大鼠腸道菌群對吡嗪酰胺及其活性代謝產(chǎn)物吡嗪酸藥動學(xué)參數(shù)的影響

劉慶香 武正華 賴雅琳 范國榮 范琦

摘 要 目的：研究大鼠腸道菌群對吡嗪酰胺及其活性代謝產(chǎn)物吡嗪酸藥動學(xué)參數(shù)的影響。方法：將16只SD大鼠隨機分為實驗組和對照組，每組8只。實驗組大鼠灌胃混合抗生素（硫酸鏈霉素+硫酸新霉素）構(gòu)建偽無菌大鼠模型。建模后，兩組大鼠灌胃吡嗪酰胺（150 mg/kg），并于給藥前和給藥后0.167、0.333、0.667、1、1.5、2、3、4、6、9 h時從眼眶靜脈叢采血0.1 mL，給藥后12、24 h時從眼眶靜脈叢采血0.3 mL。以非那西丁為內(nèi)標(biāo)，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定大鼠血漿中吡嗪酰胺和吡嗪酸的濃度。以Agilent Zorbax SB-Aq為色譜柱，以0.2%甲酸水溶液（含8 mmol/L乙酸銨）-甲醇為流動相進(jìn)行梯度洗脫，流速為1 mL/min，柱溫為30 ℃，進(jìn)樣量為10 μL;以電噴霧電離源為離子源，離子源溫度為500 ℃;碰撞氣為氮氣，壓力為10 psi;質(zhì)譜傳輸接口溫度為100 ℃;質(zhì)譜監(jiān)測模式為多反應(yīng)監(jiān)測，采集模式為正離子模式;用于定量分析的離子對分別為m/z 124.0→79.0（吡嗪酰胺）、m/z 125.1→79.1（吡嗪酸）、m/z 180.0→110.2（內(nèi)標(biāo)），去簇電壓分別為55、26、85 V，碰撞電壓分別為24、23、28 V。使用DAS 2.1.1軟件計算藥動學(xué)參數(shù)并比較。結(jié)果：吡嗪酰胺和吡嗪酸檢測質(zhì)量濃度的線性范圍分別為25～5 000 ng/mL（r=0.997 6）、100～12 500 ng/mL（r=0.999 0）;定量下限分別為25、100 ng/mL;批內(nèi)、批間準(zhǔn)確度為92.93%～100.50%，批內(nèi)、批間精密度和基質(zhì)效應(yīng)試驗的RSD均不高于8.42%（n=6或n=3）。與對照組比較，實驗組大鼠體內(nèi)吡嗪酰胺的tmax顯著延長（P<0.01），而其余藥動學(xué)參數(shù)組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：大鼠腸道菌群改變可導(dǎo)致單劑量吡嗪酰胺的吸收延遲。

關(guān)鍵詞 吡嗪酰胺;吡嗪酸;大鼠;腸道菌群;藥動學(xué);液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To study the effects of rat intestinal flora on the pharmacokinetic parameters of pyrazinamide and its active metabolite pyrazinoic acid. METHODS： Totally 16 SD rats were randomly divided into trial group and control group， with 8 rats in each group. Trial group was given mixed antibiotics （streptomycin sulfate+neomycin sulfate） intragastrically to construct pseudoaseptic rat model. After modeling， both groups were given pyrazinamide intragastrically （150 mg/kg）. Before and 0.167， 0.333， 0.667， 1， 1.5， 2， 3， 4， 6， 9 h after administration， 0.1 mL blood sample was collected from orbital venous plexus， and 0.3 mL blood sample was collected from orbital venous plexus 12， 24 h after administration. Using phenacetin as internal standard， LC-MS/MS method was adopted to determine the plasma concentration of pyrazinamide and pyrazinoic acid. The determination was performed on Agilent ZORBAX SB-Aq column with mobile phase consisted of 0.2% formic acid （containing 8 mmol/L ammonium acetate）-methanol （gradient elution） at the flow rate of 1 mL/min. The column temperature was set at 30 ℃， and sample size was 10 μL. The ion source was ESI and the temperature of ion source was 500 ℃. The collision gas was nitrogen and the pressure was 10 psi. The temperature of mass transfer interface was 100 ℃. The mass spectrum monitoring mode was multi reaction monitoring， and the collection mode was positive ion mode. The monitoring transition ion-pairs were m/z 124.0→79.0 （pyrazinamide）， m/z 125.1→79.1 （pyrazinic acid） and m/z 180.0→110.2 （internal standard）. The de-clustering potential and collision voltage were 55， 26 and 85 V， 24， 23 and 28 V， respectively. The pharmacokinetic parameters were calculated and compared by using DAS 2.1.1 software.? RESULTS： The linear ranges of pyrazinamide and pyrazinoic acid were 25-5 000 ng/mL （r=0.997 6） and 100-12 500 ng/mL （r=0.999 0）. The lower limits of quantification were 25 and 100 ng/mL， respectively. Intra-batch and inter-batch accuracy were 92.93%-100.50%， and RSDs of intra-batch and inter-batch precision and matrix effect tests were all lower than or equal to 8.42% （n=6 or n=3）. Compared with control group， tmax of pyrazinamide in trial group was prolonged significantly （P<0.01）; there was no statistical significance in other pharmacokinetic parameters between 2 groups （P>0.05）. CONCLUSIONS： The absorption of single dose pyrazinamide is delayed with the change of intestinal flora in rats.

