唑啉草酯分析方法

遲志娟

摘 要：采用高效液相色譜法，以0.1%蟻酸水溶液、甲醇+0.1%蟻酸為流動(dòng)相，Accucore RP-MS，ref.：17626-104630（THERMO）色譜柱和DAD檢測器分析唑啉草酯的含量。結(jié)果表明：該方法下，唑啉草酯的線性相關(guān)系數(shù)r>0.99，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.47%。經(jīng)驗(yàn)證，該方法準(zhǔn)確、可靠。

關(guān)鍵詞：唑啉草酯;高效液相色譜;分析方法

文章編號(hào)：1004-7026（2019）20-0100-03 ? ? ? ?中國圖書分類號(hào)：S482.4 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

1 ?試驗(yàn)?zāi)康?/p>

唑啉草酯是先正達(dá)歷時(shí)10年成功開發(fā)的芽后、選擇性除草劑，2006年上市，2007年全球銷售額即破億美元，2014年銷售額達(dá)4.25億美元，成為田禾本科雜草除草劑中的領(lǐng)軍產(chǎn)品[1]。隨著國內(nèi)外唑啉草酯的市場份額逐步擴(kuò)大，要求有更加準(zhǔn)確便捷的分析檢測方法。采用液相色譜二極管陣列檢測（DAD）對(duì)唑啉草酯的含量進(jìn)行檢測，并對(duì)該分析方法進(jìn)行驗(yàn)證。

2 ?試驗(yàn)

2.1 ?試劑和溶液

乙腈（色譜純），甲醇（色譜純），超純水，蟻酸（色譜純），唑啉草酯標(biāo)準(zhǔn)品（Dr.Ehrenstorfer）。

2.2 ?儀器

Alliance 2695 chromatographic system（Waters）高效液相色譜儀，W2996 Photodiode Array Detector 檢測器及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)Empower 3（Waters），Accucore RP-MS，ref.：17626-104630（THERMO）色譜柱，100 mm×4.6 mm，2.6 μm，容量瓶：25 mL，移液器：100～1 000 μL。

2.3 ?高效液相色譜操作條件

色譜柱：Accucore RP-MS，ref.：17626-104630（THERMO），100 mm×4.6 mm，2.6 μm。

流動(dòng)相：A（0.1%蟻酸水溶液）和B（甲醇+0.1%蟻酸）。

柱溫：40 ℃，檢測波長：UV 257 nm，進(jìn)樣體積：20 μL，保留時(shí)間10.3 min。

洗脫程序見表1。唑啉草酯有效成分高效液相色譜見圖1。

2.4 ?測定步驟

2.4.1 ?標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制（定量）

稱取唑啉草酯標(biāo)樣10 mg（須精確至0.1 mg）于25 mL小燒杯中，加入8 mL乙腈溶解，搖勻后轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，用乙腈定容。將上述溶液稀釋10倍后備用。

2.4.2 ?標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制（標(biāo)準(zhǔn)曲線）

分別稱取唑啉草酯標(biāo)樣20.2 mg、22.4 mg、23.9 mg、26.5 mg、30.0 mg（精確至0.1 mg）于25 mL小燒杯，加入8 mL乙腈溶解，搖勻后轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，用乙腈定容。將上述溶液稀釋10倍后備用，見表2。

以唑啉草酯峰面積為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣量作為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。唑啉草酯線性方程為y=5.607 4E-04x-100.5，線性相關(guān)系數(shù)為0.993 51。線性相關(guān)性測定結(jié)果見圖2。

2.4.3 ?樣品溶液的配制

稱取唑啉草酯樣品25 mg（須精確至0.1 mg）于25 mL小燒杯，加入8 mL乙腈溶解，搖勻后轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，用乙腈定容。將上述溶液稀釋10倍后備用。

2.4.4 ?測定

待儀器基線穩(wěn)定后，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)數(shù)次測定，計(jì)算唑啉草酯相對(duì)響應(yīng)值，直至相鄰2次響應(yīng)值相對(duì)變化<1.5%，按標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品溶液、樣品溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液的順序進(jìn)行測定。

2.4.5 ?計(jì)算

用2針試樣溶液中唑啉草酯的峰面積以及試樣溶液前后2針標(biāo)準(zhǔn)溶液中唑啉草酯的峰面積分別計(jì)算平均值，計(jì)算出唑啉草酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，按下式計(jì)算。

? ? 式中：H為唑啉草酯樣品溶液的峰面積;f為標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均響應(yīng)值;V為測試物體積;d為稀釋倍數(shù);w為唑啉草酯樣品質(zhì)量。

3 ?結(jié)果與討論

3.1 ?色譜條件的選擇

使用Alliance 2695色譜儀唑啉草酯在222 nm和257 nm都有較大的吸收，但257 nm條件下唑啉草酯的吸收面積更大，所以將檢測的波長設(shè)定為257 nm。同時(shí)，對(duì)流動(dòng)相0.1%蟻酸水溶液、甲醇+0.1%蟻酸的配比進(jìn)行了篩選，最終確定在流速1 mL/min下不同時(shí)間的配比分別是0～1 min為9∶1，8～15 min為2∶8，15～20 min為9∶1，從而能夠快速、準(zhǔn)確地分析檢測。

3.2 ?方法驗(yàn)證

3.2.1 ?線性

線性方法通過檢測80～120 μg/mL（6個(gè)梯度），每個(gè)梯度重復(fù)2次。結(jié)果顯示相關(guān)系數(shù)r>0.99，呈現(xiàn)良好的線性。

3.2.2 ?重復(fù)性

重復(fù)5次進(jìn)行有效成分檢測。結(jié)果顯示：相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.47%，平均值990.6 g/kg，顯示了可靠的重復(fù)性。見表3。

3.2.3 ?中間精密度

分別使用相同分析方法重復(fù)5次測定同一唑啉草酯樣品的有效成分含量，但第5次由不同的分析人員在不同的時(shí)間進(jìn)行操作測試，所得結(jié)果與另外4次結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果顯示較好的中間精密度，具體見表4。

4 ?結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，采用高效液相色譜法分析唑啉草酯原藥，具有準(zhǔn)確性與精密度較高、線性關(guān)系良好、操作簡單、快速、分離效果好的優(yōu)點(diǎn)，是定性、定量分析唑啉草酯原藥較為理想的方法。

參考文獻(xiàn)：

[1]柏亞羅，顧林玲.唑啉草酯及其應(yīng)用與開發(fā)[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2017，16（3）：40-44.