LncRNA-MEG3作為急性髓系白血病預(yù)后標(biāo)志物調(diào)控細(xì)胞增殖

曾進(jìn)龍　周志衡　陳寶欣　王彩霞

【摘要】 目的：探索長(zhǎng)鏈非編碼-MEG3（LncRNA-MEG3）與急性髓系白血病（AML）生存期的關(guān)系，并分析它對(duì)細(xì)胞增殖的調(diào)控作用。方法：采用過表達(dá)技術(shù)對(duì)AML細(xì)胞系HL-60、THP-1和U937的LncRNA-MEG3進(jìn)行過表達(dá)，用MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。收集初發(fā)未治的10例AML患者和10名健康人的骨髓標(biāo)本及相關(guān)臨床資料，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）檢測(cè)LncRNA-MEG3在骨髓中的表達(dá)情況。檢測(cè)75例被確診為AML患者骨髓中LncRNA-MEG3的表達(dá)情況，并跟蹤隨訪5年，分析LncRNA-MEG3的表達(dá)與患者生存結(jié)局的關(guān)系。結(jié)果：與健康人比較，AML患者骨髓中LncRNA-MEG3的表達(dá)量明顯下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。生存分析顯示，MEG3低表達(dá)組患者的中位生存時(shí)間為21.162個(gè)月，明顯短于MEG3高表達(dá)組的41.715個(gè)月（P<0.000 1）。MTT結(jié)果顯示，LncRNA-MEG3過表達(dá)細(xì)胞組的細(xì)胞增殖明顯低于陰性對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：LncRNA-MEG3在AML骨髓中表達(dá)下調(diào)，LncRNA-MEG3低表達(dá)可能是AML預(yù)后不良的新生物標(biāo)記物，并能調(diào)控AML細(xì)胞的細(xì)胞增殖。

【關(guān)鍵詞】 急性髓系白血病; 長(zhǎng)鏈非編碼RNA; 細(xì)胞增殖; 生物標(biāo)志物

LncRNA-MEG3 as a Prognostic Marker of Acute Myeloid Leukemia Regulates Cell Proliferation/ZENG Jinlong，ZHOU Zhiheng，CHEN Baoxin，et al.//Medical Innovation of China，2019，16（23）：00-005

【Abstract】 Objective：To explore the relationship between long-chain non-coding-MEG3（LncRNA-MEG3）and the survival period of acute myeloid leukemia（AML），and to analyze its regulatory effect on cell proliferation.Method：LncRNA-MEG3 of AML cell lines HL-60，THP-1 and U937 were overexpressed by overexpression technique，and the proliferation of the cells was detected by MTT.Bone marrow samples and relevant clinical data of 10 untreated AML patients and 10 normal people were collected，and the expression of LncRNA-MEG3

in bone marrow was detected by real-time quantitative PCR（qPCR）.The expression of LncRNA-MEG3 in the bone marrow of 75 patients diagnosed with AML was detected and followed up for 5 years to analyze the relationship between the expression of LncRNA-MEG3 and survival outcome of patients.Result：Compared with healthy individuals，the expression of LncRNA-MEG3 in bone marrow of AML patients was significantly down-regulated，the difference was statistically significant（P<0.01）.Survival analysis showed that the median survival time of patients in the MEG3 low-expression group was 21.162 months，significantly shorter than 41.715 months in the MEG3 high-expression group（P<0.000 1）.MTT results showed that the proliferation of LncRNA-MEG3 overexpressed cells in the LncRNA-MEG3 overexpressed cells group was significantly lower than that in the negative control group，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion：The expression of LncRNA-MEG3 in AML bone marrow is down-regulated，and the low expression of LncRNA-MEG3 may be a new biomarker of AML with poor prognosis，and can regulate the proliferation of AML cells.

