安神膠囊的薄層色譜鑒別

張曉紅 王月茹 謝 偉 陜西步長(zhǎng)制藥有限公司（西安710075）

安神膠囊是由靈芝、沒(méi)藥、墨旱蓮、柴胡、山楂、香附、丹參等組成的純中藥制劑。該制劑可疏肝養(yǎng)血，安神定志。適用于肝氣郁結(jié)，心血不足之失眠、多夢(mèng)、健忘、頭昏、情志抑郁、不思飲食等證。通過(guò)對(duì)安神膠囊治療失眠（肝郁血虛證）的臨床觀察，結(jié)果表明該制劑療效確切，對(duì)肝氣郁結(jié)，心血不足之失眠、多夢(mèng)、健忘、頭昏、情志抑郁、不思飲食等均有較好的療效。本研究重點(diǎn)在于優(yōu)化和篩選出安神膠囊中各藥材的薄層色譜條件，為能夠合理的控制和制定安神膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀 器 939全自動(dòng)薄層制板器（重慶南岸貝爾德儀器技術(shù)廠）；WFH－201 紫外投射儀（上海）；SB3200DT 超聲波清洗機(jī)（寧波）；梅特勒電子天平（萬(wàn)分子一）；KZW－G 型儀表恒溫不銹鋼水浴鍋（上海）；RE－52AA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；硅膠G（青島海洋化工廠）；

1.2 試 藥 靈芝對(duì)照藥材（批號(hào)為：120968－200906）、沒(méi)藥對(duì)照藥材（批號(hào)為：120922－201007）、墨旱蓮對(duì)照藥材（批號(hào)為：121137－201003）、柴胡對(duì)照藥材（批號(hào)為：120992－200705）均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；水為純凈水，其余試劑均為分析純；安神膠囊3批樣品（批號(hào)：120701、120702、120703）由陜西步長(zhǎng)制藥有限公司生產(chǎn)提供。

2 薄層色譜鑒別研究［1］

2.1 靈芝的薄層鑒別［2］取本品適量，加乙醇20mL，溫浸1h，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL 使溶解，作為供試品溶液。另取靈芝對(duì)照藥材1g，同法制成對(duì)照藥材溶液。吸取上述供試品溶液6μL，對(duì)照藥材溶液2μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，該薄層板厚度0.3mm，于110℃活化30min 后，以甲苯和醋酸乙酯（9∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。同法檢測(cè)三批供試品色譜結(jié)果中，在對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無(wú)干擾。

2.2 沒(méi)藥的薄層鑒別［3］取本品適量，加乙醚20mL，超聲提取30min，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)哟姿嵋阴?mL使溶解，作為供試品溶液。另取沒(méi)藥對(duì)照藥材1g，同法制成對(duì)照藥材溶液，分別吸取上述供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以甲苯－醋酸乙酯－冰醋酸（92∶5∶5）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以二硝基苯肼乙醇試液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)。同法檢測(cè)三批供試品色譜結(jié)果中，在對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無(wú)干擾。

2.3 墨旱蓮的薄層鑒別 取本品適量，加乙醇20mL，溫浸1h，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL 使溶解，作為供試品溶液。另取墨旱蓮對(duì)照藥材1g，供試品溶液制法制成對(duì)照藥材溶液。分別吸取上述供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各5μL，點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，該薄層板厚度0.3mm，于110℃活化30min后，以環(huán)已烷－丙酮－醋酸乙酯（12∶3∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。同法檢測(cè)三批供試品色譜結(jié)果中，在對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無(wú)干擾。

2.4 柴胡的薄層鑒別 取本品內(nèi)容物15g，置于索氏提取器中，加入三氯甲烷適量，回流提取2h后，棄去三氯甲烷液，藥渣揮干，再置索氏提取器中加90%乙醇適量，回流提取4h，回收乙醇至干，殘?jiān)铀?0mL使之溶解，用水飽和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇液，用1%NaOH 溶液洗滌3次，再用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次20mL，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?～4mL 使溶解，加0.5g中性氧化鋁拌勻，蒸干甲醇，裝入預(yù)先裝好的中性氧化鋁（100～200 目）柱子中，用三氯甲烷－甲醇（7∶2）50mL 洗脫，棄去洗脫液，再用三氯甲烷－甲醇－水（7∶3∶2）50mL 進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使之溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對(duì)照藥材1g，同法制成柴胡正丁醇萃取液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。另按照相同處方比例和制備方法，制得不含柴胡的陰性對(duì)照樣品。按照薄層色譜法（2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液15μL、對(duì)照藥材溶液10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，置以三氯甲烷－甲醇－水（7∶3∶2）10℃以下放置的下層液為展開(kāi)劑的展開(kāi)缸內(nèi)飽和20min，展開(kāi)，取出，晾干，噴以2%對(duì)二甲氨基苯甲醛40%硫酸溶液，60℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。在供試品色譜中，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照樣品無(wú)干擾。

3 討 論

安神膠囊為中藥復(fù)方制劑，其組方藥味較多，化學(xué)成分復(fù)雜，我們?cè)谘芯恐型ㄟ^(guò)多次試驗(yàn)，篩選出合理的提取方法和展開(kāi)系統(tǒng)，對(duì)方中主要藥物進(jìn)行定性質(zhì)量鑒別，該方法簡(jiǎn)便易行，斑點(diǎn)分離清晰，重復(fù)性好，陰性對(duì)照樣品無(wú)干擾，可作為該制劑的定性質(zhì)量控制方法。

在薄層鑒別研究中，我們?cè)鴮?duì)處方中山楂、香附藥材，分別采用了多種展開(kāi)溶劑種類(lèi)及不同比例展開(kāi)劑進(jìn)行了研究，但均分離效果不理想，重現(xiàn)性差，故未列入本文中。

［1］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010，附錄ⅥB：34－35.

［2］ 王守愚.丹芪口服液中丹參、黃芪的薄層鑒別［J］.中草藥，1996，27（7）：409.

［3］ 田繼義，羅紅鎖.益氣養(yǎng)血口服液的薄層鑒別研究［J］.陜西中醫(yī)，2009，30（10）：1399－1400.