姜黃醇提物化學(xué)成分及其抗氧化活性分析

劉 宇，熊 亮，彭 成，李小翠，蒙春旺，劉 菲,*，郭 力,*

（1.成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都 611137；2.成都中醫(yī)藥大學(xué)，西南特色藥材創(chuàng)新藥物成分研究所，四川 成都 611137）

氧化應(yīng)激反應(yīng)是人類身體衰老和健康問題的最大敵人之一，人體內(nèi)外多種因素誘導(dǎo)產(chǎn)生的過量自由基，可以引發(fā)氧化脅迫反應(yīng)，不僅導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷和功能缺失，促使機(jī)體衰老，而且會(huì)加劇阿爾茨海默病、心血管疾病、惡性腫瘤等相關(guān)疾病的發(fā)展[1-2]，因此應(yīng)用抗氧化劑保持人體健康和預(yù)防疾病在現(xiàn)代社會(huì)具有廣泛的需求[3]，抗氧化劑研究和開發(fā)越來越受到國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注[4-6]。由于合成抗氧化劑具有潛在的身體危害[7-8]，所以從植物中尋找高效、低毒、廉價(jià)的天然抗氧化劑成為目前抗氧化劑開發(fā)的必然趨勢[9-10]，目前從植物中提取分離得到的天然抗氧化劑種類繁多，其化學(xué)成分類型包括多酚類、類胡蘿卜素、迷迭香等[11]。其中，酚類成分的抗氧化活性在紛繁復(fù)雜的天然產(chǎn)物中得到的廣泛的肯定和認(rèn)可[12]。

姜黃來源于姜科植物姜黃（Curcuma longa L.）的干燥根莖，富含酚類成分。研究表明姜黃具有良好的抗氧化活性[13]。趙革平等[14]研究發(fā)現(xiàn)姜黃醇提物是有效的抗氧化劑，但是研究限于粗提物，并未深入到具體的單體化合物水平，為進(jìn)一步闡明姜黃醇提物的抗氧化活性物質(zhì)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)對其醇提物中的酚類成分進(jìn)行分離鑒定，并對獲得的單體化合物進(jìn)行了抗氧化活性篩選。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

姜黃飲片購于四川新荷花中藥飲片有限公司，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物研究室龍飛教授鑒定為姜黃的干燥根莖。

甲醇（色譜純） 美國Sigma公司；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2 -picrylhydrazyl，DPPH）美國Sigma公司；2,2’-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)，ABTS） 南京都萊生物技術(shù)有限公司；石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇、乙醇、濃硫酸、VC（均為分析純） 成都市科隆化學(xué)品有限公司；十八烷基硅烷鍵合硅膠（RPC18，40～60 μmol/L） 月旭科技（上海）股份公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Bruker-500核磁共振波譜儀 德國Bruker公司；Synapt G2 高分辨質(zhì)譜儀 美國Waters公司；1220型高效液相色譜儀 美國Agilent公司；Varioska多功能酶標(biāo)儀 美國Thermo Scientific公司；Sephadex LH-20葡聚糖凝膠 瑞典Amershan Pharmacia公司；Gradient Former B-687中壓液相色譜儀 瑞士Büchi公司；ZF-90多功能暗箱式紫外透射儀 上海寶山顧村電光儀器廠；Milli-Q Reference超純水儀 德國默克集團(tuán)；柱色譜硅膠H和薄層色譜硅膠GF254 青島海洋化工廠；GF254硅膠制備薄層板 煙臺(tái)江友硅膠開發(fā)有限公司；Coring Costar 96孔酶標(biāo)板 美國康寧公司。

1.3 方法

1.3.1 提取與分離

將姜黃飲片50 kg，加95%乙醇溶液浸泡過夜，回流提取2 次，第1次2 h，第2次1.5 h，合并提取液，50 ℃減壓濃縮得干燥浸膏7 kg。浸膏加水適量成為混懸液，依次用石油醚、乙酸乙酯反復(fù)萃取，將萃取液于50 ℃減壓濃縮，得石油醚萃取物1.6 kg，乙酸乙酯萃取物3 kg。

