腦和肌肉芳香烴受體核轉(zhuǎn)運(yùn)樣蛋白1基因調(diào)控口腔及全身骨代謝的作用

鄧詩(shī)勇 宮蘋 譚震

口腔疾病研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 國(guó)家口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心四川大學(xué)華西口腔醫(yī)院種植科 成都610041

作為人體重要器官，骨具有支持、運(yùn)動(dòng)、存儲(chǔ)礦物質(zhì)等作用，維持著人體進(jìn)行正常的生理功能。骨的發(fā)育過(guò)程中，四肢骨、軀干骨及顱底骨等主要由軟骨內(nèi)成骨形成，該過(guò)程由軟骨細(xì)胞為主導(dǎo)；頜骨、鎖骨則由膜內(nèi)成骨形成，由間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞以直接形成骨[1]。骨組織并非一成不變，而是處于動(dòng)態(tài)平衡之中，其中涉及骨形成與骨吸收，在多種因素下維持著動(dòng)態(tài)平衡，一方面，軟骨細(xì)胞與成骨細(xì)胞形成正常骨組織并發(fā)育成熟，另一方面，破骨細(xì)胞與成骨細(xì)胞相互作用與制約，二者的平衡與骨生理穩(wěn)定至關(guān)重要[2]。骨代謝異常則可能導(dǎo)致疾病發(fā)生或誘發(fā)并發(fā)癥，因而研究骨相關(guān)細(xì)胞活動(dòng)及調(diào)控機(jī)制，對(duì)于相關(guān)疾病的防治具有十分重要的意義。

腦和肌肉芳香烴受體核轉(zhuǎn)運(yùn)樣蛋白1（brain and muscle aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator-like protein 1，Bmal1）基因廣泛參與調(diào)節(jié)生物體內(nèi)生理活動(dòng)。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)其在骨生理及病理過(guò)程上起著重要作用[3]。通過(guò)影響間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨向分化、軟骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞的功能[4-6]，Bmal1基因分別從骨形成與骨吸收兩方面參與調(diào)控骨生理，但其中的分子機(jī)制尚無(wú)定論。近年來(lái)，發(fā)現(xiàn)多種疾病中存在晝夜節(jié)律的變化，時(shí)相療法的概念也應(yīng)運(yùn)而生[7]，骨組織中，包括顱面部骨，存在著節(jié)律的變化[8-9]，而牙槽骨的骨量變化一直是口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要課題，因而探究骨代謝性疾病的晝夜節(jié)律調(diào)控機(jī)制具有重要意義。本文就Bmal1基因調(diào)控骨組織生理活動(dòng)的研究進(jìn)展作一綜述，分析其中可能的分子機(jī)制，并討論其在口腔及全身相關(guān)骨代謝疾病診療中可能發(fā)揮的作用。

1 Bmal1基因是參與機(jī)體正常生理活動(dòng)的重要調(diào)節(jié)因子

對(duì)哺乳動(dòng)物來(lái)說(shuō)，大多數(shù)生理活動(dòng)都在近日鐘基因調(diào)節(jié)下，遵循24 h的晝夜節(jié)律，這種節(jié)律受外界光強(qiáng)、溫度等因素的影響，環(huán)境信號(hào)的變化主要通過(guò)視網(wǎng)膜感知并傳輸至視交叉上核，并進(jìn)一步作用于組織細(xì)胞中的局部振蕩系統(tǒng)。近日鐘基因包括Bmal1、生物鐘循環(huán)輸出蛋白（circadian locomotor output cycles kaput，Clock）基因、周期（period，Per）基因家族、隱花色素（cryptochrome，Cry）家族及維甲酸相關(guān)孤兒受體等成員，Bmal1與Clock二者表達(dá)蛋白形成二聚體結(jié)合到Per與Cry基因啟動(dòng)子的E-box區(qū)域進(jìn)而調(diào)控其表達(dá)，當(dāng)Per與Cry表達(dá)達(dá)到峰值，反過(guò)來(lái)抑制Bmal1與Clock的表達(dá)，如此隨著時(shí)間推移周而復(fù)始，形成周期振蕩的負(fù)反饋調(diào)節(jié)系統(tǒng)[10]。

