和定量檢測中。

2.2Southern雜交技術(shù)

該種方法主要是通過對特異性探針結(jié)合的基因組片斷內(nèi)或者是周圍序列，實施限制性內(nèi)切核酸酶酶切為點作圖，進(jìn)而對基因在基因組內(nèi)部組織排列進(jìn)行研究，分析過程涉及到以下幾個步驟：在待測樣品中對DNA進(jìn)行提取，利用限制性內(nèi)切酶，開展酶解工作，然后通過瓊脂糖凝膠電游分離，轉(zhuǎn)移到固相支持無，利用對特異性探針的標(biāo)記，結(jié)合在膜上的轉(zhuǎn)基因成分，進(jìn)行雜交反應(yīng)，最后利用放射自顯影技術(shù)或者是利用熒光分析法，對待測樣品中靶標(biāo)DNA是否存在進(jìn)行判斷[2]。該種方法應(yīng)用效果良好，可以檢測轉(zhuǎn)基因成分，但是想要利用該種方法對轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)行檢測需要對轉(zhuǎn)入的外源基因序列進(jìn)行明確，并且待見樣品需要保證一定純度、基因組中需要具有較高轉(zhuǎn)基因成分豐度。

二、轉(zhuǎn)錄水平檢測

在檢測轉(zhuǎn)基因食品中，最為常用的一種轉(zhuǎn)錄水平檢測方法為N o r t h e r n 雜 交 技術(shù)，該種技術(shù)原理和上述So r t h e r n 雜 交技術(shù)大致相同，反應(yīng)步驟也基本相同。但是，N o r t h e r n 雜 交 技術(shù)的對象是mRNA，mRNA是食品中特定外源基因DNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，在提取RNA時并不用利用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行消化，可以省去該步驟，直接通過瓊脂糖凝膠電泳分離，轉(zhuǎn)移到合適的膜上，進(jìn)行交雜檢測。由于RNA較為活躍，在食品中對RNA進(jìn)行提取時非常容易被各種污染源影響，進(jìn)而發(fā)生降解，而其質(zhì)量、含量也和食品完整性、新鮮度相關(guān)，若食品是被深度加工的，那么其RNA加工時更加容易被降解，因此在檢測鮮活動物、植物性食品時可以利用該種檢測技術(shù)[3]。此外，N o r t h e r n 雜 交 技術(shù)雜交信號的強弱與mRNA豐度之間存在一定的聯(lián)系，若mRNA豐度過低，這時需要把其進(jìn)行分離，進(jìn)而增強檢測信號。因為該條件的限制，該種檢測技術(shù)應(yīng)用并不是較為廣泛。

三、翻譯水平檢測

酶聯(lián)免疫吸附試驗法是常用的一種翻譯水平檢測方法，其原理是抗原抗體特異性結(jié)合，對轉(zhuǎn)基因表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測，利用自顯影等手段對信號強弱進(jìn)行檢測。酶聯(lián)免疫吸附試驗法，可以定性檢測食品中轉(zhuǎn)基因成分，也可以定量分析食品中轉(zhuǎn)基因成分。該種檢測方法主要有間接法與直接法兩種類型，且需要利用到三種試劑，其中包括酶標(biāo)記抗原或抗體、固定相抗原或抗體、酶作用底物。在檢測過程中，在固相載體平板微孔中，把抗原或抗體進(jìn)行結(jié)合，在載體表面，結(jié)合待測溶液特殊抗原或抗體，然后把酶標(biāo)記康球蛋白與抗原結(jié)合，利用酶標(biāo)記物、底物顏色改變這兩種方式，檢測結(jié)合物，利用最后溶液顏色的深淺開展定量分析[4]。該種檢測技術(shù)特異性較強、靈敏度較高，操作較為簡單，通量性較高，可以對很多樣品進(jìn)行同時。但是該種檢測方法也有一些不足之處，如果外源基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含量過低，檢測能力會有所降低，并且僅僅適用于檢測食品原材料，因為食品加工時容易出現(xiàn)蛋白質(zhì)降解和失活問題。

結(jié)束語：

總而言之，在新時代背景下，在檢測轉(zhuǎn)基因食品中分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用是非常重要的，可以保證轉(zhuǎn)基因食品安全。轉(zhuǎn)基因食品和人們的身體健康、經(jīng)濟效益有著直接的聯(lián)系。最近幾年，人們對檢測轉(zhuǎn)基因食品技術(shù)要求的提升，當(dāng)下急需發(fā)展低消耗、高效、簡便、準(zhǔn)確、快速的轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)。但是，在具體檢測中，不同檢測技術(shù)的優(yōu)缺點也是不同的，需要不斷完善和優(yōu)化，有時還需要和其他檢測方法配合使用進(jìn)行驗證。在未來，隨著科技不斷發(fā)展，將會研究出更先進(jìn)、更科學(xué)、更多的檢測轉(zhuǎn)基因食品技術(shù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]沈泓，李超，李玨.分子生物學(xué)技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食品檢測領(lǐng)域中的研究進(jìn)展[J].中國農(nóng)業(yè)信息，2017（15）：57-59.

[2]付華.生物芯片技術(shù)及其在食品檢測中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代食品，2016，000（016）：P.14-15.

[3]張敬泰.重視分子生物學(xué)檢測技術(shù)服務(wù)區(qū)域食品安全[J].食品安全導(dǎo)刊，2019，000（012）：127.

[4]林馥芬，侯紅利，劉晉，等.轉(zhuǎn)基因植物DNA成分檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J].中國種業(yè)，2016，11（11）：19-20.

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