不同殺菌劑對火龍果炭疽病菌的室內(nèi)毒力測定

鄭 偉，王 彬*，張 榮，王 荔，張永忠

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 果樹科學(xué)研究所，貴州 貴陽 550006； 2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院，廣東 廣州 510462； 3.羅甸縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州 羅甸 550100)

火龍果因其明亮的紅色與綠色表皮覆蓋著鱗片似蛟龍的外鱗而得名，又稱仙蜜果、紅龍果、吉祥果和情人果等[1-3]，屬仙人掌科(Cactaceae)三角柱屬(Hylocereus)和西施仙人柱屬(Selenicereus)植物[4-5]。隨著火龍果生產(chǎn)的發(fā)展，近年來在集中連片種植區(qū)火龍果病蟲害發(fā)生、流行呈加劇趨勢，導(dǎo)致火龍果產(chǎn)量和品質(zhì)下降，進(jìn)而影響火龍果種植效益。目前國內(nèi)有關(guān)火龍果病害及某些病害的藥劑試驗(yàn)已有文獻(xiàn)報(bào)道?；瘕埞铣Ｒ姷牟『τ杏善侥毴滏邔?Bipolariscactivora)[6]、尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysporum)和單隔鐮刀菌(Fusarium.dimerum)[7]、雙間柱頂孢〔Scytalidiumdimidiatum(Penz.)Sutton and Dyko〕[8]、歐文氏菌屬(Erwiniasp.)[9]及腸桿菌屬(Enterobactersp.)[10]等病原菌侵染引起的腐爛病，由大豆炭疽病菌(Colletotrichumtruncatum)、膠孢炭疽菌(C.gloeosporioides)[11-12]及平頭刺盤孢(C.truncatum)[13]引起的炭疽病，由尖孢鐮刀菌(F.oxysporumSchlecht)、色二孢屬(Diplodiasp.)、殼二孢屬(Ascochytasp.)和莖點(diǎn)霉屬(Phomasp.)[9]引起的枯萎病，由交鏈孢菌(Alternariasp.)[14]、球二孢屬(Botryodiplodiasp.)[15]及粘隔孢屬(Septogloeumsp.)[16]引起的莖斑病，由新暗色柱節(jié)孢屬(Neoscytalidiumdimidiatum)[17]引起的潰瘍病等。據(jù)初步調(diào)查，火龍果炭疽病是貴州火龍果種植區(qū)主要病害之一，枝條和果實(shí)均可發(fā)病，嚴(yán)重影響植株的生長并威脅火龍果的生產(chǎn)效益。2014年前期研究中對貴州火龍果炭疽病作過鑒定，主要為膠孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)和平頭刺盤孢(Colletotrichumtruncatum)。但目前相關(guān)研究還不是很多且不夠全面，其發(fā)生發(fā)展及防控等方面還有待深入研究。為此，采用生長速率法，室內(nèi)測定不同殺菌劑對火龍果炭疽病菌的毒力作用，以期為火龍果炭疽病的防治提供安全有效的殺菌劑及用藥技術(shù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株 火龍果膠孢炭疽菌和辣椒炭疽菌，課題組從采自羅甸、關(guān)嶺及望謨火龍果基地的典型發(fā)病火龍果標(biāo)本上分離、純化后獲得。

1.1.2 供試藥劑 選擇市面上常見的10種殺菌劑(表1)。

表1 供試藥劑的基本信息

1.2 方法

1.2.1 含藥培養(yǎng)基的配制 將10種藥劑分別按試驗(yàn)要求配制成所需的系列濃度藥液，以1∶9的比例與測定用培養(yǎng)基混合均勻即得到系列濃度梯度的含藥培養(yǎng)基備用。

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 利用生長速率法對菌絲生長進(jìn)行室內(nèi)毒力測定，篩選高效低毒的化學(xué)藥劑。針對膠孢炭疽菌和辣椒炭疽菌菌株分別采用雙因素試驗(yàn)進(jìn)行測定，其中，因素1為藥劑，因素2為濃度，每個(gè)藥劑5個(gè)濃度，共設(shè)35個(gè)處理(表2)，以不加藥劑為對照(CK)，5次重復(fù)。將膠孢炭疽菌和辣椒炭疽菌菌株接種在PDA平板上于25℃培養(yǎng)3 d后，用內(nèi)徑為5 mm的打孔器把菌落打成菌餅，在無菌操作下移植到含有不同藥劑的PDA平板上，將帶菌絲的一面接觸培養(yǎng)基，在25℃恒溫培養(yǎng)5 d。

