蓮須化學成分與藥理作用的研究進展

宋靜 陳亞南 饒高雄

[摘要]通過查閱文獻對蓮須的本草記載、化學成分、含量測定以及藥理作用等研究現狀進行了歸納總結，以期為蓮須的后續(xù)研究提供基礎。目前蓮須的化學成分研究相對不足，藥理作用主要為總提取物的活性研究，其活性成分與作用機制均不明顯，且《中華人民共和國藥典》中其含量測定也沒有明確的指標成分。故后期可對蓮須的化學成分等進行深入研究，可為更好地開發(fā)利用蓮須提供科學依據。

[關鍵詞]蓮須;化學成分;黃酮;藥理活性;固腎澀精;含量測定

[中圖分類號] R285.5? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-4721（2020）7（a）-0031-04

Research advances on chemical constituents and pharmacological effect of Nelumbinis stamen

SONG Jing? ?CHEN Ya-nan? ?RAO Gao-xiong▲

College of Chinese Medicine， Yunnan University of Chinese Medicine， Yunnan Provincial Ethnic Health Theory and Health Product Engineering Laboratory， Kunming? ?650500， China

[Abstract] Based on the literature review， this paper summarizes the current situation of the studies on the record， chemical composition， content determination and pharmacological action of Nelumbinis stamen， so as to provide a basis for the follow-up study of Nelumbinis stamen. At present， the research on the chemical components of Nelumbinis stamen is relatively insufficient， and the pharmacological action is mainly the activity study of the total extract， the active components and the mechanism of action are not obvious， and there is no clear index component in the Chinese Pharmacopoeia for the determination of its content. Therefore， in the later stage， the chemical components of Nelumbinis stamen can be further studied， which can provide scientific basis for the better development and utilization of Nelumbinis stamen

[Key words] Nelumbinis stamen; Chemical composition; Flavonoids; Pharmacological activity; Reinforcing the kidney and controlling noctural emission; Determination of content

蓮須（Nelumbinis stamen）為睡蓮科（Nymphaeaceae）蓮屬（Nelumbo）植物蓮（Nelumbo nucifera Gaertn.）的干燥雄蕊。夏季花開時選晴天采收，蓋紙曬干或陰干。其味甘、澀，性平，歸心、腎經，具固腎澀精之功效，可用于遺精滑精、帶下、尿頻等癥[1-2]。我國各省區(qū)大都有蓮存在，但其主要栽培地多位于中國的南方地區(qū)，如浙江、江蘇及兩湖地區(qū)等地，全國種植面積已達30多萬公頃以上[3]。目前對于植物蓮的化學研究主要在于蓮子心、荷葉，對與蓮須的化學成分研究還不多，僅有陳艷琰等[4]對于其化學成分的提取分離方面有過研究，且《中華人民共和國藥典》[1]中對于蓮須的含量測定項并無相關成分的規(guī)定，主要的藥效成分也不明朗。本文就蓮須的相關研究作簡要概述，以促進蓮須后期的研究及資源的開發(fā)利用。

1本草沿革及記載

蓮須作為傳統(tǒng)中藥材，在西周時期《詩經》中蓮稱為“菡萏”，《爾雅》中曰“芙蕖”，晉《古今注》中曰“芙蓉”，而蓮在本草中最早記載于《本草綱目》，歸于水果類，載為“蓮藕”[5]。蓮須最早載于宋代（公元1253年）嚴用和所撰的《濟生方》，用以治療遺精[6]。

