結(jié)核分枝桿菌的介紹

吳 林

成都市青白江區(qū)疾病預(yù)防控制中心 四川成都 610300

一、什么是結(jié)核分枝桿菌

結(jié)核分枝桿菌也可以叫做結(jié)核桿菌，是引起結(jié)核病的病原菌，對于患者全身的器官都會(huì)起到侵犯作用，其中很大一部分是引起肺結(jié)核。結(jié)核病目前仍然是一項(xiàng)較為重要的傳染病，根據(jù)專業(yè)報(bào)道可以知道，每年都有大量的結(jié)核病發(fā)生，是一種極易導(dǎo)致死亡的疾病。近年來我國人民生活水平提升，衛(wèi)生狀態(tài)有一定的改善，卡介苗也納入計(jì)劃免疫，因此結(jié)核病的發(fā)病率和死亡率也很大程度的降低。但是目前因?yàn)橐恍┨厥獾脑?，該疾病也有上升的趨勢?/p>

二、結(jié)核分枝桿菌導(dǎo)致的疾病

結(jié)核分枝桿菌可以通過呼吸道或是消化道傳播，或者是皮膚損傷而入侵,引起各種組織器官的結(jié)核病，其中，呼吸道是結(jié)核分枝桿菌主要的傳播途徑，約95%的結(jié)核感染者是經(jīng)呼吸道傳染，且可經(jīng)飛沫、飛沫核和塵埃等多種空氣傳播方式傳染。而腸道之中有很多正常的菌落群體寄居，結(jié)核分枝桿菌必須要通過競爭，才能夠在人體內(nèi)生存，并且和容易感染的細(xì)胞相粘附，因此肺結(jié)核相對而言較為多見。

1、肺部感染。因?yàn)楦腥炯?xì)菌的毒力，數(shù)量，以及機(jī)體的免疫力，都是有一定區(qū)別的。因此肺結(jié)核容易出現(xiàn)以下幾種情況。

第一原發(fā)感染大部分存在于兒童中，肺泡里有很多的吞噬細(xì)胞，一些少數(shù)的活性結(jié)核分枝桿菌在進(jìn)入肺泡之后會(huì)被吞噬細(xì)胞所吞噬，因?yàn)檫@類細(xì)菌有很多脂質(zhì)可以抵抗溶菌酶而繼續(xù)繁殖，讓吞噬細(xì)胞受到破壞，釋放出大量的細(xì)菌，在肺泡內(nèi)引起炎癥，也被稱作為原發(fā)灶。第一次感染的機(jī)體因?yàn)槿狈μ禺愋缘拿庖?，因此結(jié)核分支桿菌經(jīng)常會(huì)順著淋巴管一直到達(dá)肺門淋巴結(jié)，讓肺門淋巴結(jié)出現(xiàn)腫大的癥狀，也就叫做原發(fā)綜合征，這個(gè)時(shí)候一些少量的結(jié)核分枝桿菌進(jìn)入到血液中向全身擴(kuò)散，但不一定會(huì)出現(xiàn)明顯的癥狀。同時(shí)肺部的巨噬細(xì)胞將特異性抗原，轉(zhuǎn)移給周圍的淋巴細(xì)胞，感染三到六周，此時(shí)患者身體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生特異性的細(xì)胞免疫，同時(shí)也會(huì)出現(xiàn)超敏反應(yīng)。病灶中的結(jié)核分枝桿菌，刺激巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化成上皮樣細(xì)胞，通過融合分裂變成多核巨細(xì)胞的同時(shí)，也抑制了蛋白酶對于組織的溶解，讓病灶組織的溶解并不全面，產(chǎn)生干酪樣的壞死。周圍包著上皮樣細(xì)胞，外面也有淋巴細(xì)胞，巨噬細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞這些結(jié)合而成結(jié)核結(jié)節(jié)，這也就是結(jié)核典型的病理特征，在感染之后大概有5%的可能性會(huì)發(fā)展成為活動(dòng)性肺結(jié)核，一些免疫力及低下的患者，通過血液以及淋巴系統(tǒng)傳播到骨頭關(guān)節(jié)以及其他部位引起結(jié)核病。而90%以上的原發(fā)感染者，形成纖維化或是鈣質(zhì)化，不用治療自己就會(huì)痊愈，但是病灶內(nèi)仍然會(huì)有一定量結(jié)核分枝桿菌長期的潛伏，不但會(huì)刺激患者產(chǎn)生免疫，也有可能成為日后內(nèi)源性感染的主要原因。

第二原發(fā)后感染。病灶一般來說在肺部比較常見，并且有可能是外源性感染，或是本來就潛伏在病灶內(nèi)的內(nèi)源性感染，因?yàn)榛颊咭呀?jīng)有特異性細(xì)胞免疫，因此原發(fā)后感染的特點(diǎn)是病灶比較局限，一般不會(huì)讓鄰近的淋巴結(jié)出現(xiàn)問題，被纖維素包圍的干酪樣壞死灶可以出現(xiàn)鈣化而使患者痊愈，如果干酪樣結(jié)節(jié)破損，排入到鄰近的支氣管內(nèi)就很容易會(huì)形成空洞，并且釋放大量的結(jié)核分枝桿菌在痰里。因此肺結(jié)核的病人在痰中查出結(jié)核分支桿菌可以初步判定是肺結(jié)核。

