• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    鎳對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲的毒性效應(yīng)

    2020-03-31 13:26:21石雅峰龍辰趙樅李若群閆春財(cái)劉文彬
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020年4期
    關(guān)鍵詞:抗氧化酶

    石雅峰 龍辰 趙樅 李若群 閆春財(cái) 劉文彬

    摘要??[目的]以紅裸須搖蚊(Propsilocerus akamusi)幼蟲為暴露對(duì)象,研究重金屬鎳對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲的毒性及其對(duì)抗氧化酶系統(tǒng)的影響。[方法]采用急性毒性試驗(yàn)方法,計(jì)算半數(shù)致死濃度(LC50)。采用考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)含量,采用可見光法測(cè)定CAT活性,采用WST-1法測(cè)定SOD活性,采用比色法測(cè)定POD活性。[結(jié)果]重金屬鎳對(duì)紅裸須搖蚊4齡幼蟲24、48、72、96 h LC50分別36.58、 12.36、2.21和0.66 mmol/L。鎳脅迫紅裸須搖蚊24 h后,各濃度組SOD和CAT活性均沒有顯著變化。48 h和72 h后,各濃度組與對(duì)照組存在顯著差異;96 h后,SOD活性僅在高濃度時(shí)表現(xiàn)為顯著增強(qiáng)的效應(yīng),各濃度組CAT活性表現(xiàn)為增強(qiáng)效應(yīng)。

    在24 h和48 h后,POD活性均沒有顯著變化,72 h后各濃度組POD活性呈現(xiàn)增強(qiáng)的趨勢(shì),96 h后POD 活性逐步下降。[結(jié)論]CAT和SOD活性在急性暴露期受到顯著誘導(dǎo),表現(xiàn)出相似的變化規(guī)律。POD活性表現(xiàn)為先下降后上升的趨勢(shì)。

    關(guān)鍵詞??紅裸須搖蚊;重金屬鎳;急性毒性試驗(yàn);抗氧化酶

    中圖分類號(hào)??X??174文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼??A

    文章編號(hào)??0517-6611(2020)04-0084-04

    doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2020.04.025

    開放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識(shí)碼(OSID):

    Toxic Effects of Nickel Exposure on Propsilocerus akamusi Larva

    SHI Ya-feng,LONG Chen,ZHAO Cong et al??(College of Life Sciences,Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance,Tianjin Normal University,Tianjin 300387)

    Abstract??[Objective] To investigate the toxicity of heavy metal Ni to the larvae of Propsilocerus akamusi and its influences on the antioxidant enzymes system with P.akamusi as exposure object.[Method] Using acute toxicicity test method,the medium lethal concentration (LC50) was calculated by using SPSS software.The protein content was determined by Coomassie Brilliant Blue G-250 method,CAT activity was determined by visible light method,SOD activity was determined by WST-1 method,and POD activity was determined by colorimetry.[Result]LC50 of heavy metal nickel to 4-instar larva of P.akamusi for 24,48,72 and 96 h were 36.58,12.36,2.21,and 0.66 mmol/L,respectively.There was no significant change in SOD and CAT activities after Nickel exposure to P.akamusi larvae 24 h. After 48 and 72 h, there were significant differences between each concentration group and the control group.After 96 h,SOD activity was only significantly enhanced at high concentrations,while CAT activity was enhanced in each concentration group. POD activity showed no significant change after 24 h and 48 h,and POD activity ?in each concentration group ?showed an enhanced trend after 72 h and POD activity gradually decreased after 96 h.[Conclusion]The activities of CAT and SOD were significantly induced during acute exposure,showing similar changes.POD activity presented an first decreasing and then increasing trend.

    Key words??Propsilocerus akamusi;Heavy metal Nickel;Acute toxicity test;Antioxidant enzymes

    在過去的幾十年里,有毒重金屬導(dǎo)致的水體污染引起了人們的廣泛關(guān)注[1-3],與有機(jī)污染物不同的是重金屬污染物無法被生物降解、具有很強(qiáng)的生物富集效應(yīng)且對(duì)土壤的污染不可逆,對(duì)環(huán)境有較大的破壞力[4]。鎳是一種在自然界中廣泛存在的重金屬,鎳和鎳化合物有較高的生產(chǎn)價(jià)值,比如鎳礦的開采和提純、電鍍和鎳鎘電池的生產(chǎn)等[5]。工業(yè)化進(jìn)程加重了水生生態(tài)系統(tǒng)的重金屬污染狀況。在常規(guī)水體環(huán)境中,Ni2+濃度為1~10 μg/L,但在一些嚴(yán)重污染的水體中鎳的排放量會(huì)增加50~100倍[6]。