口腔及全身生理過(guò)程中廣泛地存在著節(jié)律振蕩及其調(diào)控，如人的牙齦及牙周膜成纖維細(xì)胞、牙髓來(lái)源干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞等均被發(fā)現(xiàn)表達(dá)近日鐘的組分[11-12]，機(jī)體生物節(jié)律的紊亂，尤其是Bmal1基因的表達(dá)降低可能誘發(fā)一系列疾病的發(fā)生。若敲除Bmal1基因，正常的生物節(jié)律被破壞，敗血癥、阻塞性肺部疾病、阻塞性睡眠呼吸暫停等疾病的風(fēng)險(xiǎn)將增加，其炎癥發(fā)展將更為嚴(yán)重，其在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌的診斷及預(yù)后判斷中也存在潛在的應(yīng)用價(jià)值[13]；晝夜節(jié)律的破壞，也將進(jìn)一步導(dǎo)致機(jī)體的衰老變化，如白內(nèi)障、皮下脂肪減少及器官萎縮等[14]。作為衰老的主要癥狀之一，骨的增齡性改變。同樣，受Bmal1的調(diào)控：8周齡Bmal1-/-基因敲除小鼠骨吸收增加，骨量明顯減少[5]；相比野生型小鼠，16周齡的Bmal1-/-小鼠脛骨長(zhǎng)度更短[15]。研究發(fā)現(xiàn)，顱骨的礦化發(fā)育過(guò)程存在周期性，且與Per基因的表達(dá)節(jié)律相關(guān)[9]，包括Bmal1在內(nèi)的多個(gè)近日鐘基因元件在顱骨、牙槽骨及牙骨質(zhì)中均有節(jié)律振蕩的表達(dá)[16-17]，亦能影響正畸治療的過(guò)程中牙周組織的重塑[18]，而Bmal1-/-小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）表達(dá)升高，出現(xiàn)下頜骨發(fā)育不全的癥狀[19]。

近年來(lái)，在骨代謝領(lǐng)域，Bmal1的作用日益受到關(guān)注；另外，隨著中國(guó)人口老齡化的加劇，骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎等增齡性疾病亟待解決，在口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，在中老年患者群體中，牙周炎骨質(zhì)喪失、種植體的成功率等問題也需要密切關(guān)注。因此，從時(shí)間生物學(xué)角度，研究骨的衰老變化及骨髓微環(huán)境中相關(guān)細(xì)胞的生理活動(dòng)，可為相關(guān)骨代謝疾病提供新的思路，具有廣闊的前景。

2 Bmal1基因通過(guò)多種途徑調(diào)控骨生理

2.1 Bmal1基因可調(diào)控MSCs成骨-成脂分化

間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）有多種組織來(lái)源，具有自我更新和多向分化潛能，在組織再生工程中被廣泛使用，其增殖能力及分化命運(yùn)的誘導(dǎo)一直是生命科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。MSCs可分化為成骨細(xì)胞，在骨生理研究領(lǐng)域同樣受到廣大學(xué)者的密切關(guān)注。Bmal1基因與MSCs成骨分化關(guān)系十分密切。研究[8]發(fā)現(xiàn)，MSCs中的近日鐘基因Bmal1與Per3二者表達(dá)亦呈8~12 h的交替節(jié)律變化，符合一般生物節(jié)律。Bmal1在包括骨髓的多種人體組織中廣泛表達(dá)，隨著間充質(zhì)干細(xì)胞的老化，Bmal1表達(dá)呈增齡性降低，而其表達(dá)水平下降與MSCs的衰老與成骨分化能力的降低明顯相關(guān)[20]。另外，老化相關(guān)的細(xì)胞內(nèi)在因子改變可干擾MSCs的成骨-成脂平衡，更多轉(zhuǎn)向成脂分化，而其成脂分化的過(guò)程同樣受Bmal1調(diào)控[21]。通過(guò)轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)MSCs的Bmal1基因，能促進(jìn)其增殖及成骨分化能力[22]，負(fù)向干擾Bmal1基因得出了同樣的結(jié)論[23]；過(guò)表達(dá)Bmal1基因的負(fù)向調(diào)節(jié)因子Reverbα，其增殖與成骨能力則相應(yīng)減弱[24]。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)同樣表明Bmal1基因通過(guò)調(diào)控MSCs的成骨分化能力進(jìn)而調(diào)節(jié)骨量[25]，糖尿病引起代謝失衡，導(dǎo)致骨喪失，過(guò)表達(dá)Bmal1也能恢復(fù)MSCs被抑制的成骨分化能力[26]。如今種植義齒已經(jīng)成為牙列缺損或缺失的首選修復(fù)方法之一，種植體植入牙槽骨后形成特殊的異源物微環(huán)境，其中MSCs的成骨分化能力對(duì)種植體—骨之間形成直接的骨結(jié)合至關(guān)重要[27]?？梢院侠硗茰y(cè)，Bmal1基因參與到種植體骨結(jié)合的形成及維持。一項(xiàng)研究通過(guò)全基因組芯片分析，發(fā)現(xiàn)種植體周組織節(jié)律基因表達(dá)明顯變化[28]，在其中Bmal1的上調(diào)更為顯著。而目前最常使用的是鈦種植體，在鈦生物材料表面培養(yǎng)MSCs，誘導(dǎo)了神經(jīng)元PAS結(jié)構(gòu)域蛋白2與Bmal1的異常共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)[29]。

