2014~2017年承德市女性HPV亞型感染情況 及分布特點

秦燕 王杏茶 方淑琴 郝云濤

摘要：目的? 了解承德市女性HPV亞型感染情況及在各年齡段的分布特點，為預(yù)防HPV感染和宮頸癌防治提供參考。方法? 選取2014～2017年就診于承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院的16338例門診及住院患者，采取醫(yī)用核酸分子雜交系統(tǒng)流式熒光雜交法進(jìn)行27種HPV基因亞型檢測。結(jié)果? 16338例樣本中，陽性4392例，陽性率26.89%，27種基因亞型全部被檢出，其中高危型2325例，低危型648例，混合感染型1419例。高危型HPV感染率最高的為HPV16型，其次為HPV58、52、18、53型;低危型HPV感染率最高的為HPV61型，其次為HPV6、43、81、42型，總檢出率最高的為HPV16型，其次為HPV58、52、61、18型。各年齡段HPV感染分布呈雙峰型，≤25歲及56～65歲HPV感染率出現(xiàn)高峰。結(jié)論? HPV感染存在地域差異，了解承德市女性HPV亞型感染情況及各年齡段的分布特點，加強(qiáng)對承德市各年齡段女性多種型別HPV的監(jiān)測及篩查，可為承德市女性宮頸癌的防治提供流行病學(xué)數(shù)據(jù)，指導(dǎo)臨床治療。

關(guān)鍵詞：人乳頭瘤病毒;宮頸癌;基因型;亞型分布

中圖分類號：R445.1? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.08.047

文章編號：1006-1959（2020）08-0144-03

Abstract：Objective? To understand the HPV subtype infection of women in Chengde City and their distribution characteristics at various ages，so as to provide a reference for the prevention of HPV infection and cervical cancer prevention.Methods? A total of 16338 outpatients and in-patients who were admitted to the Affiliated Hospital of Chengde Medical College from 2014 to 2017 were selected，and 27 types of HPV genotypes were detected by flow fluorophore hybridization using medical nucleic acid molecular hybridization system.Results? Among the 16338 samples，4392 were positive，with a positive rate of 26.89%.All 27 gene subtypes were detected，including 2325 high-risk types，648 low-risk types，and 1419 mixed infection types.High-risk HPV infection rate is the highest type HPV16，followed by HPV58，52，18，53;low-risk HPV infection rate is the highest type HPV61，followed by HPV6，43，81，42 type，the highest total detection rate type is HPV16，followed by HPV58，52，61，18 type.The distribution of HPV infection in each age group is bimodal，with peaks in HPV infection rates of≤25 years old and 56-65 years old.Conclusion? There are regional differences in HPV infection，understand the HPV subtype infection status and the distribution characteristics of various age groups of women in Chengde City，strengthen the monitoring and screening of multiple types of HPV of women of all age groups in Chengde City，with a view to the cervical cancer of women in Chengde City Prevention and treatment provides epidemiological data to guide clinical treatment.

Key words：Human papillomavirus;Cervical cancer;Gnotype;Subtype distribution

子宮頸癌是威脅中國女性健康的第二大惡性腫瘤，目前，國內(nèi)宮頸癌患病率逐年升高、患病人群逐漸趨于年輕化，因此，盡早準(zhǔn)確鑒別宮頸癌前病變及宮頸癌對降低患者病死率有重要意義。高危型人乳頭瘤病毒（HR HPV）持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件。90%以上的宮頸癌中均可檢測到HPV的存在。根據(jù)現(xiàn)有的數(shù)據(jù)及材料分析：不同國家或地區(qū)HPV的感染亞型分布存在差異性。因此，研究HPV感染在特定地區(qū)的分布，對我國HPV疫苗的研發(fā)以及應(yīng)用具有重要的指導(dǎo)意義。本研究通過對2014～2017年就診于承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院的16338例門診及住院患者進(jìn)行27種HPV基因型分析檢測，以期為宮頸癌的篩查及其防治提供可靠的臨床依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2014年8月～2017年2月承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院門診就診及住院女性患者16338例進(jìn)行HPV篩查，年齡17～82歲，中位年齡41.50歲，有性生活史，初次進(jìn)行HPV篩查。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑? 使用上海透景生命科技股份有限公司提供的HPV核酸擴(kuò)增分型檢測系統(tǒng)，包括核酸提取試劑盒、人乳頭瘤病毒核酸分型檢測試劑盒（流式熒光雜交法）、基因擴(kuò)增儀及多功能流式點陣儀。