    搖蚊幼蟲是典型的水生無脊椎動(dòng)物,主要生活于淡水水域的底棲環(huán)境中,不僅是經(jīng)濟(jì)魚類的餌料,而且是水環(huán)境生物監(jiān)測(cè)良好的指示生物[7]。紅裸須搖蚊幼蟲抗逆性強(qiáng)、易于獲取、價(jià)格低廉,具有廣闊的市場前景。目前對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲的毒理學(xué)研究主要集中在重金屬銅、鉻、汞等、農(nóng)藥及其他有機(jī)污染物方面,以單一或復(fù)合污染物暴露的方式開展急性和慢性毒性試驗(yàn),并對(duì)污染物脅迫下抗氧化酶系和解毒酶系的活性水平進(jìn)行了廣泛深入的研究[8-10]。此外,在基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)方面也取得了一定的進(jìn)展[11]。

    動(dòng)物體內(nèi)的抗氧化酶系,如超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)等是抗氧化應(yīng)激的第一道防線,可以在個(gè)體遭遇不良環(huán)境時(shí),清除體內(nèi)不斷產(chǎn)生的氧自由基,保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷,從而使個(gè)體耐受性增強(qiáng)。關(guān)于逆境脅迫下紅裸須搖蚊幼

    蟲體內(nèi)酶活性的變化,耿飛飛等[8]研究發(fā)現(xiàn)紅裸須搖蚊對(duì)Hg2+脅迫的敏感性較強(qiáng),Hg2+刺激后其體內(nèi)過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GST)都有顯著變化。鄭先云等[12]研究發(fā)現(xiàn)紅裸須搖蚊對(duì)Cd2+脅迫的敏感性較低,在Cd2+短時(shí)間作用下CAT活性沒有顯著變化。

    綜上可知,國內(nèi)外學(xué)者對(duì)重金屬Cd2+、Cd2+、Hg2+及多種有機(jī)物的毒性試驗(yàn)[13-14]已取得較大進(jìn)展,但Ni2+脅迫下紅裸須搖蚊的毒性效應(yīng)研究較少涉及。筆者探究紅裸須搖蚊體內(nèi)不同抗氧化酶對(duì)重金屬鎳的響應(yīng)水平,旨在為紅裸須搖蚊的生物監(jiān)測(cè)及Ni2+的排放標(biāo)準(zhǔn)制定提供理論依據(jù),為進(jìn)一步揭示Ni2+對(duì)水生無脊椎動(dòng)物的毒性作用機(jī)理提供數(shù)據(jù)支撐。

    1??材料與方法

    1.1??材料

    紅裸須搖蚊幼蟲購于天津花鳥魚蟲市場,以頭殼寬度鑒定齡期,選取活性較高、體長一致的4齡搖蚊幼蟲作為試驗(yàn)材料。幼蟲的平均體重為(0.017±0.004)g,平均體長為(0.95±0.11)cm。在開始試驗(yàn)前,幼蟲用曝氣除氯48 h的自來水(pH 8.2,溶解氧含量7.7~9.6 mg/L,總硬度7.1 mmol/L,水體溫度20 ℃)在自然光照下馴養(yǎng)7 d,試驗(yàn)期間每天換水1次,每天多次監(jiān)測(cè)水質(zhì)指標(biāo),發(fā)現(xiàn)異常時(shí)及時(shí)換水并將死亡的搖蚊幼蟲挑出,直至幼蟲的自然死亡率穩(wěn)定且小于1%時(shí)開展試驗(yàn),馴養(yǎng)期間水體持續(xù)曝氣,幼蟲采用饑餓處理。

    氯化鎳(NiCl2·6H2O),由天津市津科精細(xì)化工研究所提供。過氧化物酶(POD)測(cè)試盒、超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)定試劑盒、過氧化氫(CAT)試劑盒、Bradford蛋白質(zhì)定量試劑盒,購自南京建成生物工程研究所。

    1.2??方法

    1.2.1??重金屬的急性毒性試驗(yàn)。

    試驗(yàn)依據(jù)《化學(xué)品 沉積物-水系統(tǒng)中搖蚊毒性試驗(yàn)》國家標(biāo)準(zhǔn)[15]以及OECD[16]等相關(guān)規(guī)定進(jìn)行,嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范。采用靜水染毒法進(jìn)行毒性測(cè)定,在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,用蒸餾水等比例配制成鎳離子濃度分別為4.21、8.42、16.84、33.68、67.36 mmol/L的5個(gè)劑量組,在200 mL燒杯中進(jìn)行試驗(yàn),每個(gè)容器中放入50只搖蚊幼蟲并以蒸餾水作為空白對(duì)照。每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)重復(fù),試驗(yàn)期間不投喂餌料。在試驗(yàn)開始后24、48、72、96 h,觀察并記錄紅裸須搖蚊幼蟲的存活情況及活動(dòng)狀態(tài)。用玻璃棒以中等力度觸碰搖蚊幼蟲腹部5~6節(jié)處,若搖蚊幼蟲未出現(xiàn)蜷縮運(yùn)動(dòng)則視為死亡。

