宮頸癌患者巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶4的表達(dá)特點(diǎn)及與介入治療預(yù)后的關(guān)系

胡睿 王映霞 陽光輝 李青春 黃婷 唐圣魏

[摘要] 目的 探討宮頸癌患者巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶4（FUT4）的表達(dá)特點(diǎn)及與介入治療預(yù)后的相關(guān)性。 方法 選取2012年2月～2017年2月在湖南省婦幼保健院治療的宮頸癌患者74例（宮頸癌組），均給予介入治療聯(lián)合子宮切除術(shù)，同時(shí)選取因子宮肌瘤行子宮切除患者40例作為對(duì)照（對(duì)照組）。采用Western blot法檢測(cè)兩組患者FUT4蛋白表達(dá)水平，同時(shí)隨訪觀察患者預(yù)后情況。 結(jié)果 宮頸癌組FUT4蛋白相對(duì)表達(dá)明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）;腫瘤直徑>4 cm、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者FUT蛋白相對(duì)表達(dá)明顯高于腫瘤直徑≤4 cm、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者（P < 0.05）;FUT蛋白表達(dá)下調(diào)患者中位無疾病進(jìn)展期和總體生存時(shí)間明顯高于FUT蛋白表達(dá)不變患者和上調(diào)患者（P < 0.05）。 結(jié)論 宮頸癌患者FUT4蛋白呈高表達(dá)，與患者臨床病理特征有一定關(guān)系;介入治療后FUT4蛋白表達(dá)下調(diào)者預(yù)后較好。

[關(guān)鍵詞] 巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶4;宮頸癌;介入治療;預(yù)后

[中圖分類號(hào)] R737.33? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-7210（2019）09（b）-0089-04

Expression of fucoidyltransferase 4 in cervical cancer and its relationship with prognosis after interventional therapy

HU Rui? ?WANG Yinxia? ?YANG Guanghui? ?LI Qingchun? ?HUANG Ting? ?TANG Shenwei

Department of Radiology， Hu′nan Maternal and Child Health Care Hospital， Hu′nan Province， Changsha? ?410008， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of expression of fucoidyltransferase 4 （FUT4） in cervical cancer and its relationship with prognosis after interventional therapy. Methods Seventy-four cases of cervical cancer （cervical cancer group） in Hu′nan Maternal and Child Health Care Hospital from February 2012 to February 2017 were selected and treated with interventional therapy combined with hysterectomy， and 40 cases of hysterectomy with hysteromyoma were selected as control （control group）， the expression of FUT4 protein was detected by Western blot， and the prognosis of patients was followed up. Results The relative expression of FUT4 protein in cervical cancer cervical cancer group was significantly higher than that in the control group （P < 0.05）. The relative expression of FUT protein in patients with tumor diameter > 4 cm and lymph node metastasis were significantly higher than the tumor diameter ≤ 4 cm and no lymph node metastases （P < 0.05）. The median duration of disease free progression and the total survival time in down regulation of FUT protein expression patients were higher than those in patients with the invariant and up-regulated expression of FUT protein （P < 0.05）. Conclusion FUT4 protein is highly expressed in cervical cancer patients， which is related to the clinicopathological characteristics of patients. Patients with down-regulation of FUT4 protein after interventional therapy has a good prognosis.

[Key words] Fucoidyltransferase 4; Cervical cancer; Interventional therapy; Prognosis

近年來宮頸癌的整體臨床發(fā)病率具有顯著的上升表現(xiàn)，流行病學(xué)研究證實(shí)，我國(guó)大陸地區(qū)2010～2017年宮頸癌的發(fā)病率持續(xù)性維持在（262～483）/10萬人[1]。臨床上宮頸癌的臨床轉(zhuǎn)歸不佳，治療后的病死率仍然較高[2]。在探討宮頸癌的發(fā)病機(jī)制的過程中發(fā)現(xiàn)，腫瘤相關(guān)生物學(xué)因子的變化，能夠?qū)е履[瘤細(xì)胞的生物學(xué)活性的改變，促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的早期增殖浸潤(rùn)過程[3-4]。巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶4（fucoidyltransferase 4，F(xiàn)UT4）的表達(dá)能夠通過對(duì)效應(yīng)蛋白的翻譯激活作用，誘導(dǎo)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的激活，增強(qiáng)腫瘤信號(hào)通路NOTCH的上調(diào)程度，從而參與到惡性腫瘤的發(fā)生過程[5-6]。部分研究者報(bào)道了FUT4在消化系統(tǒng)及血液系腫瘤發(fā)生過程中的作用，認(rèn)為FUT4的高表達(dá)是促進(jìn)患者臨床轉(zhuǎn)歸惡化的重要風(fēng)險(xiǎn)因素[7]，但在宮頸癌中的研究不足。為了揭示FUT4與宮頸癌的關(guān)系，從而為臨床上宮頸癌的診斷和免疫靶向治療提供參考，本研究收集了湖南省婦幼保健院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）宮頸癌患者，探討了FUT4在宮頸癌病灶組織中的異常表達(dá)情況，報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年2月～2017年2月在我院接受治療的宮頸癌患者74例（宮頸癌組）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)病理組織學(xué)確診;②初次介入治療患者;③FIGO分期ⅠB～Ⅱ期;④臨床隨訪資料完整;⑤患者及家屬知情同意并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤者;②有化療禁忌證者。同時(shí)選取因子宮肌瘤行子宮切除患者40例作為對(duì)照組。兩組患者年齡、體重指數(shù)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。見表1。