【Key words】 Acute myeloid leukemia; Long non coding RNA; Cell proliferation; Biomarker

First-authors address：Zengcheng District Peoples Hospital of Guangzhou，Guangzhou 511300，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.23.001

母系表達(dá)基因3（maternally expressed gene 3，MEG3）是小鼠母體印記基因Gtl2的人類同系物，定位于染色體14q32.3，屬于長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，LncRNA）。有研究發(fā)現(xiàn)，MEG3在多種正常組織中表達(dá)，但在很多腫瘤細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)或者表達(dá)缺失[1]。MEG3可能是腫瘤發(fā)生發(fā)展的新生物標(biāo)記物[2-3]，但它在血液腫瘤中的功能如何，仍未被闡明。本研究擬探索長(zhǎng)鏈非編碼LncRNA-MEG3與急性髓系白血病生存期的關(guān)系，并分析它對(duì)細(xì)胞增殖的調(diào)控作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系 白血病細(xì)胞株HL-60、THP-1和U937由廣州賽哲生物科技有限公司實(shí)驗(yàn)室饋贈(zèng)。培養(yǎng)體系為含10%胎牛血清的1640培養(yǎng)液，置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.1.2 主要試劑與儀器 TRIzol（Gibco公司），PCR引物、PCR內(nèi)參照引物（上海生工公司），逆轉(zhuǎn)錄試劑盒Fermentas K1622，TurboFect Transfection Reagents（Thermo Scientific），qPCR試劑盒（Promega公司）pcDNA3.0空載體和pcDNA3.0-MEG3質(zhì)粒（上海吉瑪制藥有限公司），F(xiàn)icoll（GE公司）。

1.1.3 患者來源 （1）檢測(cè)LncRNA-MEG3差異表達(dá)的患者來源：2018年8月1日-10月30日在本院初發(fā)未治急性髓系白血?。ˋML）10例，患者均符合FAB診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男5例，女5例，年齡21～67歲，平均（34.40±4.12）歲;選取10名健康人作為健康對(duì)照組，其中男5例，女5例，年齡21～65歲，平均（34.10±3.91）歲。（2）生存分析的入組患者來源：根據(jù)FAB的診斷標(biāo)準(zhǔn)，選取本院于2012年2月-2013年12月在廣州市第一人民醫(yī)院確診的75例AML患者標(biāo)本庫標(biāo)本作為入組對(duì)象，收集這些患者的骨髓標(biāo)本和相關(guān)臨床資料，并對(duì)其進(jìn)行隨訪。自確診之日至死亡或最后隨訪截止日計(jì)算其生存時(shí)間，終點(diǎn)隨訪時(shí)間為2018年12月30日，隨訪時(shí)間均超過5年。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 總RNA提取及純度和含量的鑒定 取1×106個(gè)MNCs用Trizol提取細(xì)胞總RNA，在1.8%瓊脂糖電泳下可見三條清晰亮帶（28S、18S、5S），證明所提RNA模板完整;用紫外分光光度計(jì)測(cè)定A260/A280比值均大于1.8，并進(jìn)行RNA含量測(cè)定。

1.2.2 pcDNA3.0 MEG3質(zhì)粒的細(xì)胞轉(zhuǎn)染 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組、空載體組、MEG3質(zhì)粒組。對(duì)照組細(xì)胞僅加轉(zhuǎn)染試劑，空載體組轉(zhuǎn)染pcDNA3.0質(zhì)粒，MEG3質(zhì)粒組轉(zhuǎn)染pcDNA3.0-MEG3質(zhì)粒。細(xì)胞培養(yǎng)獲得對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，接種于6孔板中，用Lipfectamine2000轉(zhuǎn)染pcDNA3.0-MEG3，以轉(zhuǎn)染空載體pcDNA3.0和未轉(zhuǎn)染細(xì)胞作為對(duì)照，轉(zhuǎn)染