表2 不同藥劑對2種病原菌室內(nèi)毒力測定的處理濃度

1.2.3 指標(biāo)測定 用十字交叉法測量菌落直徑，取平均值，計(jì)算抑制率。將抑制率根據(jù)反應(yīng)率-機(jī)率值轉(zhuǎn)換表換算成抑制機(jī)率值，以設(shè)定藥劑濃度的對數(shù)(x)為橫坐標(biāo)，以抑制率(y)為縱坐標(biāo)，作回歸直線，擬合各藥劑分別對火龍果莖枯病病原菌的毒力回歸方程，計(jì)算抑制中濃度(EC50)及相關(guān)系數(shù)(r)。

抑制率=

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用農(nóng)藥室內(nèi)生物測定數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(Pesticidea Laboratory Boiactvity Testa Data Syatem)處理數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 7種殺菌劑對火龍果膠孢炭疽菌的毒力

由表3看出，7種藥劑各濃度對膠孢炭疽菌均有不同程度的抑制作用，且隨著濃度升高抑制率呈增加趨勢。其中，克菌丹的抑制率為15.38%～71.74%，代森錳鋅為10.15%～100.00%，多菌靈為10.15%～96.71%，戊唑·福美雙為13.22%～88.65%，丙森鋅為30.36%～87.14%，咪鮮胺為27.96%～79.97%，氟菌·肟菌酯為33.67%～96.23%。由表4看出，7種殺菌劑使用濃度與其對火龍果膠孢炭疽菌的抑制率間均存在良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.933 5～0.987 3，也說明隨著藥劑濃度升高抑制率呈增加趨勢；7種殺菌劑對火龍果膠孢炭疽菌的毒力大小依次為戊唑·福美雙>多菌靈>咪鮮胺>氟菌·肟菌酯>丙森鋅>代森錳鋅>克菌丹，其中，以戊唑·福美雙的藥效最好，EC50為22.387 6 μg/mL，其次是多菌靈、咪鮮胺和氟菌·肟菌酯，EC50分別為33.183 6 μg/mL、36.112 7 μg/mL和37.870 9 μg/mL，再次是丙森鋅、代森錳鋅，EC50分別為53.058 1 μg/mL和69.196 6 μg/mL，克菌丹的藥效最差，EC50為151.246 4 μg/mL。

表3 不同藥劑對膠孢炭疽菌菌絲生長的抑制效果

Table 3 The Inhibition effect of different fungicides on pathogen mycelium ofC.gloeosporioides

藥劑名稱Agent name濃度/(μg/mL)Concentration菌落直徑/mmColony diameter抑制率/%Inhibition ratio克菌丹834.7222.3371.74 Captan278.2428.2064.1192.7441.6746.6330.9260.6721.8910.3165.6715.38代森錳鋅800.804.00100.00 Mancozeb266.9317.3381.1888.9832.2560.1329.6659.0022.389.8967.6710.15多菌靈500.506.3396.71 Carbendazim166.8313.6786.3555.6119.6777.8918.5355.3327.566.1867.6710.15戊唑·福美雙150.089.3388.65 Oftebuconzole · thiram50.0335.3354.8415.5843.3344.435.5656.5027.311.8567.3313.22丙森鋅875.0011.3387.14 Propineb291.6718.6773.8097.2226.3360.1332.4134.3345.8410.8043.0030.36咪鮮胺700.7016.0079.97 Prochloraz233.5724.0069.5777.8628.0064.3725.9537.3352.248.6456.0027.96氟菌·肟菌酯857.726.6796.23 Fluopyram·otrifloxystrobin285.9112.5088.0095.3031.6760.9531.7643.2544.6110.5951.0033.67