1.2.2標(biāo)本采集? 采集的標(biāo)本類型為人宮頸脫落細(xì)胞，于月經(jīng)來潮后完成采樣工作，采樣前48 h內(nèi)禁止性生活，不做陰道沖洗，不用避孕藥膏等陰道內(nèi)用藥物。取樣前，患者仰臥于檢查床上，采用陰道窺器暴露宮頸，擦拭宮頸分泌物，然后使用專用的HPV一次性宮頸采樣器置于宮頸口，旋轉(zhuǎn)10圈，取出采樣刷，置于盛有細(xì)胞保存液的洗脫瓶中，蓋上瓶蓋，直立置于4℃環(huán)境下保存，2周內(nèi)檢測。

1.2.3檢測方法? 采用上海透景生命科技股份有限公司的核酸提取試劑，其原理采用通用引物多重PCR擴(kuò)增，流式熒光雜交分型檢測的方法，同時檢測27種HPV DNA，包括高危型17種：HPV16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、68、82型;低危型10種：HPV6、11、40、42、43、44、55、61、81、83型）。樣本離心后棄上清液，加入核酸提取試劑后孵育，離心后取上清，作為PCR擴(kuò)增反應(yīng)的樣品核酸模板進(jìn)行擴(kuò)增。PCR反應(yīng)條件：95 ℃ 5 min，95 ℃ 30 s、58 ℃30 s、72 ℃ 30 s，共5個循環(huán)退熱，然后進(jìn)行雜交向每個雜交孔中加入22 μl微球雜交液和3 μl PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，在恒溫95 ℃孵育15 min 讀數(shù)。每批同時擴(kuò)增HPV陽性對照和陰性對照各一份。當(dāng)陽性對照Globin信號大于150且HPV型別特異性探針信號大于150時，則判斷該探針對應(yīng)的HPV型別為陽性。

1.3觀察指標(biāo)? 觀察承德市女性HPV亞型感染情況及在各年齡段的分布特點。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析? 采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料采用（%）表示，組間比較行？字2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 HPV感染情況? 16338例樣本中陽性4392例，陽性率為26.89%，27種基因亞型全部被檢出，高危型HPV感染率最高的為HPV16型，其次為HPV58、52、18、53型;低危型HPV感染率最高的為HPV61型，其次為HPV6、43、81、42型，總檢出率最高的為HPV16型，其次為HPV58、52、61、18型。見表1。

2.2 HPV單一感染和混合感染情況? HPV感染標(biāo)本中，單一感染2973例，混合感染1419例。在混合感染的標(biāo)本中，以高危亞型混合感染最為常見，共986例，占混合感染的69.46%，見表2。

2.3 HPV感染年齡分布? 各年齡段HPV感染分布呈雙峰型，≤25歲及56～65歲HPV感染陽性率出現(xiàn)高峰，本資料顯示≤20歲患者HPV陽性率最高達(dá)48.00%，見表3。

3討論

HPV是一種小DNA病毒，屬乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒A屬，人體感染HPV后引起皮膚、黏膜的鱗狀上皮細(xì)胞增殖而出現(xiàn)多種臨床癥狀。HPV病毒的傳播途徑廣泛，主要以密切接觸方式傳染，如性接觸、母嬰垂直傳播、醫(yī)源性感染等。目前發(fā)現(xiàn)200多種亞型，各亞型微小的基因結(jié)構(gòu)差異決定了不同亞型可能引起的病變部位和性質(zhì)不同。根據(jù)感染病毒的危險性分為低危型和高危型。臨床宮頸癌患者中，95%以上的患者感染高危型HPV病毒，宮頸疾病患者中感染HPV的概率更高。目前發(fā)現(xiàn)40多種亞型下生殖道易感，其中13～15種與子宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變和宮頸癌的發(fā)病密切相關(guān)。高達(dá)99%的宮頸癌組織及接近90%的子宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變患者中發(fā)現(xiàn)有高危型HPV的存在，其中與HPV16和18型有關(guān)者占到70%[1]。流行病學(xué)資料表明[2]，歐洲地區(qū)的型別分布以HPV16、31、18為主，亞洲地區(qū)以HPV16、18、33為主，南美地區(qū)以HPV16、58、18為主。表明不同地區(qū)HPV感染亞型的分布存在差異，因此明確我國不同地區(qū)HPV感染的基因型及年齡分布特點，研制適合不同地區(qū)的HPV疫苗，對宮頸癌的早期預(yù)防將起到至關(guān)重要的意義。

