高強(qiáng)度間歇運(yùn)動(dòng)對(duì)中年小鼠心肌自噬/線粒體自噬相關(guān)蛋白表達(dá)和線粒體呼吸功能的影響

廖波 黃沖 胡帥 張昱 賈瀟彭 張慶 王貴平 羅麗

蘇州大學(xué)體育學(xué)院（江蘇蘇州215021）

自噬作為細(xì)胞的一種分解代謝途徑，能將細(xì)胞中有害或錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)以及受損的細(xì)胞器遞送至溶酶體中進(jìn)行降解，從而維持蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞器結(jié)構(gòu)與功能的正常[1]。作為有絲分裂后細(xì)胞，心肌細(xì)胞的分裂增殖只存在于胚胎期，在胎兒出生以后就幾乎不再進(jìn)行分裂增殖[2]，因此，自噬在維持心肌細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用。線粒體是細(xì)胞的能源中心，通過氧化磷酸化為機(jī)體生命活動(dòng)提供能量。心臟作為人體的“動(dòng)力引擎”，其正常功能的發(fā)揮高度依賴于線粒體呼吸。心肌衰老過程中線粒體數(shù)目減少，線粒體呼吸鏈上的酶活性降低，導(dǎo)致線粒體呼吸功能減弱。更為不利的是，功能異常的線粒體會(huì)引起活性氧生成和釋放增加，后者又會(huì)進(jìn)一步加劇線粒體損傷，誘導(dǎo)促凋亡因子釋放，造成心肌細(xì)胞凋亡水平上升。因此，線粒體健康對(duì)于維持心肌正常生理功能至關(guān)重要。當(dāng)線粒體發(fā)生損傷時(shí)，細(xì)胞可通過自噬作用選擇性清除受損線粒體，這一過程稱為線粒體自噬，也是線粒體質(zhì)量控制的重要機(jī)制。線粒體自噬在心肌健康中扮演著重要角色。Parkin 和Bnip3L 是調(diào)控線粒體自噬的關(guān)鍵蛋白，有研究發(fā)現(xiàn)，在Parkin敲除小鼠的心肌梗死模型中，出現(xiàn)梗死區(qū)損傷線粒體數(shù)量增多，心肌細(xì)胞凋亡水平顯著升高[3]。Bnip3L敲除小鼠則在12月齡時(shí)表現(xiàn)出明顯的心臟肥大[4]。

高強(qiáng)度間歇運(yùn)動(dòng)（high-intensity interval training，HIIT）[5]可以提高心臟收縮和舒張能力，增加心輸出量，降低心血管疾病患病風(fēng)險(xiǎn)[6]，但其發(fā)揮心肌保護(hù)作用的內(nèi)在機(jī)制仍未闡明。

衰老是心血管疾病發(fā)生發(fā)展的主要危險(xiǎn)因素。衰老過程中自噬功能減退，且自噬衰退的程度與心臟衰老密切相關(guān)。研究表明，適宜強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)鍛煉能通過調(diào)控自噬增進(jìn)健康，延緩衰老[7]，但HIIT 對(duì)中年心肌自噬/線粒體自噬的調(diào)控及其對(duì)線粒體呼吸功能的影響仍未闡明。

本研究通過建立中年小鼠HIIT運(yùn)動(dòng)模型，探討HI?IT 對(duì)心肌自噬/線粒體自噬信號(hào)通路和線粒體呼吸功能的影響，為通過科學(xué)鍛煉促進(jìn)中年人群心臟健康提供更充分的科學(xué)依據(jù)。

1 研究對(duì)象與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組

12月齡健康雄性ICR 小鼠20 只，購(gòu)于蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。自由適應(yīng)環(huán)境1 周后，將小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（CON組）、高強(qiáng)度間歇運(yùn)動(dòng)組（HIIT組），每組各10 只，單籠飼養(yǎng)，籠內(nèi)保持通風(fēng)干燥，自由攝食飲水，CON組小鼠不接受任何形式的運(yùn)動(dòng)干預(yù)。HIIT組進(jìn)行為期8 周的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練。光照時(shí)間為7：00～19：00，溫度在23℃± 1℃，相對(duì)濕度50%～70%。