Bmal1調(diào)控MSCs成骨分化的核心機(jī)制，目前尚缺乏定論。作為MSCs成骨分化的最為核心的信號(hào)通路之一，Wnt/β-連環(huán)蛋白通路被證實(shí)與Bmal1在促進(jìn)成骨分化上存在協(xié)同作用，Bmal1基因轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中，核心因子β-連環(huán)蛋白的表達(dá)明顯增強(qiáng)[30]，但二者在成骨中的相互作用機(jī)制需要進(jìn)一步研究。另外，MSCs的老化與細(xì)胞周期相關(guān)p53/p21信號(hào)激活密切相關(guān)，而Bmal1對(duì)該通路起到抑制作用[31-32]，糖尿病導(dǎo)致的MSCs成骨分化能力減弱同樣與Bmal1對(duì)p53信號(hào)通路的調(diào)控有關(guān)[33]，這也為Bmal1調(diào)控成骨分化的機(jī)制研究提供了可能思路；而有染色質(zhì)免疫沉淀分析表明低氧應(yīng)激通路作為與MSCs老化息息相關(guān)的調(diào)節(jié)因子，與Bmal1之間存在串?dāng)_[34]。綜上可見，Bmal1基因參與調(diào)節(jié)多方面生命活動(dòng)，與多種信號(hào)通路形成了復(fù)雜的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，因此調(diào)控MSCs成骨分化機(jī)制研究線索雖眾，但缺乏有力證據(jù)明確其核心通路。

2.2 Bmal1基因參與維持軟骨細(xì)胞功能

生長(zhǎng)板軟骨細(xì)胞主導(dǎo)的軟骨內(nèi)成骨形成，對(duì)個(gè)體四肢發(fā)育具有重要作用。通過(guò)測(cè)定軟骨細(xì)胞的有絲分裂指數(shù)、生長(zhǎng)板高度，表明軟骨組織同樣具有晝夜節(jié)律[35]，超過(guò)600個(gè)軟骨細(xì)胞表達(dá)的基因具有節(jié)律性，隨著細(xì)胞老化，軟骨的晝夜節(jié)律振蕩幅度還將明顯降低[36]。作為節(jié)律基因的核心因子，Bmal1基因參與維持軟骨完整及軟骨細(xì)胞功能。關(guān)節(jié)內(nèi)間充質(zhì)干細(xì)胞的Bmal1基因被敲除后，表現(xiàn)出更強(qiáng)的促炎性，軟骨發(fā)育受到抑制[37]。骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）的核心病理機(jī)制便是軟骨細(xì)胞的功能異常與退化，已經(jīng)證明在OA患者及老年小鼠軟骨組織中BMAL1表達(dá)水平降低，軟骨細(xì)胞中靶向敲除Bmal1基因，導(dǎo)致了小鼠關(guān)節(jié)軟骨的退化，下游軟骨主要基質(zhì)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子SOX9，聚蛋白多糖和Ⅱ型膠原蛋白Col2a1的表達(dá)降低[38]。