取乙酸乙酯萃取物經(jīng)硅膠柱色譜（150 cm×22 cm），分別用石油醚-乙酸乙酯溶液（1∶0、7∶3、4∶6、0∶1，V/V）和乙酸乙酯-甲醇溶液（1∶1、0∶1，V/V）洗脫，每種梯度的洗脫液收集在一起，并依次編號(hào)為Fr. 1～Fr. 6，F(xiàn)r. 1～Fr. 6洗脫液經(jīng)50 ℃減壓濃縮至浸膏狀，選擇Fr. 2（500 g）經(jīng)硅膠柱色譜（150 cm×22 cm），用二氯甲烷-乙酸乙酯溶液（100∶1～0∶1，V/V）梯度洗脫，洗脫液每500 mL收集一份，以薄層色譜（10 cm×20 cm）檢視，合并相似洗脫餾分并減壓濃縮，共分得17 個(gè)餾分，依次編號(hào)為JHA～JHQ；其中，JHI組分經(jīng)中壓液相色譜（30 cm×4 cm），以甲醇溶液（30%～100%）梯度洗脫，洗脫液每50 mL收集一份，以薄層色譜（10 cm×20 cm）檢視，合并相似餾分并減壓濃縮，最后得到15 個(gè)餾分（JHI-1～JHI-15），其中JHI-2經(jīng)過葡聚糖凝膠SephadexLH-20柱色譜、硅膠制備薄層色譜（20 cm×20 cm）、高效液相色譜分離得到化合物1～5，JHI-2經(jīng)過葡聚糖凝膠SephadexLH-20柱色譜、硅膠制備薄層色譜反復(fù)制備得到化合物6和化合物7。

1.3.2 抗氧化活性測定

由于化合物7（香草醛）為植物常見化學(xué)成分，在植物姜黃中不屬于具有代表性的成分，因此本實(shí)驗(yàn)選擇化合物1～6進(jìn)行抗氧化活性篩選。

1.3.2.1 ABTS陽離子自由基清除測定

參照曾維才等[15]的方法，稍有改變。用超純水配制40 mL含ABTS（7 mmol/L）與過硫酸鉀（2.45 mmol/L）的混合溶液，使其在23 ℃的暗處避光反應(yīng)16 h，制備得到ABTS基液。然后取2 mL基液用超純水稀釋，制得在734 nm波長處吸光度為0.70±0.02的ABTS工作液。取80 μL不同濃度化合物的95%乙醇溶液與400 μL的ABTS工作液混勻，23 ℃孵育6 min，孵育液置于96 孔板中用酶標(biāo)儀測定[16-17]，不同濃度的孵育液分別設(shè)置3 個(gè)孔，每孔150 μL，測量反應(yīng)混合物在734 nm波長處的吸光度，吸光度取平均值，以VC作陽性對照，95%乙醇溶液作空白對照。ABTS陽離子自由基清除率按公式（1）計(jì)算：

式中：A1為化合物孵育液吸光度；A0為空白對照組孵育液吸光度。

1.3.2.2 DPPH自由基清除率測定

參考曾維才等[15]的方法，稍有改變。以95%乙醇溶液為溶劑配制濃度為0.1 mmol/L的DPPH溶液，此溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用。取250 μL不同濃度的受試物溶液同250 μL DPPH溶液混合，25 ℃避光孵育30 min，孵育液置于96 孔板中測定，不同濃度的孵育液分別設(shè)置3 個(gè)孔，每孔150 μL，測量反應(yīng)混合物在517 nm波長處的吸光度，吸光度取平均值，以VC作陽性對照，95%乙醇溶液作空白對照。DPPH自由基清除率按公式（2）計(jì)算：

