HC-gp39和GP73檢測(cè)對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷及TACE預(yù)后的評(píng)估價(jià)值

唐輝，劉偉，陳根生

（麗水市人民醫(yī)院 介入科，浙江 麗水 323000）

原發(fā)性肝癌（primary hepatic carcinoma, PHC）是我國(guó)最常見的消化道惡性腫瘤之一。目前，PHC 發(fā)病率位列我國(guó)常見惡性腫瘤的第4 位，男性發(fā)病率高于女性，病死率在腫瘤致死病因中位列第2 位，嚴(yán)重威脅人們的生命健康[1-2]。PHC 的發(fā)病機(jī)制尚不十分明確，難以針對(duì)病因徹底根治，總體生存率較低[3]。而且在疾病初期，臨床表現(xiàn)不典型，一旦出現(xiàn)明顯癥狀，即表明腫瘤發(fā)展迅速，患者多已進(jìn)展為中晚期[4]。因而，早期及時(shí)診斷PHC 對(duì)患者的治療和預(yù)后非常重要。在實(shí)驗(yàn)室檢查方面，甲胎蛋白是肝癌診斷的常用指標(biāo)，但部分患者檢測(cè)結(jié)果可以出現(xiàn)假陰性，因此需要尋求敏感性和特異性更高的肝癌血清標(biāo)志物。人軟骨糖蛋白39（human cartilage glycoprotein-39, HCgp39）不僅是炎癥疾病的血清標(biāo)志物，而且與多種惡性腫瘤密切相關(guān)[5]。高爾基體糖蛋白73（Golgi protein 73, GP73）在各類肝臟疾病中的異常表達(dá)受到越來(lái)越多的關(guān)注，被認(rèn)為在肝細(xì)胞病變中發(fā)揮著重要作用[6-7]。經(jīng)導(dǎo)管肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)（transcatheter arterial chemoembolization, TACE）是通過(guò)栓塞動(dòng)脈以阻斷血供，來(lái)達(dá)到抑制腫瘤生長(zhǎng)、促使腫瘤凋亡的目的。PHC 患者在中晚期無(wú)法行手術(shù)切除病灶時(shí)，TACE 成為重要治療手段[8]。本研究探討血清HCgp39、GP73 水平在PHC 中的診斷價(jià)值及其與TACE患者術(shù)后預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年6月—2018年6月麗水市人民醫(yī)院收治的PHC 患者58 例作為觀察組。其中，男性41 例，女性17 例；年齡34 ～72 歲，平均（47.35±16.82）歲。選取同期健康體檢者60 例作為對(duì)照組。其中，男性41 例，女性19 例；年齡35 ～70 歲，平均（45.68±13.49）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)： ①符合《原發(fā)性肝癌診治規(guī)范（2011）》[9]；②經(jīng)影像學(xué)檢查確診；臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)： ①轉(zhuǎn)移性肝癌；②嚴(yán)重心、肺、腎等器官功能不全；③其他惡性腫瘤；④合并免疫性疾??；⑤合并血液系統(tǒng)疾??；⑥相關(guān)手術(shù)禁忌證。本研究通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及其家屬知情同意。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 觀察組患者入院后于清晨抽取空腹靜脈血3 ～5 ml，離心分離血清標(biāo)本。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清HC-gp39（試劑盒購(gòu)自北京中山生物科技有限公司）、GP73 水平（試劑盒購(gòu)自北京熱景生物科技股份有限公司）。微孔板包被、洗板、封閉、顯色等實(shí)驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，采用艾德康600 全自動(dòng)酶標(biāo)儀（煙臺(tái)艾德康生物科技有限公司）讀取光密度值。根據(jù)PHC 診治規(guī)范原則，所有患者行TACE 手術(shù)： 采用Seldinger 法穿刺股動(dòng)脈插入微導(dǎo)管（北京麥瑞通醫(yī)療器械有限公司），根據(jù)患者個(gè)體的腫瘤病灶大小、位置、數(shù)目、肝功能等具體情況，緩慢注入適量氟尿嘧啶（長(zhǎng)春長(zhǎng)慶藥業(yè)集團(tuán)有限公司）和奧沙利鉑（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司），然后注入碘化油（法國(guó)加柏大藥廠）栓塞腫瘤微血管，部分患者輔以明膠海綿顆粒（杭州艾力康醫(yī)藥科技有限公司）加強(qiáng)栓塞。治療后1 個(gè)月，采用相同方法檢測(cè)血清HC-gp39、GP73 水平。對(duì)觀察組進(jìn)行隨訪，從患者行TACE 術(shù)后第1 天開始，截至2019年12月30日，隨訪時(shí)間3 ～40 個(gè)月。