1.2 動(dòng)物訓(xùn)練方案

HIIT 組小鼠首先在小鼠轉(zhuǎn)輪式疲勞儀（圖1）（YLS-10B，濟(jì)南益延科技發(fā)展有限公司）中進(jìn)行為期1周的適應(yīng)性運(yùn)動(dòng)，每次運(yùn)動(dòng)15 min，每天1 次，共5 天。休息2天后，對(duì)HIIT組小鼠進(jìn)行運(yùn)動(dòng)耐力測(cè)試，具體方案是：起始速度為10 轉(zhuǎn)/min，每3 min 增加5 轉(zhuǎn)直至力竭。力竭判定標(biāo)準(zhǔn)：小鼠跟不上設(shè)定的運(yùn)動(dòng)速度，滑至轉(zhuǎn)輪底部，電擊刺激不能促使小鼠繼續(xù)運(yùn)動(dòng)，此時(shí)跑步機(jī)上的速度記錄為小鼠的最大跑步速度（Vpeak）。

圖1 小鼠轉(zhuǎn)輪式疲勞儀

HIIT 組運(yùn)動(dòng)方案如下：先以14 轉(zhuǎn)/min 的速度進(jìn)行熱身；隨后以90%Vpeak的強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)3min，間歇2 min，間歇期以14 轉(zhuǎn)/min 的速度進(jìn)行運(yùn)動(dòng)，共5 組；接著以12轉(zhuǎn)/min的速度放松3 min。運(yùn)動(dòng)時(shí)間為下午14：00～16：00。每周運(yùn)動(dòng)5天，共8周。

1.3 實(shí)驗(yàn)取材

末次運(yùn)動(dòng)后24小時(shí)，小鼠頸椎脫臼處死后迅速剝離心臟，PBS清洗后濾紙吸干裝入EP管，-80℃冰箱保存。

1.4 主要儀器及試劑

YLS-10B 小鼠轉(zhuǎn)輪式疲勞儀，濟(jì)南益延科技發(fā)展有限公司；電泳儀（powerPAC2000 型）、垂直電泳槽、轉(zhuǎn)移電泳槽，美國(guó)Bio-Rad公司；Odyssey雙色紅外激光成像系統(tǒng)，美國(guó)LI-COR公司；BioTek酶標(biāo)儀，美國(guó)博騰儀器有限公司；TY-20脫色搖床，上海西巴斯生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

1.5 蛋白免疫印跡（western blot）實(shí)驗(yàn)檢測(cè)心肌組織自噬/線粒體自噬相關(guān)蛋白及線粒體呼吸鏈復(fù)合物蛋白表達(dá)水平

微管相關(guān)蛋白1 輕鏈3（microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3）的分離膠濃度為12%，自噬相關(guān)蛋白5（autophagy-related protein 5，ATG5）、溶酶體關(guān)聯(lián)膜蛋白2 （lysosomal associated membrane protein 2，LAMP2）、線粒體自噬相關(guān)蛋白Parkin、BCL2/腺病毒E1B-19kDa 相互作用蛋白3 樣（BCL2/adenovi?rus E1B 19kDa-interacting protein 3-like，Bnip3L）；線粒體標(biāo)志物細(xì)胞色素C 氧化酶Ⅳ（cytochrome C oxi?dase subunit Ⅳ，COXⅣ）分離膠濃度為10%，線粒體呼吸鏈復(fù)合物蛋白Ⅰ～Ⅴ（ComplexⅠ～Ⅴ）分離膠濃度為15%。70 V 電泳至目的蛋白條帶拉開，300 mA轉(zhuǎn)膜2 h，用1%TBST 配制5%脫脂奶粉，將NC 膜置入牛奶中封閉1 h，一抗孵育過夜。二抗室溫?fù)u床孵育2 h，封閉、一抗以及二抗孵育后均用TBST洗膜3次，每次10 min。之后用Odyssey 雙色紅外激光成像系統(tǒng)掃膜。