24～48 h后，檢測(cè)各組細(xì)胞LncRNA-MEG3表達(dá)水平。

1.2.3 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn) 按照5 000個(gè)/mL的細(xì)胞密度接種于96孔板，每孔200 μL，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔，置于5% CO2、37 ℃培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);細(xì)胞處理：U937、HL-60和THP-1細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染siRNA-NC、siLncRNA-MEG3，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次;培養(yǎng)結(jié)束前4 h，每孔加入5 mg/mL的MTT溶液20 μL，繼續(xù)置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)至結(jié)束;收集細(xì)胞并重懸，每孔加入150 μL DMSO，水平振蕩10 min，酶標(biāo)儀檢測(cè)492 nm處的吸光值，繪制生長(zhǎng)曲線。

1.2.4 人單個(gè)核細(xì)胞（mononuclear cells，MNCs）提取 白血病患者和健康人標(biāo)本均為肝素抗凝新鮮骨髓，PBS稀釋后，置于淋巴細(xì)胞分離液Ficoll上，在自動(dòng)平衡離心機(jī)上1 500 r/min（Eppendorf，美國(guó)）離心20 min，吸取界面層MNCs，PBS洗滌2次，所得MNCs一部分用作抽提總RNA。

1.2.5 qPCR檢測(cè)LncRNA-MEG3表達(dá)情況 各細(xì)胞的總RNA運(yùn)用Fermentas K1622試劑（Thermo Scientific公司）逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后，根據(jù)試劑說明書配置QPCR體系（20 μL）：2×Master Mix（10 μL），F(xiàn)orward Primer（10 μM）（0.3 μL），Reverse Primer（10 μM）（0.3 μL）（序列：Forward：5-ATCCGTCCACCTTGTCT-3，Reverse：5-CCTCTTCATCCTTTGCCATC-3），cDNA（0.8 μL），nuclease-free Water（8.6 μL）。每樣品每基因重復(fù)3次。在ABI Stepone Plus qPCR儀上設(shè)置QPCR反應(yīng)程序：95 ℃，5 min;95 ℃，30 s;58 ℃，30 s，40個(gè)循環(huán);72 ℃，15 s，95 ℃，15 s;60 ℃，1 min;95 ℃，15 s。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 運(yùn)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件建立數(shù)據(jù)庫并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用（x±s）描述，比較用獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，三個(gè)時(shí)間點(diǎn)重復(fù)測(cè)量的MTT結(jié)果采用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)的方差分析。應(yīng)用K-M法和生命表法計(jì)算中位生存率和累計(jì)生存率;運(yùn)用對(duì)數(shù)秩檢驗(yàn)（Log-rank）比較不同組的生存時(shí)間差異，雙側(cè)ɑ=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者一般情況 本研究入組的急性髓細(xì)胞白血病患者75例，按照FBA分型M1、M2、M3、M4、M5分別是5、18、12、15、25例，M6、M7均為0例。其中男41例，女34例，年齡18～68歲，平均（34.20±4.12）歲。

2.2 白血病患者與健康對(duì)照組MNC細(xì)胞LncRNA-MEG3的表達(dá) 健康人骨髓MNC細(xì)胞LncRNA-MEG3表達(dá)量為4.759±1.719，而AML患者骨髓MNC細(xì)胞LncRNA-MEG3表達(dá)量為1.109±0.362。與健康人比較，AML患者的骨髓標(biāo)本中LncRNA-MEG3的表達(dá)明顯下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-6.684，P<0.001），見圖1。