式中：A1為化合物孵育液吸光度；A0為空白對照組孵育液吸光度。

1.3.2.3 還原力測定

參考曾維才等[15]的方法，稍有改變。取100 μL不同濃度的受試物溶液，與100 μL磷酸緩沖液（0.2 mmol/L，pH 6.6）和100 μL質(zhì)量分?jǐn)?shù)l%鐵氰化鉀溶液混勻，50 ℃孵育20 min，迅速冷卻，加入100 μL質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%三氯乙酸溶液，混合后，加入100 μL超純水和20 μL 0.1%三氯化鐵溶液，混勻，混合液置于96 孔板中測定，不同濃度的混合液分別設(shè)置3 個(gè)孔，每孔150 μL，測量反應(yīng)混合物在700 nm波長處的吸光度，吸光度取平均值，以VC為陽性對照，95%乙醇溶液為空白對照。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

ABTS陽離子自由基清除實(shí)驗(yàn)和DPPH自由基清除率測定實(shí)驗(yàn)的半抑制濃度IC50值用SPSS 18.0的Probit Regression計(jì)算；還原力測定實(shí)驗(yàn)吸光度與給藥濃度之間的關(guān)系以GraphPad Prism 5繪制折線圖表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 化合物結(jié)構(gòu)鑒定

本實(shí)驗(yàn)共分離鑒定得到7 個(gè)化合物，依次編號(hào)為化合物1～7，采用Bruker-500核磁共振波譜儀，以氘代丙酮（CD3COCD3）為溶劑，對化合物1～7進(jìn)行核磁共振氫譜分析，以Waters Synapt G2高分辨質(zhì)譜儀對化合物1～7進(jìn)行分子式、分子質(zhì)量分析，將化合物1～7以硅膠GF254為載體進(jìn)行薄層展開，以多功能暗箱式紫外透射儀、10%硫酸乙醇試劑對化合物進(jìn)行檢視，研究其理化性質(zhì)，以FeCl3試劑進(jìn)行酚羥基反應(yīng)驗(yàn)證其化學(xué)結(jié)構(gòu)中酚羥基的有無。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，化合物4為新天然產(chǎn)物，化合物1、2、3和6為姜黃屬首次發(fā)現(xiàn)，化合物7為香草醛（略去），結(jié)構(gòu)鑒定如圖1所示。

圖1 化合物1～6化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig. 1 Chemical structures of compounds 1 to 6

化合物1：無色油狀物，[α]D25=＋9.76（c 0.27,EtOH），以多功能暗箱式紫外透射儀進(jìn)行薄層檢視，在254 nm波長處呈現(xiàn)明顯的暗斑，硫酸乙醇顯色為藍(lán)紫色，與FeCl3反應(yīng)呈陽性，HR-ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z 219.089 6[M＋Na]＋，提示其分子式為C11H16O3（理論計(jì)算值C11H16O3Na，219.099 7），不飽和度為4。1H NMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：7.23（1H，s，Ar-OH），6.81（1H，s，H-2’），6.72（1H，d，J = 8.0 Hz，H-5’），6.64（1H，d，J = 8.0 Hz，H-6’），3.82（3H，s，—OCH3），3.72（1H，m，H-2），3.47（1H，d，J = 5.0 Hz，—OH），2.66（1H，m，H-4a），2.56（1H，m，H-4b），1.67（2H，m，H-3a，H-3b），1.14（3H，d，J = 6.0 Hz，—CH3）。以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)[18]對照一致，鑒定為Zingerol，結(jié)構(gòu)式見圖1。

化合物2：無色油狀物，以多功能暗箱式紫外透射儀進(jìn)行薄層檢視，在254 nm波長處呈現(xiàn)明顯的暗斑，硫酸乙醇顯色為藍(lán)紫色，與FeCl3反應(yīng)呈陽性，HR-ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z 247.095 3[M＋Na]＋，提示其分子組成為C12H16O4（理論計(jì)算值C12H16O4Na，247.084 1），不飽和度為5。1H NMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：7.33（1H，br s，Ar-OH），6.85（1H，d，J = 2.0 Hz，H-2’），6.73（1H，d，J = 8.0 Hz，H-5’），6.67（1H，dd，J = 8.0，2.0 Hz，H-6’），4.07（2H，q，J = 7.0 Hz，—CH2—），3.83（3H，s，—OCH3），2.82（2H，t，J = 7.5 Hz，H-3a，H-3b），2.56（2H，t，J = 7.5 Hz，H-2a，H-2b），1.19（3H，t，J = 7.0 Hz，—CH3）。以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)[19]對照一致，鑒定為Dihydroferulic acid ethyl ester，結(jié)構(gòu)式見圖1。

