加味六黃湯聯(lián)合西格列汀對(duì)初診2型糖尿病病人血清炎性因子及氧化應(yīng)激產(chǎn)物的影響

馮 佳，齊 婷，王述進(jìn)，左 紅

2型糖尿病是臨床最常見的慢性內(nèi)分泌代謝性疾病[1]，嚴(yán)重危害人類健康。近年來，隨著人們生活水平不斷提高，2型糖尿病已經(jīng)成為全球性疾病，國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(IDF)2015年統(tǒng)計(jì)顯示[2]，全球2015年糖尿病病人人數(shù)已經(jīng)高達(dá)4.15億人，其中我國(guó)1.096億人左右，居第一位，2型糖尿病發(fā)病率增長(zhǎng)快速，給病人造成了沉重經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。對(duì)于初診2型糖尿病病人，盡快控制血糖水平使其達(dá)標(biāo)對(duì)于消除高血糖毒性、防治慢性并發(fā)癥等有著重要意義，也是早期治療的主要目的。口服降糖藥物是治療初診2型糖尿病的主要手段，隨著醫(yī)學(xué)界對(duì)于2型糖尿病發(fā)病機(jī)制的深入研究，二肽基肽酶Ⅳ(DPP-Ⅳ)抑制劑、胰高糖素樣肽(GLP-1)受體激動(dòng)劑、鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)體(SGLT)抑制劑等新型降糖藥陸續(xù)進(jìn)入臨床[3]。在2型糖尿病的治療中，中醫(yī)藥以其悠久的歷史和獨(dú)特優(yōu)勢(shì)占據(jù)重要地位[4]，常與口服降糖藥聯(lián)合使用來提高治療效果。本研究探討中藥湯劑加味六黃湯聯(lián)合DPP-Ⅳ抑制劑西格列汀對(duì)初診2型糖尿病病人血清炎性因子及氧化應(yīng)激產(chǎn)物的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核通過并在其監(jiān)督下，選取2017年1月—2018年3月在我院內(nèi)分泌科治療的初診2型糖尿病病人154例作為研究對(duì)象。所有病人均已明確診斷，隨機(jī)分為兩組，各77例。對(duì)照組，男43例，女34例；年齡20～65 (51.36±8.73)歲；糖化血紅蛋白(HbA1c)為(8.12±1.43)%，最高10%，最低7%；體重40～90(67.63±9.06)kg；體質(zhì)指數(shù)(BMI)為17～30(24.73±1.98)kg/m2。研究組，男41例，女36例；年齡18～64 (52.05±9.01)歲；HbA1c為(8.34±1.29)%，最高10%，最低7%；體重42～90(66.87±8.96)kg；BMI為18～30(24.06±2.13)kg/m2。兩組臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有病人診斷符合2016年美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)(ADA)《糖尿病醫(yī)學(xué)診療標(biāo)準(zhǔn)》[5]的2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)過口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)確診；中醫(yī)辨證符合2011年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)(CACM)《糖尿病中醫(yī)防治指南》中氣陰兩虛證的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；②從未接受過抗糖尿病藥物治療；③年齡18～65歲；④病人或家屬簽訂知情同意書，積極配合此次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①1型糖尿病、繼發(fā)性糖尿病病人；②已經(jīng)接受抗糖尿病藥物、胰島素等治療的病人；③空腹血糖(FBG)≥15.0 mmol/L者；④合并自身免疫性疾病、其他內(nèi)分泌代謝疾病等的病人；⑤既往存在胰腺炎病史或胰腺切除者；⑥正在使用抗氧化藥物治療者；⑦妊娠期或擬妊娠女性；⑧對(duì)研究中使用到的藥物過敏或無法耐受的病人。

