田海蓉,夏永波,張人俊*
(1. 貴州省動物疫病預(yù)防控制中心,貴州貴陽550008; 2. 貴州省龍里縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,貴州龍里551200)
冠狀病毒屬是1個大型病毒家族,自然宿主范圍很廣,可感染人、豬、牛、貓、狗、鼠、禽類等脊椎動物,是引起人和動物呼吸道、消化道、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等的重要病原。犬冠狀病毒(Canine coronavirus,CCV)是冠狀病毒的1個種,屬于套式病毒目(Nidovirales)、冠狀病毒科(Coronaviridae)、冠狀病毒屬(Coronaviurs),冠狀病毒Ⅰ群[1]。CCV已確定有2個基因型,即CCV-Ⅰ和 CCV-Ⅱ[2]。犬冠狀病毒病是由CCV感染犬引起的1種高度接觸性傳染病,以急性胃腸炎為主要癥狀,病死率較低。
CCV的直徑為60~200 nm,呈球形,帶囊膜,核衣殼呈絲狀螺旋對稱;病毒粒子的表面具有冠狀病毒特有的“冠狀”突起,呈放射狀,長12~24 nm,末端呈球棒狀,寬約10 nm,排列有序,間隔較寬,均勻分布于整個病毒粒子表面;病毒基因組是不分節(jié)段的單鏈正股RNA,大小在27~32 kb之間[3]。CCV基因在病毒自身RNA聚合酶的存在下以先導(dǎo)引物轉(zhuǎn)錄機制進行轉(zhuǎn)錄,不同的病毒基因組和亞基因組翻譯產(chǎn)生除病毒依賴的RNA聚合酶以外,還產(chǎn)生其他病毒的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白,其中有相對比較保守、參與病毒核衣殼形成、介導(dǎo)宿主細胞免疫的核衣殼蛋白(N);在病毒出芽、組裝和成熟中起重要作用的膜蛋白(M);能刺激機體產(chǎn)生中和抗體,且易變異的纖突蛋白(S),S蛋白決定病毒的血清型和感染力,同時通過識別與病毒宿主細胞受體相互作用決定病毒感染的宿主范圍[4]。CCV對熱、紫外線、脂溶劑、非離子去污劑、甲醛和氧化劑等一般的化學(xué)藥品均敏感,對酸穩(wěn)定,在-70 ℃或凍干后4 ℃下可保存數(shù)年,在糞便中可存活6~9天,污染物在水中可保持數(shù)天的傳染性。
CCV由Binn等在1971年首先從腹瀉的德國軍犬中分離到,目前該病已在世界范圍內(nèi)廣泛流行。1985年徐漢坤等首次報道本病在我國流行,后來相繼有CCV分離鑒定的報道[5]。2008年,張晉在北京地區(qū)進行犬病流行情況調(diào)查,CCV感染占41.42%(70/169),其中并發(fā)有2種疾病感染的占13.2%(47/356)[5,6]。CCV感染有一定的季節(jié)性,據(jù)北京地區(qū)調(diào)查統(tǒng)計,以1月份發(fā)病最高(42.86%),3月份次之(27.14%),其他月份都相對較少[6];在山東地區(qū)春初、秋末和冬季CCV檢出率為22.2%~81.8%,而夏季檢出率為10%~23.5%[7]。傳播途徑主要是經(jīng)呼吸道和消化道傳染,大多通過直接接觸而感染發(fā)病。CCV傳染力強,傳播快,數(shù)日內(nèi)常成窩暴發(fā);臨床上以犬嚴重脫水、嘔吐、腹瀉和血便為主要特征,病死率較低,但與其他傳染病混合感染時死亡率升高,對幼犬危害嚴重[8]。據(jù)山東地區(qū)調(diào)查統(tǒng)計,1歲以內(nèi)犬CCV檢出率為25.2%~72.4%;2~4月齡的犬對該病最易感,CCV檢出率平均為72.4%;大于 1歲的犬CCV檢出率低于13.4%,無種屬特異性,任何品種的犬均易感[7]。