蓮須具有清心、益腎、澀精、止血之功效?？芍委焿暨z滑泄，吐、衄、崩、帶，瀉痢等癥[1]。古籍中對其應用的記載多為固腎澀精方面作用，如《本草經疏》：“蓮蕊須《本經》不收，而古方固真補益方中，往往用之。詳其主治，乃是足少陰經藥，亦能通手少陰經，能清心，入腎固精氣，烏須發(fā)，止吐血，療滑泄，治夢遺精滑最良[7]?！薄侗窘浄暝罚骸吧忢殻逍耐I，以其味澀，故為固澀精氣之要藥[8]?！薄侗静萸笳妗罚骸吧忢殻蕼囟鴿?，功與蓮子略同。但澀性居多，不似龍骨寒澀，有收陰、定魂安魄之妙;牡蠣咸澀微寒，兼有化堅解熱之功;金櫻徒有阻澀之力，而無清心通腎之理爾[9]。”《本草綱目》：“清心通腎，固精氣，烏須發(fā)，悅顏色，益血，止血崩、吐血[5]?！薄侗静萃ㄐ罚骸爸文凶幽I泄，女子崩帶[10]?！?/p>

2化學成分

從90年代初開始對蓮須進行研究，從中分離得到的化合物共16個化合物，檢測到4個化合物;采用氣相色譜-質譜聯用儀（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）分析檢測其揮發(fā)油，發(fā)現揮發(fā)油中含有44種化學成分。

陳艷琰等[4]采用95%乙醇對蓮須進行提取后采用各種柱色譜分離純化得到1-癸醇、二十四烷酸、棕櫚酸、環(huán)阿爾廷醇、環(huán)阿爾屯烷-23-烯-3β，25-二醇、金色酰胺醇酯、β-谷甾醇、胡蘿卜苷、棕櫚酸-α，α′-甘油二酯、二十六烷酸-α-甘油酯、對苯二酚、對羥基苯甲酸、丁二酸、山萘酚、山萘酚-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷、異鼠李素16個化合物。荊瑞俊等[11]采檢測發(fā)現蓮須中含有槲皮素、木犀草素、山萘酚、異槲皮苷4種有效成分。馮峰等[12]采用水蒸氣蒸餾法提取蓮須揮發(fā)油后利用GC-MS對揮發(fā)油中的化學成分進行分離鑒定，從蓮須揮發(fā)油中鑒定出44種化學成分，占總成分的89.98%，主要為脂肪酸萜烯烷烴類成分，其中脂肪酸（棕櫚酸為主）含量最高，其次為萜烯類化合物。此外，周榮漢等[13]主編的《植物化學分類學》記載了蓮須中含有生物堿，但從未有研究者分離或檢測到生物堿。

3理化分析

在目前蓮須的理化分析中均以槲皮素、木犀草素、山萘酚、異槲皮苷等幾種黃酮類化合物作為指標成分，其中槲皮素和山萘酚為最常用指標。

荊瑞俊等[11]采用毛細管區(qū)帶電泳紫外檢測法（capillary zone electrophoresis for ultraviolet detection，CZE-UV）測定中藥蓮須中槲皮素、木犀草素、山萘酚、異槲皮苷4種化學成分。4種物質在離子濃度為40 mmol/L Na2B4O7的緩沖溶液（pH 9.0），分離電壓為16 kV，波長為254 nm時，得到了良好的分離測定。

孟憲生等[14]通過高效液相色譜法測定蓮須中槲皮素和山萘酚的含量，采用Shim-pack CLC-ODC色譜柱（島津反相C18柱）;以甲醇∶0.025 mol/L磷酸（60∶40）為流動相，檢測波長為370 nm。測定組分槲皮素、山萘酚與其他組分的色譜峰得到基線分離。加樣回收率平均值為96.8%，相對標準偏差（relative standard deviation，RSD）為1.97%。此方法為控制中藥蓮須的內在質量提供了新的測定指標和方法。