1.3 治療方法 兩組均接受低糖飲食控制及運(yùn)動(dòng)輔助常規(guī)治療，定期接受糖尿病健康教育。對(duì)照組予以磷酸西格列汀片[規(guī)格：每片100 mg，國(guó)藥準(zhǔn)字J20120057，批號(hào)：20150926，意大利 Merck Sharp &； Dohme (Australia) Pty Ltd]100 mg/d，每日1次口服。研究組在對(duì)照組相同劑量磷酸西格列汀治療基礎(chǔ)上，予以加味六黃湯治療，組方：當(dāng)歸12 g，黃芪24 g，生地12 g，熟地12 g，黃柏12 g，黃連12 g，黃芩12 g，淮山藥12 g，黨參10 g，丹參10 g，川赤芍10 g。浸泡30 min后煎煮，取汁200 mL，每日2次口服。兩組病人均治療12周。

1.4 觀測(cè)指標(biāo)

1.4.1 血糖水平檢測(cè)及臨床療效評(píng)價(jià) 于治療前后，由護(hù)士采集病人空腹時(shí)及餐后2 h肘靜脈血3 mL送至檢驗(yàn)科，靜置1 h后，由檢驗(yàn)科醫(yī)師采用德國(guó)SIGMA 2-16K型離心機(jī)3 000 r/min離心10 min，移液器吸取上層血清，并采用日本東芝TBA-40FR型全自動(dòng)生化分析儀測(cè)HbA1c、FBG、餐后2 h血糖(2 hPBG)水平。參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[7]評(píng)估病人治療前后證候積分，計(jì)算療效指數(shù)。療效指數(shù)=(治療前證候積分-治療后證候積分)/治療前證候積分×100%，臨床療效判定標(biāo)準(zhǔn)，顯效：病人臨床癥狀、體征顯著改善，療效指數(shù)≥70%，F(xiàn)BG、2 hPBG降至治療前的60%以下或達(dá)到正常范圍；有效：病人臨床癥狀、體征好轉(zhuǎn)，療效指數(shù)為30%～69%，F(xiàn)BG、2 hPBG降至治療前的61%～80%，且未恢復(fù)正常；無效：病人臨床癥狀、體征無變化或加重，療效指數(shù)<30%，F(xiàn)BG、2 hPBG降至治療前的80%以上或未下降。

1.4.2 血清炎性因子含量檢測(cè) 于治療前后采集病人空腹靜脈血3 mL送至檢驗(yàn)科，靜置1 h后，由檢驗(yàn)科醫(yī)師采用離心機(jī)3 000 r/min離心10 min，移液器吸取上層血清，用美國(guó)Thermo Fisher Multiskan FC型酶標(biāo)儀，通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)測(cè)定腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)以及單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)含量。操作按照試劑盒說明書進(jìn)行，試劑盒由上海晶抗生物工程公司提供。

1.4.3 血清氧化應(yīng)激產(chǎn)物含量檢測(cè) 于治療前后，采集病人空腹靜脈血3 mL送至檢驗(yàn)科，靜置1 h后，由檢驗(yàn)科醫(yī)師采用離心機(jī)3 000 r/min離心10 min，移液器吸取上層血清，用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定總抗氧化態(tài)(TAS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)含量，試劑盒由上海心語生物科技有限公司提供。操作按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4.4 安全性評(píng)估 研究過程中定期監(jiān)測(cè)病人血、尿常規(guī)及肝腎功能，密切觀察不良反應(yīng)發(fā)生情況。

2 結(jié) 果

2.1 兩組臨床療效比較 治療后，研究組總有效率為92.21%，對(duì)照組總有效率為80.52%，兩組總有效率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.466，P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組臨床療效比較 單位： 例(%)

2.2 兩組治療前后血糖水平比較 與治療前比較，研究組及對(duì)照組治療后HbA1c、FBG、2 hPBG水平明顯降低(P<0.05)；與對(duì)照組比較，治療后研究組HbA1c、FBG、2 hPBG水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組HbA1c、FBG、2 hPBG水平比較(±s)

2.3 兩組血清炎性因子含量比較 與治療前比較，研究組及對(duì)照組治療后血清TNF-α、hs-CRP、IL-6、MCP-1含量明顯降低(P<0.05)；與對(duì)照組比較，治療后研究組血清TNF-α、hs-CRP、IL-6、MCP-1含量明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 兩組血清TNF-α、hs-CRP、IL-6、MCP-1含量比較(±s) 單位：ng/L