化合物3：無色油狀物，以多功能暗箱式紫外透射儀進(jìn)行薄層檢視，在254 nm波長處呈現(xiàn)明顯的暗斑，硫酸乙醇顯色為藍(lán)紫色，與FeCl3反應(yīng)呈陽性，HR-ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z 217.082 5[M＋Na]＋，推測其分子式為C11H14O3（理論計(jì)算值C11H14O3Na，217.084 1），不飽和度為5。1H NMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：8.16（1H，br s，Ar-OH），7.05（2H，d，J = 8.5 Hz，H-2’，H-6’），6.74（2H，d，J = 8.5 Hz，H-3’，H-5’），4.06（2H，q，J = 7.0 Hz，—CH2—），2.81（2H，t，J = 7.5 Hz，H-3a，H-3b），2.53（2H，t，J = 7.5 Hz，H-2a，H-2b），1.18（3H，t，J = 7.0 Hz，—CH3）。以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)[20]對照一致，鑒定為乙基-3-(4-羥基-苯基)-丙酸乙酯，結(jié)構(gòu)式見圖1。

化合物4：無色油狀物，以多功能暗箱式紫外透射儀進(jìn)行薄層檢視，在254 nm波長處呈現(xiàn)明顯的暗斑，硫酸乙醇顯色為藍(lán)紫色，與FeCl3反應(yīng)呈陽性，HR-ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z 409.163 4[M＋Na]＋，提示其分子式為C22H26O6（理論計(jì)算值C22H26O6Na，409.162 7），不飽和度為10。1H NMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：6.84（2H，d，J = 2.0 Hz，H-2，H-2’），6.71（2H，d，J = 2.0 Hz，H-4，H-4’），3.86（6H，s，—OCH3×2），2.79（8H，s，H-1a，H-1b，H-1a’，H-1b’，H-2a，H-2b，H-2a’，H-2b’），2.10（6H，s，—CH3×2）。以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)[21]對照，鑒定為化合物Zingerone dimer [4,4’-(6,6’-dihydroxy-5,5’-dimethoxy-[1,1’-biphenyl]-3,3’-diyl)bis(butan-2-one)]，該化合物為首次從植物中分離鑒定，為新穎的天然產(chǎn)物，且為化合物5的二聚體，結(jié)構(gòu)式見圖1。

化合物5：無色油狀物，以多功能暗箱式紫外透射儀進(jìn)行薄層檢視，在254 nm波長處呈現(xiàn)明顯的暗斑，硫酸乙醇顯色為藍(lán)紫色，與FeCl3反應(yīng)呈陽性，HR-ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z 217.083 8[M＋Na]＋，提示其分子式為C11H14O3（理論計(jì)算值C11H14O3Na，217.084 1），不飽和度為5。1H NMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：7.28（1H，s，Ar-OH），6.82（1H，d，J = 2.0 Hz，H-2’），6.71（1H，d，J = 8.0 Hz，H-5’），6.64（1H，dd，J = 8.0，2.0 Hz，H-6’），3.82（3H，s，—OCH3），2.74（4H，s，H-3a，H-3b，H-4a，H-4b)，2.08（3H，s，—CH3）。以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)[22]對照一致，鑒定為姜酮，結(jié)構(gòu)式見圖1。

