崗梅的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展

杜冰曌++楊鑫瑤++馮曉++尹旭+張和新歌++趙鳳+高增平++屠鵬飛+柴興云

[摘要]嶺南特色藥材崗梅為冬青科冬青屬梅葉冬青的根和莖，具有清熱解毒、生津止渴、利咽消腫、散瘀止痛之功效，民間多用于治療風(fēng)熱感冒、急慢性咽喉炎、咽喉腫痛等疾病?，F(xiàn)代研究表明，崗梅的化學(xué)成分以三萜皂苷為主，也含有一定的酚酸和少量甾體及單萜。藥理研究顯示，崗梅提取物具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝等活性。該文對崗梅的傳統(tǒng)應(yīng)用、化學(xué)成分及藥理活性進(jìn)行整理，以期為系統(tǒng)的藥效物質(zhì)研究、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升及資源進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。

[關(guān)鍵詞]崗梅； 冬青屬； 三萜皂苷； 藥理活性； 綜述

崗梅為冬青屬植物梅葉冬青Ilex asprella （Hook et Arn） Champ ex Benth的干燥根及莖，性苦、微甘、涼。歸肺、脾、胃經(jīng)[1]，具有清熱解毒、生津止渴、利咽消腫、散瘀止痛之功效，臨床用于治療風(fēng)熱感冒、急慢性咽喉炎、肺熱咳嗽、咽喉腫痛、跌打瘀癰等病癥。崗梅既是感冒靈顆粒、外感顆粒、青梅感冒沖劑等多種清熱解毒類中成藥的重要原料之一，又是復(fù)方崗梅沖劑、復(fù)方崗梅合劑、復(fù)方土牛膝糖漿等醫(yī)院制劑的組成藥物，也是嶺南地區(qū)王老吉涼茶、沙溪涼茶等的重要原料，市場需求大[2]。

梅葉冬青為落葉灌木，高約1～4 m，具長枝和宿短枝，長枝纖細(xì)，栗褐色，無毛，具淡色皮孔，短枝多皺，具宿存的鱗片和葉痕，形如秤星，又稱為“秤星樹”。梅葉冬青喜溫暖濕潤氣候，主要分布在廣東、廣西、湖南、江西、福建、臺灣等地，常生長于海拔400～1 000 m的山地疏林或路旁灌叢中[3]。崗梅作為我國嶺南特色藥材之一，受到不少學(xué)者關(guān)注[2，4]，辛?xí)苑嫉萚1，5]總結(jié)了崗梅提取物及相關(guān)復(fù)方制劑的藥理作用，但針對崗梅化學(xué)成分、單體化合物活性、質(zhì)量評價等整理還不夠系統(tǒng)?；诖?，本文對崗梅化學(xué)成分和藥理活性進(jìn)行全面歸納，為其藥效物質(zhì)研究、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升及資源進(jìn)一步開發(fā)利用做些準(zhǔn)備。

1化學(xué)成分

迄今為止，崗梅中已報道了分離鑒定的104個化學(xué)成分，在數(shù)目和含量上皆以三萜皂苷為主，尤其是熊果烷（烏蘇烷）型，亦含有綠原酸、黃酮、苯丙素及木脂素，少量甾體等其他類。崗梅化學(xué)成分結(jié)構(gòu)式1～104，見圖1，2。由表可知，大多數(shù)成分來自崗梅根，部分來自崗梅葉中，暫時無崗梅莖的化學(xué)研究報道。

11三萜及皂苷類目前已發(fā)現(xiàn)30種以上類型，主要分四環(huán)三萜和五環(huán)三萜2類[6]，具有抗癌、抗炎、抗過敏、抗病毒、降血糖、防治心腦血管疾病等作用[7]。