抗體廠家、貨號(hào)及工作濃度如下：LC3（Novus，NB100-2220，1∶500）；ATG5（Cell Signaling Technolo?gy，12994S；1∶1000）；LAMP2（sigma，016M4840V，1∶1000）；Parkin（Santa Cruz，SC-32282，1∶1000）；Bnip3L（Cell Signaling Technology，#12396S，1∶500）；COX Ⅳ（Cell Signaling Technology，#11976，1∶1000）；OXPHOS（Abcam，#110413，1∶200）；GAPDH（Abcam，#ab9484，1∶10000）；tubulin（Abcam，#ab6160，1∶10000）。

1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)

所有數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。采用Graphpad prism 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用單因素方差分析進(jìn)行組間比較，事后多重比較（Post Hoc Tests）采用Newman Keuls 法。P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極其顯著。

2 結(jié)果

2.1 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

小鼠心肌自噬相關(guān)蛋白表達(dá)如圖2所示，與CON組相比，HIIT組小鼠心肌組織LC3Ⅰ/GAPDH無明顯變化，LC3Ⅱ/GAPDH 顯著增加（P＜0.001），LC3Ⅱ/Ⅰ顯著增加（P＜0.05）。如圖3所示，與CON組相比，HIIT組小鼠心肌組織ATG5蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.05）。如圖4所示，與CON 組相比，HIIT 組小鼠心肌組織LAMP2 蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.01）。

圖2 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌LC3蛋白表達(dá)的影響

圖3 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌ATG5蛋白表達(dá)的影響

圖4 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌LAMP2蛋白表達(dá)的影響

2.2 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌線粒體自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

小鼠心肌組織中線粒體自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)如圖5所示，與CON 組相比，HIIT 組小鼠心肌組織Parkin 蛋白表達(dá)水平無顯著變化。如圖6所示，與CON組相比，HIIT 組小鼠心肌組織Bnip3L 蛋白表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05）。

圖5 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌Parkin蛋白表達(dá)的影響

圖6 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌Bnip3L蛋白表達(dá)的影響

2.3 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌線粒體含量的影響

小鼠心肌組織中COX Ⅳ蛋白表達(dá)如圖7所示，與CON組相比，HIIT組小鼠COX Ⅳ的蛋白表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05）。

圖7 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌COX Ⅳ蛋白表達(dá)的影響

2.4 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物蛋白表達(dá)的影響

小鼠心肌組織中線粒體呼吸鏈復(fù)合物蛋白表達(dá)如圖8所示，與CON 組相比，HIIT 組小鼠心肌ComplexⅠ蛋白表達(dá)顯著增加（P＜0.05），ComplexⅡ～Ⅴ無顯著差異。

3 討論

3.1 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

大量研究表明，自噬是一種進(jìn)化上保守的分解代謝途徑，能選擇性或非選擇性地清除長(zhǎng)壽命、非必需或受損的蛋白質(zhì)和細(xì)胞器以維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。當(dāng)自噬被激活時(shí)，自噬相關(guān)蛋白ATG12 通過ATG7 作用后與ATG5發(fā)生共價(jià)結(jié)合，形成ATG5-ATG12復(fù)合物，該復(fù)合物再與ATG16、LC3Ⅱ依次相結(jié)合，進(jìn)而形成ATG5-ATG12-ATG16-LC3Ⅱ終復(fù)合物，最終與自噬體膜相結(jié)合，促進(jìn)自噬體膜的彎曲融合，包裹受損的蛋白質(zhì)和細(xì)胞器。隨后，自噬體在LAMP2的作用下與溶酶體結(jié)合形成自噬溶酶體，降解內(nèi)容物。LC3 定位于前自噬體和自噬體，分為L(zhǎng)C3Ⅰ和LC3Ⅱ，兩種形式之間可以互相轉(zhuǎn)化，自噬激活時(shí)LC3Ⅰ轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)C3Ⅱ，因此LC3Ⅱ是自噬體的標(biāo)志蛋白，可以反映自噬體的數(shù)量。LAMP2 是溶酶體特異性標(biāo)記蛋白，可以反映溶酶體的數(shù)量。