化合物6：無色油狀物，以多功能暗箱式紫外透射儀進(jìn)行薄層檢視，在254 nm波長處呈現(xiàn)明顯的暗斑，硫酸乙醇顯色為藍(lán)紫色，與FeCl3反應(yīng)呈陰性，HR-ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z 231.099 6[M＋Na]＋，提示其分子式為C12H16O3（理論計(jì)算值C12H16O3Na，231.099 7），不飽和度為5。1H NMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：6.83（1H，s，H-2’），6.82（1H，d，J = 8.0 Hz，H-5’），6.72（1H，dd，J = 8.0，2.0 Hz，H-6’），3.78（3H，s，—OCH3at C4’），3.76（3H，s，—OCH3at C3’），2.76（4H，s，H-3a，H-3b，H-4a，H-4b），2.08（3H，s，—CH3）。以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)[23]對照，鑒定為化合物4-(3,4-二甲氧基苯基)丁烷-2-酮，結(jié)構(gòu)式見圖1。

化合物7：無色油狀物，有特殊香味，以多功能暗箱式紫外透射儀進(jìn)行薄層檢視，在254 nm波長處呈現(xiàn)明顯的暗斑，硫酸乙醇顯色為藍(lán)紫色，與FeCl3反應(yīng)呈陽性，HR-ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z 175.031 4[M＋Na]＋，提示其分子式為C8H8O3（理論計(jì)算值C8H8O3Na，175.037 1），不飽和度為6。1H NMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：9.82（1H，s，—CHO），7.45（1H，d，J = 8.0 Hz，H-6），7.44（1H，s，H-2），7.00（1H，d，J = 8.0 Hz，H-5），3.93（3H，s，—OCH3）。以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)[24]對照，鑒定為香草醛。

2.2 化合物的抗氧化活性

2.2.1 ABTS陽離子自由基的清除

表1 化合物1～6對ABTS陽離子自由基、DPPH自由基的IC50Table 1 Half maximal inhibitory concentration (IC50) of compounds 1 to 6 against ABTS radical cations and DPPH radicals

根據(jù)不同濃度受試物對ABTS溶液吸光度的影響測定天然產(chǎn)物對ABTS陽離子自由基的清除能力，該方法最早由Miller等提出[25]。如表1所示，陽性對照VC的IC50為（13±1.1）μmol/L，化合物1～6中，化合物1對ABTS陽離子自由基的清除效果最好，IC50為（3±0.2）μmol/L，效果遠(yuǎn)強(qiáng)于陽性對照，化合物2效果和VC效果相當(dāng)，化合物3效果為VC的1/2，化合物4對ABTS陽離子自由基有一定的清除效果，化合物5對ABTS陽離子自由基清除作用較弱，化合物6與陽性對照對比清除作用非常弱，幾乎無效。

2.2.2 DPPH自由基的清除

DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)中，受試物給出的氫原子與DPPH自由基結(jié)合，使反應(yīng)溶液的吸光度發(fā)生變化，通過比較實(shí)驗(yàn)組與空白組溶液吸光度的變化評(píng)價(jià)受試物的抗氧化活性結(jié)果[26]。如表1所示，陽性對照VC對DPPH自由基清除率的IC50為（7±0.3）μmol/L，效果最好的是2號(hào)化合物，IC50為（16±1.2）μmol/L，清除效果約為陽性對照的1/2，另外化合物1清除DPPH自由基的效果也較好，IC50為（65±4.4）μmol/L，化合物4、5對DPPH自由基有一定的清除效果，化合物6對DPPH幾乎無清除作用。

2.2.3 還原力

研究表明，還原能力是表征物質(zhì)在氧化還原反應(yīng)中給出電子自身發(fā)生氧化的能力，既是物質(zhì)抗氧化活性的重要表現(xiàn)，又是對其抗氧化能力的合理解釋[27]，研究中通常采用三價(jià)鐵離子還原法觀察物質(zhì)的還原能力，吸光度越高，還原能力越強(qiáng)[28]，化合物1、2、4及VC還原能力篩選時(shí)選擇的濃度分別為0.250、0.125、0.063、0.032、0.016 μmol/mL，結(jié)果如圖2所示?；衔?還原能力最強(qiáng)，其5 個(gè)濃度梯度的吸光度均高于VC，化合物2在濃度低于0.125 μmol/mL時(shí)還原能力強(qiáng)于VC，超出0.125 μmol/mL時(shí)還原力與VC逐漸接近，在篩選濃度范圍內(nèi)，化合物4具有一定的還原能力，但是比VC更弱?；衔?、5、6還原能力篩選時(shí)，選擇的濃度為1.000、0.500、0.250、0.125、0.063 μmol/mL，如圖2所示，其還原能力遠(yuǎn)弱于VC，因此其抗氧化能力很弱。

