燈盞細辛乙醚部位化學成分研究

摘 要：[目的]為進一步明確燈盞細辛藥材藥效作用的物質(zhì)基礎。[方法]本文采用硅膠、聚酰胺柱層析和重結(jié)晶等方法燈盞細辛乙醚提取物進行分離，并根據(jù)化合物的理化性質(zhì)及1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HR-MS等方法分析、鑒定化合物結(jié)構(gòu)。[結(jié)果]從燈盞細辛乙醚提取部位中分離和鑒定出4個化合物，24（s）-3β-羥基豆甾-5-烯-7-酮（化合物1）、染料木素（化合物2）、3'，4'-二甲氧基槲皮素（化合物3）、β-谷甾醇（化合物4）。其中化合物1、2均為首次從燈盞細辛藥材中分離得到。[結(jié)論]研究結(jié)果豐富了燈盞細辛的化學成分內(nèi)容，為今后的開發(fā)提供了科學依據(jù)。

關(guān)鍵詞：燈盞細辛;乙醚部位;組分分離;首次;結(jié)構(gòu)鑒定

Abstract：[Objective]To further determine the material basis of the pharmacodynamics of Erigeron breviscapus.[Method]the chemical constituents were repeated by silica，gelpolyamide column chromatography and recrystallization，and the structures of compounds from the ether extraction were identified on the basis of physico-chemical characteristics by1H-NMR，13C-NMR，HMBC，HR-MS spectrum.[Result]4 compounds were isolated and elucidated from the ether extraction from Erigeron breviscapus，which were 24（s）-3β-hydroxystigmast-5-en-7-one（1），genistein（2），3'，4'-trimethoxyquercetin（3），β-sitosterol（4）.[Conclusion]Compound 1 and 2 were separated from Erigeron breviscapus for the first time.The results not only enriched its chemical constituents of Erigeron breviscapus，but also would provide material basis for its development in the future.

Key words：Erigeron breviscapus;ether extraction;constituent isolation;first time;structure identification

燈盞細辛，又名燈盞花，為菊科飛蓬屬植物短葶飛蓬（Erigeron breviscapus Hand.-Mazz.）的干燥全草。該藥材最早收載于《滇南本草》，《中華人民共和國》2015版一部亦有收載。[1]傳統(tǒng)中醫(yī)認為燈盞細辛的功效為：解表散寒，祛風活絡，除濕止痛;臨床上常用于用于治療風寒感冒，風濕痹痛，半身不遂等癥。眾多專家和學者先后從燈盞細辛藥材分離出多種化學成分，但大多數(shù)化學成分是從乙酸乙酯部位、石油醚部位、正丁醇部位分離出來的。[2、3]為了更好地開發(fā)利用燈盞細辛藥材，本文以干燥處理后的燈盞細辛全草為材料，經(jīng)過80%乙醇提取、系統(tǒng)溶劑萃取、薄層層析對燈盞細辛藥材的化學成分進行分離及結(jié)構(gòu)鑒定，共分離和鑒定出4個化合物。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Photolysis TOF-MS 型高質(zhì)量質(zhì)譜儀（英國Kore公司），DPX-400核磁共振儀（瑞典Bruker公司）;TMS內(nèi)標，X6型熔點測定儀（天津廣普光學儀器有限公司），RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn)），BPG-9030BH型電熱恒溫鼓風干燥箱（上海和呈儀器制造有限公司），SHB-Ⅲ型臺式循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司），HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州澳華儀器有限公司）。

1.2 試劑

柱層析填料Toyopearl HW-40（日本TOSOH公司），Pharmadex LH-20安瑪硅膠H（青島海洋化工廠），薄層層析硅膠G（青島海洋化工廠），所用化學試劑均為分析純（天津市化學試劑三廠）。

1.3 藥材

研究所用的燈盞細辛藥材采自云南省紅河自治州瀘西縣，經(jīng)湖南省食品藥品檢驗研究院王華副主任中藥師鑒定為菊科植物短葶飛蓬（Erigeron breviscapus）的全草。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取與分離

