白藜蘆醇對(duì)IEC-6 細(xì)胞輻射損傷的防護(hù)作用及機(jī)制研究

秦浩人 孫婉君 張恒 閻皓 張?jiān)娢?朱思偉 王輝

放射性腸炎是腹腔、盆腔、腹膜后惡性腫瘤放療后的常見(jiàn)并發(fā)癥，主要表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、便血、里急后重等癥狀，嚴(yán)重者可引起腸穿孔、腹膜炎等并發(fā)癥，危及病人生命[1]。放療醫(yī)師為避免放射性腸炎，對(duì)腫瘤靶區(qū)的單次照射劑量和總照射劑量給與限制，甚至放棄對(duì)部分靶區(qū)的治療，因此嚴(yán)重影響病人的預(yù)后。目前除對(duì)癥支持治療外，臨床上對(duì)放射性腸炎尚缺乏有效的治療手段，因此如何有效減輕和治療放射性腸炎是一個(gè)亟需解決的問(wèn)題。

電離輻射誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激是放射性腸損傷主要原因[2]。相關(guān)研究[3]表明，電離輻射產(chǎn)生的過(guò)量活性氧（reactive oxygen species,ROS）能抑制小腸黏膜再生，由此導(dǎo)致放射性腸炎。在細(xì)胞水平上，ROS 積累會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞衰老和凋亡，造成輻射損傷[4-5]。因此，通過(guò)消除ROS 并抑制細(xì)胞衰老、凋亡對(duì)放射性腸炎的治療具有重要意義。

白藜蘆醇是一種天然多酚類化合物，具有抗氧化、抗衰老、抗炎和抗凋亡等多種藥理作用[6-7]，可以改善電離輻射引起的肝損傷、造血系統(tǒng)損傷和卵巢炎癥，是一種潛在的放射防護(hù)劑。前期研究[11]發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇能夠改善電離輻射誘導(dǎo)的小鼠小腸損傷，但其能否通過(guò)消除ROS 并減輕輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老、凋亡，從而改善輻射誘導(dǎo)的小腸損傷仍不清楚。本研究以大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞（intestinal epithelial cell-6,IEC-6）為研究對(duì)象，評(píng)估白藜蘆醇對(duì)IEC-6輻射損傷的保護(hù)作用，并探討白藜蘆醇是否可以消除ROS 并抑制細(xì)胞衰老及凋亡，為白藜蘆醇治療放射性腸炎提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 材料 大鼠IEC-6 細(xì)胞系購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所。DMEM 高糖培養(yǎng)基、胎牛血清、雙抗購(gòu)自美國(guó)Gibco 公司，白藜蘆醇、牛胰島素購(gòu)自美國(guó)Sigma 公司。P16 抗體購(gòu)自Abcam 公司；P21 抗體購(gòu)自Affinity 公司；β-actin、過(guò)氧化氫酶（catalase,CAT）、超氧化物歧化酶2（superoxide dismutase 2，SOD2）抗體購(gòu)自于CST 公司。細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)（cell counting kit-8,CCK-8）試劑盒、β-半乳糖苷酶（β-galactosidase,β-Gal）染色試劑盒購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司；ROS 檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞凋亡檢測(cè)（Annexin V-PI Apoptosis Detection, Annexin V-PI）試劑盒購(gòu)自碧云天生物技術(shù)有限公司。mRNA 提取及反轉(zhuǎn)錄、cDNA 擴(kuò)增及實(shí)時(shí)熒光定量PCR（realtime qPCR）檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海翊圣生物科技有限公司。引物序列由生工生物工程股份有限公司合成。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)及分組 用含10%胎牛血清、1%雙抗、0.1%胰島素的DMEM 高糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在含5%CO2、37.0 ℃的恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育，每2 d 換液1 次，細(xì)胞密度至90%以上后傳代，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。白藜蘆醇在二甲基亞砜中溶解，用DMEM 高糖培養(yǎng)基稀釋。將細(xì)胞進(jìn)行等量載體孵育后分為對(duì)照組、模型組和白藜蘆醇組，分別做不同處理。①對(duì)照組：僅接受偽照射。②模型組：接受不同劑量（2、4、6、8、10 Gy）的6 MeV 高能X 射線照射，劑量率0.99 Gy/min。記錄不同劑量照射后的細(xì)胞克隆團(tuán)數(shù)量，分析電離輻射對(duì)細(xì)胞增殖的影響。③白藜蘆醇組：照射前2 h 加入含不同濃度的白藜蘆醇培養(yǎng)基孵育，測(cè)量0.1、0.5、1、5、10、20、40 μmol/L白藜蘆醇處理后的細(xì)胞活力；另外，測(cè)量在0.1、1、2、4、6、8 μmol/L 白藜蘆醇處理后經(jīng)電離輻射的細(xì)胞活力。選取細(xì)胞活力最佳時(shí)對(duì)應(yīng)的白藜蘆醇濃度，測(cè)量該濃度下細(xì)胞凋亡率、DCFH-DA 熒光強(qiáng)度、β-Gal 陽(yáng)性率及SOD2、CAT、p16、p21 的mRNA 水平和蛋白質(zhì)表達(dá)。