表4 不同藥劑對膠孢炭疽菌的室內(nèi)防治效果

2.2 7種殺菌劑對火龍果辣椒炭疽菌的毒力

由表5看出，7種藥劑各濃度對辣椒炭疽菌均有不同程度的抑制作用，且隨著濃度升高抑制率呈增加趨勢。其中，百菌清的抑制率為17.54%～44.74%，克菌丹的抑制率為7.60%～88.30%，代森錳鋅為11.56%～100.00%，戊唑·福美雙為15.76%～86.05%，波爾·錳鋅8.68%～78.23%，甲基硫菌靈62.04%～74.67%、氟菌·肟菌酯38.26%～53.02%。由表6看出，7種藥劑使用濃度與對辣椒炭疽菌的抑制率間均存在線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.957 1～0.989 1，也說明隨著藥劑濃度升高抑制率呈增加趨勢；7種殺菌劑對火龍果辣椒炭疽菌的毒力大小依次為甲基硫菌靈>戊唑·福美雙>克菌丹>代森錳鋅>波爾·錳鋅>氟菌·肟菌酯>百菌清，其中，甲基硫菌靈的藥效最好，EC50為0.465 5 μg/mL，其次是戊唑·福美雙，EC50為15.396 5 μg/mL，再次是克菌丹、代森錳鋅和波爾·錳鋅，EC50分別為142.290 5 μg/mL、206.460 4 μg/mL和586.683 3 μg/mL，氟菌·肟菌酯和百菌清的藥效最差，EC50分別為1 046.098 9 μg/mL和2 938.796 1 μg/mL。

表5 不同藥劑對辣椒炭疽菌菌絲生長的抑制效果

Table 5 Inhibitory effects of seven fungicides on the mycelial growth ofC.capsici

藥劑名稱Agent name濃度/(μg/mL)Concentration菌落直徑/mmColony diameter抑制率/%Inhibition ratio百菌清1 252.0937.5044.74 Chlorothalonil417.3642.5035.96139.1245.3331.0046.3747.2527.6315.4653.0017.54克菌丹834.7212.6788.30 Captan278.2420.0075.4492.7438.6742.6830.9248.5025.4410.3158.677.60代森錳鋅1 000.000.50100.00 Mancozeb333.3333.1054.68111.1152.6723.1137.0454.3320.4412.3459.8311.56戊唑·福美雙150.0811.6786.05 Oftebuconzole · thiram50.0320.0070.9115.5833.0047.275.5637.0040.001.8550.3315.76波爾·錳鋅2 500.0018.5078.23 Boer·mancozeb833.3335.2551.21277.7844.6736.5692.5961.339.1530.8473.008.68甲基硫菌靈563.2024.6774.67 Thiophanate methyl187.7326.3371.7662.5830.0066.6720.8630.6765.746.9533.3362.04氟菌·肟菌酯857.7241.0053.02 Fluopyram·otrifloxystrobin285.9142.6750.7895.3042.3351.2331.7650.0040.9410.5952.0038.26

表6 不同藥劑對辣椒炭疽菌的室內(nèi)防治效果

3 結(jié)論與討論

研究結(jié)果表明，不同藥劑各濃度對火龍果炭疽病菌菌絲均有不同程度的抑制作用，其抑制率隨濃度的增加而增加，同時(shí)不同藥劑抑制率也存在明顯差異。戊唑·福美雙對膠孢炭疽菌的藥效最好，EC50為22.387 6 μg/mL；其次是多菌靈、咪鮮胺和氟菌·肟菌酯，EC50分別為33.183 6 μg/mL、36.112 7 μg/mL和37.870 9 μg/mL；其余藥劑的藥效相對較差。甲基硫菌靈對辣椒炭疽菌的藥效最好，EC50為0.465 5 μg/mL；其次是戊唑·福美雙，EC50為15.396 5 μg/mL；其余藥劑藥效相對較差。但是在大田生產(chǎn)中，由于病原物、寄主和環(huán)境之間存在復(fù)雜的關(guān)系，施藥量較大。因此，對篩選出的藥劑直接應(yīng)用于大田防治，對相應(yīng)病害是否有明顯的防治效果，尚需進(jìn)一步深入研究。