新近研究發(fā)現(xiàn)，Bmal1基因的敲除明顯抑制了軟骨細(xì)胞的增殖，MMP13表達(dá)增加，它的機(jī)制可能是通過(guò)低氧誘導(dǎo)因子（hypoxia inducible factor，HIF）介導(dǎo)的信號(hào)通路[4]。BMAL1與HIF1α具有相似的蛋白結(jié)構(gòu)域，二者相互作用，而作為HIF1的主要調(diào)控靶點(diǎn)之一，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）作用于生長(zhǎng)板軟骨最后轉(zhuǎn)化為骨組織的血管化過(guò)程[39]。可以看到，HIF1所代表的低氧誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，不論是與軟骨細(xì)胞還是成骨細(xì)胞均有密切關(guān)系，Bmal1通過(guò)這一途徑同時(shí)參與調(diào)控膜內(nèi)成骨與軟骨成骨，值得進(jìn)一步探索其在骨代謝相關(guān)領(lǐng)域的作用。此外，Akagi等[40]利用RNA-Seq測(cè)序推測(cè)乙型轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β也可能是Bmal1調(diào)控軟骨細(xì)胞功能的途徑之一。

2.3 Bmal1基因調(diào)控成骨-破骨平衡

成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞分別行使的骨形成與骨吸收作用是骨改建的基本方面，它們相互協(xié)同又相互制約，共同維持骨組織的穩(wěn)定，而以Bmal1為核心的近日鐘基因在其中發(fā)揮重要作用，可能是今后骨再生醫(yī)學(xué)的調(diào)控靶點(diǎn)。破骨細(xì)胞起源于單核/巨噬細(xì)胞，分化過(guò)程中核因子κB受體活化因子配體（receptor activator of nuclear factor-κB ligand，RANKL）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)起核心作用，而成骨細(xì)胞可分泌護(hù)骨素（osteoprotegrin，OPG）競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合胞膜上的RANKL蛋白，抑制破骨細(xì)胞形成[41]；反之，破骨細(xì)胞可分泌信號(hào)素Semaphorin-4Dl來(lái)抑制成骨細(xì)胞的成骨功能[42]。Bmal1基因通過(guò)調(diào)節(jié)骨形成蛋白-2/SMAD1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞的成骨活性[43]，共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明，敲除Bmal1基因的成骨細(xì)胞具有更強(qiáng)的支持破骨細(xì)胞形成的能力，說(shuō)明在二者的協(xié)同中Bmal1也起到了調(diào)節(jié)作用；Bmal1基因可上調(diào)OPG表達(dá)，進(jìn)而抑制骨吸收，當(dāng)其被特異性敲除，可以通過(guò)OPG的表達(dá)下調(diào)降低對(duì)破骨細(xì)胞分化的抑制[44]，這抑或與核因子（nuclear factor，NF）-κB通路相關(guān)。直接敲除破骨細(xì)胞Bmal1基因，對(duì)小鼠骨量無(wú)影響[45]，似乎表明Bmal1基因調(diào)控破骨細(xì)胞功能是間接作用，但晝夜節(jié)律的破壞直接影響了破骨細(xì)胞的功能，Xu等[46]提出Bmal1基因可通過(guò)與SRC家族及活化T細(xì)胞核因子的交互作用，進(jìn)而促進(jìn)破骨細(xì)胞分化，故破骨細(xì)胞特異性敲除Bmal1基因甚至增加了骨量。這種矛盾的出現(xiàn)基于成骨-破骨平衡機(jī)制的復(fù)雜性，Bmal1基因參與介導(dǎo)骨生理的雙向平衡，如何厘清其中復(fù)雜的分子調(diào)控機(jī)制，明確Bmal1基因在各方面的作用，是當(dāng)下研究其調(diào)控骨生理的難點(diǎn)。

