CRP cTnT TSLP miR-30c-5p水平與穩(wěn)定型心絞痛患者冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度關(guān)系

黃玉冰, 廖 旺

(海南省人民醫(yī)院/海南醫(yī)學(xué)院附屬海南醫(yī)院心血管內(nèi)科, 海南 海口 570311)

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(Coronary atherosclerotic heart disease,CHD)簡(jiǎn)稱冠心病，是因?yàn)閯?dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的心血管疾病[1]。穩(wěn)定型心絞痛(Stable angina pectoris,SAP)是最常見(jiàn)的CHD類型之一，系因勞累過(guò)度導(dǎo)致的心肌缺血，出現(xiàn)胸部及周圍部位不適感的一類疾病，可伴有一定程度的心功能障礙，好發(fā)于40歲以上的男性群體[2]。研究表明，SYNTAX評(píng)分是基于冠狀動(dòng)脈造影(Coronary arteriongraphy,CAG)結(jié)果評(píng)估冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度的一種手段，但其評(píng)估過(guò)程復(fù)雜且耗時(shí)較長(zhǎng)[3]。因此，尋找能快速準(zhǔn)確反映冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度的生物學(xué)指標(biāo)對(duì)改善SAP患者的預(yù)后尤為重要[4]。本研究探討了C反應(yīng)蛋白(CRP)、血清肌鈣蛋白T(cTnT)、胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)、miR-30c-5p水平與SAP患者冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料:回顧性分析2016年5月至2019年5月間醫(yī)院收治的經(jīng)CAG證實(shí)的90例SAP患者的臨床資料，根據(jù)SYNTAX評(píng)分分為輕度組(0～22分，41例)、中度組(23～32分，32例)、重度組(≥33分，17例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)CAG證實(shí)存在一支或以上冠狀動(dòng)脈狹窄≥50%；②年齡≤75歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重心、肝、肺、腎等臟器功能不全患者；②惡性腫瘤患者；③合并血液系統(tǒng)疾病患者；④過(guò)往卒中、急性心梗、心律失常、經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療、冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)史患者；⑤不穩(wěn)定性心絞痛患者；⑥合并瓣膜性心臟病、慢性肺組疾病患者；⑦CAG禁忌(對(duì)碘或造影劑過(guò)敏、電解質(zhì)紊亂等)患者；⑧合并感染性、炎癥性疾病患者。輕度組中，男30例、女11例，年齡為40～75歲，平均(57.63±9.61)歲。中度組中，男23例、女9例，年齡為42～74歲，平均(57.70±9.64)歲。重度組中，男12例、女5例，年齡為41～75歲，平均(57.80±9.70)歲。

1.2方法:收集患者的性別、年齡、病程、體質(zhì)指數(shù)(BMI)、吸煙史、糖尿病、高血壓、高脂血癥、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)等一般資料。CAG檢查：使用島津國(guó)際貿(mào)易(上海)有限公司生產(chǎn)的Bransist Safire型號(hào)心血管造影系統(tǒng)行CAG檢查。采用Judkins法分別經(jīng)橈動(dòng)脈或股動(dòng)脈入路完成左右冠狀動(dòng)脈造影，多體位投照，左冠狀動(dòng)脈6個(gè)體位，右冠狀動(dòng)脈3個(gè)體位。造影結(jié)果由兩名資深介入心臟外科醫(yī)師評(píng)估，采用目測(cè)直徑法分析冠狀動(dòng)脈狹窄程度。并將造影結(jié)果輸入至SYNTAX官網(wǎng)中的SYNTAX評(píng)分系統(tǒng)中，獲得SYNTAX分值，其中SYNTAX評(píng)分為0～22分則為冠狀動(dòng)脈輕度病變、23～32分則為冠狀動(dòng)脈中度病變、≥33分則為冠狀動(dòng)脈重度病變。CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平檢測(cè)：采集5ml患者入院后第2d清晨空腹?fàn)顟B(tài)肘靜脈血，室溫下靜置30min，3000r/min，離心處理15min，分離血清，取上層血清，-80℃冷存待檢。①CRP：采用固相夾心法法檢測(cè)樣本中的CRP水平，試劑盒由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，結(jié)果使用貝克曼庫(kù)爾特AU5800全自動(dòng)生化分析儀判讀；②cTnT：采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)樣本中的cTnT水平，試劑盒由德國(guó)羅氏公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，結(jié)果使用Cobas e 601電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)判讀；③TSLP：采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)樣本中的TSLP水平，試劑盒由武漢默沙克生物科技有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，結(jié)果使用貝克曼庫(kù)爾特AU5800全自動(dòng)生化分析儀判讀；④miR-30c-5p：采用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)法檢測(cè)樣本中的miR-30c-5p水平，提取樣本中總DNA后分析行測(cè)定RNA純度及濃度、逆轉(zhuǎn)錄、熒光定量PCR擴(kuò)增等操作，內(nèi)參基因?yàn)閏el-miR-39，并采用2-△△CT法測(cè)定miR-30c-5p水平。