    1.2.2??酶活的測(cè)定。

    1.2.2.1??酶液的制備。在急性毒性試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,以96 h LC50為參照,設(shè)置0、0.10、0.20、0.40、0.80、1.60 mmo/L的鎳離子濃度梯度進(jìn)行急性暴露試驗(yàn)。在暴露24、48、72、96 h時(shí)取不同Ni2+濃度脅迫下存活的搖蚊幼蟲12只,各濃度組和對(duì)照組均進(jìn)行3次重復(fù),取出的搖蚊幼蟲用濾紙吸干體表水分,按照1∶9(m/V)的比例加入生理鹽水,在冰水浴條件下用研磨棒將搖蚊幼蟲研磨成10%的組織勻漿,2 500 r/mi下離心10 min后,取上清液進(jìn)行測(cè)定。

    1.2.2.2??酶活測(cè)定方法。嚴(yán)格按照SOD、POD、CAT試劑盒所標(biāo)示的方法測(cè)定酶活,采用考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)含量,采用可見光法測(cè)定CAT活性,采用WST-1法測(cè)定SOD活性,采用比色法測(cè)定POD活性。

    1.2.3??數(shù)據(jù)處理。

    采用SPSS軟件中的Probit模塊計(jì)算紅裸須搖蚊在不同濃度、不同時(shí)間處理下的半數(shù)致死濃度(LC50)、線性回歸方程、95%置信區(qū)間和相關(guān)系數(shù)。采用ANOVA方差分析進(jìn)行LSD多重比較,分析同一時(shí)間不同濃度以及不同時(shí)間相同濃度條件處理下各種酶活的變化。

    2??結(jié)果與分析

    2.1??紅裸須搖蚊幼蟲的中毒表現(xiàn)

    接觸重金屬鎳溶液初期,試驗(yàn)組搖蚊幼蟲活動(dòng)劇烈,出現(xiàn)蟲體間纏繞的現(xiàn)象;暴露24 h后,各濃度組幼蟲活動(dòng)情況與對(duì)照組均無顯著差異,但體色由紅色變?yōu)槠攸S色;暴露48~72 h時(shí),各濃度組搖蚊幼蟲活力顯著降低,處于靜止?fàn)顟B(tài),但觸碰活體搖蚊幼蟲腹部仍能觀察到蜷縮反應(yīng),對(duì)照組搖蚊自由游動(dòng)。暴露96 h后,觀察到死亡的紅裸須搖蚊幼蟲身體發(fā)黑變軟,漂浮于溶液表面。

    2.2??金屬鎳對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲的急性毒性

    由表1可知,重金屬鎳對(duì)紅裸須搖蚊4齡幼蟲24、48、72、96 h的LC50分別為36.58、 12.36、2.21和0.66 mmol/L。

    2.3??紅裸須搖蚊幼蟲抗氧化酶對(duì)Ni2+的脅迫響應(yīng)

    2.3.1??鎳脅迫對(duì)紅裸須幼蟲不同暴露時(shí)間蛋白質(zhì)含量的影響。

    由表2可知,24 h時(shí),低濃度組的鎳離子對(duì)蛋白質(zhì)含量無顯著影響,而高濃度組會(huì)使蛋白質(zhì)含量顯著降低,當(dāng)鎳離子達(dá)到最高濃度(1.6 mmol/L)時(shí)蛋白質(zhì)含量降至(35.35±0.18) g/L。48 h時(shí),與對(duì)照組相比,高濃度組的蛋白質(zhì)含量存在顯著變化,而其余組別與對(duì)照組無明顯差異。72 h時(shí),隨著Ni2+濃度的增大,Ni2+誘導(dǎo)蛋白質(zhì)含量升高的作用增強(qiáng)。96 h時(shí),與對(duì)照組相比,各濃度組蛋白質(zhì)含量均顯著升高。由此可見,高濃度的鎳短時(shí)間內(nèi)可對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲的靶標(biāo)酶產(chǎn)生抑制作用,但隨著作用時(shí)間的延長,體內(nèi)其他靶標(biāo)酶被誘導(dǎo)增強(qiáng),提高了蛋白質(zhì)濃度。

    2.3.2??鎳脅迫對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲體內(nèi)抗氧化酶活性的影響。

    紅裸須搖蚊幼蟲在不同濃度梯度的Ni2+脅迫24、48、72、96 h后體內(nèi)抗氧化酶活性的變化見表3。

    2.3.3??鎳脅迫對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲體內(nèi)SOD活性的影響。

    如圖1所示,鎳脅迫紅裸須搖蚊24 h時(shí),各濃度組的SOD活性與對(duì)照組相比沒有顯著變化。48 h后,各濃度組的SOD活性均顯著升高,當(dāng)Ni2+濃度為1.6 mmol/L時(shí)SOD活性達(dá)到最大值。72 h,在0.80 mmol/L的Ni2+脅迫下SOD受到的誘導(dǎo)程度最大,為(76.75±0.005) U/mg。96 h,SOD活性在高濃度時(shí)顯著下降,但SOD活性仍高于對(duì)照組。