1.3 克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖 細(xì)胞處理后常規(guī)消化細(xì)胞，將細(xì)胞稀釋至104 個(gè)/mL，在6 孔板內(nèi)接種細(xì)胞，每孔600 個(gè)細(xì)胞。在37 ℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育7～14 d，當(dāng)肉眼可見(jiàn)細(xì)胞克隆團(tuán)時(shí)中止孵育。用4%多聚甲醛固定細(xì)胞15 min，棄去固定液后0.1%結(jié)晶紫染色30 min，流水緩慢洗去染色液，空氣干燥。在顯微鏡下計(jì)數(shù)，將細(xì)胞數(shù)目大于10 的克隆團(tuán)計(jì)為1 個(gè)克隆團(tuán)。

1.4 CCK-8 法檢測(cè)細(xì)胞活力 細(xì)胞消化后接種于96 孔板內(nèi)，3 000 個(gè)細(xì)胞/孔，每組設(shè)置5 個(gè)副孔。細(xì)胞在培養(yǎng)箱中孵育24 h 至細(xì)胞貼壁后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理。細(xì)胞處理后在培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育24 h。向每孔加入10 μL CCK-8 試劑，培養(yǎng)箱內(nèi)孵育2 h 后用酶標(biāo)儀測(cè)定在450 nm 處的光密度（OD）。

1.5 2’，7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽（2,7-Dichlorodihydrofluorescein diacetate，DCFH-DA）熒光探針檢測(cè)ROS 照射及給藥處理后6 h 檢測(cè)ROS。按照1∶1 000 無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋DCFH-DA。去除細(xì)胞培養(yǎng)液，加入1 mL 稀釋的DCFH-DA。37 ℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20 min。無(wú)血清培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞3 次后在熒光顯微鏡下檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)為488 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為525 nm。

1.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡 照射給藥處理后24 h，參照Annexin V-PI 凋亡檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測(cè)IEC-6 細(xì)胞凋亡、壞死率。將處理后的細(xì)胞培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)，磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer saline,PBS）洗滌貼壁細(xì)胞1 次，加入胰酶消化。室溫孵育至輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)加入收集的細(xì)胞培養(yǎng)液中止消化。調(diào)整細(xì)胞濃度至（5～10）×105/mL，取1 mL 再次離心洗滌。棄上清，加入195 μL Annexin V-FITC 結(jié)合液輕輕重懸細(xì)胞。加入5 μL Annexin V-FITC，加入10 μL 碘化丙啶染色液，輕輕混勻。20～25 ℃室溫下避光孵育10～20 min 后進(jìn)行檢測(cè)。

1.7 β-Gal 染色檢測(cè)細(xì)胞衰老 將IEC-6 細(xì)胞接種于6 孔板內(nèi)，照射給藥處理后48 h 檢測(cè)細(xì)胞衰老。吸出孔內(nèi)培養(yǎng)液，PBS 洗滌后加入1 mL β-Gal染色固定液，室溫固定15 min。吸除固定液后PBS洗滌3 次，每孔加入1 mL 染色工作液，37 ℃孵育在無(wú)二氧化碳環(huán)境中過(guò)夜，光學(xué)顯微鏡下觀察，每組隨機(jī)選取6 個(gè)視野，統(tǒng)計(jì)β-Gal 陽(yáng)性率

1.8 Real-time qPCR 檢測(cè)mRNA 水平 照射后24 h胰酶消化并收集細(xì)胞，采用Trizol 提取總RNA,測(cè)定RNA 濃度及純度，按反轉(zhuǎn)錄試劑盒步驟構(gòu)建cDNA文庫(kù)。以cDNA 為模板進(jìn)行Real-time qPCR 擴(kuò)增。GAPDH 為內(nèi)參，內(nèi)參及目的基因Cdkn2a（p16）、Cdkn1a（p21）、SOD2、CAT 引物序列見(jiàn)表1。擴(kuò)增條件：95 ℃預(yù)變性5 min，95 ℃變性10 s，60 ℃退火/延伸30 s，循環(huán)40 次。采用2-ΔΔCt法計(jì)算目的基因相對(duì)表達(dá)量。