2.4 兩組氧化應(yīng)激產(chǎn)物含量比較 與治療前比較，研究組及對(duì)照組治療后血清TAS、SOD、GSH-Px含量升高，MDA含量明顯降低(P<0.05)；與對(duì)照組比較，治療后研究組血清TAS、SOD、GSH-Px含量較高，MDA含量較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表4。

表4 兩組血清TAS、SOD、GSH-Px、MDA含量比較(±s)

2.5 兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較 治療過程中，對(duì)照組出現(xiàn)惡心嘔吐3例，腹痛2例，咽痛3例，頭暈2例，不良反應(yīng)發(fā)生率為12.99%；研究組出現(xiàn)惡心嘔吐2例，腹痛2例，咽痛1例，頭暈2例，不良反應(yīng)發(fā)生率為9.09%。兩組間不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3 討 論

2型糖尿病是一種終身性疾病，導(dǎo)致其發(fā)生的常見危險(xiǎn)因素包括家族史、肥胖、高齡、體力活動(dòng)不足、高血壓、高血脂、飲食結(jié)構(gòu)、生活方式、社會(huì)環(huán)境因素等等[8]，這些因素常相互影響，共同參與2型糖尿病的發(fā)生過程。2型糖尿病的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，在以往的認(rèn)識(shí)中，胰島素抵抗(IR)及胰島素分泌不足是基本的機(jī)制，治療手段也主要圍繞這一機(jī)制展開。而張黎明等[9]研究認(rèn)為，2型糖尿病屬于“慢性低度炎癥狀態(tài)”，多種細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫調(diào)控及炎癥反應(yīng)，能夠引發(fā)IR和胰島β細(xì)胞損傷，導(dǎo)致2型糖尿病。任春久等[10]則認(rèn)為機(jī)體氧化與抗氧化系統(tǒng)失衡，發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，一方面直接造成胰島β細(xì)胞損傷，另一方面激活部分應(yīng)激敏感通路，影響胰島素信號(hào)傳遞，誘發(fā)IR，最終引發(fā)或加重2型糖尿病?？梢?，炎癥細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)以及氧化應(yīng)激反應(yīng)也在2型糖尿病的發(fā)病過程中起到了重要作用，為2型糖尿病的治療提供了新的思路。因此，對(duì)初診2型糖尿病采取有效的治療手段控制血糖，恢復(fù)胰島β細(xì)胞功能，對(duì)于延緩2型糖尿病進(jìn)展有重要作用。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，2型糖尿病屬于“消渴”“消癉” “消中”等范疇[11]，氣陰兩虛證為其最常見證型，病人多先天稟賦不足，素體腎陰虧虛，燥熱偏盛，久之耗傷脾氣，氣血水津不布，發(fā)為本病，治療上應(yīng)以清熱養(yǎng)陰、益氣生津?yàn)橹?。加味六黃湯由當(dāng)歸六黃湯化裁而來，原方中當(dāng)歸養(yǎng)血增液，生地、熟地滋養(yǎng)腎陰、清熱止渴，黃連、黃芩、黃柏清三焦郁熱，黃芪益氣固表，有滋陰瀉火、益氣固表之效，加入淮山藥補(bǔ)氣養(yǎng)陰生津、黨參益氣，既可助黃芪益氣補(bǔ)虛，又可防止黃連、黃芩、黃柏清瀉太過；加入川赤芍可行氣活血，使補(bǔ)而不滯，丹參可活血祛瘀，除煩熱，防止久病生瘀，全方配伍精當(dāng)，共奏益氣養(yǎng)血，滋陰降火，生津止渴之效。現(xiàn)代研究顯示，黃芪的藥理成分為黃芪多糖，具有雙向調(diào)節(jié)血糖、抗自由基氧化等作用[12]；黃芪和山藥藥對(duì)也被證實(shí)對(duì)2型糖尿病大鼠模型有降低血糖水平、提高抗氧化功能的效果[13]。西格列汀為用于臨床最早的DPP-Ⅳ抑制劑，能夠抑制機(jī)體內(nèi)90%以上DPP-Ⅳ活性，防止其加速GLP-1降解，使得GLP-1水平升高，以葡萄糖依賴形式促進(jìn)胰島素分泌、增強(qiáng)β細(xì)胞增殖、抑制胰高血糖素分泌等，從而降低血糖水平，發(fā)揮抗2型糖尿病的作用。李寅輝等[14]研究認(rèn)為，西格列汀安全性高，且對(duì)病人的遠(yuǎn)期預(yù)后非常有益，是2型糖尿病病人治療的有效合理選擇。