KEYWORDS? ?Pyrazinamide; Pyrazinoic acid; Rat; Intestinal flora; Pharmacokinetics; LC-MS/MS

結(jié)核病是全球最嚴(yán)重的傳染病之一[1]。吡嗪酰胺（化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖1A）是治療結(jié)核病的一線藥物，對藥物敏感性和多藥耐藥性結(jié)核病均表現(xiàn)出獨特、優(yōu)良的治療作用，其不但能夠降低結(jié)核病復(fù)發(fā)率，還能夠縮短結(jié)核病治療周期，常用于對異煙肼和利福平耐藥的結(jié)核病患者的治療[2]。有研究表明，吡嗪酰胺經(jīng)肝微粒體酰胺酶代謝產(chǎn)生的主要活性代謝產(chǎn)物吡嗪酸（化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖1B）可與天冬氨酸脫羧酶結(jié)合，中斷結(jié)核分枝桿菌輔酶A的生物合成，從而起到殺菌作用[3]。但是，相較于其它抗結(jié)核藥物，吡嗪酰胺被證實具有更強的肝毒性[4-6]。已有研究報道，聯(lián)用吡嗪酰胺酶抑制劑可以減輕吡嗪酰胺誘導(dǎo)的SD大鼠肝損傷，由此推測該藥引起的肝毒性可能與其代謝產(chǎn)物吡嗪酸有關(guān)[7]?？梢?，關(guān)注吡嗪酰胺的體內(nèi)代謝，對提高抗結(jié)核病的療效、降低毒副作用均具有重要意義。

口服藥物在胃腸道被吸收入血前，可能被寄居在腸道內(nèi)的菌群轉(zhuǎn)化為具有生物活性、生物惰性或毒性的代謝產(chǎn)物，然后再吸收入血[8]。本課題組前期研究顯示，灌胃吡嗪酰胺后，SD大鼠體內(nèi)吡嗪酰胺的膽汁濃度遠(yuǎn)高于糞便濃度，據(jù)此推測吡嗪酰胺可能在腸道內(nèi)發(fā)生了生物轉(zhuǎn)化。基于此，本文擬通過灌胃混合抗生素復(fù)制偽無菌SD大鼠模型，建立測定大鼠血漿中吡嗪酰胺及其活性代謝產(chǎn)物吡嗪酸濃度的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS），研究大鼠腸道菌群對吡嗪酰胺和吡嗪酸藥動學(xué)參數(shù)的影響，旨在為提高吡嗪酰胺的療效及降低其毒副作用提供參考。

1 材料

1.1 主要儀器

LC-20A型液相色譜系統(tǒng)（配有LC-20AD型二元泵、DGU-20A3型脫氣機、SIL-20A型自動進(jìn)樣器、CTO- 20AC型柱溫箱）、AUW220D型電子分析天平均購自日本Shimadzu公司，API 4000型三重四極桿質(zhì)譜儀（配有Analyst software 1.6工作站）購自美國AB Sciex公司，MX-S型渦旋混合儀購自美國Scilogex公司，SK7200H型超聲儀購自上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司，Research UV型超純水機購自上海和泰儀器有限公司，Sorvall Legend Micro21R型離心機購自美國Thermo Fisher Scientific公司。