馬銀海等[15]研究了用固相萃取預分離、高效液相色譜法測定蓮須中的槲皮素和山萘酚，蓮須中的槲皮素和山萘酚用90%甲醇加熱回流提取，提取液用Waters Sep-Pak-C18固相萃取小柱預分離，以安捷侖ZORBAX Stable Bound（4.6 mm×50 mm，3.5 μm）色譜柱為固定相，0.2%磷酸：甲醇（體積比50∶50）為流動相，在該色譜條件下，蓮須中的槲皮素和山萘酚在1.5 min內可達到基線分離;用紫外二極管矩陣檢測器檢測，方法標準回收率為98%～102%，RSD為0.87%～1.22%，比常規(guī)液相色譜法縮短了80%的分析時間。該方法的建立在一定程度上優(yōu)化了蓮須中槲皮素和山萘酚含量測定的方法。

李彥博等[16]采用Phenomenex-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色譜柱;以甲醇∶0.2%磷酸溶液（55∶45）為流動相;流速1 ml/min;柱溫30℃;在350 nm處對蓮須中的木犀草素進行含量測定;發(fā)現木犀草素在0.204～2.040 μg之間線性關系良好，加樣回收率為99.44%，RSD=0.82%（n=6）。結果表明，在該條件下使用高效液相色譜法測定蓮須中木犀草素的含量的方法具有很好的重現性和穩(wěn)定性。

陳建忠等[17]用25%的鹽酸∶甲醇溶液（1∶4）水解提取蓮須樣品后，采用高效液相色譜法測定其水解液中槲皮素和山萘酚的含量，在流動相為甲醇∶0.0125%磷酸溶液（60∶40），流速1.0 ml/min，檢測波長370 nm，柱溫30℃的條件下等度洗脫，測定其水解苷元槲皮素和山萘酚的含量，發(fā)現不同來源的蓮須樣品中槲皮素和山萘酚含量差異較大，說明酸水解提取高效液相色譜法可用于蓮須藥材中槲皮素和山萘酚含量的測定，而15批不同來源蓮須的含量測定結果為進一步修訂蓮須的質量標準提供了實驗依據。

蘇本華等[18]采用分光光度法，以蘆丁為對照品，5%三氯化鋁甲醇溶液為顯色劑，在波長413 nm處對樣品中的總黃酮進行含量測定，結果表明，總黃酮在3～30 μg/ml之間線性關系良好，加樣回收率為98.95%，RSD=0.90%（n=6）;建立了蓮須藥材中總黃酮的含量測定方法。楊冰等[19]通過優(yōu)化薄層色譜條件，將山萘酚、蓮須標準品、蓮須樣品三種溶液均以乙酸乙酯∶丁酮∶甲醇∶甲酸∶水（5∶3∶1∶0.1∶1）為展開劑展開，晾干后噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，分別置日光及紫外光燈（365 nm）下檢視，發(fā)現其薄層色譜斑點清晰，故薄層色譜法可作為蓮須質量控制的方法。

李慶等[20]采用容量分析法測定蓮須花粉粒的顯微特征指數，采用高效液相法對蓮須中異槲皮苷、槲皮素、木犀草素、山萘酚及異鼠李素的含量進行測定，發(fā)現蓮須中花粉粒顯微特征指數與異槲皮苷、槲皮素有相關性，與木犀草素、山萘酚及異鼠李素無相關性。李慶等[21]采用色差計和紫外可見分光光度計分別測定蓮須藥材的粉末顏色與總黃酮的含量的關系，采用統(tǒng)計學方法比較顏色值與總黃酮含量間的相關性，發(fā)現蓮須藥材總黃酮含量與藥材粉末明暗程度有關，其粉末顏色越亮，總黃酮的含量則越高。

