高效液相色譜技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用

梁慧恒

作為人類生存與發(fā)展的基礎(chǔ)，食物的重要性不言而喻。進入新世紀以來，隨著社會發(fā)展模式的變化以及相關(guān)技術(shù)水平的提高，食品的加工模式與方法也發(fā)生了很大的變化。市面上流動的食品在加工過程中，為了保證食品的口感以及質(zhì)量，通常會在其中加入部分添加劑。在規(guī)定劑量之內(nèi)的添加劑添加不會對人體造成不利的影響，但是由于缺乏相關(guān)的規(guī)范指導(dǎo)以及嚴格的查處方式，很多商家對于食品添加劑的選擇以及應(yīng)用都存在很多的不足。除此之外，食品在儲存與運輸過程中外界因素的影響也會使得食物變質(zhì)，這無疑會威脅食用者的生命健康安全。高效液相色譜技術(shù)作為一種新時代背景下誕生的食品檢測技術(shù)，其對于食品質(zhì)量以及食品添加劑的檢測效果十分有效與直觀，可以稱作是保障食品安全的科學(xué)保護傘。本文以此為基礎(chǔ)，就高效液相色譜技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用問題予以探析，旨在為今后食品檢測工作的開展提供積極的參考。

高效液相色譜（hig h e f f ic ie nc y liquid chromatography HPLC）也被稱之為高壓液相色譜（high pressure liquid chromatography）。其本質(zhì)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，加之氣相色譜理論發(fā)展而來的一種新型檢測技術(shù)。HPLC不僅檢測靈敏度較高，同時分析速度快分離效率高。這些特性在食品檢測領(lǐng)域的應(yīng)用可謂有的放矢。我國食品文化歷史悠久，但是近年來受制于多種因素的影響，食品安全問題層出不窮。這一方面需要相關(guān)部門增強對食品安全的管理，另一方面增強食品分析與檢測工作的開展也尤為必要。HPLC早在上個世紀七十年代便在我國的食品分析領(lǐng)域予以應(yīng)用，在九十年代末國家相關(guān)標準已經(jīng)將HPLC列為事物中污染物，添加劑以及無機成分等元素的國際方法。下文便結(jié)合實踐，就HPLC在食物添加劑，食品營養(yǎng)成分以及食品污染元素情況展開分析。

HPLC在食品添加劑領(lǐng)域的應(yīng)用

食品添加劑的使用是食品加工過程中必不可少的工序，合理的添加不僅不會影響食物的品質(zhì)，相反會提高食物的口感與品質(zhì)，同時延長食物的保質(zhì)期。但是過量的添加會對食用者造成不良的影響。當下我國食品添加劑的種類十分繁多，加強對食品添加劑的檢測與分析對于食品安全工作的開展而言至關(guān)重要。

食品甜味劑的檢測。在食物的制作過程中，甜味劑的應(yīng)有可增加食物的甜味，甜味劑以營養(yǎng)價值區(qū)分可分為營養(yǎng)型甜味劑與非營養(yǎng)型甜味劑。其中糖精鈉作為非營養(yǎng)型甜味劑，不僅造價低廉而且應(yīng)用方便，所以在食品制作的過程中被廣泛的應(yīng)用。

丁芳林等以液相色譜與氣相色譜聯(lián)用技術(shù)為基礎(chǔ)，甲醇—甲酸，電噴霧負離子采集模式，sphergelC18色譜柱，就果凍等食品中的糖精鈉、安賽蜜以及甜蜜素等含量予以檢測。最終加樣回收率為93.19%—100.90%。相關(guān)標準偏差（RSD）為1.05—2.04%，該方式不僅分析時間較短，且定性定量準確，適合在飲料等食品的定性定量檢測中應(yīng)用。

王敏等在酸性條件下利用次氯酸鈉將甜蜜素轉(zhuǎn)化為氯基環(huán)己烷，正已烷萃取，流動相選用乙腈水=70.30（V- V），ODS- C18柱，在波長314nm處采用紫外檢測，同時以外標法定量測定。這種方式的應(yīng)用一方面可有效降低樣品中復(fù)雜基質(zhì)的干擾，另一方面其本身的測定限低。在固體樣品的檢測過程中，可最低檢出限可達2.0mg/kg。對于干擾條件較少的液體樣品而言，最低檢出限為0.5mg/L。