1.2 主要藥品與試劑

吡嗪酰胺對照品（批號100178-201104，純度99%）購自中國食品藥品檢定研究院，吡嗪酸對照品（批號STBG6304，純度98%）購自美國Sigma-Aldrich公司，非那西丁對照品（內(nèi)標(biāo)，批號N1216AS，純度98%）、吡嗪酰胺原料藥（批號MB2017，純度>99%）、硫酸鏈霉素原料藥（批號MB1275，規(guī)格>720 U/mg）、硫酸新霉素原料藥（批號MB1716，規(guī)格>600 U/mg）均購自大連美侖生物技術(shù)有限公司，羧甲基纖維素鈉（CMC-Na，食品級）購自河南萬邦實業(yè)有限公司，甲醇（色譜純）購自美國Tedia試劑公司，甲酸和乙酸銨（色譜純）購自美國ACS公司;其余試劑均為分析純或?qū)嶒炇页Ｓ靡?guī)格，水為超純水。

1.3 動物

清潔級健康SD大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量均為200～220 g，購自上海市計劃生育科學(xué)研究所實驗動物經(jīng)營部，動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（滬）2018-0006。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜與質(zhì)譜條件

2.1.1 色譜條件 以Agilent Zorbax SB-Aq（150 mm×4.6 mm，5 μm）為色譜柱，以0.2%甲酸水溶液（含8 mmol/L乙酸銨）為流動相A、以甲醇為流動相B進(jìn)行梯度洗脫（0～0.6 min，40%B;0.6～4.0 min，90%B;4.0～5.0 min，40%B）;流速為1 mL/min，柱溫為30 ℃，進(jìn)樣量為10 μL。

2.1.2 質(zhì)譜條件 離子源為電噴霧電離源，離子源溫度為500 ℃;碰撞氣為氮氣，壓力為10 psi;質(zhì)譜傳輸接口溫度為100 ℃;質(zhì)譜監(jiān)測模式為多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），采集模式為正離子模式;用于定量分析的離子對分別為m/z 124.0→79.0（吡嗪酰胺）、m/z 125.1→79.1（吡嗪酸）、m/z 180.0→110.2（內(nèi)標(biāo)），去簇電壓分別為55、26、85 V，碰撞電壓分別為24、23、28 V。

2.2 校正混合對照品溶液與質(zhì)控混合對照品溶液的制備

精密稱取吡嗪酰胺、吡嗪酸對照品各適量，分別用80%甲醇溶解并稀釋，制成質(zhì)量濃度均為1 mg/mL的校正對照品儲備液，于4 ℃下保存，備用。精密量取上述校正對照品儲備液適量，用80%甲醇稀釋，制成質(zhì)量濃度分別為100、80、40、20、10、4、2、1、0.5 μg/mL的吡嗪酰胺校正對照品系列溶液和250、200、160、100、40、20、10、4、2 μg/mL的吡嗪酸校正對照品系列溶液。同法制備質(zhì)量濃度分別為80、40、1、0.5 μg/mL的吡嗪酰胺質(zhì)控對照品系列溶液和200、160、4、2 μg/mL的吡嗪酸質(zhì)控對照品系列溶液。精密量取對應(yīng)濃度的吡嗪酰胺和吡嗪酸校正對照品系列溶液各500 μL，混合，制成吡嗪酰胺質(zhì)量濃度分別為50、40、20、10、5、2、1、0.5、0.25 μg/mL和吡嗪酸質(zhì)量濃度分別為125、100、80、50、20、10、5、2、1 μg/mL的校正混合對照品系列溶液。同法制備吡嗪酰胺質(zhì)量濃度分別為40、20、0.5、0.25 μg/mL和吡嗪酸質(zhì)量濃度分別為100、80、2、1 μg/mL的高、中、低質(zhì)量濃度和定量下限混合對照品溶液。

2.3 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密稱取非那西丁對照品適量，用80%甲醇溶解并稀釋，制成質(zhì)量濃度為1 mg/mL的內(nèi)標(biāo)儲備液，于4 ℃下保存，備用。臨用時，精密量取上述內(nèi)標(biāo)儲備液適量，用80%甲醇稀釋，制成1 μg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液。