崗梅三萜或皂苷主要為熊果烷型，另有部分齊墩果烷型 （51～63）和其他類型 （64～67），其中23個為三萜苷元，包括1，4，9，21，29，31～32，39，41，43，46，48，50，52～57，64～67；44個為皂苷，糖鏈部分包括Xyl，Ara，Glc，GlcA 4種單糖類型。值得注意的是，崗梅含有磺酸化皂苷，其中化合物4，13的磺酸化在苷元上，17，19，24～25，33～34，38的磺酸化在糖上，61在糖和苷元上同時有磺酸基取代。崗梅皂苷中有28個以新化合物被發(fā)現(xiàn)，分別為（3β）19hydroxy28oxours12en3yl βDglucopyranosiduronic acid nbutyl ester（15） [8]，ilexasosides A～H （16～19，26，35～37） [12]，asprellanosides C～E （24～25，38） [14]，ilexasprellanosides A～F （5～6，20，58～59，63） [15]，asprellanosides A～B（33，34） [10]，ilexasprellanoside H（40） [19]，asprellic acids A～C（54～56） [9]，asprellcoside A （61）[11]和asprellols A～C（64～66） [13]，提示崗梅化學(xué)成分研究的潛力較大，特別是從崗梅根乙醇提取物的氯仿萃取部位中分離得到的64～66，有一定的結(jié)構(gòu)新穎度，類似于木栓烷型，不同之處在于木栓烷型的C5連甲基，但64～66的甲基連于C10上，64～66也可以歸屬于降熊果烷型[13]。

崗梅三萜1，5，41，51，63對人腫瘤細(xì)胞株A549有明顯細(xì)胞毒活性[15]，12和33可抗HSV1，其活性可能因C3連接木糖且C23和C24為甲基所致，如果C3位不連木糖，如7和8，或者三萜C23，C24甲基被氧化，如45和47，抗HSV1活性消失[10]。齊墩果烷型化合物54和56對RPMI7951細(xì)胞系和KB細(xì)胞有強(qiáng)細(xì)胞毒性[9]， 61可抑制流感病毒，并能抑制ADP誘導(dǎo)的體外血小板聚集，且抗聚集作用或由硫基貢獻(xiàn)[11]。

12酚酸類除三萜外，從崗梅中報道了3個綠原酸、9個黃酮、11個苯丙素和木脂素、6個其他類共29個酚酸。

鄧桂球等[17]報道了崗梅根中的綠原酸（68）、隱綠原酸（69）和3，5O二咖啡?？鼘幩峒柞ィ?0）。因為綠原酸類具有較廣泛的抗菌作用，被視為崗梅抑菌活性的藥效物質(zhì)。黃酮類在崗梅葉中報道相對較多，包括山柰酚及其葡萄糖苷（71～76）、槲皮素及其糖苷（77～79）

2藥理活性

崗梅有清熱解毒、利咽消腫之功效，臨床用于治療風(fēng)熱感冒、上呼吸道感染等疾病。藥理學(xué)中上述功效與抗炎和鎮(zhèn)痛作用相關(guān)，因此藥理學(xué)研究多圍繞根、莖、葉等不同部位提取物的抗炎作用及相應(yīng)分子機(jī)制，這是當(dāng)前研究崗梅的主要內(nèi)容。此外，也有抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝等報道。

21抗炎組織腫脹是炎癥早期的重要反應(yīng)，在炎癥晚期和慢性炎癥期，則會形成肉芽組織[28]。研究表明，灌胃給藥崗梅水提物生藥8，16 g·kg-1對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有顯著效果（P< 001），以水提物生藥28，56，112 g·kg-1劑量可顯著抑制角叉菜膠致大鼠足跖腫脹（P<005或P<001）；此劑量在大鼠棉球肉芽腫實驗?zāi)Ｐ蜕弦灿酗@著效果（P<005或P<001）；崗梅水提物生藥4，8，16 g·kg-1能明顯抑制醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高（P<005或P<001） [29]。崗梅醇提物6，12 g·kg-1對二甲苯致小鼠耳廓腫脹也有顯著效果（P<005或P<001） [30]；崗梅根、莖、葉、根莖混合醇提物分別灌胃給藥8 g·kg-1于此模型，耳腫脹抑制率分別達(dá)6211%，4395%，5390%，5738%[31]。崗梅根醇提物生藥9 g·kg-1肌肉注射可抑制角叉菜膠致大鼠足跖腫脹和大鼠棉球肉芽腫增生（P<001） [32]；根醇提物12 g·kg-1對大鼠棉球肉芽腫模型有一定的抑制作用（P<005）；根醇提物6，12 g·kg-1也能明顯抑制醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高（P<005或P<001） [30]。