食品防腐劑的檢測。當下國際法中允許部分毒性較小的防腐劑添加到事務(wù)之中。但是對于人體而言，防腐劑的富集會對人體產(chǎn)生十分不利的影響。所以加強對食品中防腐劑的測量測定尤為必要。

王靜選用Diamonsil—ODS色譜柱，以水（磷酸調(diào)pH值為3）四氫呋喃，乙腈為流動相梯度洗脫，在波長254nm處進行紫外檢測。就苯甲酸，對羥基苯異丙酯，對羥基苯甲酸丙酯等七種食品防腐劑進行檢測。七種防腐劑可以達到基線分離，加樣回收率為93.3%—100.5%，最低檢出限為0.025- 0.500μg。

劉二東等以HPCL對含乳飲料中的苯甲酸含量進行檢測。以Zn（Ac）2與KFe（CN）3溶液為沉淀劑，展開對樣品的預(yù)處理。流動相選擇磷酸鹽緩沖液與甲醇混合溶液，C18色譜柱，在波長225nm處進行紫外檢測。該方式在應(yīng)用過程中操作簡便且靈敏度較高，適合市面上大多數(shù)含乳飲料中防腐劑的檢測，同時對于純牛奶的檢測也具有理想的效果。

蘇愛梅以加沉淀劑沉淀法展開了對火腿樣品的預(yù)處理，在經(jīng)過過濾處理后，以RP- HPLC法對火腿中山梨酸以及苯甲酸的含量進行檢測。以Symetry—C18為色譜柱，在波長230nm處進行紫外檢測。上述兩種防腐劑濃度在0—0.05g/L的范圍內(nèi)線性較好（r=0.9996），平均回收率為100.4%，RSD為0.68%。

HPL C在食品營養(yǎng)成分檢測領(lǐng)域的應(yīng)用

碳水化合物的檢測。HPCL在碳水化合物的檢測過程中操作較為簡便，同時靈敏度較為理想?？赏瑫r展開對各種糖分的檢測。國際上已經(jīng)將酒類糖分含量測定的仲裁法設(shè)置為HPCL。

林婧燁以高效液相色譜—蒸發(fā)光散射對龍眼中寡糖組分以及水溶性單糖的種類與含量進行檢測，選用HypersilNH柱，乙腈水=80 20（v/v）為流動相，就龍眼中果糖、葡萄糖以及蔗糖進行分離鑒定。其在25—1000μ/ml的范圍內(nèi)與色譜峰面積有著較為理想的線性關(guān)系，標準品回收率在97%—106%。

張雪榮等就麥芽糖含量的測定方法予以了建立，以Alhima氨基柱為色譜柱，以乙腈—水（62 38V/V）為流動相。其中雜質(zhì)峰與麥芽糖峰的分離度為6.09，RSD為0.90%。該方式在測量麥芽糖含量的過程中較為實用，且具備簡潔、準確的特點。

Bemaardez等就不同種類栗子里的葡萄糖以及蔗糖果糖的含量予以了測量。在測量過程中，首先就樣品予以冷凍干燥處理，而后在體積比為80%的水醇溶液中采用超聲波提取糖類。最終蔗糖的回收率為86%，由于不同種類栗子中的蔗糖含量有所差異，其最終范圍為65—195g/kg。

氨基酸的檢測。作為生物體中重要的組成物質(zhì)，氨基酸不僅參與酶的組成，還是構(gòu)成蛋白質(zhì)的重要單位。就食物中氨基酸的含量予以測量是食品檢測工作開展中重要的環(huán)節(jié)。當下柱前衍生化高效液相色譜法的應(yīng)用逐步取代了茚三酮方式，并在實際檢測工作中取得了理想的檢測效果。

陳悅嬌等以O(shè)PA柱前衍生RP- HPLC法就豆?jié){中的氨基酸予以測定，選用Eclipse XDB- C18反相柱，甲醇以及0.05mol/L醋酸鈉線性梯度洗脫。在波長338nm的位置進行紫外檢測。由于在豆?jié){的煮制過程中游離氨基酸的含量會逐步的上升，最終回收率為90.86%—106.05%。氨基酸也實現(xiàn)了理想的分離。

劉霄玲采用柱前衍生發(fā)就C18反相色譜柱進行分離試樣，就乳制品中16中氨基酸的含量通過HPCL法進行測定。就最終的檢測結(jié)果而言，該檢測方法不僅重現(xiàn)性較好，且色譜分離時間與分離度較理想。