表1? ?兩組患者一般資料比較（x±s）

1.2 治療方法

于股動(dòng)脈處行子宮動(dòng)脈化療栓塞導(dǎo)管插管至子宮動(dòng)脈，注入奧沙利鉑（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：11010612）200 mg + 氟尿嘧啶（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：11010573）15 g，治療后48～72 h給予全子宮切除術(shù)，術(shù)后常規(guī)給予補(bǔ)液、預(yù)防感染等治療。

1.3 檢測(cè)方法

所有組織標(biāo)本經(jīng)石蠟包埋后作連續(xù)切片，厚度約為4 mm，采用免疫組化鏈霉卵白素-生物素復(fù)合體法（strep avidin-biotin complex，SABC法）染色，二氨基聯(lián)苯胺（diamionben zidene，DAB）顯色。FUT4蛋白通用型二抗以及SP試劑盒（生產(chǎn)批號(hào)：1018555）和DAB顯色盒（生產(chǎn)批號(hào)：1017596）均購自北京中杉金橋生物技術(shù)開發(fā)公司。以陽性片及PBS代替一抗分別作為陽性及陰性對(duì)照，高倍顯微鏡下觀察FUT4蛋白的表達(dá)情況，具體染色步驟嚴(yán)格按照SP試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。生存曲線采用Kaplan-Meier分析，比較采用Log-rank檢驗(yàn)。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 宮頸癌組和對(duì)照組FUT4蛋白表達(dá)比較

宮頸癌組FUT4蛋白相對(duì)表達(dá)為（0.922±0.067），明顯高于對(duì)照組（0.217±0.097），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t = 45.615，P < 0.05）。見圖1。

A：對(duì)照組;B：宮頸癌組

圖1? ?Western blot檢測(cè)FUT4蛋白表達(dá)情況

2.2 FUT4蛋白表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征關(guān)系

FUT4蛋白表達(dá)與宮頸癌腫瘤直徑和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P < 0.05），與年齡、FIGO分期、組織類型、分化程度和浸潤(rùn)深度無關(guān)（P > 0.05）。見表2。

表2? ?FUT4蛋白表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系（x±s）

2.3 FUT4蛋白表達(dá)變化與宮頸癌預(yù)后的關(guān)系

根據(jù)患者介入治療前后FUT4蛋白表達(dá)變化情況，將患者分為上調(diào)、不變、下調(diào)三組，F(xiàn)UT4蛋白表達(dá)下調(diào)患者26例，不變患者30例，上調(diào)患者18例。截至隨訪日期2018年4月，F(xiàn)UT蛋白表達(dá)下調(diào)患者中位無疾病進(jìn)展期和總生存時(shí)間分別為44個(gè)月和56個(gè)月，明顯高于不變患者的28個(gè)月和34個(gè)月（χ2=12.544、20.165，均P < 0.05）和上調(diào)患者的29個(gè)月和35個(gè)月（χ2=15.630、24.555，均P < 0.05）。見圖2。

2 討論

多基因遺傳突變或者后天性的環(huán)境因素，均能夠?qū)е聦m頸柱狀上皮細(xì)胞惡變的發(fā)生，特別是在具有人乳頭瘤狀病毒（HPV）感染的人群中，宮頸癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)可進(jìn)一步上升[8]。長(zhǎng)期的臨床隨訪研究證實(shí)，手術(shù)、放化療等綜合措施治療后，胃癌患者的5年生存率不足35%，治療后的無瘤生存時(shí)間不足36個(gè)月[9-10]。免疫靶向治療能夠在惡性腫瘤的治療中發(fā)揮重要作用，能夠特異性地阻斷相關(guān)蛋白受體的表達(dá)，抑制腫瘤的復(fù)發(fā)，改善腫瘤患者的臨床癥狀。而本研究對(duì)于宮頸癌患者病灶組織中的生物學(xué)因子的表達(dá)研究，能夠?yàn)閷m頸癌的免疫靶向治療提供作用靶點(diǎn)。