本研究對承德市婦女16338例婦女進(jìn)行27種HPV亞型監(jiān)測，結(jié)果顯示陽性病例4392例，陽性率為26.89%，低于石家莊[3]37.4% 、及天津地區(qū)[4]的31.6%。接近河南地區(qū)[5]23.98%和大連地區(qū)[6]（23.19%）;高于邯鄲[7]15.95%、上海市奉賢區(qū)[8]16.31%;承德市HPV感染率較高的高危型是：16、58、52、18、53與石家莊[3]16、58、52、53、天津地區(qū)[4]16、58、56及邯鄲地區(qū)[7]16、58、52的檢測結(jié)果基本一致。不同于江蘇[8]33、59、56、51及西安[9]16、18、31、33的檢測結(jié)果。表明HPV亞型感染存在地域差異，承德市、石家莊、邯鄲均屬于河北省區(qū)域，生活環(huán)境相似。監(jiān)測結(jié)果顯示：承德市HPV感染標(biāo)本中，單一感染2973例，混合感染1419例。在混合感染的標(biāo)本中，以高危亞型混合感染最為常見，共986例，占混合感染的69.46%。高危型HPV病毒長期持續(xù)感染，所以對高危型HPV感染的密切監(jiān)測能有效預(yù)測宮頸病變的發(fā)生。HPV多重感染與宮頸病變密切相關(guān)[10]，故重視對多重HPV感染的干預(yù)，對預(yù)防宮頸癌意義重大。

承德市各年齡段HPV感染分布結(jié)果顯示：各年齡段HPV感染分布呈雙峰型，≤25歲及56～65歲年齡段HPV感染陽性率出現(xiàn)高峰，與邯鄲地區(qū)[7]HPV感染的高峰年齡為15～24歲及55～64歲基本一致。本研究結(jié)果第一個高峰在≤25歲，可能與該年齡段女性過早性行為或性生活頻繁相關(guān)，另一個峰值在56～65歲，該年齡女性進(jìn)入絕經(jīng)期，機(jī)體免疫力相對降低，對HPV病毒易感，且對其感染后清除能力下降有關(guān)。HPV感染與性生活過早、性行為活躍及機(jī)體免疫功能低下有關(guān)。

宮頸癌與HPV感染密切相關(guān)，控制HPV感染就能明顯降低宮頸癌的發(fā)病率。HPV疫苗的問世及其廣泛使用，將會更加全面、有效的預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。早期接種疫苗顯得尤為重要，13～15歲的女孩為HPV疫苗的重點接種對象，目前我國二價HPV16、18、四價HPV6、11、16、18、九價疫苗HPV6、11、16、18、31、33、45、52、58均已上市，從疫苗覆蓋的HPV型別分析2價及4價疫苗覆蓋的型別較少，9價疫苗雖覆蓋本地區(qū)高發(fā)的HPV型別，但尚有其余感染型別未覆蓋，不同地區(qū)感染HPV的型別存在差異，不同年齡段HPV感染情況也不相同，因此加強(qiáng)對本地區(qū)不同年齡段HPV的全面篩查，研發(fā)適合不同地區(qū)情況的疫苗對于降低宮頸癌的發(fā)病率至關(guān)重要。

綜上所述，HPV感染存在地域差異，了解承德市女性HPV亞型感染情況及各年齡段的分布特點，加強(qiáng)對承德市各年齡段女性多種型別HPV的監(jiān)測及篩查，以期為承德市女性宮頸癌的防治提供流行病學(xué)數(shù)據(jù)，指導(dǎo)臨床治療。

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收稿日期：2020-01-03;修回日期：2020-01-17

編輯/李國苗