表1 基因的引物序列及產(chǎn)物大小

1.9 Western Blot 檢測(cè)蛋白質(zhì)表達(dá) 照射后24 h 采用胰酶消化并收集細(xì)胞，加入適量的細(xì)胞裂解液重懸，置于冰上裂解30 min（每隔5 min 震蕩1 次）,裂解完全后放入已預(yù)冷的離心機(jī)中14 000 r/min 離心15 min；BCA 法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度后取上清并加入上樣緩沖液，100 ℃變性10 min；每孔等量上樣,將蛋白質(zhì)進(jìn)行SDS-PAGE 電泳分離，并轉(zhuǎn)移至PVDF 膜上；5%脫脂奶粉室溫封閉2 h 后孵育一抗，4 ℃震蕩過(guò)夜。TBST 洗膜3 次，室溫下孵育二抗2 h，再次洗膜后用ECL 化學(xué)發(fā)光液顯影，Bio-rad 全自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng)顯影拍照。將β-actin 設(shè)為內(nèi)參蛋白，Image J 1.4 軟件分析P16、P21、CAT、SOD2 和β-actin 蛋白條帶的灰度值，比較各組蛋白質(zhì)表達(dá)量。

1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用Kolmogorov-Smirnov 檢驗(yàn)評(píng)估計(jì)量資料的正態(tài)性，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。多組間比較采用單因素方差分析，應(yīng)用Tukey’s HSD 進(jìn)行驗(yàn)后兩兩比較。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 電離輻射對(duì)IEC-6 細(xì)胞增殖的影響 對(duì)照組細(xì)胞克隆團(tuán)數(shù)量為（272.00±15.00）個(gè)，模型組采用2、4、6、8、10 Gy 電離輻射后細(xì)胞克隆團(tuán)數(shù)量分別為（249.30±14.19）、（215.70±19.55）、（146.70±15.70）、（65.00±12.77）、（27.33±3.51）個(gè)，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=147.40，P＜0.001）。模型組4、6、8、10 Gy電離輻射后細(xì)胞克隆團(tuán)數(shù)量逐漸減少，均低于對(duì)照組（P＜0.05）（圖1）。

圖1 電離輻射后細(xì)胞克隆團(tuán)數(shù)量。a 與對(duì)照組相比，P＜0.05。

2.2 白藜蘆醇對(duì)IEC-6 細(xì)胞活力的影響 對(duì)照組細(xì)胞在450 nm 處的OD 值為2.475±0.271，濃度為0.1、0.5、1、5、10、20、40 μmol/L 的白藜蘆醇組細(xì)胞的OD 值分別為2.479±0.358、2.355±0.260、2.593±0.376、2.340 ±0.384、1.956 ±0.368、1.236 ±0.262、0.719±0.072，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=28.70，P＜0.001）。其中，濃度為10、20、40 μmol/L 的白藜蘆醇組細(xì)胞的OD 值逐漸降低，均低于對(duì)照組（均P＜0.05），其余各組與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）（圖2）。

圖2 白藜蘆醇對(duì)細(xì)胞活力的影響。a與對(duì)照組相比，P＜0.05。

2.3 白藜蘆醇對(duì)電離輻射后細(xì)胞活力的影響 對(duì)照組細(xì)胞在450 nm 處的OD 值為1.416±0.177，模型組的OD 值為1.108±0.123，濃度為0.1、1、2、4、6、8 μmol/L 的白藜蘆醇組細(xì)胞的OD 值分別為1.291±0.119、1.329±0.210、1.125±0.100、1.143±0.211、0.946±0.368、0.943±0.062，多組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=10.94，P＜0.001）。模型組和2、4、6、8 μmol/L 白藜蘆醇組細(xì)胞OD 值均低于對(duì)照組（均P＜0.05）；0.1、1 μmol/L 白藜蘆醇組細(xì)胞OD 值高于模型組（P＜0.05）；其余各組細(xì)胞OD 值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）（圖3）。

圖3 白藜蘆醇對(duì)電離輻射后細(xì)胞活力的影響。a 與對(duì)照組相比，P＜0.05；b 與模型組相比，P＜0.05。

2.4 3 組間細(xì)胞凋亡率、DCFH-DA 熒光強(qiáng)度及β-Gal 陽(yáng)性率的比較 相比對(duì)照組，模型組的細(xì)胞凋亡率、DCFH-DA 熒光強(qiáng)度、β-Gal 陽(yáng)性率均明顯升高（均P＜0.05），白藜蘆醇組的DCFH-DA 熒光強(qiáng)度也升高（P＜0.05）；相比模型組，白藜蘆醇組各指標(biāo)均降低（均P＜0.05）。詳見(jiàn)圖4-6，表2。