    2.3.4??鎳脅迫對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲體內(nèi)CAT活性的影響。由圖2可知,24 h時(shí)各濃度組CAT活性無顯著變化;48 h時(shí),Ni2+濃度分別為0.2、0.4、0.8 mmol/L的試驗(yàn)組CAT活性顯著增強(qiáng)(P<0.01)。72和96 h,各濃度組CAT活性均極顯著升高(P<0.01)。72 h,各濃度組CAT活性均高于對(duì)照組;96 h,CAT活性相對(duì)于72 h時(shí)有所下降,但始終高于對(duì)照組。

    2.3.5

    鎳脅迫對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲體內(nèi)POD活性的影響。從圖3可以看出,24、48 h時(shí)各濃度組POD活性與對(duì)照組相比無明顯變化;72 h,POD活性明顯下降(P<0.01);96 h,POD活性顯著增強(qiáng)(P<0.01)。POD活性整體上呈現(xiàn)出前期無明顯變化、中后期先下降后上升的變化趨勢(shì)。

    3??討論

    通過急性毒性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),重金屬鎳對(duì)紅裸須搖蚊4齡幼蟲24、48 h的LC50分別為36.58和12.36 mmol/L,與閆賓萍等[17]研究鎳對(duì)羽搖蚊幼蟲的急性毒性結(jié)果相比,紅裸須搖蚊幼蟲比羽搖蚊幼蟲對(duì)鎳有更強(qiáng)的耐受性。Wentsel等[18]的研究結(jié)果為搖蚊具有較強(qiáng)耐受重金屬的能力提供了數(shù)據(jù)支撐。

    近年來,大量研究結(jié)果表明,抗氧化酶活性可作為環(huán)境監(jiān)測(cè)的生物標(biāo)志物。該試驗(yàn)通過鎳對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲進(jìn)行24、48、72、96 h的急性暴露試驗(yàn),監(jiān)測(cè)幼蟲體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)活性的變化,進(jìn)而揭示環(huán)境水體中重金屬鎳的生物響應(yīng)情況。該試驗(yàn)結(jié)果表明,短時(shí)間內(nèi)紅裸須搖蚊幼蟲對(duì)鎳的敏感程度低,隨著作用時(shí)間的延長,SOD活性呈現(xiàn)顯著增強(qiáng)的趨勢(shì),誘導(dǎo)產(chǎn)生的SOD用來消除鎳對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲的活性損傷,96 h后氧自由基減少,SOD活性又逐漸恢復(fù)到正常狀態(tài)。CAT活性的變化趨勢(shì)與SOD活性大致相同,但96 h后CAT活性仍被顯著誘導(dǎo),用來清除SOD作用氧自由基后產(chǎn)生的H2O2。72 h后,各濃度組POD活性與對(duì)照組相比顯著降低,但96 h POD活性又逐漸回升至顯著高于對(duì)照組的水平。

    綜上所述,重金屬鎳對(duì)紅裸須搖蚊體內(nèi)抗氧化酶活性有較大影響,CAT、SOD和POD活性均可作為監(jiān)測(cè)重金屬鎳對(duì)環(huán)境影響的指標(biāo),CAT活性與SOD活性具有相同的變化趨勢(shì),但CAT活性的變化響應(yīng)在SOD活性之后表現(xiàn)出協(xié)同作用。

    POD活性呈現(xiàn)出先下降后上升的變化趨勢(shì),有可能是CAT、SOD活性的顯著增強(qiáng)抑制了POD的活性,隨著作用時(shí)間的延長,SOD活性在逐步減弱的同時(shí),POD活性顯著上升。然而,此變化的分子機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。

    參考文獻(xiàn)

    [1]

    RAI P K.Heavy metal phytoremediation from aquatic ecosystems with special reference to macrophytes[J].Critical reviews in environmental science and technology,2009,39(9):697-753.

    [2] 張建江,賈繼民,馬永紅.中國重要水系的有毒重金屬污染狀況[J].職業(yè)與健康,2011,27(1):89-91.

    [3] 朱賢英.論有毒重金屬污染對(duì)人體健康的危害及飲水安全[J].湖北教育學(xué)院學(xué)報(bào),2006,23(2):72-74.

    [4] NAGAJYOTI P C,LEE K D,SREEKANTH T V M.Heavy metals,occurrence and toxicity for plants:A review[J].Environmental chemistry letters,2010,8(3):199-216.

    [5] 陳素秋.鎳的性質(zhì)及用途[J].重有色冶煉,1980(10):59-62.

    [6] EISLER R.Nickel hazards to fish,wildlife,and invertebrates:A synoptic review[R].Patuxent Wildlife Research Center,1998.