圖2 化合物1～6還原力Fig. 2 Reducing power of compounds 1-6

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)對姜黃醇提物乙酸乙酯部位的化學(xué)成分進(jìn)行了分離，共分離得到了7 個(gè)單體化合物，分別為Zingerol（1）、Dihydroferulic acid ethyl ester（2）、乙基-3-(4-羥基-苯基)-丙酸乙酯（3）、Zingerone dimer[4,4’-(6,6’-dihydroxy-5,5’-dimethoxy-[1,1’-biphenyl]-3,3’-diyl)bis(butan-2-one)]（4）、姜酮（5）、4-(3,4-二甲氧基苯基)丁烷-2-酮（6）、香草醛（7）。從生源途徑看，姜黃中含有大量的姜黃素，其母核為二苯庚烷，骨架可通過化合物1、化合物5、化合物6脂肪鏈上C-1位聚合一個(gè)相同母核的化合物而形成，化合物2、3為化合物1、5、6類似物，由此可見本實(shí)驗(yàn)分離得到的一系列化合物不是姜黃素，而是姜黃素的前體化合物；不同的是，化合物4為化合物5為通過C-5’位自身聚合而形成的二聚體，這種聚合方式在姜黃及姜黃屬植物化學(xué)成分的形成途徑中非常罕見新穎，通過美國化學(xué)學(xué)會(huì)SciFinder數(shù)據(jù)庫檢索發(fā)現(xiàn)，雖然化合物4已有化學(xué)合成產(chǎn)物，但卻是首次從自然界中發(fā)現(xiàn)的新天然產(chǎn)物，這對于將來姜黃屬植物化學(xué)成分及其生物合成途徑研究具有重要的指導(dǎo)意義。

本實(shí)驗(yàn)采用ABTS陽離子自由基清除實(shí)驗(yàn)、DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)、還原力實(shí)驗(yàn)對分離得到的化合物1～6進(jìn)行了抗氧化能力評(píng)價(jià)，綜合3 種實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，化合物1的抗氧化能力最強(qiáng)，且活性總體強(qiáng)于陽性對照VC，另外化合物2的抗氧化能力也較強(qiáng)，稍微弱于陽性對照VC，除化合物6以外，其余化合物均有一定的抗氧化能力，不同方法活性略有不同。6 種化合物中，只有化合物1脂肪鏈的2位被羥基取代，其余均為羰基，根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，化合物羥基取代的有無及位置對其抗氧化活性具有影響[29]，因此本實(shí)驗(yàn)推測化合物1抗氧化能力最強(qiáng)的原因可能是由于其脂肪鏈上有羥基取代，脂肪鏈2位上的羥基有無對其抗氧化活性具有重要影響。在此研究基礎(chǔ)上，結(jié)合化合物6在3 種抗氧化實(shí)驗(yàn)中抗氧化能力都極其微弱，其結(jié)構(gòu)式中羥基全部甲基化，而另外5 個(gè)化合物具有一定的抗氧化活性，其結(jié)構(gòu)式中只有部分羥基甲基化，均具有1～2 個(gè)羥基，張華等[30]報(bào)道過酚羥基的甲基化會(huì)降低一些酚類物質(zhì)的自由基清除能力，酚羥基數(shù)目越多，抗氧化活性越強(qiáng)，本研究也印證了其觀點(diǎn)。同時(shí)，本次分離得到的酚類化合物均顯示了一定程度的抗氧化活性，表明姜黃醇提物中的酚類成分是姜黃抗氧化活性的物質(zhì)基礎(chǔ)之一。