KLF4、Ki-67及E-cadherin在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義

石 芳 趙建芳

鋅指轉(zhuǎn)錄因子Krtippel樣因子4(KLF4)主要參與胚胎發(fā)育及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，可有效抑制多種腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲及遷移。Ki-67是與細(xì)胞增殖特異相關(guān)的一種核抗原，能夠反映細(xì)胞增殖的活性狀態(tài)，常被作為腫瘤細(xì)胞增殖性標(biāo)志基因。E鈣黏蛋白(E-cadherin)是反映上皮細(xì)胞正常功能的重要指標(biāo)，可作為腫瘤轉(zhuǎn)移、侵襲評價的重要指標(biāo)。在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中，KLF4及Ki-67于細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)，E-cadherin于細(xì)胞膜及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)。有研究表明，KLF4、Ki-67及E-cadherin在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)與其病理特征具有密切關(guān)系[1]。本研究主要探討KLF4、Ki-67及E-cadherin在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)與臨床特征的相關(guān)性，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

以我院2012年12月至2017年12月收治的79例確診為宮頸鱗狀細(xì)胞癌的患者為研究對象，所有患者均經(jīng)病理學(xué)診斷為宮頸鱗狀細(xì)胞癌，病例資料完整，患者年齡33～72歲，平均(53.68±3.15)歲；腫瘤直徑1～8 cm，平均(4.56±0.38)cm；臨床分期：Ⅰ～Ⅱ期71例，Ⅲ期8例；低分化癌28例，中、高分化癌51例；淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移24例，無轉(zhuǎn)移55例；有局部浸潤7例，無局部浸潤72例。

1.2 方法

KLF4(1∶100)、 Ki-67抗體、(1∶1 500)及E-cadherin(1∶50) 均購自Sigma公司，Max VisionTM試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。采用MaxVision兩步SP法對KLF4、Ki-67及E-cadherin在宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)進(jìn)行分析。取4 μm厚切片，常規(guī)脫蠟至水后進(jìn)行高溫高壓熱修復(fù)，并嚴(yán)格按照試劑盒上的說明書進(jìn)行操作。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

KLF4在細(xì)胞核上定位表達(dá)，核中出現(xiàn)黃色顆粒、結(jié)合其百分率及染色強(qiáng)度進(jìn)行綜合評分判斷：>10%則為陽性(+)，≤10%則為陰性(-)[2]。Ki-67采用陽性率評分，陽性率在30%以內(nèi)則為低表達(dá)，陽性率在30%及以上則為高表達(dá)[3]。E-cadherin采用陽性率及陽性強(qiáng)度評分，陽性率：0分：5%以內(nèi)，1分：>5%～25%，2分：>25%～50%，3分：>50%～75%， 4分：>75%及以上。染色強(qiáng)度：0分：未著色，1分：淡黃色，2分：棕黃色，3分：棕褐色。兩項(xiàng)乘積得分≤8分則為低表達(dá)，9分及以上則為高表達(dá)[4]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件包，等級資料之間比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)，行χ2檢驗(yàn)，采用Pearson分析法分析三者的相關(guān)性，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 KLF4在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)與病理特征的關(guān)系

在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中KLF4的表達(dá)僅與腫瘤分化程度、Ki-67及E-cadherin表達(dá)有關(guān)(P<0.05)，而與患者的年齡、臨床分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)及局部浸潤無關(guān)(P>0.05)。KLF4表達(dá)與Ki-67增殖指數(shù)呈負(fù)相關(guān)，與E-cadherin表達(dá)呈正相關(guān)，見表1。

2.2 Ki-67及E-cadherin在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)與病理特征的關(guān)系

在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中Ki-67及E-cadherin的表達(dá)僅與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分化程度有關(guān)(P<0.05)，而與患者的年齡、臨床分期、腫瘤大小、局部浸潤無關(guān)(P>0.05)。E-cadherin與Ki-67的表達(dá)無明顯相關(guān)性(P>0.05)，見表2。

表1 KLF4在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)與病理特征的關(guān)系(例，%)

3 討論

宮頸鱗狀細(xì)胞癌是宮頸癌中最為常見的1種組織學(xué)類型，其發(fā)生往往從慢性宮頸炎逐漸發(fā)展為宮頸上皮內(nèi)瘤變，再到癌變的過程。針對宮頸鱗狀細(xì)胞癌臨床上常采用手術(shù)聯(lián)合放化療手段進(jìn)行，為評價其治療效果、判斷預(yù)后，臨床上一直在尋找可以預(yù)測腫瘤轉(zhuǎn)移以及預(yù)后的生物標(biāo)記物，以期為臨床提供參考。

KLF4是1個復(fù)雜干性轉(zhuǎn)錄因子，其異常表達(dá)可有效評估腫瘤發(fā)生、發(fā)展。有研究表明[5]，KLF4在肺癌及消化道類癌中的表達(dá)均可顯著發(fā)揮腫瘤抑制因子的功能，抑制腫瘤的侵襲及遷移，而在乳腺癌中則可促進(jìn)癌細(xì)胞的侵襲和遷移，可見KLF4可通過誘導(dǎo)不同靶基因的表達(dá)，對癌基因發(fā)揮不同作用，其結(jié)果與宋暉等報道一致[6]。本研究結(jié)果表明，在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中KLF4的表達(dá)僅與組織學(xué)分級、Ki-67及E-cadherin表達(dá)有關(guān)(P<0.05)，而與患者的年齡、臨床分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)及局部浸潤無關(guān)(P>0.05)。提示KLF4在宮頸癌中發(fā)揮抑制腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲及遷移， KLF4的表達(dá)在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中下調(diào)，其原因可能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中去分化相關(guān)[7]。另外KLF4表達(dá)與Ki-67增殖指數(shù)呈負(fù)相關(guān)，與E-cadherin表達(dá)呈正相關(guān)，表明KLF4與細(xì)胞增殖能力相關(guān)，且KLF4可能通過E-cadherin抑制腫瘤細(xì)胞的增殖及遷移[8]。

表2 Ki-67及E-cadherin在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)與病理特征的關(guān)系(例，%)

Ki-67與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)及控制有密切關(guān)系，常被作為腫瘤細(xì)胞的增殖性標(biāo)志，E-cadherin是1種鈣黏蛋白，其下調(diào)可增加腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲的能力[9-10]。在本研究中，Ki-67及E-cadherin的表達(dá)僅與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分化程度有關(guān)(P<0.05)，而與患者的年齡、臨床分期、腫瘤大小、局部浸潤無關(guān)(P>0.05)。E-cadherin與Ki-67的表達(dá)無明顯相關(guān)性(P>0.05)。提示E-cadherin與Ki-67的表達(dá)在一定程度上可判斷腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移及分化程度，對判斷預(yù)后具有重要意義。

綜上所述，在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中，KLF4與Ki-67及E-cadherin之間有一定的相關(guān)性，三者聯(lián)合檢測可為臨床判斷宮頸鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展提供參考。