    [7] ARMITAGE P D,CRANSTON P S,PINDER L C V.The Chironomidae.The biology and ecology of non-biting midges[M].London:Chapman and Hall,1995.

    [8] 耿飛飛,于洪賢,劉曼紅,等.汞脅迫對(duì)紅裸須搖蚊幼蟲抗氧化酶活性的影響[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2018,46(4):97-100.

    [9] 葛士林,曹傳旺,王志英.3種農(nóng)藥對(duì)紅裸須搖蚊體內(nèi)蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)和AChE活性的影響[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2011,39(1):108-109,126.

    [10] 李浩.銅和鎘對(duì)羽搖蚊幼蟲(Chironomus plumosus)和紅裸須搖蚊幼蟲(Propsilocerus akamusi)的毒性效應(yīng)[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2012.

    [11] ZHENG X Y,XIE Z Y,WANG S,et al.Determination of the protein expression profiles of Propsilocerus akamusi(Tokunaga) Malpighian tubules response to cadmium stress by iTRAQ coupled LC-MS/MS[J].Journal of proteomics,2017,164:85-93.

    [12] 鄭先云,龍文敏,郭亞平,等.Cd2+對(duì)紅裸須搖蚊Propsilocerus akamusi的急性毒性研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),2008,27(1):86-91.

    [13] CAO C W,LI X P,GE S L,et al.Enzymatic activities as potential stress biomarkers of two substituted benzene compounds in Propsilocerus akamusi (Diptera:Chironomidae)[J].Africa journal of aquatic socience,2012,37(3):265-270.

    [14] 趙燕,湯保華,蔡磊明,等.殺菌劑戊唑醇對(duì)花翅搖蚊(Chironomus kiiensis)幼蟲的急性毒性和抗氧化酶系統(tǒng)的影響[J].農(nóng)藥,2012,51(6):445-448.

    [15] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局,中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).化學(xué)品 沉積物-水系統(tǒng)中搖蚊毒性試驗(yàn) 加標(biāo)于沉積物法:GB/T 27859—2011[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2012.

    [16] OECD.Guideline 235:Chirnomus sp.,Acute Immobilisation Test [S].Paris:OECD,2004

    [17] 閆賓萍,宋志慧.Ni2+、Hg2+和五氯酚對(duì)羽搖蚊(Chironomus plumosus)幼蟲的毒性和生物濃縮[J].青島科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2006,27(5):411-414.

    [18] WENTSEL R,MCINTOSH A,ATCHISON G.Evidence of resistance to metals in larvae of the midge Chironomus tentans in a metal contaminated lake[J].Bulletin of environmental contamination and toxicology,1978,20(4):451-455.