3 Bmal1基因在異常骨代謝中的作用

Bmal1基因參與調(diào)節(jié)β-連環(huán)蛋白、HIF1、NFκB等關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)，通過(guò)復(fù)雜的分子機(jī)制，調(diào)控MSCs、成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞及軟骨細(xì)胞的生理功能，維持骨代謝平衡。當(dāng)受到外界因素刺激，平衡被打破則會(huì)引發(fā)骨代謝相關(guān)疾病或誘發(fā)并發(fā)癥，在其中Bmal1基因及其代表的生物節(jié)律亦會(huì)受到影響，并對(duì)疾病恢復(fù)起到一定作用。

3.1 Bmal1基因與牙周骨質(zhì)喪失

牙周炎是最常見的口腔慢性疾病之一，以菌斑為始動(dòng)因子，主要表現(xiàn)為牙周組織的破壞，其中包括牙槽骨的骨質(zhì)流失。牙周組織中表達(dá)晝夜節(jié)律基因，缺氧條件模擬炎癥狀態(tài)下牙周膜節(jié)律蛋白表達(dá)水平降低[47]。牙齦卟啉單胞菌（牙周炎的主要致病菌之一）可使Bmal1啟動(dòng)子甲基化，從而抑制Bmal1轉(zhuǎn)錄，Bmal1的下調(diào)介導(dǎo)NF-κB因子激活，進(jìn)一步促進(jìn)了炎癥發(fā)展[48]。目前的牙周序列治療難以修復(fù)已經(jīng)缺損的牙周組織，而組織工程技術(shù)的出現(xiàn)為牙周病治療提供了新的思路。種植體周圍炎同樣地存在著周圍骨質(zhì)的喪失，二者在臨床特征及組織病理學(xué)上有著諸多相似之處，但種植體周圍炎往往存在更多的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)[49]。如前述，Bmal1基因與種植體骨結(jié)合的形成關(guān)系緊密，在失敗的骨結(jié)合過(guò)程也發(fā)生上調(diào)。作為促進(jìn)牙周組織愈合、牙槽骨缺損修復(fù)的干細(xì)胞基礎(chǔ)，MSCs在牙周組織工程技術(shù)治療中發(fā)揮了巨大作用[50-51]。研究顯示，與牙周膜干細(xì)胞相比，MSCs的成骨分化能力更強(qiáng)，在炎癥微環(huán)境中具有更強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)作用。近年來(lái)，Bmal1基因在促進(jìn)MSCs成骨分化、逆轉(zhuǎn)干細(xì)胞衰老方面發(fā)揮的作用日益受到關(guān)注，在控制炎癥方面的作用也得到證實(shí)[52]，以此在菌斑控制的基礎(chǔ)上，將為修復(fù)牙周炎及種植體周圍炎牙周缺損提供新的思路。

3.2 Bmal1基因與骨質(zhì)疏松

衰老和婦女絕經(jīng)后狀態(tài)是骨質(zhì)疏松的兩大主因，表現(xiàn)出骨量及骨密度的下降，并導(dǎo)致骨的脆性增加，增加骨折風(fēng)險(xiǎn)。小鼠經(jīng)卵巢切除術(shù)模擬絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)包括BMAL1在內(nèi)的晝夜節(jié)律調(diào)節(jié)蛋白表達(dá)降低[53]；自然衰老小鼠骨質(zhì)退化，雖然晝夜節(jié)律正常，但應(yīng)對(duì)外界刺激時(shí)觀察到了年齡相關(guān)的運(yùn)動(dòng)節(jié)律破壞[54]。近日鐘基因中，Bmal1的調(diào)節(jié)因子維甲酸相關(guān)孤兒受體和REV-ERBα可能是骨質(zhì)疏松癥的治療靶點(diǎn)[55]，而其下游基因Cry2被證明與老年骨質(zhì)疏松患者相關(guān)[56]，Bmal1作為反饋循環(huán)中的關(guān)鍵因子，對(duì)骨質(zhì)疏松的直接作用有待證實(shí)，而鑒于Bmal1基因?qū)SCs老化的逆轉(zhuǎn)作用，可為骨質(zhì)疏松的再生治療提供可能思路。