4藥理作用

目前蓮須的藥理作用研究多集中在其提取物中，其提取液具有收縮子宮、弱雌激素樣、抗腹瀉、抗氧化、鎮(zhèn)痛等作用及其他功效如補脾止瀉等作用。

4.1對子宮的作用

吳麗明等[22]通過觀察蓮須對正常和孕鼠離體子宮活動的影響，實驗結果表明，蓮須能增加正常大鼠和早孕大鼠離體子宮收縮力，具有催產作用。蓮須能使幼雌性小鼠卵巢增重，幼雌性小鼠子宮增重，使子宮內膜發(fā)生改變，且陰道開口時間提前，陰道開口率增加，提示蓮須在體內整體試驗有雌激素樣作用，為弱雌激素樣效應。吳麗明等[23]將0.6～9.6 mg/ml劑量蓮須加到小鼠離體子宮;將0.88、4.4、8.8 mg/ml蓮須加到大鼠離體子宮和2.2、4.4、8.8 mg/ml蓮須加到早孕大鼠離體子宮后，分別觀察對子宮收縮力的影響，發(fā)現蓮須能增加多種實驗動物子宮平滑肌收縮力，且劑量大時子宮收縮頻率增加，具有催產作用。吳麗明等[24]在觀察蓮須對正常和孕鼠離體子宮活動的影響時發(fā)現蓮須能增加正常大鼠和早孕大鼠離體子宮收縮力，具有催產作用;且蓮須能使幼雌性小鼠卵巢增重，幼雌性小鼠子宮增重，使子宮內膜發(fā)生改變，且陰道開口時間提前，陰道開口率增加，提示蓮須在體內整體試驗有雌激素樣作用，為弱雌激素樣效應。

4.2抗腹瀉、抗氧化、鎮(zhèn)痛

周細根等[25]將20只小鼠隨機分為兩組，給對照組小鼠灌胃生理鹽水0.2 ml/10 g，給實驗組小鼠灌胃蓮須乙醇提取液0.2 ml/10 g，30 min后對兩組小鼠均灌胃10%的卡紅硫酸鎂溶液0.2 ml/10 g，20 min 后測量幽門至卡紅前沿的距離。結果顯示，蓮須乙醇提取液能明顯減少卡紅推進距離，降低卡紅推進百分率。表明蓮須乙醇提取液對硫酸鎂所致小鼠腹瀉具有明顯的拮抗效果。吳麗明等[26]發(fā)現1.0 g/kg蓮須可明顯提高小鼠痛閾和抑制冰醋酸引起的扭體反應。沈雅琴等[27]通過研究發(fā)現蓮須能抑制蓖麻油引起的小腸性腹瀉和番瀉葉引起的大腸性腹瀉，但卻不影響小鼠的胃腸推進運動，因此蓮須的抗腹瀉作用并非抑制腸運動，故其作用機制不明。張明發(fā)等[28]研究發(fā)現蓮須能預防電刺激大鼠頸動脈，損傷動脈內皮細胞而引起的血栓形成，但無明顯的抗凝血作用，對血凝過程也無促進作用。

Park等[29]采用MTT法研究了蓮須水提物對小鼠GC-2 spd（ts）細胞的影響，通過測定細胞活力研究蓮須水提物對GC-2 spd（ts）細胞過氧化氫誘導氧化應激的保護作用，測定脂質過氧化水平和過氧化氫酶，結果表明，蓮須水提物在GC-2 spd（ts）細胞中具有抗氧化活性。

4.3其他

高林等[30]認為慢性腎臟疾病蛋白尿是虛實夾雜的病證，治療需要虛實結合。重用蓮須固澀精氣，輔以金銀花、黃芩、赤芍、牡丹皮、小薊、梔子等活血化瘀清熱利濕之藥補瀉，并施標本兼顧。龐桂香等[31]采用蓮須治療嬰幼兒脾虛泄瀉有獨特效果，能明顯縮短病程，表明蓮須有補脾止瀉之功效。此外，研究還發(fā)現藕節(jié)與蓮須合用對鼻息肉、鼻瘡確有治療作用，但觀察的病例數過少，不足以充分證明，故有待于進一步的研究[32]。