脂肪酸的檢測。李國琛等建立了以HPLC法聯(lián)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行技術(shù)就蛋黃中磷脂粗提物進行分析。通過HPLC將蛋黃中的多種磷脂進行預(yù)先分離。在收集之后分析得出較為清晰的質(zhì)譜圖。

Makahleh等選用了RP- HPLC聯(lián)合電容耦合非接觸電導(dǎo)檢測棕櫚酸，油酸以及亞油酸等五種脂肪酸進行分離測定。最終的測定結(jié)果表明，硬脂酸與峰面積線性關(guān)系良好時的范圍為5—200μg/ml。其他四種脂肪酸的線性范圍則為2—200μg/ml。這種方式的檢測對象適用于大豆、南瓜以及米糠等食物中脂肪酸的檢測。

HPLC在食品污染領(lǐng)域的應(yīng)用

農(nóng)藥殘留檢測。農(nóng)藥殘留是現(xiàn)階段威脅食物安全的總要因素，國家相關(guān)標準就食物中農(nóng)藥殘留的劑量予以明確的規(guī)定，一旦超出規(guī)定劑量，勢必會對人體造成長期的傷害。

李海飛等選用HPCL柱后衍生熒光檢測法，就葡萄，蘋果等水果中克百威，涕滅威以及滅多威等農(nóng)藥的殘留量予以檢測。最終七種農(nóng)藥中三種的不同濃度平均回收率為72.5%- 116.2%，最低檢出限為0.0037—0.0074mg/ kg。除此之外，西維因、狄氏劑等農(nóng)藥也均可采用HPLC法展開分析與分離。

食品中其他來源化學(xué)污染物的檢測?，F(xiàn)代工業(yè)的高速發(fā)展，使得所產(chǎn)生的諸多有害物質(zhì)經(jīng)食物鏈進入食物中，這對于人體健康會造成巨大的威脅。

董新艷等建立了氧化鋁柱色譜富集集合HPLC- FLD分析檢測法。就三種天然VE中的高分子量多環(huán)芳烴予以測定分析。首先需將樣品進行中性氧化鋁柱色譜富集凈化。以乙腈水（80 20 V/V）為流動相。最終八種高分子量多環(huán)芳烴的最低檢出限為0.05—0.45ng/g。定量限范圍為0.18—1.50ng/g。

食品中霉菌毒素的檢測。黃曲霉素，鐮刀菌毒素以及玉米赤霉烯酮等霉菌毒素是食物中較為常見的毒素，這些毒素的存在不僅會使得糧食等發(fā)生霉變繼而造成巨額的經(jīng)濟損失，在不當食用之后還會對人畜造成不可逆的傷害。

程樹峰等建立了快速檢測作物中黃曲霉毒素的碘柱前衍生—高效液相色譜法。在檢測過程中需對樣品進行提取液處理。而后對其加入適量的碘衍生劑衍生。在衍生過程結(jié)束之后展開色譜分析，最終四種黃曲霉毒素均在七分鐘之內(nèi)完成檢測，最低檢出限均符合pg水平。

隨著時代的高速發(fā)展，人們生活方式的轉(zhuǎn)變促使食品加工方式的轉(zhuǎn)變與升級。而與此同時，隨著各種添加劑的廣泛應(yīng)用以及各種不安全因素的存在，食品安全問題的保障無疑成為了社會各界廣泛關(guān)注的焦點。HPCL作為一種高效的食品檢測技術(shù)，其在對食品添加劑、農(nóng)藥殘留以及營養(yǎng)成分分析等問題的解決有著較為理想的應(yīng)用價值。本文以此為基礎(chǔ)，就HPCL技術(shù)的應(yīng)用為問題予以探析，旨在為今后食品安全檢測工作的開展提供助力。與此同時，隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的逐步發(fā)展與成熟，高效液相色譜儀器也在不斷的升級與發(fā)展。其在與各類檢測技術(shù)的合作應(yīng)用范圍與形式也愈發(fā)的廣泛，這無疑也為今后食品檢測工作的開展提供了嶄新的發(fā)展方向與契機。食品安全保障工作的開展至關(guān)重要，作為參與其中的應(yīng)堅持對檢測技術(shù)的探索與創(chuàng)新，以實際行動構(gòu)建我國食品安全的鋼鐵長城。