2.4 灌胃混懸液的制備

2.4.1 混合抗生素混懸液 精密稱取硫酸鏈霉素、硫酸新霉素原料藥各適量，用0.5%CMC-Na溶液溶解并稀釋，制成質(zhì)量濃度均為20 mg/mL的混合抗生素混懸液。

2.4.2 吡嗪酰胺混懸液 精密稱取吡嗪酰胺原料藥適量，用0.5%CMC-Na溶液溶解并稀釋，制成質(zhì)量濃度為30 mg/mL的吡嗪酰胺混懸液。

2.5 分組、造模與給藥

將16只SD大鼠隨機分為實驗組和對照組，每組8只，雌雄各半。參考文獻(xiàn)[9-10]方法，實驗組大鼠灌胃20 mg/mL的混合抗生素混懸液（100 mg/kg），早晚各1次，連續(xù)6 d，構(gòu)建偽無菌大鼠模型;對照組大鼠灌胃等體積生理鹽水，早晚各1次，連續(xù)6 d。建模后，實驗組（經(jīng)1 d的清洗期后）和對照組大鼠均禁食不禁水12 h，單次灌胃30 mg/mL的吡嗪酰胺混懸液（150 mg/kg）[11-12]。

2.6 大鼠血漿樣品的處理

取大鼠血漿樣品100 μL，加內(nèi)標(biāo)溶液10 μL，再加甲醇300 μL，渦旋3 min，于4 ℃下以13 800×g離心10 min，取上清液，備測。

2.7 方法學(xué)考察

參考2020年版《中國藥典》（四部）通則“生物樣品定量分析方法驗證指導(dǎo)原則”[13]進(jìn)行方法學(xué)考察。

2.7.1 選擇性 取大鼠空白血漿（不加內(nèi)標(biāo)）、大鼠空白血漿+混合對照品溶液（定量下限質(zhì)量濃度）、大鼠灌胃給藥后1.5 h的血漿樣品，按“2.6”項下方法處理后，再按“2.1”項下色譜與質(zhì)譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖，詳見圖2。結(jié)果，吡嗪酰胺、吡嗪酸、內(nèi)標(biāo)的保留時間分別為2.94、1.90、3.27 min，且大鼠血漿內(nèi)源性雜質(zhì)對上述成分的測定無干擾。

2.7.2 殘留 取大鼠空白血漿+高質(zhì)量濃度的校正混合對照品溶液、大鼠空白血漿（不加內(nèi)標(biāo)）適量，分別按“2.6”項下方法處理后，再按“2.1”項下色譜與質(zhì)譜條件依次進(jìn)樣測定。結(jié)果，大鼠空白血漿中未見吡嗪酰胺、吡嗪酸、內(nèi)標(biāo)殘留，表明進(jìn)樣高質(zhì)量濃度樣品后，不會影響后續(xù)樣品的分析。

2.7.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線與定量下限 取“2.2”項下校正混合對照品系列溶液各10 μL，分別加至大鼠空白血漿90 μL中，混勻，按“2.6”項下方法處理后，再按“2.1”項下色譜與質(zhì)譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積。以吡嗪酰胺或吡嗪酸的質(zhì)量濃度（x，ng/mL）為橫坐標(biāo)、以吡嗪酰胺或吡嗪酸與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值（y）為縱坐標(biāo)，采用最小二乘法（權(quán)重系數(shù)為1/x2）進(jìn)行線性回歸分析。結(jié)果，大鼠血漿中吡嗪酰胺的檢測質(zhì)量濃度在25～5 000 ng/mL范圍內(nèi)，得回歸方程y=0.000 346x+0.003 13（r=0.997 6）;吡嗪酸的檢測質(zhì)量濃度在100～12 500 ng/mL范圍內(nèi)，得回歸方程y=0.004 9x+0.051 9（r=0.999 0）;吡嗪酰胺的定量下限為25 ng/mL，吡嗪酸的定量下限為100 ng/mL。