多種炎性因子參與2型糖尿病的進(jìn)展過程。TNF-α為促炎細(xì)胞因子，相關(guān)研究認(rèn)為其可通過促進(jìn)脂肪分解提高機(jī)體游離脂肪酸水平，降低酪氨酸激酶、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體4(GLUT4)等的活性誘發(fā)IR，是2型糖尿病病人IR的主要危險(xiǎn)因素之一。hs-CRP為敏感的炎癥標(biāo)志物，可以由其他炎性細(xì)胞因子誘導(dǎo)釋放，又可誘導(dǎo)炎性因子產(chǎn)生，加速2型糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)生。IL-6則屬于免疫調(diào)節(jié)因子，能夠通過干擾胰島素受體信號(hào)、促進(jìn)氧自由基釋放、抑制GLUT4表達(dá)等途徑誘發(fā)IR。MCP-1為脂肪組織釋放的趨化因子家族成員，可以誘導(dǎo)單核巨噬細(xì)胞聚集、激活，釋放氧自由基和溶酶體，加重組織損傷和炎癥反應(yīng)，還可促進(jìn)IR發(fā)生。有研究顯示，2型糖尿病病人血清MCP-1含量與HbA1c有正相關(guān)關(guān)系，可用于評(píng)估疾病預(yù)后[15]。

本研究采用加味六黃湯聯(lián)合西格列汀對(duì)初診2型糖尿病病人進(jìn)行治療，并分析該療法對(duì)病人炎癥狀態(tài)及氧化應(yīng)激產(chǎn)物的影響。研究顯示，研究組血糖水平低于對(duì)照組，治療總有效率高于對(duì)照組，說明加味六黃湯聯(lián)合西格列汀治療初診2型糖尿病確實(shí)取得了較好療效。研究組治療后血清TNF-α、hs-CRP、IL-6、MCP-1含量低于對(duì)照組，說明加味六黃湯聯(lián)合西格列汀可以改善初診2型糖尿病病人炎癥狀態(tài)，控制病情進(jìn)展。氧化應(yīng)激產(chǎn)物檢測(cè)結(jié)果顯示，研究組血清TAS、SOD、GSH-Px含量高于對(duì)照組，MDA含量低于對(duì)照組。TAS、SOD、GSH-Px均屬于抗氧化系統(tǒng)成員，TAS反應(yīng)總體的抗氧化水平，SOD可以清除超氧陰離子自由基、過氧化物游離基等氧自由基，發(fā)揮抗氧化作用；GSH-Px則能促使過氧化物水解或還原為羥基化合物，保護(hù)細(xì)胞和組織免受過氧化物損傷；MDA脂質(zhì)氧化終產(chǎn)物，能夠直接攻擊線粒體DNA使其破壞，加速細(xì)胞凋亡，影響胰島素分泌和效應(yīng)，誘發(fā)并加重2型糖尿病[15]。本研究結(jié)果說明加味六黃湯聯(lián)合西格列汀能增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，降低氧化終產(chǎn)物水平，促進(jìn)氧化-抗氧化平衡恢復(fù)，減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)的組織損傷和IR。

加味六黃湯聯(lián)合西格列汀治療初診2型糖尿病病人的臨床療效確切，能有效降低血清炎性因子含量，調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激產(chǎn)物水平，提高機(jī)體抗氧化能力，而且具有較高的安全性。