1.2.2 對(duì)照組患者于體檢當(dāng)天抽取空腹靜脈血3 ～5 ml，采用相同方法檢測(cè)血清HC-gp39、GP73水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用方差分析，兩兩比較采用SNK-q法；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)；繪制受試者工作特征（ROC）曲線，Kaplan-Meier 法繪制生存曲線，比較采用Log-rank χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清HC-gp39、GP73 水平比較

對(duì)照組與觀察組治療前、治療后1 個(gè)月血清HC-gp39、GP73 水平比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），觀察組治療前、治療后1 個(gè)月高于對(duì)照組（P＜0.05），且觀察組治療后1 個(gè)月低于治療前（P＜0.05）。見表1。

2.2 血清HC-gp39、GP73 對(duì)PHC 的診斷價(jià)值

血清HC-gp39、GP73聯(lián)合診斷PHC 的ROC曲線下面積（AUC）高于HC-gp39 單一檢測(cè)。見表2和圖1。

表1 兩組血清HC-gp39、GP73 水平比較 （±s）

表1 兩組血清HC-gp39、GP73 水平比較 （±s）

注： ①與對(duì)照組比較，P ＜0.05；②與治療前比較，P ＜0.05。

組別 n HC-gp39/（pg/ml） GP73/（ng/ml）對(duì)照組 60 188.24±89.73 66.78±27.41觀察組 58治療前 335.76±136.28① 213.84±120.25①治療后1 個(gè)月 276.28±116.35①② 170.41±95.22①②F 值 4.571 10.236 P 值 0.001 0.000

2.3 血清HC-gp39、GP73 與TACE 患者術(shù)后預(yù)后的關(guān)系

截至2019年12月30日，失訪2 例，共56 例獲得隨訪，死亡39 例。治療后36 例血清HC-gp39＜335.76 pg/ml患者死亡24 例，總體生存率為33.33%；20 例血清HC-gp39 ≥335.76 pg/ml 患者死亡15 例，總體生存率為25.00%。兩者總體生存率比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.192，P=0.036），血 清HC-gp39＜335.76 pg/ml 患者高于血清HC-gp39 ≥335.76 pg/ml患者。治療后血清HC-gp39＜335.76 pg/ml 患者中位生存時(shí)間為25.50 個(gè)月，血清HC-gp39 ≥335.76 pg/ml 患者中位生存時(shí)間為20.86 個(gè)月。兩者生存時(shí)間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.415，P=0.020），治療后血清HC-gp39＜335.76 pg/ml 患者高于血清HC-gp39 ≥335.76 pg/ml 患者。見圖2。

表2 血清HC-gp39、GP73 在PHC 中的診斷價(jià)值參數(shù)

圖1 血清HC-gp39、GP73 診斷PHC 的ROC 曲線

治療后31例血清GP73＜213.84 ng/ml 患者死亡19例，總體生存率為38.71%；25 例血清GP73 ≥213.84 ng/ml 患者死亡20 例，總體生存率為20.00%。兩者治療后總體生存率比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.176，P=0.029），血清GP73＜213.84 ng/ml患者高于血清GP73 ≥213.84 ng/ml 患者。治療后血清GP73＜213.84 ng/ml 患者中位生存時(shí)間為24.63 個(gè)月，血清GP73 ≥213.84 ng/ml 患者中位生存時(shí)間為20.12個(gè)月。兩者治療后生存時(shí)間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.996，P=0.025），血清GP73＜213.84 ng/ml 患者高于血清GP73 ≥213.84 ng/ml。見圖3。

