50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑的反相高效液相色譜分析

吳航俊，俞霖潔，孫小波，吳偉東，龐雯霏，林夢佳，唐利斌

（浙江省化工研究院有限公司，浙江 杭州 310023）

0 前言

綠麥?。–hlorotoluron），中文別名 N-（3-氯-4-甲基苯基）-N'，N'-二甲基脲，是一種低毒、高效、廣譜的的選擇性內(nèi)吸傳導(dǎo)型麥田除草劑，多用于防除諸如看麥娘、風(fēng)翦股穎、馬唐、黑麥草、早熟禾、狗尾草、野燕麥等禾本科雜草，以及繁縷、藜、蓼、莧等闊葉雜草，但對田旋花、問荊、錦葵等雜草無效。異丙隆（Isoproturon），中文別名3-對-異丙苯基-1，1-二甲基脲，可防除一年生禾本以及雙子葉雜草，如馬唐、藜、早熟禾、看麥娘等，主要用于小麥、大麥等作物，亦可用于西紅柿、馬鈴薯、育苗韭菜、甜（辣）椒、茄子、蠶豆、豌豆、蔥頭等部分菜田除草[1-2，5]。

50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑是由綠麥隆原藥、異丙隆原藥和合適的助劑、填料按一定的比例以及加工方式加工而成的防治小麥田雜草的藥劑。其分析方法未見報道，但異丙隆單劑及其它復(fù)配制劑的分析方法己有報道[2-5]。本文在已有文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，采用以甲醇/水的流動相體系，內(nèi)裝C18鍵合固定相的不銹鋼柱作為分析柱的反相HPLC法，對試樣中綠麥隆、異丙隆兩個有效成分進(jìn)行定量測定，獲得了滿意的結(jié)果。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 方法提要

試樣用甲醇溶解并定容，采用以甲醇/水的流動相體系，內(nèi)裝C18鍵合固定相的不銹鋼柱作為分析柱的反相HPLC法，對試樣中綠麥隆、異丙隆兩個有效成分進(jìn)行分離，外標(biāo)法定量。

1.2 試劑和溶液

甲醇：色譜純，通過0.5 μm孔徑油相膜過濾。

水：二次蒸餾水，通過0.5 μm孔徑水相膜過濾。

綠麥隆已知樣：含量98.8%，國家農(nóng)藥質(zhì)檢中心（定值）。

異丙隆已知樣：含量98.9%，國家農(nóng)藥質(zhì)檢中心（定值）。

50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑：江蘇省蘇科農(nóng)化有限責(zé)任公司。

1.3 儀器

Dionex Ultimate 3000高效液相色譜儀：具DAD檢測器和自動進(jìn)樣器，色譜處理工作站；

色譜柱：250 mm×4.6 mm （id）， 內(nèi)裝 Inertsil ODS-3 C18鍵合固定相5 μm不銹鋼柱；

UV-1750紫外-可見分光光度計。

1.4 溶液配制

標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取25 mg綠麥隆和25 mg異丙隆標(biāo)樣，分別置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解稀釋，冷卻至室溫并定容，充分搖勻，配置成綠麥?。?5 mg/50 mL）和異丙?。?5 mg/50 mL）標(biāo)準(zhǔn)溶液，用0.45 μm微孔濾膜過濾后待用。

混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取25 mg綠麥隆標(biāo)樣和25 mg異丙隆標(biāo)樣，置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解稀釋，冷卻至室溫并定容，充分搖勻，配置成綠麥?。?5 mg/50 mL）、異丙?。?5 mg/50 mL）的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用0.45 μm微孔濾膜過濾后待用。

樣品溶液：稱取約0.1 g樣品（約含25 mg綠麥隆和25 mg異丙?。糜?0 mL容量瓶中，用甲醇溶解稀釋，冷卻至室溫并定容，充分搖勻，用0.45 μm微孔濾膜過濾后待用。

1.5 色譜條件

色譜柱：250 mm×4.6 mm （id）Inertsil ODS-3 C18鍵合固定相5 μm不銹鋼柱；柱溫：35℃；檢測波長：245 nm；流動相：甲醇+水=60+40；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：5 μL。

1.6 測定步驟

1.6.1 測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至相鄰2針的峰面積小于1.5%時，按標(biāo)準(zhǔn)溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液的順序進(jìn)行測定。