自噬是許多生物體衰老的中心機(jī)制。在衰老過程中，心臟自噬功能進(jìn)行性衰退，重要的自噬相關(guān)蛋白和自噬調(diào)節(jié)因子下調(diào)。與年輕動(dòng)物相比，老年小鼠存在Beclin1 和LC3A、B 水平顯著下降，這表明伴隨著衰老的發(fā)生，自噬體的形成過程受到影響[8，9]。許多能夠延緩衰老過程的措施，例如熱量限制、運(yùn)動(dòng)等，其作用的發(fā)揮至少部分地與自噬激活有關(guān)。但自噬激活改善心肌功能從而延緩衰老的機(jī)制仍遠(yuǎn)未闡明。一些研究探討了運(yùn)動(dòng)的心臟保護(hù)作用與自噬功能之間的關(guān)系。Ogura 等[10]報(bào)道，青年大鼠一次性恒速跑步運(yùn)動(dòng)后即刻，心肌LC3Ⅱ水平顯著降低，1 h 后顯著升高。賈紹輝等[11]發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)時(shí)間中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)可激活小鼠心肌自噬并改善自噬與細(xì)胞凋亡之間的平衡，保護(hù)線粒體功能。馬曉雯等[12]報(bào)道中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)可上調(diào)大鼠心肌細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白Beclin1、LC3 的表達(dá)水平。Cam?pos 等[13]報(bào)道，8 周有氧運(yùn)動(dòng)可以改善心力衰竭小鼠心肌自噬水平，增強(qiáng)心肌功能。與長(zhǎng)時(shí)間中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)相比，HIIT 可以更好地改善小鼠的運(yùn)動(dòng)能力，而這與HIIT誘導(dǎo)的心肌基礎(chǔ)自噬適應(yīng)有關(guān)[14]。對(duì)于自噬相關(guān)基因缺陷（ATG7敲除）小鼠來說，運(yùn)動(dòng)并不能改善心肌功能，這進(jìn)一步證實(shí)了自噬在運(yùn)動(dòng)發(fā)揮心臟保護(hù)功能中的重要作用[15]。在本研究中，8周HIIT上調(diào)了中年小鼠心肌組織中自噬信號(hào)通路中的關(guān)鍵蛋白LC3Ⅱ、ATG5、LAMP2 的表達(dá)水平和LC3Ⅱ/Ⅰ比值，提示長(zhǎng)期HIIT激活了中年小鼠自噬信號(hào)通路。

圖8 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物蛋白表達(dá)的影響

3.2 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌線粒體自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

心肌細(xì)胞有很高的能量需求，主要通過氧化磷酸化產(chǎn)生ATP 以維持正常的收縮功能，因此富含線粒體（占細(xì)胞體積的35%）。然而，線粒體功能并不局限于提供能量，還在氧化應(yīng)激、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞凋亡等中發(fā)揮重要作用。線粒體源性的氧化應(yīng)激可造成生物大分子的不可逆損傷，這在衰老相關(guān)的疾病發(fā)生發(fā)展中具有關(guān)鍵作用。此外，線粒體損傷引起的氧化還原敏感介質(zhì)的激活，包括核因子-κB等，參與了衰老過程中慢性炎癥狀態(tài)的發(fā)生發(fā)展[16]。相似的，線粒體損傷還將導(dǎo)致線粒體途徑的細(xì)胞凋亡水平增加。

線粒體自噬是一種選擇性自噬，能清除損傷或衰老的線粒體，以維持細(xì)胞內(nèi)健康線粒體的數(shù)量。與神經(jīng)元和骨骼肌細(xì)胞一樣，作為有絲分裂后細(xì)胞，成年心肌細(xì)胞的再生能力非常有限。因此，清除受損的線粒體以確保細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的完整性至關(guān)重要。一項(xiàng)利用表達(dá)Mito-Keima 小鼠開展的研究表明，心臟是線粒體自噬功能最強(qiáng)健的器官之一，證實(shí)了線粒體自噬對(duì)于正常心臟功能的重要性[17]。