動物體內(nèi)實驗表明崗梅水提物和醇提物對急性炎癥或慢性炎癥都有一定的抑制作用，且根和莖的效果近似，為崗梅根莖相互替代提供了一定的參考[33]。ELISA雙抗體夾心法檢測感染甲型流感病毒FM1株的小鼠血清中炎癥因子水平，結(jié)果顯示，崗梅根水提物10，20 g·kg-1能明顯升高感

dime1OglucopyranosideC16H28O7葉[22]染病毒小鼠的IFNγ水平（P<001）；10 g·kg-1劑量明顯升高IL10水平（P<001），提示崗梅可升高抗炎細(xì)胞因子水平[34]。流式細(xì)胞術(shù)檢測感染A/FM/1/47 H1N1病毒小鼠體內(nèi)炎癥因子水平，結(jié)果顯示，崗梅醇提物500 mg·kg-1劑量組與感染組相比，IL6，MCP1和TNFα水平明顯下降（P<005或001），IL10和IFNγ水平明顯增高（P<005或001） [35]，化合物61和83對H1N1感染的A549細(xì)胞中誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的IP10有抑制作用，EC50分別為66，25 μmol·L-1[11]。上述實驗說明崗梅提取物可以抑制病毒感染導(dǎo)致的小鼠肺部炎癥。崗梅根、莖醇提物（生藥5 g·kg-1）灌胃給藥，對脂多糖致急性咽炎小鼠血清中的NO，MDA有顯著抑制效果（P< 001）當(dāng)給藥劑量相同時，同一植株的崗梅根、莖藥效無顯著性差異[33]。

22抗病毒動物實驗以肺指數(shù)或肺指數(shù)抑制率以及死亡保護(hù)率為檢測指標(biāo)。結(jié)果顯示，甲型流感病毒FM1株感染的小鼠經(jīng)崗梅根水提物灌胃給藥，其5，10，20 g·kg-1劑量組小鼠肺指數(shù)變化顯著（P<005或P<001），肺指數(shù)抑制率為181%，304%，325%，陽性藥病毒唑（007 g·kg-1）抑制率為340%[34]。H9N2亞型禽流感病毒滴鼻感染的小鼠灌胃給藥崗梅根水提物，5，10 g生藥·kg-1劑量可顯著降低小鼠的肺指數(shù)（P< 001），延長存活時間（P< 001） [36]，說明崗梅根水提物具有體內(nèi)抗流感病毒作用。

體外實驗方面，崗梅根水提物125 g·L-1濃度能完全抑制MDCK細(xì)胞中甲1型流感病毒FM1株的血凝素，莖的水提物125 g·L-1對病毒有抑制作用。崗梅根水提物（40，20） g·L-1能抑制A549細(xì)胞中呼吸道合胞病毒（RSV）致細(xì)胞的病變，且40 g·L-1時可完全抑制，20 g·L-1能抑制90%的病毒。崗梅莖水提物40 g·L-1對感染RSV病毒的A549細(xì)胞有顯著抑制作用抑制率90%，而20 g·L-1對RSV病毒無抑制作用。崗梅根水提物466，233 g·L-1能完全抑制HEL細(xì)胞中腺病毒3型病毒，莖水提物在質(zhì)量濃度550，275 g·L-1能完全抑制腺病毒3型所致的細(xì)胞病變作用。根水提物50 g·L-1無毒濃度能完全抑制LLCMK2細(xì)胞中副流感病毒3型所致的細(xì)胞病變作用，而莖水提物25 g·L-1無毒濃度無明顯抑制副流感病3型作用[37]。