1.3觀察指標(biāo):比較三組患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平及SYNTAX評(píng)分。

2 結(jié) 果

表1 三組患者的一般資料比較

2.1三組患者的一般資料比較:三組患者的性別、年齡、病程、BMI、吸煙史、糖尿病、高血壓、高脂血癥、LDL-C、HDL-C、TG、TC等一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，見(jiàn)表1。

2.2三組患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平及SYNTAX評(píng)分比較:三組患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平及SYNTAX評(píng)分比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)，兩兩對(duì)比LSD-t檢驗(yàn)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 三組患者的CRP cTnT TSLP miR-30c-5p水平及SYNTAX評(píng)分比較

2.3CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平與SAP患者冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重的程度關(guān)系:Pearson相關(guān)性分析顯示，CRP、cTnT、TSLP與SYNTAX評(píng)分均呈顯著正相關(guān)(P<0.01)，而miR-30c-5p與SYNTAX評(píng)分呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)，見(jiàn)表3。

表3 CRP cTnT TSLP miR-30c-5p水平與SAP患者冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重的程度關(guān)系

3 討 論

穩(wěn)定性心絞痛的病理基礎(chǔ)為動(dòng)脈粥樣硬化，而現(xiàn)有研究證實(shí)，局部、全身性炎癥反應(yīng)參與了動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生進(jìn)展的整個(gè)過(guò)程，損傷機(jī)體的心肌功能及內(nèi)皮功能[5]。因此，炎癥因子、心肌損傷標(biāo)志物及影響內(nèi)皮功能的標(biāo)志物能體現(xiàn)出冠狀動(dòng)脈病變的嚴(yán)重程度[6]。

CRP是一類常用的全身性炎癥反應(yīng)標(biāo)志物，其在炎癥反應(yīng)早期即可迅速增高，且在48～72h時(shí)達(dá)到峰值[7]。研究表明，CRP在心肌缺血時(shí)，CRP水平會(huì)顯著升高，且其升高程度和患者的預(yù)后密切相關(guān)，臨床中亦被用作評(píng)估硬化病灶穩(wěn)定性指標(biāo)之一[8]。研究顯示[9]，血清CRP水平和冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度有關(guān)，其在病變程度較高的患者中的水平要明顯高于程度較輕的患者，表明CRP和冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度顯著相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，重度組患者的CRP水平要明顯高于中度組及輕度組患者，且Pearson相關(guān)性分析顯示，CRP與SYNTAX評(píng)分呈顯著正相關(guān)，即CRP水平越高，SYNTAX評(píng)分越高，冠狀動(dòng)脈病變?cè)絿?yán)重。分析其機(jī)制可能為：炎癥反應(yīng)對(duì)血管內(nèi)皮功能造成影響，削弱機(jī)體抗凝、抗黏附功能。此外，炎性因子通過(guò)釋放降解基質(zhì)蛋白酶(如纖溶酶原激活酶、基質(zhì)金屬蛋白酶等)，降解細(xì)胞下基質(zhì)，從而削弱纖維帽，進(jìn)而導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈粥樣硬化程度加深[10]。