2.3 LncRNA-MEG3表達(dá)與AML患者預(yù)后生存期的關(guān)系 75例AML患者，中位生存時(shí)間為31.577個(gè)月，有20例（26.67%）患者達(dá)5年或5年以上長(zhǎng)期生存。以LncRNA-MEG3表達(dá)量1.0為截點(diǎn)，把AML患者分為MEG3低表達(dá)組（37例）和高表達(dá)組（38例）。MEG3低表達(dá)組患者的生存時(shí)間2～60個(gè)月，中位生存時(shí)間為21.162個(gè)月，有3例（8.108%）患者的生存期5年以上;而MEG3高表達(dá)組患者的生存時(shí)間為1～60個(gè)月，中位生存時(shí)間為41.715個(gè)月，有17例（44.737%）患者的生存期5年以上。經(jīng)對(duì)數(shù)秩檢驗(yàn)（Log-rank）分析，MEG3高表達(dá)組的5年生存率（44.737%）和MEG3低表達(dá)組患者的5年生存率（8.108%）比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=19.117，P<0.000 1），見圖2。

2.4 各細(xì)胞系LncRNA-MEG3過表達(dá)效果 HL-60、

THP-1和U937細(xì)胞分別用pcDNA3.0-MEG3和空載體pcDNA3.0轉(zhuǎn)染48 h后，分別檢測(cè)未轉(zhuǎn)染細(xì)胞、空載體pcDNA3.0轉(zhuǎn)染細(xì)胞和pcDNA3.0-MEG3轉(zhuǎn)染細(xì)胞的LncRNA-MEG3表達(dá)水平。結(jié)果顯示，

以上三種細(xì)胞被空載體pcDNA3.0轉(zhuǎn)染后，LncRNA-MEG3表達(dá)量分別是（0.56±0.10）、（0.62±0.12）和（0.39±0.07）;而被pcDNA3.0-MEG3轉(zhuǎn)染后，以上三種細(xì)胞的LncRNA-MEG3表達(dá)量分別（5.78±0.58）、（6.42±1.21）和（5.15±0.77），pcDNA3.0-MEG3轉(zhuǎn)染細(xì)胞的LncRNA-MEG3表達(dá)量明顯上調(diào)，達(dá)到了過表達(dá)的效果。

2.5 AML細(xì)胞系中LncRNA-MEG3對(duì)細(xì)胞增殖的調(diào)控作用 在不同細(xì)胞系中，與pcDNA3.0空載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞比較，pcDNA3.0-MEG3轉(zhuǎn)染細(xì)胞增殖受抑制。其中，HL-60和THP-1細(xì)胞系在轉(zhuǎn)染24 h起，pcDNA3.0-MEG3轉(zhuǎn)染細(xì)胞增殖（ODHL-60=0.214，ODTHP-1=0.231）低于pcDNA3.0空載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞（ODHL-60=0.315，ODTHP-1=0.325），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），而U937細(xì)胞在轉(zhuǎn)染48 h pcDNA3.0-MEG3轉(zhuǎn)染細(xì)胞增殖（OD=0.423）低于pcDNA3.0空載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞（OD=0.645），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），見圖3。

3 討論

近年來，LncRNA在腫瘤發(fā)病和預(yù)后的研究備受關(guān)注。LncRNA是繼miRNA之后被科學(xué)家們重點(diǎn)研究的熱點(diǎn)之一[4]。前期的研究證明，LncRNA在多種腫瘤中存在異常表達(dá)的現(xiàn)象，并在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中起重要作用[5]。有研究顯示，LncRNA在急性和慢性病白血病中也存在表達(dá)異常現(xiàn)象，并具有重要的調(diào)控功能[6-7]：LncRN-MIR100HG和As MONC參與了急性巨核細(xì)胞白血病的發(fā)生與發(fā)展[8]，LncRNA NEAT1在急性早幼粒細(xì)胞白血病中的表達(dá)明顯低于健康人的表達(dá)[9]，LncRNA-ANRIL在急性淋巴細(xì)胞白血病中能調(diào)節(jié)p16INK4a;LncRNA急性髓性白血病中能參與沉默p15和p21基因。本課題在過去的研究也發(fā)現(xiàn)，LncRNA-H19、LncRNA-ENST00000414355在AML中具有調(diào)控細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的作用，并與部分臨床指標(biāo)具有相關(guān)性。