2、肺外感染。一些患者結(jié)核分枝桿菌可能是因?yàn)檫M(jìn)入了血液循環(huán)，而造成的肺部內(nèi)外散播，比如說腦部、腎部的結(jié)核，骨結(jié)核，腰椎、胸椎結(jié)核等。病菌被咽入消化道，也可能會(huì)引起腸結(jié)核或是結(jié)核性腹膜炎等。還有一種結(jié)核分枝桿菌L型的產(chǎn)生，它是一種耐藥表現(xiàn)。由于既往不正規(guī)抗結(jié)核治療，抗結(jié)核藥物在體內(nèi)誘導(dǎo)結(jié)核分枝桿菌形成L型，進(jìn)而對機(jī)體產(chǎn)生耐藥。有研究認(rèn)為，在臨床常用治療濃度下的利福平，異煙肼等對結(jié)核分枝桿菌有抑制殺滅作用，但同時(shí)也能誘導(dǎo)其形成L型，從而沒有抑制殺滅作用。

三、結(jié)核分枝桿菌的實(shí)驗(yàn)室檢查

這里我們主要談一下結(jié)核病的實(shí)驗(yàn)室診斷?；顒?dòng)性結(jié)核是通過呼吸道或其他部位標(biāo)本中的結(jié)核分枝桿菌來診斷的，盡管一些新的診斷方法（如分子生物學(xué)方法）得到了一定的發(fā)展，但抗酸菌涂片顯微鏡檢查和羅氏培養(yǎng)基的分離培養(yǎng)依然是診斷活動(dòng)性結(jié)核的“金標(biāo)準(zhǔn)”，特別是不發(fā)達(dá)國家和地區(qū)是唯一證實(shí)臨床疑似病例的可行性方法。

1、萋爾-尼爾遜染色，也就是我們常說的抗酸染色，它是一種特殊的染色方法，主要用于抗酸菌，如結(jié)核分枝桿菌。因?yàn)樗募?xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂類物質(zhì)可以耐受多種酸性介質(zhì)的作用，抵抗普通的染色方法如革蘭氏染色法。抗酸染液是由0.8%的石碳酸復(fù)紅，5%的鹽酸乙醇脫色劑和0.06%的亞甲藍(lán)復(fù)染液構(gòu)成，經(jīng)過固定-初染-水洗-脫色-水洗-復(fù)染-水洗這幾個(gè)步驟后待玻片上的水干燥后方可鏡檢。通過20mm 痰膜，使用100 倍油鏡，在淡藍(lán)色背景下，抗酸菌呈紅色，其他細(xì)菌和細(xì)胞呈藍(lán)色。連續(xù)觀察300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸菌報(bào)告陰性。3-9條/100 視野，連續(xù)觀察300個(gè)視野為（1+）；1-9條/10 視野，連續(xù)觀察100個(gè)視野為（2+）；連續(xù)觀察50個(gè)視野，1-9條/1 視野為（3+）；連續(xù)觀察50個(gè)視野，≥10條/1 視野為（4+）。

2、分枝桿菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)滿足國家生物安全Ⅱ級(jí)（BSL-Ⅱ）及以上實(shí)驗(yàn)室的及以上實(shí)驗(yàn)室的基本要求。結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)方法有固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)。固體培養(yǎng)基最常見的是羅氏培養(yǎng)基，也是最具代表性的一種，其他的還有丙酮酸培養(yǎng)基，小川辰次雞蛋培養(yǎng)基和Middle brook 7H10、7H11等瓊脂培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基的優(yōu)勢在于直接觀察菌落的形態(tài)并可以做分枝桿菌鑒定用，因此常用于臨床標(biāo)本的分離培養(yǎng)、鑒定、保存菌種及藥敏實(shí)驗(yàn)操作，不足之處是結(jié)核分枝桿菌生長較慢，可能在3-4 周才生長，要報(bào)告陰性都要孵育滿8 周。BD960 液體培養(yǎng)，是通過檢測液體培養(yǎng)基中消耗氧氣的量來確定是否有細(xì)菌生長。但這種方法不常用，大多數(shù)的實(shí)驗(yàn)室都是用的羅氏培養(yǎng)基培養(yǎng)的。

四、結(jié)核病的診斷

不同部位的結(jié)核病診斷方法自然也不同，最常見的肺結(jié)核就需要做痰涂片，若陽性再送培養(yǎng)，肺部X 片或者胸部CT，結(jié)合臨床可以診斷。其他部位的結(jié)核病最重要的是看病理檢查，即在病理片中找到結(jié)核分枝桿菌，結(jié)合臨床表現(xiàn)方可診斷。