    猜你喜歡
    抗氧化酶
    牡荊苷對(duì)腦缺血再灌注損傷小鼠抗氧化酶的影響
    外源氯化鈣對(duì)大蒜幼苗鹽脅迫傷害的緩解作用
    [CX2]NaCl脅迫對(duì)萌發(fā)期甜高粱和春小麥生理生化特性的影響
    [CX2]NaCl脅迫對(duì)萌發(fā)期甜高粱和春小麥生理生化特性的影響
    低溫脅迫對(duì)不同豇豆品種抗寒性生理特性的影響
    遮陽網(wǎng)覆蓋對(duì)枇杷幼果抗寒性影響機(jī)理初探
    模擬酸雨和富營養(yǎng)化復(fù)合脅迫對(duì)水葫蘆抗氧化酶的影響
    重金屬鎘脅迫對(duì)油橄欖幼苗生長的影響
    不同養(yǎng)殖環(huán)境中的中華絨螯蟹組織抗氧化劑水平和抗氧化酶活力
    不同預(yù)處理對(duì)PEG脅迫下水稻幼苗抗氧化系統(tǒng)的影響
    中文字幕最新亚洲高清| 日韩电影二区| 欧美日韩av久久| 久久国内精品自在自线图片| 国产在视频线精品| 最近手机中文字幕大全| 日韩免费高清中文字幕av| 五月天丁香电影| 国产精品嫩草影院av在线观看| 97人妻天天添夜夜摸| 飞空精品影院首页| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 精品一区二区三卡| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 人体艺术视频欧美日本| 久久人妻熟女aⅴ| 久久人妻熟女aⅴ| 久久99精品国语久久久| 26uuu在线亚洲综合色| 成年女人毛片免费观看观看9 | 欧美日韩精品网址| 久久久久久久大尺度免费视频| tube8黄色片| 熟女av电影| 少妇的逼水好多| 亚洲人成77777在线视频| 午夜日本视频在线| 欧美日韩一级在线毛片| 男女国产视频网站| 一级毛片我不卡| 成年人午夜在线观看视频| 老司机影院成人| 少妇 在线观看| 国产深夜福利视频在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲国产日韩一区二区| 女性生殖器流出的白浆| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 一级,二级,三级黄色视频| 欧美日韩一级在线毛片| 日本wwww免费看| 成人国语在线视频| 国产片内射在线| xxxhd国产人妻xxx| 日韩免费高清中文字幕av| 水蜜桃什么品种好| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲国产精品国产精品| 男人添女人高潮全过程视频| 午夜免费观看性视频| 99re6热这里在线精品视频| 久久女婷五月综合色啪小说| 亚洲一码二码三码区别大吗| 街头女战士在线观看网站| 亚洲熟女精品中文字幕| 99re6热这里在线精品视频| 尾随美女入室| 亚洲人成77777在线视频| 美女大奶头黄色视频| 欧美日韩视频精品一区| av免费在线看不卡| 2018国产大陆天天弄谢| 中文字幕最新亚洲高清| 国产成人免费无遮挡视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲图色成人| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| 国产男女超爽视频在线观看| 国产免费福利视频在线观看| 婷婷色麻豆天堂久久| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲成人手机| 高清欧美精品videossex| 亚洲三区欧美一区| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 丝袜喷水一区| 日韩一区二区视频免费看| 欧美激情 高清一区二区三区| 久久久国产精品麻豆| 久久免费观看电影| 日本午夜av视频| 亚洲av福利一区| 午夜免费鲁丝| 国产精品嫩草影院av在线观看| 性色av一级| 99久久人妻综合| 国产午夜精品一二区理论片| 岛国毛片在线播放| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲综合色惰| av一本久久久久| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲四区av| 国产亚洲一区二区精品| 在线观看人妻少妇| 尾随美女入室| 中文字幕人妻丝袜制服| 91国产中文字幕| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产人伦9x9x在线观看 | 另类亚洲欧美激情| 色94色欧美一区二区| 1024视频免费在线观看| 视频区图区小说| 日韩av免费高清视频| 最近中文字幕高清免费大全6| 超碰成人久久| 黄色 视频免费看| 国产免费又黄又爽又色| 国产在线免费精品| 母亲3免费完整高清在线观看 | 丝袜美足系列| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲图色成人| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产一区二区三区av在线| 各种免费的搞黄视频| 午夜免费鲁丝| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产精品蜜桃在线观看| 午夜激情av网站| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 国产亚洲一区二区精品| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久婷婷青草| 欧美精品一区二区大全| 在线观看国产h片| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | av视频免费观看在线观看| 高清黄色对白视频在线免费看| 最近最新中文字幕免费大全7| 99久久综合免费| 美女视频免费永久观看网站| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 中文天堂在线官网| 成人漫画全彩无遮挡| 热re99久久精品国产66热6| 99九九在线精品视频| 三上悠亚av全集在线观看| 亚洲国产日韩一区二区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产又爽黄色视频| 18在线观看网站| 搡老乐熟女国产| 国产乱来视频区| 18禁国产床啪视频网站| 久久精品国产自在天天线| 黄色毛片三级朝国网站| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产熟女欧美一区二区| 99久久人妻综合| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 十分钟在线观看高清视频www| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 免费少妇av软件| 日韩人妻精品一区2区三区| 男女国产视频网站| 成年av动漫网址| 大陆偷拍与自拍| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产精品免费视频内射| 亚洲久久久国产精品| 男人操女人黄网站| videossex国产| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 色哟哟·www| 少妇人妻精品综合一区二区| 十八禁网站网址无遮挡| 亚洲av男天堂| 水蜜桃什么品种好| 午夜免费男女啪啪视频观看| 26uuu在线亚洲综合色| 免费观看无遮挡的男女| 免费少妇av软件| 日韩av在线免费看完整版不卡| 观看美女的网站| 久久久久久久国产电影| 男女免费视频国产| 校园人妻丝袜中文字幕| tube8黄色片| 交换朋友夫妻互换小说| 最近中文字幕高清免费大全6| 久久精品国产a三级三级三级| 精品国产乱码久久久久久男人| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 亚洲一区中文字幕在线| 久久久久精品人妻al黑| 日韩中文字幕视频在线看片| 妹子高潮喷水视频| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 