5毒理研究

目前蓮須的毒理研究僅有1篇[33]文獻報道，且結果表明蓮須屬于無毒級物質，也無遺傳毒性及致突變作用。

吳麗明等[33]研究了蓮須的急性毒性及遺傳毒性，采用方法如下：急性毒性設了21.50、10.00、4.64、2.15 g/kg四組劑量灌胃。Ames試驗：設0.5、5、50、500、5000 μg/皿劑量，觀察加或不加S9混合物對TA97、TA98、TA100、TA102菌株的影響。小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗：設10.0、5.0、2.5 g/kg三組劑量，2次灌胃后，6 h制片，鏡檢。小鼠精子畸形試驗：設2.50、5.0、10.0 g/kg三組劑量，連續(xù)灌胃5 d，第35天后制片、鏡檢。急性毒性試驗表明蓮須屬于無毒級物質。污染物致突變性檢測（Ames試驗）結果為陰性，未發(fā)現對小鼠骨髓嗜多染紅細胞有致突變作用和對小鼠精子有致突變作用。

6開發(fā)前景

根據古代本草及現代中草藥文獻記載，歸納其現代藥理研究和臨床應用的相關報道后，發(fā)現蓮須在調節(jié)雌激素、催產、抗氧化及鎮(zhèn)痛等方面具有較好的作用。比較來看，中醫(yī)對蓮須的傳統(tǒng)認識是偏固腎澀精、遺精等治療作用，與現代藥理研究偏催產、抗炎抗腹瀉的作用并不完全一致;另外古方中記載的相關藥理作用現代研究涉及不多，如在嶺南民間有讓孕婦在妊娠末期服用蓮須煲雞蛋的習俗，這一秘方不僅能清熱去胎毒，使初生的寶寶皮膚白凈，不易上火，不長濕疹，另有固澀、補血止血之效，有助防止生產時大量流血的作用，還能幫助順產，有助產的功效;但并未有臨床研究證明。此外，目前對于蓮須的研究不夠深入，化學成分的分離研究較少;固腎澀精等主要功效的藥理研究也不全面，作用機制及活性成分均不明了。作為傳統(tǒng)中藥，不僅在藥典中薄層鑒別及含量測定均沒有指標成分，藥理活性及其作用機制不明朗，且市場上對蓮須相關產品的開發(fā)亦稍顯空白，這和其具有的巨大開發(fā)潛力和廣闊應用前景很不對等。故對于蓮須臨床還需開展系統(tǒng)的、深入的研究工作來促進對其化學成分、藥理活性及作用機制的認識，以促進蓮須藥材植物資源的綜合利用。根據蓮須的傳統(tǒng)應用特點，其研究開發(fā)應側重于深入闡述其固腎澀精、止血、催產等藥理作用的機制及其物質基礎，建立蓮須藥材的含量測定成分及質量分析控制技術，為充分利用蓮須藥材奠定良好的基礎。

[參考文獻]

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（第一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：274.

[2]中國科學院植物志委員會.中國植物志（第二十七卷）[M].北京：科學出版社，2004：2-4.

[3]倪學明.蓮的品種分類研究[J].園藝學報，1983，8（3）：207-210.

[4]陳艷琰，唐于平，段金廒，等.蓮須化學成分的研究[J].中國藥學雜志，2010，45（20）：1535-1538.

[5]李時珍.本草綱目[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1975：217-219.

[6]國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草（第八卷）[M].上海：上?？茖W技術出版社，2005：399-404.

[7]繆希雍（明）.本草經疏[M].北京：中醫(yī)古籍出版社，2017：453.

[8]張璐.本經逢原[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2007：159.

[9]黃宮繡.本草求真[M].太原：山西科學技術出版社，2015：55-56.

[10]李中梓（明）.本草通玄（卷下）[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2015：88.

[11]荊瑞俊，姜小瑩，侯書榮，等.毛細管電泳紫外檢測法測定蓮須中的槲皮素、木犀草素、山萘酚、異槲皮甙[J].分析化學，2007，35（8）：1187-1190.