目前，LncRNA在肝癌、肺癌等腫瘤的研究較多，而在白血病的研究報(bào)道有限[10-12]。特別是LncRNA在急性白血病中發(fā)生發(fā)展中的調(diào)控、與治療和預(yù)后的研究仍處于起步階段?；诖?，本項(xiàng)目組開展了LncRNA-MEG3與AML生存時(shí)間的關(guān)系，并研究LncRNA-MEG3對(duì)AML細(xì)胞系的細(xì)胞增殖調(diào)控作用。本研究發(fā)現(xiàn)，AML患者骨髓單核細(xì)胞的LncRNA-MEG3表達(dá)量顯著下調(diào);AML患者中，骨髓單核細(xì)胞的LncRNA-MEG3表達(dá)量下調(diào)組的患者生存時(shí)間較LncRNA-MEG3高表達(dá)組的短。在三種急性白血病細(xì)胞系中，LncRNA-MEG3過表達(dá)細(xì)胞組的細(xì)胞增殖情況明顯低于pcDNA3.0空載體轉(zhuǎn)染組。以上結(jié)果提示，LncRNA-MEG3與AML發(fā)病和預(yù)后相關(guān)，并具有調(diào)控AML細(xì)胞增殖的功能。

既往大量的研究發(fā)現(xiàn)，LncRNA-MEG3在乳腺癌、肝癌、肺癌等多種腫瘤中呈現(xiàn)低表達(dá)的現(xiàn)象，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)LncRNA-MEG3能抑制部分腫瘤細(xì)胞增殖的作用[13-16]，MEG3可能是一種腫瘤抑制因子，可通過增強(qiáng)P53基因的活性而發(fā)揮調(diào)控作用[17-18]。然而，LncRNA-MEG3在急性髓系白血病中的調(diào)控功能如何、它的表達(dá)與該病的預(yù)后關(guān)系如何？調(diào)控機(jī)制如何？[19-20]尚未被闡明。本研究發(fā)現(xiàn)，LncRNA-MEG3在急性白血病中調(diào)控細(xì)胞增殖的功能，并發(fā)現(xiàn)LncRNA-MEG3低表達(dá)的患者生存時(shí)間較短，這提示LncRNA-MEG3可能是急性髓系白血病預(yù)后的一個(gè)新生物標(biāo)志物，這和文獻(xiàn)[21]報(bào)道LncRNA-MEG3在其他腫瘤的調(diào)控功能吻合。今后，筆者將繼續(xù)擴(kuò)大臨床樣本量和進(jìn)一步延長(zhǎng)患者的跟蹤隨訪時(shí)間和增加觀察指標(biāo)，進(jìn)一步驗(yàn)證LncRNA-MEG3在急性白血病中作為新生物標(biāo)記物的效果，并深入探索LncRNA-MEG3的調(diào)控機(jī)制，為闡明LncRNA-MEG3在急性白血病預(yù)防、診斷和治療的角色提供新思路。

參考文獻(xiàn)

[1]王昱文，成秉林，張淑君.LncRNA的生物標(biāo)記作用及MEG3在腫瘤中的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2017，25（2）：308-311.

[2]劉珂，侯毅，鄭稼.LncRNA MEG3對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖、侵襲和凋亡的影響[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，53（1）：56-59.

[3] Xiu Y L，Sun K X，Chen X，et al.Upregulation of the LncRNA Meg3 induces autophagy to inhibit tumorigenesis and progression of epithelial ovarian carcinoma by regulating activity of ATG3[J].Oncotarget，2017，8（19）：31714.

[4] Dong D，Mu Z，Wang W，et al.Prognostic value of long noncoding RNA ZFAS1 in various carcinomas：a meta-analysis[J].Onco Targets Ther，2017，8（48）：84497-84505.

[5] Zheng Y，Liu L，Shukla G C.A comprehensive review of web-based non-coding RNA resources for cancer research[J].Cancer Lett，2017，407：1-8.