一些學(xué)者探討了運(yùn)動(dòng)對(duì)心肌線粒體自噬功能的影響。在線粒體自噬發(fā)生的過程中，E3泛素連接酶Parkin能被選擇性地募集到線粒體上，促進(jìn)線粒體自噬。Bnip3L與BCL2/腺病毒E1B相互作用蛋白3（BCL2/ade?novirus E1B 19kDa-interacting protein 3，Bnip3）定位于線粒體膜表面，可以在LIR 結(jié)構(gòu)域與LC3直接結(jié)合，將LC3 募集到損傷線粒體上促進(jìn)線粒體自噬。Li 等[18]發(fā)現(xiàn)，45 min 急性運(yùn)動(dòng)可顯著上調(diào)青年小鼠心肌Bnip3L 水平，激活線粒體自噬。Zhao 等[19]報(bào)道，每天15 min，連續(xù)8 周游泳運(yùn)動(dòng)可提高青年小鼠心肌線粒體PINK1、Parkin蛋白表達(dá)。晚期運(yùn)動(dòng)預(yù)處理可增強(qiáng)青年大鼠心肌Parkin介導(dǎo)的線粒體自噬，但對(duì)Bnip3蛋白表達(dá)無影響[20]。這些結(jié)果表明，急性和長(zhǎng)期運(yùn)動(dòng)都可能激活心肌線粒體自噬功能，從而發(fā)揮心臟保護(hù)作用。

HIIT 在改善心臟功能，降低心血管疾病患病風(fēng)險(xiǎn)方面顯示了較大的潛力，但關(guān)于HIIT 對(duì)中年心肌線粒體自噬的調(diào)控作用尚未見報(bào)道。本研究中，8 周HIIT對(duì)中年小鼠心肌組織Parkin 蛋白表達(dá)無影響，但上調(diào)了Bnip3L的表達(dá)，這提示，8周HIIT可能激活了Bnip3L依賴的線粒體自噬途徑。

線粒體自噬選擇性清除受損線粒體，是重要的線粒體質(zhì)量控制機(jī)制之一。PINK1/Parkin 通路是目前研究較多的介導(dǎo)線粒體自噬的途徑。線粒體損傷時(shí)膜電位下降，絲氨酸/蘇氨酸激酶PINK1 在線粒體外膜累積。自磷酸化并活化的PINK1招募并磷酸化Parkin，之后Parkin 繼續(xù)泛素化線粒體外膜蛋白，繼而這些底物的泛素化成為自噬降解的信號(hào)。Bnip3/NIX 途徑是受體介導(dǎo)的線粒體自噬通路。NIX，又稱BNIP3L，可通過與自噬體上的LC3 或 γ-氨基丁酸受體相關(guān)蛋白（GABARAP）直接結(jié)合，啟動(dòng)線粒體自噬。目前研究認(rèn)為，生理?xiàng)l件下，受體介導(dǎo)的線粒體自噬通路在維持線粒體健康方面發(fā)揮更大作用，但在壓力或應(yīng)激條件下，細(xì)胞常優(yōu)先通過PINK1/Parkin 途徑清除功能失調(diào)的線粒體。迄今為止，人們對(duì)不同方式運(yùn)動(dòng)調(diào)控心肌線粒體自噬的作用和機(jī)制仍知之甚少，需要更多的實(shí)驗(yàn)對(duì)這一領(lǐng)域深入研究。

3.3 8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌線粒體含量和呼吸鏈復(fù)合物蛋白表達(dá)的影響