2.5 3 組目的基因的mRNA 水平比較 3 組IEC-6細(xì)胞中CAT、SOD2、p16、p21 的mRNA 水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。其中，模型組細(xì)胞的SOD2、CAT 的mRNA 水平均低于對(duì)照組和白藜蘆醇組（均P＜0.05），p16、p21 的mRNA 水平高于對(duì)照組和白藜蘆醇組（均P＜0.05）（表3）。

2.6 3 組細(xì)胞目的蛋白表達(dá)的比較 3 組IEC-6 細(xì)胞中CAT、SOD2、P16、P21 蛋白的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）（圖7）。其中，模型組細(xì)胞SOD2、CAT 蛋白的表達(dá)均低于對(duì)照組和白藜蘆醇組（均P＜0.05），而P16、P21 蛋白的表達(dá)高于對(duì)照組和白藜蘆醇組（均P＜0.05）。白藜蘆醇組P21 蛋白表達(dá)也高于對(duì)照組（P＜0.05）（表4）。

3 討論

圖4 Annexin V/PI 染色后3 組IEC-6 細(xì)胞凋亡及壞死散點(diǎn)圖。左下象限為活細(xì)胞數(shù)量（Annexin V-/PI-），左上象限為壞死細(xì)胞數(shù)量（Annexin V-/PI＋），右上象限為凋亡和壞死細(xì)胞數(shù)量（Annexin V+/PI+），右下象限為凋亡細(xì)胞數(shù)量（Annexin V+/PI-），右上和右下象限細(xì)胞數(shù)目之和（Annexin V+）為凋亡細(xì)胞數(shù)。

圖5 3 組IEC-6 細(xì)胞DCFH-DA 熒光強(qiáng)度圖。應(yīng)用DCFH-DA 熒光探針對(duì)細(xì)胞內(nèi)ROS 染色，ROS 呈綠色熒光。

圖6 白藜蘆醇對(duì)電離輻射后IEC-6 細(xì)胞衰老的影響。3 組間β-Gal 陽(yáng)性細(xì)胞染色照片，β-Gal陽(yáng)性細(xì)胞染色后呈青綠色（紅色箭頭標(biāo)注）。

小腸黏膜是快速更新的組織之一，對(duì)輻射敏感，目前對(duì)輻射導(dǎo)致的小腸損傷尚無(wú)有效治療措施。黏膜是早反應(yīng)組織，輻射損傷的修復(fù)主要依賴于黏膜干細(xì)胞的增殖作用[12]。研究[13]表明位于小腸隱窩底部第4、5 層的細(xì)胞，具有較強(qiáng)的增殖和分化功能，可以生成吸收細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞和潘氏細(xì)胞，以維持小腸隱窩和絨毛上皮的完整性。IEC-6 細(xì)胞是從正常SD 大鼠空腸隱窩分離并培養(yǎng)的細(xì)胞系,能很好地反映腸上皮細(xì)胞的生物特性，常被用作炎性腸病的體外模型。本研究以IEC-6 細(xì)胞為研究對(duì)象，應(yīng)用克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞克隆團(tuán)數(shù)量，發(fā)現(xiàn)4～10 Gy 電離輻射能夠以劑量依賴性抑制IEC-6 細(xì)胞增殖。因此，選用10 Gy 電離輻射建立IEC-6 細(xì)胞輻射損傷模型。CCK-8 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，IEC-6 細(xì)胞對(duì)濃度為0.1～5 μmol/L 的白藜蘆醇耐受性良好；在該劑量范圍內(nèi)，進(jìn)一步檢測(cè)白藜蘆醇對(duì)電離輻射后IEC-6 細(xì)胞活力的影響。結(jié)果表明低劑量（0.1～1 μmol/L）白藜蘆醇預(yù)處理后細(xì)胞活力較模型組增加，提示低劑量白藜蘆醇能夠改善輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷，因此選擇濃度為1 μmol/L 的白藜蘆醇進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。Annexin V-PI 染色結(jié)果表明，白藜蘆醇預(yù)處理后細(xì)胞凋亡率較模型組下降，這進(jìn)一步說(shuō)明了白藜蘆醇能有效改善輻射誘導(dǎo)的IEC-6細(xì)胞損傷。