[6] Sun C，Luan S，Zhang G，et al.CEBPA-mediated upregulation of the lncRNA PLIN2 promotes the development of chronic myelogenous leukemia via the GSK3 and Wnt/β-catenin signaling pathways[J].Am J Cancer Res，2017，7（5）：1054-1067.

[7] Miller C R，Ruppert A S，F(xiàn)obare S，et al.The long noncoding RNA，treRNA，decreases DNA damage and is associated with poor response to chemotherapy in chronic lymphocytic leukemia[J].Oncotarget，2017，8（16）：25942-25954.

[8] Emmrich S，Streltsov A，F(xiàn)ranziska S.LincRNAs MONC and MIR100HG act as oncogenes in acute megakaryoblastic leukemia[J].Molecular Cancer，2014，13（1）：171-182.

[9] Yu X，Li Z，Zheng H，et al.NEAT1：A novel cancer-related long non-coding RNA[J].Cell Prolif，2017，50（2）：12329.

[10] Ziye Li，Lin Yang，Xiaojun Liu，et al.The Long Noncoding RNA MEG3 and its Target miR-147 Regulate JAK/STAT Pathway in Advanced Chronic Myeloid Leukemia[J].Bio Medicine，2018，34：61-75.

[11] Ji L，Li X.Long noncoding RNA MEG3 is a tumor suppressor in choriocarcinoma by upregulation of microRNA-211[J].J Cell Physiol，2019.

[12] Pang X，F(xiàn)eng G，Shang W，et al.Inhibition of lncRNA MEG3 protects renal tubular from hypoxia-induced kidney injury in acute renal allografts by regulating miR-181b/TNF-αsignaling pathway[J].J Cell Biochem，2019，120（8）：12822-12831.

[13] Zhang L L，Hu D，Zou L H.Low expression of lncRNA MEG3 promotes the progression of oral squamous cell carcinoma by targeting miR-21[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci，2018，22（23）：8315-8323.

[14] Zhou X，Yuan P，Liu Q，et al.LncRNA MEG3 Regulates Imatinib Resistance in Chronic Myeloid Leukemia via Suppressing MicroRNA-21[J].Biomolecules & Therapeutics，2017，25（5）：490-496.

[15] Binabaj M M，Bahrami A，Bahreyni A，et al.The prognostic value of long noncoding RNA MEG3 expression in the survival of patients with cancer：A meta-analysis[J].J Cell Biochem，2018，119（11）：9583-9590.

[16]周晶，田野.長(zhǎng)鏈非編碼RNA MEG3在腫瘤發(fā)生中的研究進(jìn)展[J].臨床醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2018，8（5）：454-459.

[17] Wang H，Li Q，Tang S，et al.The role of long noncoding RNA HOTAIR in the acquired multidrug resistance to imatinib in chronic myeloid leukemia cells[J].Hematology，2017，22（4）：208-216.

[18]范寧寧，耿敬姝.長(zhǎng)鏈非編碼RNA MEG3在人膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達(dá)及作用研究[J].實(shí)用腫瘤學(xué)雜志，2018，32（3）：219-223.

[19] Feng S Q，Zhang X Y，F(xiàn)an H T，et al.Up-regulation of LncRNA MEG3 inhibits cell migration and invasion and enhances cisplatin chemosensitivity in bladder cancer cells[J].Neoplasma，2018，65（6）：925-932.

[20] Yao H，Duan M，Lin L，et al.TET2 and MEG3 promoter methylation is associated with acute myeloid leukemia in a Hainan population[J].Oncotarget，2017，8（11）：18337-18347.

[21] Li Z Y，Yang L，Liu X J，et al.The Long Noncoding RNA MEG3 and its Target miR-147 Regulate JAK/STAT Pathway in Advanced Chronic Myeloid Leukemia[J].E Bio Medicine，2018，34：61-75.

（收稿日期：2019-03-19） （本文編輯：張爽）