血清蛋白電泳和免疫固定電泳對多發(fā)性骨髓瘤的診斷價值

郭曉聰，徐曉婭，劉偉平

［作者單位］643000四川自貢，自貢市第一人民醫(yī)院檢驗科（郭曉聰，劉偉平），神經(jīng)內(nèi)科（徐曉婭）

多發(fā)性骨髓瘤是惡性漿細胞疾病中最為常見的一種，是骨髓內(nèi)單克隆漿細胞異常增生的一種惡性腫瘤。異常漿細胞浸潤骨髓和軟組織并分泌出大量異常的單克隆免疫球蛋白，即M蛋白［1］?；颊叱３霈F(xiàn)腎功能損害、高鈣血癥、繼發(fā)感染、高黏滯綜合征等臨床問題［2］。近年來，隨著人口老齡化日趨嚴重，多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，嚴重危及患者健康和生命，該病的早期診斷和鑒別具有重要的臨床意義。以往多發(fā)性骨髓瘤的檢測手段多以骨髓涂片、免疫球蛋白定量和組織活檢為主，但由于這些檢測方法都存在一定的局限性，對多發(fā)性骨髓瘤的診斷極易造成漏診或誤診。目前血清蛋白電泳和免疫固定電泳已成為多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷的重要手段［3］。該次研究選取筆者所在醫(yī)院血液科已確診的多發(fā)性骨髓瘤患者56例，分別行血清蛋白電泳和免疫固定電泳檢測M蛋白，探討兩種檢測方法在多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷中的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年12月—2017年6月在筆者所在醫(yī)院血液科及腫瘤科住院治療的多發(fā)性骨髓瘤患者56例為研究對象，均符合國內(nèi)MM診斷標準［4］。且均為新發(fā)病例。其中男31例，女25例；年齡42.6～77.3歲，平均57.6歲。

1.2 儀器與方法 采用法國Sebia公司的capillarysminicap毛細管電泳儀，試劑為Sebia公司配套試劑。血清蛋白電泳試劑包括：緩沖液（pH9.9），沖洗液（70 ml原液加蒸餾水至 700 ml配制而成），稀釋器，試劑杯。免疫固定電泳試劑用的是即用型抗血清杯，包括：分析緩沖液（ELP溶液，黃色），抗人類γ重鏈哺乳動物免疫球蛋白 （粉紅色），抗人類α重鏈哺乳動物免疫球蛋白（深藍色），抗人類u重鏈哺乳動物免疫球蛋白（黃綠色），抗人類κ（游離和結(jié)合）輕鏈哺乳動物免疫球蛋白（淺綠色），抗人類λ（游離和結(jié)合）輕鏈哺乳動物免疫球蛋白（淺藍色）和用于樣品稀釋的特定稀釋液。

1.3 試驗方法 （1）選擇項目血清蛋白電泳，取血清2 ml置于sebia樣本架上，再放入血清蛋白電泳稀釋杯。待儀器進入準備完成狀態(tài)后進樣指示燈變綠，從儀器進樣口放入樣本架，儀器自動吸取樣本進行稀釋，電泳。完成后取出樣本架。（2）血清蛋白電泳完成后，切換項目為免疫固定電泳。將血清樣本放入樣本架，在樣本架上加載即用型抗血清杯，重新放入儀器進樣口。儀器自動吸樣進行免疫固定電泳。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計學軟件。計數(shù)資料用百分數(shù)表示，取P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 血清蛋白電泳結(jié)果 在56例多發(fā)性骨髓瘤患者中有49例患者血清蛋白電泳檢測出M蛋白 （即基底窄而均一的尖峰），且多出現(xiàn)在γ球蛋白區(qū)，少數(shù)出現(xiàn)在β區(qū)或兩區(qū)帶之間，有7例患者未檢出。見圖1。

2.2 免疫固定電泳結(jié)果 56例多發(fā)性骨髓瘤患者均檢測出M蛋白，檢出率100%；具體分型結(jié)果為：IgG κ 型 17例，λ 型 11例，IgA κ 型 13例，λ 型 9例，輕鏈型κ型2例，λ型4例。見表1。

