不同產(chǎn)地、采收期及加工方法金銀花中木犀草苷含量分析

鄭國成，李漢天，龐麗華，劉鐵軍，周明霞，李 哲，蔡向杰，屈云萍，李 菲

(神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司，河北 石家莊 051430)

金銀花為忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或初開的花。其味甘，性寒，歸肺、心、胃經(jīng)，具有清熱解毒、疏散風(fēng)熱的功效，臨床用于癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風(fēng)熱感冒、溫病發(fā)熱的治療[1]。金銀花在我國主產(chǎn)于山東、河南、河北[2]。2015版《中國藥典》規(guī)定，金銀花的標(biāo)志性成分為綠原酸和木犀草苷，而是否含有木犀草苷是區(qū)別金銀花和同科植物山銀花、忍冬藤的主要化學(xué)指標(biāo)，也是金銀花與山銀花等同科植物在療效上存在差異的主要原因[3]。以木犀草素及木犀草苷為代表的黃酮類化合物具有抗炎、抗菌、抗病毒和抗癌等多種藥理作用[4-6]。本試驗(yàn)對(duì)河南封丘、河北巨鹿和山東平邑收集的14批金銀花藥材進(jìn)行木犀草苷含量測(cè)定，分析比較不同產(chǎn)地、采收期及加工方法金銀花藥材中木犀草苷的含量，以期篩選出符合《中國藥典》要求的優(yōu)質(zhì)金銀花藥材，為其質(zhì)量評(píng)價(jià)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

電子天平(賽多利斯 CP225D，十萬分之一)；昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司KH-3200 E超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司KH-3200 E)；戴安U3000 高效液相色譜儀；藥典篩。

1.2 試劑

乙腈為色譜純，乙醇為分析純；木犀草苷對(duì)照品由中國食品藥品檢定研究院提供(批號(hào)111720-201609)。

1.3 材料

2018年6-7月分別從河南封丘、河北巨鹿、山東平邑3個(gè)產(chǎn)地收集金銀花樣品共計(jì)14批，經(jīng)鑒定均為忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或初開的花。樣品信息見表2。

2 方法

2.1木犀草苷含量測(cè)定[1]

2.1.1 色譜條件 色譜柱以苯基硅烷健合硅膠為填充劑(月旭 UltimateR·RXB-Penyl 4.6 mm×250 mm，5 μm)；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.5%冰醋酸溶液為流動(dòng)相B，按表1進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長為350 nm；柱溫為30 ℃。

2.1.2 對(duì)照品溶液制備 取木犀草苷對(duì)照品適量，精密稱定，加70%乙醇制成每1 mL含40μg木犀草苷的溶液，即得。

表1 梯度洗脫程序

2.1.3 供試品溶液制備 取金銀花粉末(過四號(hào)篩)約2 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50 mL，稱定重量，超聲處理(功率250 W，頻率35 kHz)1 h，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液10 mL，回收溶劑至干，殘?jiān)?0%乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加70%乙醇至刻度，即得。

2.1.4 測(cè)定方法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。見圖1。

圖1 木犀草苷對(duì)照品(A)和金銀花藥材(B)HPLC色譜

3 結(jié)果

結(jié)果顯示，14批次金銀花藥材中有4批次木犀草苷含量達(dá)不到0.05%，不符合《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)。收集的3個(gè)產(chǎn)地的金銀花藥材木犀草苷含量基本接近；同一產(chǎn)地金銀花中炕干較曬干的木犀草苷含量高；不同采收期中，頭茬金銀花中木犀草苷含量略高于二茬花。

表2 金銀花樣品來源情況及木犀草苷含量 (%)

續(xù)表2 金銀花樣品來源情況及木犀草苷含量 (%)

4 討論

三個(gè)產(chǎn)地但相同采收期、相同干燥方式的金銀花藥材木犀草苷含量相差不大?？桓筛稍锓绞矫黠@優(yōu)于曬干，收集的14批金銀花樣品中，炕干金銀花木犀草苷含量均符合中國藥典規(guī)定的≥0.05%，4批次曬干金銀花木犀草苷含量<0.5%，不符合《中國藥典》規(guī)定。此外，頭茬花的木犀草苷含量高于二茬花。

金銀花具有很高的藥用價(jià)值，所含化學(xué)成分復(fù)雜，主要包括揮發(fā)油、黃酮類、有機(jī)酸和三萜皂苷類物質(zhì)，其標(biāo)志性成分為綠原酸和木犀草苷[7]，根據(jù)2015版《中國藥典》規(guī)定，金銀花的質(zhì)量控制項(xiàng)目為綠原酸和木犀草苷含量，并常以是否含有木犀草苷區(qū)別金銀花和山銀花。測(cè)定的14批金銀花藥材中木犀草苷含量最高為0.063%，大部分合格批次金銀花木犀草苷含量與合格線接近，這就要求金銀花的種植、采收及加工過程各環(huán)節(jié)要嚴(yán)格控制，在實(shí)施金銀花的GAP生產(chǎn)及采收加工過程中，應(yīng)充分考慮這些影響因素，以提高金銀花的質(zhì)量和產(chǎn)量，為臨床提供優(yōu)質(zhì)高效的金銀花藥材。