[12]馮峰，念其濱.蓮須揮發(fā)油成分的GC-MS分析[J].海峽藥學，2016，28（11）：50-52.

[13]周榮漢，段金廒.植物化學分類學[M].上海：上海科學技術出版社，2005：501-502.

[14]孟憲生，沙明，曹愛民，等.HPLC測定蓮須中槲皮素和山萘酚的含量[J].中成藥，2003，25（12）：1004-1006.

[15]馬銀海，彭永芳，郭亞東，等.高效液相色譜法快速測定蓮須中的槲皮素和山萘酚[J].昆明師范高等專科學校學報，2005，27（4）：12-13，17.

[16]李彥博，孫靜.HPLC法測定蓮須中木犀草素的含量[J].實用藥物與臨床，2011，14（6）：488-489.

[17]陳建忠，曾志偉，曾榮潔，等.酸水解提取HPLC法測定不同來源蓮須中槲皮素和山柰酚的含量[J].藥物分析雜志，2015，35（2）：355-359.

[18]蘇本華，蘇春英，孫靜，等.分光光度法測定蓮須中總黃酮的含量[J].中醫(yī)藥信息，2011，28（3）：81-82.

[19]楊冰，趙希賢.蓮須薄層色譜鑒別方法的研究[J].首都醫(yī)藥，2011，18（12）：56.

[20]李慶，郭爽，張建逵，等.蓮須顯微特征指數與化學成分相關性研究[J].中華中醫(yī)藥學刊，2018，36（2）：348-350.

[21]李慶，張建逵，康延國，等.蓮須粉末顏色與總黃酮含量相關性研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2016，12（14）：32-34.

[22]吳麗明，張錦周，莊志雄.用子宮增重試驗檢測蓮須的雌激素樣作用[J].現代臨床醫(yī)學生物工程學雜志，2003，9（2）：83-84，87.

[23]吳麗明，邱光清，陳麗娟，等.蓮須對動物子宮收縮的影響實驗研究[J].現代臨床醫(yī)學生物工程學雜志，2003，9（3）：166-167.

[24]吳麗明，邱光清，陳麗娟，等.蓮須的生殖藥理作用研究[J].生殖與避孕，2005，25（1）：27.

[25]周細根，梁生林，胡存華，等.蓮須乙醇提取液抗腹瀉作用的研究[J].實用臨床醫(yī)學，2011，12（12）：9，15.

[26]吳麗明，邱光清，陳麗娟.蓮須的鎮(zhèn)痛作用及對子宮收縮的影響[J].中藥藥理與臨床，1999，（2）：32-33.

[27]沈雅琴，張明發(fā)，朱自平，等.蓮須的抗腹瀉和抗炎作用[J].藥學實踐雜志，1998，（4）：198-200.

[28]張明發(fā)，沈雅琴，朱自平，等.蓮須的抗血栓形成、抗?jié)兒玩?zhèn)痛作用[J].中醫(yī)藥研究，1998，（1）：16-18.

[29]Park EH，Chang MS，Kil KJ，et al.The antioxidant activity of Nelumbinis stamen in GC-2 spd（ts）cells[J].Korea J Herbol，2012，27（5）：15-20.

[30]高林，王恒，孫響波.胡遵達運用蓮須治療蛋白尿經驗[J].山東中醫(yī)藥大學學報，2014，38（5）：455-456.

[31]龐桂香，高秀敏，王新梅，等.蓮須治療嬰幼兒脾虛泄瀉468例臨床觀察[J].現代中西醫(yī)結合雜志，2000，（6）：497-498.

[32]卜鐵建，謝素珍.藕節(jié)、蓮須合用治鼻息肉、鼻瘡效果好[J].中國醫(yī)院藥學雜志，1987，（8）：39.

[33]吳麗明，邱光清，陳麗娟，等.蓮須的遺傳毒性研究[J].癌變.畸變.突變，2003，（2）：94-96.

（收稿日期：2019-11-29）