電離輻射誘導(dǎo)的ROS 產(chǎn)生是細(xì)胞輻射損傷的重要原因。ROS 是一類不穩(wěn)定的含氧分子，具有高度反應(yīng)活性，可引發(fā)鏈?zhǔn)阶杂苫磻?yīng)，引起DNA、蛋白質(zhì)、脂類等生物大分子變性和交聯(lián)，從而造成細(xì)胞損傷[4,14]。DCFH-DA 熒光探針能夠反映細(xì)胞內(nèi)ROS 水平。本研究結(jié)果表明，白藜蘆醇處理后DCFHDA 熒光強(qiáng)度較模型組明顯降低，但仍高于對(duì)照組，這表明白藜蘆醇能夠抑制但不能完全消除電離輻射后ROS 的產(chǎn)生。SOD2 是一種線粒體解毒酶，能夠催化超氧化物轉(zhuǎn)化為過(guò)氧化氫。隨后，CAT 將過(guò)氧化氫分解為水，從而減輕細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷。有研究[3]顯示小腸中過(guò)量的ROS 會(huì)抑制小腸干細(xì)胞增殖和分化，而抗氧化應(yīng)激治療能促進(jìn)小腸黏膜再生，從而減輕輻射誘導(dǎo)的小腸損傷。本研究結(jié)果表明，白藜蘆醇預(yù)處理后IEC-6 細(xì)胞中SOD2、CAT 的mRNA 水平和蛋白質(zhì)表達(dá)較模型組明顯增高，這說(shuō)明白藜蘆醇可以通過(guò)增加抗氧化酶的表達(dá)，消除電離輻射后ROS 的產(chǎn)生，從而改善IEC-6 細(xì)胞輻射損傷。

表2 3 組間IEC-6 細(xì)胞的凋亡率、DCFH-DA 熒光強(qiáng)度、β-Gal 陽(yáng)性率的比較

表3 3 組間IEC-6 細(xì)胞p16、p21、CAT、SOD2 的mRNA 水平比較

表4 3 組間IEC-6 細(xì)胞P16、P21、CAT、SOD2 蛋白的表達(dá)比較

細(xì)胞內(nèi)過(guò)量的ROS 還能夠誘導(dǎo)細(xì)胞衰老。細(xì)胞衰老是指細(xì)胞失去增殖分化能力，并伴隨著永久的細(xì)胞周期阻滯。在衰老細(xì)胞中高表達(dá)衰老相關(guān)β-Gal，因此β-Gal 染色能夠反映細(xì)胞衰老。p16 與p21 基因表達(dá)與細(xì)胞衰老密切相關(guān)[15]。p16 編碼的蛋白主要作用于CDK4，并抑制CDK4 與Cyclin D1 結(jié)合，造成G1/S 期阻滯。研究表明，p16 在人類細(xì)胞衰老過(guò)程中表達(dá)持續(xù)增高，可作為細(xì)胞衰老的標(biāo)志物[16]。P21 蛋白是P53 蛋白的下游產(chǎn)物，能夠與Ckd2-Cyclin E 和Cdk4/6-Cyclin D1 等細(xì)胞周期蛋白結(jié)合并抑制其活性，使細(xì)胞停滯于G1期，誘發(fā)細(xì)胞衰老特征性改變。在本實(shí)驗(yàn)中，電離輻射后IEC-6 細(xì)胞中p16、p21 基因和蛋白的表達(dá)均上調(diào)。而白藜蘆醇預(yù)處理后，p16、p21 基因和蛋白的表達(dá)及β-Gal 陽(yáng)性細(xì)胞比例較模型組明顯降低，這說(shuō)明白藜蘆醇可以改善電離輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老。

圖7 Western blot 檢測(cè)CAT、SOD2、P16、P21 蛋白的表達(dá)。（a）IEC-6 細(xì)胞中CAT、SOD2、P16、P21蛋白表達(dá)情況；（b－e）CAT、SOD2、P16、P21 蛋白相對(duì)表達(dá)量統(tǒng)計(jì)柱狀圖。a 與對(duì)照組相比，P＜0.05；b 與模型組相比，P＜0.05。

綜上所述，白藜蘆醇可以通過(guò)消除活性氧，抑制細(xì)胞衰老及凋亡，改善電離輻射誘導(dǎo)的IEC-6 細(xì)胞損傷。然而，輻射誘導(dǎo)細(xì)胞損傷的機(jī)制是復(fù)雜的，且白藜蘆醇作為一種非特異性化合物，可作用于多個(gè)靶點(diǎn)。因此，在IEC-6 細(xì)胞的輻射損傷防護(hù)中，白藜蘆醇的具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步探討。