2.3 M蛋白檢出率比較 血清蛋白電泳的M蛋白檢出率為84%（47/56），而免疫固定電泳的M蛋白檢出率則為100%（56/56），后者檢出率明顯高于前者。

圖1 多發(fā)性骨髓瘤血清蛋白電泳圖

表1 56例多發(fā)性骨髓瘤血清免疫固定電泳分型結(jié)果

3 討論

多發(fā)性骨髓瘤（MM）是一種惡性漿細胞病，其腫瘤細胞起源于骨髓中的漿細胞。病理特征為骨髓漿細胞異常增生伴有單克隆免疫球蛋白或輕鏈過度生成，主要指標表現(xiàn)為 IgG、IgA、IgE或 Bence Jones蛋白質(zhì)（游離的單克隆性κ或γ輕鏈）過度增生［5］；極少數(shù)患者可以是不產(chǎn)生M蛋白的未分泌型MM。發(fā)病率為 2～3/10萬，男女比例大概為 1.6∶1，多為40歲以上中老年人患病。MM臨床表現(xiàn)復雜，如骨痛、貧血、腎功能損害、高鈣血癥等［6］。且由于其起病徐緩，早期無明顯癥狀，容易被誤診。據(jù)相關資料顯示其誤診率高達54.00%～69.11%［7］。過去診斷多發(fā)性骨髓瘤常依據(jù)臨床癥狀，免疫球蛋白定量以及骨髓細胞形態(tài)學檢查等。但由于該病臨床癥狀多樣化且不典型，骨髓細胞形態(tài)學檢查難以和漿細胞白血病區(qū)分，免疫球蛋白增高不能與巨球蛋白血癥等疾病鑒別［8］。血清蛋白電泳在臨床實驗中已被廣泛應用于檢測樣本中的非正常蛋白質(zhì)。血清蛋白電泳可以用來檢測M蛋白，但是血清蛋白電泳也存在自身缺陷，即難以區(qū)別α2區(qū)或β區(qū)急性時反應蛋白或脂蛋白增高引起的峰型和M峰，比如多數(shù)腎病、腎小球腎炎患者α2區(qū)或β區(qū)多出現(xiàn)高尖的峰，而血清蛋白電泳不能直接認定其為M蛋白，需要通過免疫固定電泳做深入的確認。免疫固定電泳技術是一種用于分析樣品中特異性抗原的技術［9］，電泳后的蛋白質(zhì)與相應抗體形成復合物后被固定在相應的位置上，圖像清晰，易于解釋結(jié)果［10］。多項研究表明［11，12］，免疫固定電泳法在 MM 的診斷價值明顯高于血清蛋白電泳。所以，目前血清蛋白電泳和免疫固定電泳就成為了診斷多發(fā)性骨髓瘤的重要手段。

該次試驗選取了近半年時間在該院血液科住院確診的多發(fā)性骨髓瘤患者56例，分別做血清蛋白電泳和免疫固定電泳檢測。結(jié)果顯示，56例多發(fā)性骨髓瘤患者中，血清蛋白電泳的M蛋白檢出率為84%，而免疫固定電泳的M蛋白檢出率則為100%。進一步進行分型提示：IgGκ型17例，λ型11例，IgA κ型13例，λ型9例，輕鏈型κ型2例，λ型4例。

綜上，血清蛋白電泳能快速、準確地對血清蛋白進行分析，并且圖譜清晰，能初步分離鑒別出血清中的M蛋白。而免疫固定電泳在快速分離鑒別M蛋白方面有顯著優(yōu)勢，且可對M蛋白進行分型，相比于骨髓細胞形態(tài)學檢查和血清蛋白電泳具有更快速簡單，更準確的特點。當血清蛋白電泳結(jié)果出現(xiàn)異常峰時須做免疫固定電泳明確診斷和分型。因此，血清蛋白電泳只能作為多發(fā)性骨髓瘤的初篩診斷，而免疫固定電泳是多發(fā)性骨髓瘤診斷和確診的重要手段。