晚上一个人看的免费电影| 久久精品人人爽人人爽视色| 午夜激情久久久久久久| 久久久久久人人人人人| 免费观看在线日韩| 9色porny在线观看| 五月天丁香电影| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 只有这里有精品99| 久久精品国产综合久久久| tube8黄色片| 最新的欧美精品一区二区| 黄片播放在线免费| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产黄色免费在线视频| 91精品国产国语对白视频| 国产乱人偷精品视频| 国产福利在线免费观看视频| 黄片播放在线免费| 国产色婷婷99| 最新中文字幕久久久久| a 毛片基地| 91精品三级在线观看| 极品人妻少妇av视频| av不卡在线播放| 少妇被粗大的猛进出69影院| 精品久久久久久电影网| 国产乱来视频区| 亚洲成色77777| 久久久国产一区二区| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 在线天堂中文资源库| 极品人妻少妇av视频| 丝袜脚勾引网站| 伦精品一区二区三区| 日本vs欧美在线观看视频| 黄色视频在线播放观看不卡| 精品酒店卫生间| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲精品国产色婷婷电影| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 在线看a的网站| 日本av手机在线免费观看| 男女午夜视频在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 丰满少妇做爰视频| 国产午夜精品一二区理论片| 99久久中文字幕三级久久日本| 少妇人妻精品综合一区二区| 最近中文字幕2019免费版| √禁漫天堂资源中文www| 国产一级毛片在线| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产综合精华液| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产 一区精品| 一本久久精品| 亚洲精品美女久久av网站| 成人国语在线视频| 久久久久久人人人人人| 18在线观看网站| 丰满少妇做爰视频| 国产在线免费精品| 丰满迷人的少妇在线观看| 新久久久久国产一级毛片| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲欧美一区二区三区久久| 人妻一区二区av| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 久久久久久久久久久免费av| 久久午夜综合久久蜜桃| 日韩电影二区| 少妇人妻久久综合中文| 性色av一级| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲成人手机| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 蜜桃国产av成人99| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 欧美精品av麻豆av| 免费少妇av软件| 看非洲黑人一级黄片| 国产成人aa在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产精品久久久av美女十八| 搡女人真爽免费视频火全软件| 一级a爱视频在线免费观看| 999久久久国产精品视频| 高清黄色对白视频在线免费看| 国精品久久久久久国模美| 久久久精品免费免费高清| 国产一区二区在线观看av| 超碰97精品在线观看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久精品国产综合久久久| 99国产精品免费福利视频| 午夜激情久久久久久久| 国产又爽黄色视频| 最近最新中文字幕免费大全7| 黄色 视频免费看| av网站免费在线观看视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 人妻一区二区av| 有码 亚洲区| 97在线人人人人妻| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 美女视频免费永久观看网站| 母亲3免费完整高清在线观看 | 99re6热这里在线精品视频| 啦啦啦在线观看免费高清www| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 麻豆av在线久日| 婷婷色综合www| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 丰满乱子伦码专区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 欧美日韩一级在线毛片| 国产乱来视频区| 美女大奶头黄色视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产精品.久久久| 丰满迷人的少妇在线观看| 久久婷婷青草| 国产亚洲欧美精品永久| 高清在线视频一区二区三区| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 欧美成人午夜精品| 精品人妻偷拍中文字幕| 中文字幕精品免费在线观看视频| 人体艺术视频欧美日本| av国产久精品久网站免费入址| 伦精品一区二区三区| 久久久精品94久久精品| 成年动漫av网址| 中国三级夫妇交换| 丝瓜视频免费看黄片| 婷婷色麻豆天堂久久| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产精品av久久久久免费| 中文字幕最新亚洲高清| 久久久欧美国产精品| 日韩三级伦理在线观看| 男女午夜视频在线观看| 性少妇av在线| 欧美成人午夜免费资源| 人人妻人人澡人人看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 美女大奶头黄色视频| 在现免费观看毛片| 午夜福利网站1000一区二区三区| 不卡av一区二区三区| 最近中文字幕2019免费版| 国产免费视频播放在线视频| 国产在线免费精品| 黄色毛片三级朝国网站| 大香蕉久久网| 免费观看无遮挡的男女| 国产在线免费精品| 国产免费视频播放在线视频| videosex国产| 午夜日韩欧美国产| 成人亚洲欧美一区二区av| 男男h啪啪无遮挡| 国产在线免费精品| 精品少妇内射三级| 大陆偷拍与自拍| 99九九在线精品视频| 国产男女超爽视频在线观看| 热re99久久国产66热| 免费大片黄手机在线观看| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲男人天堂网一区| 久久热在线av| 午夜福利,免费看| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产午夜精品一二区理论片| 久久久久人妻精品一区果冻| 人妻 亚洲 视频| 欧美中文综合在线视频| 考比视频在线观看| 免费av中文字幕在线| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 日本欧美视频一区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲国产av新网站| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 成年女人毛片免费观看观看9 | 欧美日韩av久久| 亚洲精品aⅴ在线观看| 热99国产精品久久久久久7| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 咕卡用的链子| 欧美日韩综合久久久久久| 久久韩国三级中文字幕| 九草在线视频观看| 高清不卡的av网站| 亚洲经典国产精华液单| 日韩欧美精品免费久久| 最近中文字幕2019免费版| videossex国产| 免费高清在线观看日韩| 中文字幕精品免费在线观看视频| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 99九九在线精品视频| 国产免费现黄频在线看| 