1.6.2 計算

將測得的2針試樣溶液以及試樣溶液前后2針標(biāo)樣溶液中綠麥隆（或異丙?。┑姆迕娣e分別進(jìn)行平均。試樣中綠麥?。ɑ虍惐。┑馁|(zhì)量分?jǐn)?shù)X%按下式計算：

式中：

A1——2針標(biāo)樣溶液中綠麥隆（或異丙?。┓迕娣e的平均值；

A2——2針試樣溶液中綠麥?。ɑ虍惐。┓迕娣e的平均值；

m1——標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2——試樣的質(zhì)量，g；

p——標(biāo)樣中綠麥?。ɑ虍惐。┑馁|(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；

f——標(biāo)樣溶液的稀釋比例，本文所述方法無稀釋步驟，故綠麥隆、異丙隆均為1。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測波長的選擇

采用紫外-可見分光光度計對1.4中配置的標(biāo)樣溶液進(jìn)行光譜掃描，獲得兩者的紫外光譜圖。如圖1所示，實(shí)線為綠麥隆的紫外吸收曲線，虛線為異丙隆的紫外吸收曲線，由圖1可知，綠麥隆在212 nm和246 nm處有較大吸收，異丙隆在204 nm和244 nm處有較大吸收。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)比較，選擇245 nm作為檢測波長，在此波長下峰形良好，綠麥隆和異丙隆吸收比例相當(dāng)，無雜質(zhì)影響。

圖1 綠麥隆和異丙隆的紫外吸收光譜圖

2.2 流動相的選擇

綠麥隆、異丙隆兩者結(jié)構(gòu)相近，采用乙腈/水體系作為流動相對試樣進(jìn)行檢測時，發(fā)現(xiàn)綠麥隆和異丙隆的液相色譜圖主峰相互重疊、較難分離，因此采用分離度更好的甲醇作為流動相。經(jīng)多次配比實(shí)驗(yàn)，最終確定流動相為甲醇∶水=60∶40，流速1.0 mL/min，綠麥隆和異丙隆兩組分能得到較好的分離，如圖2所示，峰型對稱、尖銳，基線平穩(wěn)，綠麥隆保留時間約為7.3 min，異丙隆保留時間約為8.2 min，綠麥隆峰寬為0.136 min，異丙隆峰寬為0.153 min，分離度為6。

圖2 綠麥隆和異丙隆混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖

2.3 線性關(guān)系

在1.5所述液相色譜操作條件下，調(diào)節(jié)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的進(jìn)樣體積分別為：2 μL、4 μL、6 μL、8 μL、10 μL，依次進(jìn)行測定，以濃度為橫坐標(biāo)，綠麥?。ó惐。┓迕娣e為縱坐標(biāo)，制作出對應(yīng)的峰面積/濃度關(guān)系圖，線性擬合后得到圖3。綠麥隆線性回歸方程為y=68.6146x+2.5617（R=0.9998，n=5），異丙隆線性回歸方程為y=72.4603x+1.9236（R=0.9999，n=5）。結(jié)果表明，該檢測方法在測定濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

圖3 綠麥隆和異丙隆的線性關(guān)系圖

2.4 準(zhǔn)確性

稱取5批次50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑樣品，分別準(zhǔn)確加入一定量的標(biāo)樣，根據(jù)稱取樣品量和加入標(biāo)樣量計算出綠麥隆和異丙隆的理論含量進(jìn)行分析，得到綠麥隆和異丙隆的實(shí)際含量，算出綠麥隆回收率在98.89%～99.21%之間，平均回收率為99.05%，異丙隆回收率在98.81%～99.20%之間，平均回收率為99.07%，均滿足定量分析要求，結(jié)果見表1。

表1 準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

2.5 精確度

稱取50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑樣品，按照1.5方法重復(fù)測定5次綠麥隆、異丙隆的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，分別獲得綠麥隆和異丙隆的標(biāo)準(zhǔn)偏差以及變異系數(shù)，結(jié)果見表2。

表2 精確度實(shí)驗(yàn)

3 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，本文所建立的分析方法可以有效地進(jìn)行50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑的檢測和分析，具有操作簡單快速、定量準(zhǔn)確、線性關(guān)系良好、重復(fù)性好等特點(diǎn)，能滿足產(chǎn)品質(zhì)量的分析要求。