3.3 Bmal1基因與骨關(guān)節(jié)炎

OA常發(fā)生在四肢關(guān)節(jié)處，是關(guān)節(jié)軟骨的退化損傷所導(dǎo)致，軟骨細(xì)胞的功能異?；蛲嘶谄渲姓加兄匾饔?。近年來(lái)，學(xué)者逐漸關(guān)注到骨關(guān)節(jié)炎中軟骨的生物節(jié)律破壞與可能的治療靶點(diǎn)，骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞中Per2的表達(dá)較高，而Bmal1的表達(dá)則明顯降低，提示軟骨細(xì)胞內(nèi)源性節(jié)律破壞可能是骨關(guān)節(jié)炎早期發(fā)展的關(guān)鍵[57]，而后RNA測(cè)序也證實(shí)了這一點(diǎn)[58]。而衰老作為骨關(guān)節(jié)炎的另一危險(xiǎn)因素，同樣受到Bmal1的影響。骨關(guān)節(jié)炎中軟骨細(xì)胞的特征性表型改變，如SOX9表達(dá)減少，MMP13的產(chǎn)生增加，均受Bmal1及下游基因Per2的影響[59]。Bmal1通過(guò)調(diào)控軟骨細(xì)胞功能，如形成軟骨基質(zhì)，進(jìn)而參與維持軟骨完整與修復(fù)，特異性敲除Bmal1基因，導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨的退化。HIF1、HIF2在軟骨發(fā)育中發(fā)揮重要作用，可能成為治療骨關(guān)節(jié)炎的可能靶點(diǎn)[60]，而Bmal1與HIF1之間存在交互，新近研究從體內(nèi)與體外兩方面證實(shí)了Bmal1通過(guò)HIF1/VEGF信號(hào)軸調(diào)控軟骨發(fā)育，但目前缺乏對(duì)該機(jī)制研究的疾病模型，是進(jìn)一步研究的熱點(diǎn)。除以上骨代謝相關(guān)疾病之外，還發(fā)現(xiàn)骨性下頜發(fā)育不全中Bmal1表達(dá)下調(diào)，其機(jī)制可能是Bmal1的缺失降低了OPG表達(dá)，破骨細(xì)胞分化增強(qiáng)，而國(guó)內(nèi)學(xué)者發(fā)現(xiàn)骨性下頜發(fā)育不全中Bmal1表達(dá)降低通過(guò)影響p65的磷酸化上調(diào)MMP3表達(dá)進(jìn)而抑制了成骨分化。

4 總結(jié)與展望

目前，關(guān)于Bmal1基因調(diào)控骨生理病理過(guò)程的研究尚存在一定的局限性，首先體現(xiàn)在近日鐘基因在組織中廣泛表達(dá)，在長(zhǎng)骨與頜骨中的具體作用尚且不明，同時(shí)其與眾多分子信號(hào)均有交互，因而對(duì)分子機(jī)制的研究大多淺嘗輒止，厘清其中核心的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是當(dāng)下研究的難點(diǎn)；其次，生物鐘受到外界環(huán)境、自身情緒及精神狀態(tài)等多種復(fù)雜因素的影響，需要克服多重因素的影響，構(gòu)建精準(zhǔn)的研究模型；最后，相關(guān)臨床證據(jù)不足，明確Bmal1基因在骨代謝性疾病中發(fā)揮的作用，為疾病防治提供切實(shí)理論，需要進(jìn)一步研究。

Bmal1通過(guò)對(duì)MSCs成骨分化的調(diào)控作用，為其在再生組織工程中的應(yīng)用提供了理論可行性，或可應(yīng)用于骨質(zhì)喪失的再生治療；其對(duì)機(jī)體的衰老、與低氧誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在多方面的交互，為進(jìn)一步研究調(diào)控骨生理的機(jī)制提供了可行方向。隨著我國(guó)人口老齡化的加劇，進(jìn)一步探究Bmal1基因?qū)ο掠蜗盗蟹肿有盘?hào)的作用，對(duì)探索口腔及全身骨代謝相關(guān)疾病的防治提供新的思路，具有深遠(yuǎn)意義。

利益沖突聲明：作者聲明本文無(wú)利益沖突。