上述表明，崗梅根、莖提取物具有較好的抗病毒潛力，值得進(jìn)一步探索?；衔?1，83對H1N1感染的A549細(xì)胞中神經(jīng)氨酸酶具有抑制作用，EC50分別為41，17 μmol·L-1，陽性藥奧司他韋EC50為09 μmol·L-1[11]?；衔?2和33具有抗HSV1病毒活性，TIC分別為014，018 mmol·L-1 [10]。

23抗腫瘤MTT法測化合物1，5，41，51，63對人腫瘤細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞毒性IC50分別為563，187，324，141，251 μmol·L-1，陽性藥5FU的IC50為2896 μmol·L-1[15]。化合物54對黑色素瘤細(xì)胞RPMI7951有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，ED50為 062 mg·L-1，56的細(xì)胞毒性微弱，ED50為55 mg·L-1?；衔?4和56均顯示對人口腔表皮樣癌細(xì)胞KB有細(xì)胞毒性，ED50分別為375，286 mg·L-1[9]。

24調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝崗梅根水煎液915 g·kg-1對束縛負(fù)荷下高脂飲食性脂肪肝大鼠脂蛋白代謝相關(guān)酶和非酒精性脂肪肝大鼠脂肪酸代謝有一定的干預(yù)作用[3839]。崗梅根總皂苷混懸液440，220，110 mg·kg-1給藥大鼠高血脂模型，血清中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）、血清瘦素（LEP）、白細(xì)胞介素6（IL6）、C反應(yīng)蛋白（CPR）水平顯著降低（P<001），高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）和脂聯(lián)素（ADP）水平顯著升高（P<005或P<001），提示具有降血脂作用[40]。

25其他作用包括抗菌、鎮(zhèn)咳、鎮(zhèn)痛、改善免疫、抑制血小板聚集和抗氧化作用，其中抗菌、鎮(zhèn)咳和鎮(zhèn)痛與崗梅利咽消腫，散瘀止痛傳統(tǒng)功效相關(guān)，但目前報道較少。

在污染菌量（13～14）×106 CFU·mL-1時，崗梅根、莖水提物對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌有抑制作用，且莖的殺菌能力略優(yōu)于根[41]。崗梅的水、70%乙醇、60%丙酮提取物對4種試驗菌均顯示一定的抑制活性，其中對金黃色葡萄球菌作用最強(qiáng)，其次為真菌（白色念珠菌），對革蘭陰性菌（銅綠假單胞菌和大腸埃希菌）抑菌作用較弱[42]。

崗梅根、莖、葉、及根莖混合醇提取物灌胃給藥氨水致咳喘小鼠模型，8 g·kg-1同一劑量下比較5 min內(nèi)小鼠咳嗽次數(shù)發(fā)現(xiàn)，崗梅根、莖、根莖混合醇提物均有顯著作用（P<005） [32]。

崗梅根水煎液16 g·kg-1可顯著抑制醋酸扭體實驗中小鼠扭體次數(shù)及熱板實驗中給藥15 h后的耐受時間（P<005），顯示崗梅根的鎮(zhèn)痛效果[43]。

此外，崗梅根水提物能提高病毒感染小鼠外周血CD3+，CD4+，CD8+百分比，升高CD4/CD8比值，即改善病毒感染所導(dǎo)致的細(xì)胞免疫損傷，提高T淋巴細(xì)胞免疫功能[34]。化合物61對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集有抑制作用，濃度60，80 μmol·L-1時抑制率分別為38%和47%，陽性藥奧扎格雷鈉50 μmol·L-1的抑制率為51%[11]。不同崗梅提取物有一定的抗氧化能力，水提物、70%乙醇提物、60%丙酮提取物對羥基和DPPH自由基均有一定的清除、還原能力和抑制脂質(zhì)過氧化能力[42]。根莖比較的實驗表明，崗梅根、莖均有較強(qiáng)的還原能力及清除羥基自由基能力，且莖的還原能力顯著優(yōu)于根[33]。