精品少妇内射三级| 老司机影院毛片| 啦啦啦在线免费观看视频4| 久久av网站| 国产高清国产精品国产三级| 国产不卡av网站在线观看| 久久ye,这里只有精品| 免费看不卡的av| 欧美精品av麻豆av| 国产成人一区二区在线| 亚洲精品久久午夜乱码| 成人免费观看视频高清| 国产免费一区二区三区四区乱码| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产精品熟女久久久久浪| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 亚洲精品久久午夜乱码| 国产在线免费精品| 久久精品国产综合久久久| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 大陆偷拍与自拍| 国产精品久久久久成人av| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 99久久精品国产国产毛片| 免费观看av网站的网址| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 下体分泌物呈黄色| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久精品久久久久久久性| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 如何舔出高潮| 亚洲欧洲国产日韩| av在线老鸭窝| 夫妻午夜视频| 亚洲欧美成人精品一区二区| av在线播放精品| videosex国产| 久久国内精品自在自线图片| 三上悠亚av全集在线观看| 最黄视频免费看| 亚洲精品国产av蜜桃| 精品福利永久在线观看| 在线 av 中文字幕| a级毛片在线看网站| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 看免费成人av毛片| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲精品中文字幕在线视频| 久久久久精品久久久久真实原创| 丁香六月天网| 啦啦啦在线观看免费高清www| 少妇被粗大的猛进出69影院| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 大片免费播放器 马上看| 亚洲人成77777在线视频| 一本久久精品| 老鸭窝网址在线观看| 99热全是精品| 又大又黄又爽视频免费| 久久久国产欧美日韩av| 高清av免费在线| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲国产精品一区三区| 欧美激情极品国产一区二区三区| av电影中文网址| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲国产av新网站| 午夜免费观看性视频| 制服人妻中文乱码| 看免费成人av毛片| 又黄又粗又硬又大视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲精品在线美女| av片东京热男人的天堂| 国产淫语在线视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 女性生殖器流出的白浆| 女性被躁到高潮视频| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲精品国产av蜜桃| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产av一区二区精品久久| 天堂8中文在线网| 看十八女毛片水多多多| 亚洲国产色片| 久久精品亚洲av国产电影网| 九九爱精品视频在线观看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 国产av一区二区精品久久| 免费观看性生交大片5| 国产av精品麻豆| 欧美日韩av久久| 美女主播在线视频| 免费黄频网站在线观看国产| 国产高清国产精品国产三级| 久久精品人人爽人人爽视色| 9热在线视频观看99| 午夜av观看不卡| 国产在线一区二区三区精| 亚洲内射少妇av| 欧美+日韩+精品| 毛片一级片免费看久久久久| 成人毛片a级毛片在线播放| 韩国高清视频一区二区三区| 精品久久久久久电影网| 欧美变态另类bdsm刘玥| 中文字幕av电影在线播放| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 麻豆乱淫一区二区| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 国产色婷婷99| 日日爽夜夜爽网站| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 啦啦啦在线免费观看视频4| 日本-黄色视频高清免费观看| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产成人免费观看mmmm| 国产又色又爽无遮挡免| 在线观看免费高清a一片| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 丝袜在线中文字幕| av网站在线播放免费| 国产毛片在线视频| 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲精品自拍成人| 自线自在国产av| 色哟哟·www| 精品酒店卫生间| 下体分泌物呈黄色| 26uuu在线亚洲综合色| 久久狼人影院| av在线播放精品| 成人毛片60女人毛片免费| 黄色 视频免费看| 亚洲av福利一区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 超碰成人久久| 欧美精品一区二区免费开放| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 中国国产av一级| 丝袜美腿诱惑在线| 国产精品国产三级国产专区5o| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 少妇的逼水好多| 卡戴珊不雅视频在线播放| 男女下面插进去视频免费观看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 久久久久精品人妻al黑| 在线 av 中文字幕| 26uuu在线亚洲综合色| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 精品人妻熟女毛片av久久网站| 欧美国产精品va在线观看不卡| 日本色播在线视频| 国产成人精品一,二区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 寂寞人妻少妇视频99o| 欧美日韩亚洲高清精品| 黑人猛操日本美女一级片| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 妹子高潮喷水视频| 国产男女内射视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 日韩三级伦理在线观看| 大香蕉久久网| 欧美成人午夜精品| 亚洲国产欧美在线一区| www.av在线官网国产| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 美女国产视频在线观看| 亚洲男人天堂网一区| 国产片特级美女逼逼视频| 视频区图区小说| 亚洲,欧美精品.| 国产精品嫩草影院av在线观看| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产精品国产av在线观看| 2021少妇久久久久久久久久久| 69精品国产乱码久久久| 午夜免费观看性视频| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产av一区二区精品久久| 又黄又粗又硬又大视频| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲视频免费观看视频| 热99国产精品久久久久久7| 搡女人真爽免费视频火全软件| 午夜福利,免费看| 午夜激情av网站| 亚洲成国产人片在线观看| 久久鲁丝午夜福利片|