cTnT是臨床中常用的長(zhǎng)效非酶性心肌損傷標(biāo)志物。其在炎癥反應(yīng)中升高速度較CRP更早，敏感度亦較CRP更高，常被用作急性心梗、心肌缺血的診斷中。黃增旭等[11]報(bào)道稱，cTnT水平和冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)存在相關(guān)性?，F(xiàn)有報(bào)道關(guān)于cTnT水平和SYNTAX評(píng)分的相關(guān)性的報(bào)道較少，認(rèn)為cTnT水平升高可能與冠狀動(dòng)脈鈣化程度及斑塊穩(wěn)定性有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，重度組患者的cTnT水平要明顯高于中度組及輕度組患者，且Pearson相關(guān)性分析顯示，cTnT與SYNTAX評(píng)分呈顯著正相關(guān)，即cTnT水平越高，SYNTAX評(píng)分越高，冠狀動(dòng)脈病變?cè)絿?yán)重。究其原因?yàn)椋褐囟炔∽兓颊叩墓跔顒?dòng)脈斑塊穩(wěn)定性更低，斑塊局部破裂，引起血管堵塞，形成微小血栓，導(dǎo)致心肌缺血，損傷心肌細(xì)胞，故而使得cTnT水平異常升高。

TSLP是白細(xì)胞介素-7(IL-7)家族中的一員，其主要在機(jī)體的表皮角質(zhì)細(xì)胞、胸腺基質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞中表達(dá)，而在腫瘤細(xì)胞、滋養(yǎng)細(xì)胞、樹突細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、肥大細(xì)胞中少量表達(dá)。陳寶峰等[12]研究指出，TSLP為炎癥反應(yīng)的啟動(dòng)因素，其主要功能為激活樹突狀細(xì)胞。此外，TSLP能誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞中的CD80表達(dá)，使其分化為樹突狀細(xì)胞。而樹突狀細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥反應(yīng)中扮演至關(guān)重要的角色。本研究結(jié)果顯示，重度組患者的TSLP水平要明顯高于中度組及輕度組患者，且Pearson相關(guān)性分析顯示，TSLP與SYNTAX評(píng)分呈顯著正相關(guān)，即TSLP水平越高，SYNTAX評(píng)分越高，冠狀動(dòng)脈病變?cè)絿?yán)重。分析機(jī)制為：血管緊張素Ⅱ能經(jīng)NF-kB信號(hào)通路誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞中的TSLP表達(dá)，從而激活樹突狀細(xì)胞T細(xì)胞分化為Th17效應(yīng)細(xì)胞，形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊[13]。

miR-30c-5p是miRNAs的一種，而miRNAs被證實(shí)參與了動(dòng)脈粥樣硬化及內(nèi)皮功能的調(diào)節(jié)過(guò)程，miRNAs缺失將引起血管出血及破裂[14]。左紅等[15]研究表明，miR-30c-5p在動(dòng)脈粥樣硬化、腫瘤及急性冠脈綜合征患者中的表達(dá)顯著下降。本研究結(jié)果顯示，重度組患者的miR-30c-5p水平要明顯低于中度組及輕度組患者，且Pearson相關(guān)性分析顯示，miR-30c-5p與SYNTAX評(píng)分呈顯著負(fù)相關(guān)，即miR-30c-5p水平越低，SYNTAX評(píng)分越高，冠狀動(dòng)脈病變?cè)絿?yán)重。

綜上所述，CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平與穩(wěn)定型心絞痛患者冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度存在相關(guān)性，早期檢測(cè)以上生物學(xué)標(biāo)志物有助于判斷穩(wěn)定性心絞痛患者的冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度。