臨床上一般都是幼犬先發(fā)病,然后波及其他年齡的犬。病犬精神沉郁,喜臥,厭食,鼻鏡干裂,但體溫一般不高。常出現(xiàn)輕重不一的胃腸炎,病初嘔吐持續(xù)數(shù)天,至出現(xiàn)腹瀉后嘔吐減輕或停止。糞便呈糊狀、半糊狀乃至水樣,橙色或綠色,其中常含有黏液和血液。經(jīng)藥物治療病犬臨床癥狀消失后1個月內(nèi)可能會出現(xiàn)復(fù)發(fā),控制不及時會造成死亡,幼犬的發(fā)病率和病死率明顯高于成年犬。有的成年犬呈隱性感染,不表現(xiàn)臨床癥狀,耐過會自愈,但會排毒傳染給幼犬使其發(fā)病。
CCV感染和其他病原體引起的腸炎在臨床上難以區(qū)別,如與輪狀病毒感染就特別相似,且常與輪狀病毒、犬細小病毒等混合感染,臨床無法進行鑒別診斷,必須通過實驗室檢測進行確診。目前檢測CCV的方法主要有病毒分離培養(yǎng)、電鏡觀察、RT-PCR、核酸探針和間接ELISA等。間接ELISA是檢測CCV的主要血清學(xué)方法,比較靈敏、快速;病毒核酸檢測可用實時熒光定量RT-PCR方法,特異性強、靈敏度高、重復(fù)性好[9]。每種檢測方法各有利弊,為了提高CCV診斷結(jié)果的精確性與準(zhǔn)確性,應(yīng)結(jié)合臨床實際情況進行至少2種方法的平行檢測。近年來,隨著分子免疫診斷技術(shù)與新型材料研發(fā)技術(shù)的迅速發(fā)展,新的檢測方法應(yīng)運而生,納米金、核酸探針、芯片技術(shù)及納米生物傳感器等技術(shù)更加敏感、便捷、高效且都具有制備試劑盒的可能性,在CCV診斷上更具有簡便性和普適性,大大提高了診斷效率[10]。當(dāng)多種疫病同時混合感染時,可采用多重PCR檢測方法,同時對病毒含量較低的病原也能夠達到快速準(zhǔn)確的檢測[11]。
堅持“預(yù)防為主、加強飼養(yǎng)管理”的原則,采取檢測、消毒、免疫、無害化處理等綜合防控措施,能有效控制CCV的發(fā)生與流行。對于高發(fā)病疫區(qū),疫苗免疫接種是預(yù)防本病的有效措施。無論是CCV基因疫苗或弱毒苗單獨免疫還是聯(lián)合免疫,均可引起特異性體液免疫應(yīng)答和細胞免疫應(yīng)答,且聯(lián)合免疫能誘導(dǎo)更強的免疫應(yīng)答水平[12]?,F(xiàn)市面上寵物多使用多聯(lián)疫苗進行預(yù)防接種。發(fā)現(xiàn)病犬應(yīng)及時隔離,防止疾病傳播和擴散。用生石灰、1︰30漂白粉溶液、0.2%~1%甲醛溶液等有效消毒劑徹底消毒飼養(yǎng)場地和圈舍,避免健康犬接觸病犬污染物,飼喂干凈飲水。犬舍應(yīng)每天打掃,清除糞便。每周用消毒液消毒犬舍,消毒劑交替使用,以防止病原產(chǎn)生耐藥性。病死犬及時進行無害化處理,焚燒或深埋,禁止解剖和食用。普通腸型CCV患犬一般采取對癥治療和支持療法相結(jié)合的治療方案:抗毒消炎,止吐止瀉,防止脫水,糾正酸中毒,加強護理,增強抗病力。嚴重者或有條件的注射CCV高免血清或單克隆抗體,早期使用可提高療效[2]。高免血清與抗菌消炎藥同時使用,可提高治療效果。病犬常因脫水而死,因此補液是治療本病的主要措施。補液的同時靜脈注射抗菌消炎藥控制繼發(fā)感染,常用抗菌類藥物有青霉素、慶大霉素、頭孢噻肟,按說明書用量連續(xù)使用3天,每天1次。注意抗菌素不要長時間使用,以防腸道正常菌群失調(diào),反而延緩腸道消化功能的恢復(fù)。嘔吐嚴重者可肌注愛茂爾、雷尼替丁,腹瀉嚴重可用瀉痢停、藥用炭、維迪康等,按說明書用量。加強護理,注意對病犬保暖,在發(fā)病后嚴格控制飲食,禁食禁水,通過輸液等方式防止脫水,因此時病犬腸胃功能紊亂和減弱,喂食只能增加消化負擔(dān),導(dǎo)致病情嚴重。當(dāng)病犬在48小時內(nèi)不再嘔吐和腹瀉,可試探性喂食易消化食物,如泡軟的狗糧[13]。