2.7.4 準(zhǔn)確度與精密度 取“2.2”項下吡嗪酰胺和吡嗪酸的定量下限和低、中、高質(zhì)量濃度的混合對照品溶液10 μL，分別加至大鼠空白血漿90 μL中，混勻，按“2.6”項下方法處理后，再按“2.1”項下色譜與質(zhì)譜條件進(jìn)樣測定。每質(zhì)量濃度樣品平行制備6份，考察批內(nèi)準(zhǔn)確度和精密度;連續(xù)3 d測定3個分析批，考察批間準(zhǔn)確度和精密度，結(jié)果見表1。

2.7.5 稀釋可靠性 分別取吡嗪酰胺、吡嗪酸的校正對照品儲備液各適量，用大鼠空白血漿稀釋，制成質(zhì)量濃度為40 μg/mL的吡嗪酰胺血漿模擬樣品和100 μg/mL的吡嗪酸血漿模擬樣品，再用大鼠空白血漿稀釋10倍和50倍后，按“2.6”項下方法處理，再按“2.1”項下色譜與質(zhì)譜條件進(jìn)樣測定。每稀釋倍數(shù)平行制備6份。將所測峰面積代入回歸方程計算含量，并乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)計算得到其實測質(zhì)量濃度，與對應(yīng)理論質(zhì)量濃度的模擬血漿樣品比較計算準(zhǔn)確度[用相對誤差（RE）表示]和精密度（用RSD表示）。結(jié)果，大鼠血漿中吡嗪酰胺和吡嗪酸稀釋10倍后，所得RE分別為-9.05%、-5.95%，RSD分別為3.21%、4.87%（n=6）;大鼠血漿中吡嗪酰胺和吡嗪酸稀釋50倍后，所得RE分別為-8.65%、-8.67%，RSD分別為3.95%、4.31%（n=6）。這表明大鼠血漿樣品經(jīng)10倍甚至50倍稀釋后，其中的吡嗪酰胺和吡嗪酸仍可用所建方法準(zhǔn)確測定。

2.7.6 基質(zhì)效應(yīng) 取6份不同來源的大鼠空白血漿各90 μL，除不加內(nèi)標(biāo)外，其余均按“2.6”項下方法處理后，再分別加入內(nèi)標(biāo)溶液10 μL和“2.2”項下高、低質(zhì)控混合對照品溶液10 μL制備高、低質(zhì)量濃度的血漿樣品，按“2.1”項下色譜與質(zhì)譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積（A1）;另按“2.2”項下方法制備對應(yīng)高、低質(zhì)量濃度的吡嗪酰胺、吡嗪酸、內(nèi)標(biāo)對照品溶液，直接進(jìn)樣測定，記錄峰面積（A2）。以A1/A2×100%計算吡嗪酰胺、吡嗪酸、內(nèi)標(biāo)的基質(zhì)因子，再用吡嗪酰胺和吡嗪酸的基質(zhì)因子除以內(nèi)標(biāo)基質(zhì)因子，計算內(nèi)標(biāo)歸一化基質(zhì)因子，結(jié)果見表2。

2.7.7 穩(wěn)定性 取“2.2”項下高、低質(zhì)量濃度的質(zhì)控混合對照品溶液各10 μL，分別加至大鼠空白血漿90 μL中，混勻，分別在室溫放置4 h、凍融（-20℃～室溫）3次、-40 ℃凍存30 d等條件下儲存后，立即按“2.6”項下方法處理，再按“2.1”項下色譜與質(zhì)譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積，代入回歸方程計算含量;同法考察按“2.6”項下方法處理后于自動進(jìn)樣器放置12 h的含量。每質(zhì)量濃度樣品平行制備3份，以RE考察各樣品的穩(wěn)定性，結(jié)果見表3。

2.8 藥動學(xué)研究

2.8.1 藥-時曲線的繪制 將16只SD大鼠按“2.5”項下方法分組、造模、給藥，分別于給藥前（0 h）和給藥后0.167、0.333、0.667、1、1.5、2、3、4、6、9 h時從眼眶靜脈叢采血約0.1 mL，給藥后12、24 h時從眼眶靜脈叢采血約0.3 mL置于肝素鈉抗凝離心管中，于4 ℃下以4 700×g離心10 min，取上層血漿，于-40 ℃凍存。將上述血漿樣品分別按“2.6”項下方法處理后，再按“2.1”項下色譜與質(zhì)譜條件進(jìn)樣分析，測定血漿中吡嗪酰胺和吡嗪酸的濃度，其中0.167、0.333、0.667、1、1.5、2、3、4、6 h等9個時間點的血漿樣品用大鼠空白血漿進(jìn)行50倍稀釋，9 h時的血漿樣品進(jìn)行10 倍稀釋。以O(shè)rigin 2019b軟件繪制吡嗪酰胺和吡嗪酸在大鼠體內(nèi)的藥-時曲線（給藥前的血漿樣品是為了考察內(nèi)源性雜質(zhì)是否影響藥物出峰，不計入藥-時曲線），結(jié)果見圖3。