3討論與展望

冬青科冬青屬植物在全世界約有400多種，我國有205種[44]，約有30種入藥用，以梅葉冬青I asprella、大葉冬青I latifolia Thunb、毛冬青Ipubescens Hooket Arn以及鐵冬青Irotunda Thunb最為常見，在當(dāng)?shù)赜糜谇鍩峤舛尽⑾?、?zhèn)咳、止痛等[45]。冬青屬化學(xué)成分皆以三萜為主，也有黃酮、木脂素等酚類、植物甾醇、蒽醌等，顯示抗病原微生物、抗炎、抗腫瘤、保護(hù)心腦血管及降糖、降脂等功效[46]。

崗梅是我國嶺南常用中藥之一，無論自制涼茶祛暑解渴，還是入藥治療肺熱上火、風(fēng)熱感冒，應(yīng)用較多，尤其作為感冒靈顆粒、外感顆粒等常用中成藥的主要原料，大大增加了藥材消耗量。崗梅傳統(tǒng)以根入藥，但由于根生長緩慢，近些年因需求量增加導(dǎo)致過度采挖，野生資源已不能滿足市場所需，因而廣東和湖南兩省將崗梅莖一并入藥，收載于《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》（2004）和《湖南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》（2009）。崗梅研究多圍繞根、莖、葉等不同部位的化學(xué)成分、藥理作用及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面，以期在符合傳統(tǒng)用藥的前提下，進(jìn)一步展拓資源，解決原料供應(yīng)這一瓶頸問題，三九藥業(yè)進(jìn)行的崗梅大規(guī)模人工栽培即為有效舉措之一。

三萜皂苷尤其熊果烷型和齊墩果烷型是崗梅主成分，也是發(fā)揮抗炎、抗病毒和抗腫瘤的活性成分。目前化學(xué)研究對象以根為主，針對葉的研究較少，而無崗梅莖化學(xué)研究報道。藥理研究以水和醇提物進(jìn)行體內(nèi)抗炎實驗較多，有關(guān)鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)咳方面較少。當(dāng)前的進(jìn)展大致揭示了崗梅抑制動物炎癥和流感病毒導(dǎo)致的炎癥作用，及相應(yīng)作用機(jī)制初步探索。崗梅單體化合物的藥理學(xué)研究少，除少數(shù)體外篩選外，沒有對特定單一成分的藥效評價及機(jī)制研究。其原因一方面是崗梅研究還不夠深入，另一方面更可能是崗梅中沒有壓倒性優(yōu)勢成分，而且，三萜苷元結(jié)構(gòu)相似度較高，而三萜皂苷極性大等性質(zhì)特點，增加了單體成分的分離難度，致使難以獲得足夠量進(jìn)行體內(nèi)實驗。

盡管崗梅的臨床應(yīng)用廣，市場用量大，至今卻不是《中國藥典》收載品種，也缺少相應(yīng)的質(zhì)量評價研究。有報道稱，通過紅外和指紋圖譜方法比較崗梅根和莖[33，47]，顯示兩者化學(xué)類別相似，且總皂苷含量也接近，彭敏樺等[48]以randialic acid B （21）為對照品建立了總皂苷含量測定方法。除此之外，幾乎無其他相關(guān)的質(zhì)量評價報道。

綜上，結(jié)合崗梅的傳統(tǒng)用藥，加強(qiáng)化學(xué)成分特別是莖的成分研究，同時開展體內(nèi)藥效評價，以闡明崗梅的藥效物質(zhì)，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步建立包括根、莖、葉等多個部位的質(zhì)量評價方法，將是當(dāng)前及今后一段時間的主要工作。

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[責(zé)任編輯丁廣治]