運(yùn)動(dòng)是否能通過促進(jìn)線粒體生物發(fā)生，增強(qiáng)心肌線粒體功能？這是一個(gè)令人關(guān)注的問題。Qi 等[21]報(bào)道，4 周耐力運(yùn)動(dòng)提高了8～9月齡小鼠心肌中線粒體DNA 拷貝數(shù)，上調(diào)了細(xì)胞色素C 氧化酶亞單位Ⅱ、Ⅳ，細(xì)胞色素氧化酶缺陷同源物1（cytochrome oxidase de?ficient homolog 1，SCO1）和細(xì)胞色素氧化酶缺陷同源物2（cytochrome oxidase deficient homolog 2，SCO2）轉(zhuǎn)錄水平。過氧化物酶體增殖物激活受體-γ共激活因子1（peroxisome proliferator-activated receptor γ coact?ive-tor-1，PGC-1α）是調(diào)控線粒體生物發(fā)生的關(guān)鍵因子，Ko等[22]報(bào)道，抗阻訓(xùn)練能上調(diào)青年糖尿病小鼠心肌PGC-1α蛋白表達(dá)。

線粒體通過呼吸鏈上的復(fù)合物（酶）經(jīng)由一系列氧化還原反應(yīng)合成ATP，為細(xì)胞提供能量。線粒體呼吸鏈復(fù)合物包括NADH（ComplexⅠ）、琥珀酸氧化還原酶（Complex Ⅱ）、細(xì)胞色素C 氧化還原酶（Complex Ⅲ）、細(xì)胞色素C 還原酶（Complex Ⅳ）、ATP 合成酶（Com?plex Ⅴ）。Rita等[23]對(duì)5周齡大鼠進(jìn)行為期54周的中等強(qiáng)度耐力訓(xùn)練，結(jié)果顯示運(yùn)動(dòng)顯著增強(qiáng)了大鼠心功能，增加了心肌線粒體蛋白豐度，增強(qiáng)了線粒體呼吸鏈復(fù)合物Complex Ⅳ和Ⅴ及ATP 合成酶功能。Baekkerud等[24]報(bào)道，8周HIIT增強(qiáng)了2型糖尿病小鼠心肌線粒體氧化磷酸化Complex（C）Ⅰ+Ⅱ、CⅡ和CⅣ，但對(duì)CⅠ、Ca2+反應(yīng)無改善。

HIIT 是否能促進(jìn)中年心肌線粒體生物發(fā)生，改善線粒體呼吸功能？本研究為這一問題的解決提供了更多證據(jù)。COXⅣ位于線粒體內(nèi)膜，可反映線粒體的數(shù)量，同時(shí)也是線粒體呼吸鏈的終端酶，能與氧氣直接作用，與線粒體氧化能力以及線粒體生物發(fā)生密切相關(guān)。本研究中，HIIT組小鼠COX Ⅳ的蛋白表達(dá)水平顯著升高，提示8 周HIIT 增加了中年小鼠心肌線粒體數(shù)量。此外，8 周HIIT 上調(diào)了中年小鼠心肌線粒體Com?plexⅠ蛋白表達(dá)，但對(duì)線粒體呼吸鏈中的其他酶蛋白表達(dá)水平無顯著影響。ComplexⅠ是線粒體呼吸鏈的關(guān)鍵蛋白，其活性的降低是心力衰竭的主要特征之一。這一現(xiàn)象是否是HIIT誘導(dǎo)中年小鼠心肌線粒體適應(yīng)的獨(dú)特效應(yīng)？HIIT調(diào)控心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物表達(dá)的關(guān)鍵因素和具體機(jī)制如何？這些問題仍有待于進(jìn)一步深入研究。

4 總結(jié)

本研究探討了8周HIIT對(duì)中年小鼠心肌自噬/線粒體自噬相關(guān)蛋白表達(dá)和線粒體呼吸功能的影響，結(jié)果顯示，8 周HIIT 引起心肌組織自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、ATG5、LAMP2 表達(dá)水平顯著升高；線粒體自噬相關(guān)蛋白Bnip3L 顯著增加；線粒體標(biāo)志物COX Ⅳ顯著增加；線粒體呼吸鏈復(fù)合物Complex Ⅰ表達(dá)顯著升高。這些結(jié)果表明，8 周HIIT 激活了中年小鼠心肌自噬/線粒體自噬信號(hào)通路，增加了線粒體數(shù)量，改善線粒體呼吸功能。