2.8.2 藥動學(xué)參數(shù)的計算 使用DAS 2.1.1軟件計算實驗組和對照組大鼠體內(nèi)吡嗪酰胺和吡嗪酸的主要藥動學(xué)參數(shù)，使用SPSS 26.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。當(dāng)數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布時，以x±s表示，兩兩比較采用t檢驗;當(dāng)數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布時，以中位數(shù)表示，兩兩比較采用非參數(shù)秩和檢驗。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果，與對照組比較，實驗組大鼠吡嗪酰胺的tmax顯著延長（P<0.01）;而其他藥動學(xué)參數(shù)組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），詳見表4。

3 討論

3.1 含量測定方法的建立

本文參考同時測定大鼠血漿中吡嗪酰胺及其活性代謝產(chǎn)物吡嗪酸含量的高效液相色譜法[14]的色譜條件，以及同時測定吡嗪酰胺與其它抗結(jié)核藥物含量的LC-MS/MS法的質(zhì)譜條件[15-16]，建立了測定大鼠血漿中吡嗪酰胺和吡嗪酸含量的LC-MS/MS法。與高效液相色譜法比較，LC-MS/MS法分析效能更高、分析速度更快。

3.2 流動相的優(yōu)化

本文前期選擇流動性時，考察了0.1%和0.2%的甲酸水溶液，發(fā)現(xiàn)以0.2%甲酸水溶液為水相可顯著提高離子化效率;考察了甲醇和乙腈，發(fā)現(xiàn)以甲醇為有機相可使吡嗪酰胺或吡嗪酸有更好的色譜峰峰形;且在水相中加入8 mmol/L乙酸銨可進(jìn)一步改善峰形，故最終選擇0.2%甲酸水溶液（含8 mmol/L乙酸銨）-甲醇作為流動相，進(jìn)行梯度洗脫。

3.3 藥動學(xué)實驗的設(shè)計

腸道菌群主要由腸桿菌科細(xì)菌組成，既有革蘭氏陽性菌，又有革蘭氏陰性菌[17]。因此，本文選擇能有效抑制各類腸道細(xì)菌的廣譜抗生素硫酸鏈霉素和硫酸新霉素，通過灌胃混合抗生素混懸液的方式建立偽無菌大鼠模型，以研究大鼠腸道菌群改變對吡嗪酰胺及其活性代謝產(chǎn)物吡嗪酸藥動學(xué)參數(shù)的影響。參考文獻(xiàn)所報道的抗生素使用劑量，確定實驗組大鼠灌胃20 mg/mL混合抗生素混懸液（100 mg/kg），早晚各1次，連續(xù)6 d[9-10]。世界衛(wèi)生組織推薦吡嗪酰胺的成人用劑量為20～30 mg/kg[11]，采用大鼠劑量換算公式[12]按成人用劑量的6.3倍換算，確定吡嗪酰胺的給藥方案為150 mg/kg。

本研究結(jié)果顯示，與對照組比較，實驗組大鼠吡嗪酰胺的tmax顯著延長（P<0.01），提示大鼠腸道菌群變化可導(dǎo)致單劑量吡嗪酰胺的吸收延遲。但本文僅考察了腸道菌群變化對單劑量灌胃后吡嗪酰胺藥動學(xué)參數(shù)的影響，而吡嗪酰胺在臨床上需要長期給藥，故本課題組后續(xù)將進(jìn)一步考察腸道菌群變化對多劑量吡嗪酰胺藥動學(xué)的影響。

參考文獻(xiàn)

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（收稿日期：2020-11-03 修回日期：2021-01-10）

（編輯：鄒麗娟）