圖2 治療后不同血清HC-gp39 水平患者的生存曲線

圖3 治療后不同血清GP73 水平患者的生存曲線

3 討論

近年來(lái)，我國(guó)PHC 的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。PHC不僅進(jìn)展快，極易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，而且預(yù)后差，5年生存率＜10%，病死率＞50%。此外PHC 早期臨床癥狀表現(xiàn)不典型，患者難以及時(shí)確診，以致錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)間[4，10-11]。影像學(xué)檢查是診斷PHC 的重要方式，但病灶在CT 成像中受到多種因素制約，可能影響診斷結(jié)果[12]。甲胎蛋白是最常用于肝癌診斷的血清標(biāo)志物，但存在部分患者早期檢測(cè)陰性的現(xiàn)象，應(yīng)用價(jià)值有限[13]。腫瘤標(biāo)志物有助于表達(dá)腫瘤的病變狀態(tài)，因此尋求更加有效的血清標(biāo)志物一直是臨床研究的重點(diǎn)。

HC-gp39 廣泛分布于組織器官，在炎癥疾病中呈高表達(dá)，在卵巢癌、膀胱癌等多種惡性腫瘤中也出現(xiàn)了顯著變化，提示HC-gp39 與腫瘤相關(guān)[14]。在正常肝細(xì)胞中，GP73 呈低表達(dá)狀態(tài)，當(dāng)肝臟組織遭受損傷或發(fā)生病變，GP73 表達(dá)明顯上調(diào)[15-16]。本研究中，觀察組治療前、治療后1 個(gè)月血清HC-gp39、GP73 水平高于對(duì)照組，且觀察組治療后1 個(gè)月低于治療前，說(shuō)明PHC 患者血清HC-gp39、GP73 水平均高于健康人。HC-gp39 和GP73 均在肝細(xì)胞癌變過(guò)程中發(fā)揮重要作用。HC-gp39 參與細(xì)胞增殖分化，能夠提高瘤旁間質(zhì)的黏附性，促進(jìn)腫瘤周圍組織的血管增生，HC-gp39還能通過(guò)腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)重建過(guò)程幫助腫瘤浸潤(rùn)[17]。高爾基體參與細(xì)胞轉(zhuǎn)化和細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)，GP73 作為與高爾基體的生理結(jié)構(gòu)密切相關(guān)的跨膜蛋白，當(dāng)肝細(xì)胞中高爾基體結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異常，GP73 分泌明顯增加[18-20]。本研究中，兩者聯(lián)合診斷PHC 的AUC 為0.814，敏感性和特異性分別為70.05%和88.64%，提示血清HCgp39、GP73 聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PHC 具有一定的診斷價(jià)值。

外科手術(shù)切除是治療PHC 的理想手段，但是考慮到早期臨床癥狀不典型，許多患者確診時(shí)已處于癌癥中晚期，腫瘤侵襲范圍過(guò)大，無(wú)法切除病灶，因此TACE 成為首選治療方式[13]。腫瘤生長(zhǎng)依賴新生血管，TACE 通過(guò)阻斷血供來(lái)抑制腫瘤生長(zhǎng)，療效可靠，且副反應(yīng)較輕[21]。腫瘤生長(zhǎng)受限使血清HC-gp39、GP73水平出現(xiàn)變化。本研究中，觀察組治療后1 個(gè)月血清HC-gp39、GP73 水平相比治療前有所降低，治療后血清HC-gp39＜335.76 pg/ml 患者總體生存率和中位生存時(shí)間均高于血清HC-gp39 ≥335.76 pg/ml 患者；治療后血清GP73＜213.84 ng/ml 患者總體生存率和中位生存時(shí)間均高于血清GP73 ≥213.84 ng/ml 患者，結(jié)果顯示術(shù)后血清HC-gp39、GP73 水平降低的TACE 患者生存質(zhì)量明顯優(yōu)于未降低患者。

綜上所述，血清HC-gp39、GP73 水平升高對(duì)PHC 具有一定的診斷價(jià)值，聯(lián)合診斷價(jià)值更高。TACE 術(shù)后血清HC-gp39、GP73 水平降低的PHC 患者生存質(zhì)量明顯優(yōu)于未降低患者，兩者對(duì)TACE 術(shù)后預(yù)后具有一定的診斷價(jià)值。