FUT4蛋白是重要的腫瘤相關(guān)膜表面糖蛋白，其氨基酸序列的羧基末端結(jié)構(gòu)上包含了多個(gè)可結(jié)合的氨基、甲基等基團(tuán)，能夠通過結(jié)合上皮細(xì)胞膜表面的糖蛋白配體，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞膜上跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，激活細(xì)胞內(nèi)腫瘤信號(hào)通路。基礎(chǔ)領(lǐng)域的研究證實(shí)，F(xiàn)UT4蛋白表達(dá)濃度的上升能夠促進(jìn)AKT或者M(jìn)APK信號(hào)通路的上調(diào)，增加了癌細(xì)胞DNA的轉(zhuǎn)錄激活的風(fēng)險(xiǎn)。FUT4蛋白還能夠影響癌細(xì)胞的生物學(xué)特征，導(dǎo)致癌細(xì)胞變形能力增強(qiáng)，促進(jìn)癌細(xì)胞向?qū)m旁組織的浸潤(rùn)[5]。部分研究者報(bào)道了FUT4蛋白的表達(dá)與宮頸癌患者的病情關(guān)系，認(rèn)為FUT4的表達(dá)上升與宮頸癌患者的臨床病理分期的進(jìn)展密切相關(guān)[11]，但對(duì)于FUT4蛋白在宮頸癌治療后的表達(dá)變化研究不足。

免疫組化的結(jié)果顯示，在宮頸癌病灶組織中，F(xiàn)UT4蛋白的表達(dá)陽性率顯著上升，高于正常宮頸組織，差異較為明顯，提示了FUT4蛋白可參與宮頸癌的病情進(jìn)展。通過薈萃相關(guān)文獻(xiàn)，筆者認(rèn)為FUT4蛋白的表達(dá)與宮頸癌的關(guān)系可能與下列幾個(gè)方面的因素有關(guān)[12-14]：①FUT4蛋白的高表達(dá)可增強(qiáng)宮頸柱狀上皮細(xì)胞的浸潤(rùn)能力，促進(jìn)癌細(xì)胞對(duì)宮頸基底膜組織的浸潤(rùn);②FUT4蛋白的表達(dá)上升能夠?qū)е聦m頸癌細(xì)胞凋亡過程的障礙，抑制凋亡過程。朱雨彤等[15]研究者也認(rèn)為，在宮頸鱗癌病灶組織中，F(xiàn)UT4蛋白的表達(dá)陽性率可上升18%以上，同時(shí)在合并有明顯宮旁組織浸潤(rùn)的宮頸癌患者中，F(xiàn)UT4蛋白的表達(dá)陽性率可進(jìn)一步上升。在探討FUT4蛋白的表達(dá)與宮頸癌患者臨床病理特征的關(guān)系過程中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)UT4蛋白的表達(dá)與宮頸癌病灶組織的直徑或者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示了FUT4蛋白的表達(dá)與宮頸癌患者的病情關(guān)系，這主要由于FUT4蛋白的表達(dá)能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，并提高柱狀上皮細(xì)胞對(duì)于淋巴結(jié)的黏附能力。但本研究并未發(fā)現(xiàn)FUT4蛋白的表達(dá)與宮頸癌患者的FIGO分期、組織類型、分化程度和浸潤(rùn)深度的關(guān)系，這與朱雨彤等[15]的結(jié)論存在一定的不同，考慮可能與FUT4蛋白的檢測(cè)靈敏度或者宮頸癌患者的基礎(chǔ)病情的差異有關(guān)[16-18]。在探討FUT4的表達(dá)與宮頸癌患者生存預(yù)后的關(guān)系過程中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)UT蛋白表達(dá)下調(diào)患者中位無疾病進(jìn)展期和總生存時(shí)間分別為44個(gè)月和56個(gè)月，明顯高于FUT4蛋白上升或者不變患者，差異較為明顯，提示了FUT4蛋白的表達(dá)與宮頸癌臨床預(yù)后的關(guān)系，考慮主要由于FUT4蛋白的低表達(dá)水平往往預(yù)示著癌細(xì)胞的增殖相對(duì)活躍度較低且侵襲能力不高有關(guān)[19-20]。

本次研究的創(chuàng)新性在于探討了FUT蛋白的表達(dá)與宮頸癌患者臨床預(yù)后的關(guān)系。綜上所述，宮頸癌患者FUT4蛋白呈高表達(dá)，與患者臨床病理特征有一定關(guān)系;介入治療后FUT4蛋白表達(dá)下調(diào)者預(yù)后較好。

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（收稿日期：2018-09-25? 本文編輯：任? ?念）