取燈盞細辛藥材10.0kg，80%乙醇連續(xù)回流提取2次，第一次加80%乙醇8倍量回流2h，第二次加80%乙醇5倍量回流2h，分別過濾，合并濾液，濃縮至稠膏至無醇味，稱其重量為5604g，依次以乙醚、乙酸乙酯萃取，分別得到乙醚部位（984g），乙酸乙酯部位（204.6g）。將乙醚部位采用石油醚-乙酸乙酯（90：10→5：95）依次梯度洗脫，收集洗脫液。以薄層色譜法（TLC）檢測洗脫液，并利用聚酰胺、Sephadex LH-20柱層析等方法對各部位進行分離純化得單體化合物。

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

從燈盞細辛乙醚部位總共分離得到5個化合物，利用傳統(tǒng)的理化鑒定法結(jié)合現(xiàn)代各種光譜技術(shù)先后鑒定了這些化合物的結(jié)構(gòu)。

化合物1：黃色油狀物，易溶于乙醚，與溴水反應為陽性。HR-ESI-MS（m/z）：430.2[M]+;1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ：3.65（1H，m，H-3），2.07（2H，m，H-4），5.72（1H，d，J=2.0Hz，H-6），2.38（1H，m，H-8），0.73（3H，s，CH3-18），0.91（3H，s，CH3-19），0.86（3H，d，J=5.9Hz，CH3-21），0.84（3H，d，J=6.8 Hz，CH3-26），0.81（3H，d，J=6.8 Hz，CH3-27），1.15（3H，s，CH3-29）;13C-NMR（CDCl3）δ：36.2（C-1），31.7（C-2），71.1（C-3），41.4（C-4），163.9（C-5），125.9（C-6），201.9（C-7），44.8（C-8），48.9（C-9），38.3（C-10），20.9（C-11），36.5（C-12），42.9（C-13），50.8（C-14），25.6（C-15），29.8（C-16），53.7（C-17），12.7（C-18），16.8（C-19），35.4（C-20），18.6（C-21），33.5（C-22），26.8（C-23），47.1（C-24），30.3（C-25），19.1（C-26），18.3（C-27），22.2（C-28），11.9（C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道[4、5]的基本一致，故鑒定化合物1為24（s）-3β-羥基豆甾-5-烯-7-酮。

化合物2：樹枝狀結(jié)晶，熔點（mp.）為297～298℃。HR-ESI-MS（m/z）：270.16[M]+;1H-NMR（500MHz，DMSO-d6）δ：826（1H，s，H-2），6.15（1H，d，J=2.1Hz，H-6），6.29（1H，d，J=2.0Hz，H-8），7.42（2H，t，J=8.6Hz，H-2，6），6.72（2H，t，J=8.6Hz，H-3，5），12.88（1H，s，5-OH），10.69（1H，s，7-OH），948（1H，s，4-OH）;13C-NMR（250MHz，DMSO-d6）δ：152.9（C-2），124.6（C-3），157.8（C-4），163.1（C-5），98.5（C-6），162.9（C-7），93.6（C-8），156.9（C-9），105.3（C-10），123.2（C-1），131.1（C-2，6），114.9（C-3，6）158.6（C-4）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道[6]的一致，故鑒定化合物3為染料木素。

化合物3：黃色粉末狀固體，鹽酸-鎂粉（Mg-Hcl）為陽性，揭示可能為黃酮類化合物。HR-ESI-MS（m/z）：330.1[M]+;1H-NMR（500MHz，CDCl3）δ：6.48（1H，s，H-6），6.23（1H，s，H-8），765（1H，d，J=1.8Hz，H-1），7.77（1H，m，H-6），6.41（1H，d，J=8.7Hz，H-5），3.86（3H，s，4-OCH3），3.93（3H，s，3-OCH3），12.81（1H，s，3-OH）;13C-NMR（100 MHz）δ：126.8（C-1），157.3（C-2），138.7（C-3），173.9（C-4），163.4（C-5），98.9（C-6），165.2（C-7），95.1（C-8），158.1（C-9），106.1（C-10），124.2（C-1），112.1（C-2），150.4（C-3），153.1（C-4），111.9（C-5），123.6（C-6），55.8（3-OCH3），55.6（4-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道[7]的一致，故鑒定該化合物為3，4-二甲氧基斛皮素。

化合物4：白色粉末，mp.138～140℃，硫酸-茴香醛反應顯紫色。EI-MS（m/z）：414.7（M+）。1HNM R（CDCl3）δ：3.49（1H，m，H-3），5.31（1 H，m，H-6），0.63（3H，s，H-18），1.01（3H，s，H-19），0.94（3H，d，J=6.3 Hz，H-21），0.82（3H，d，J=6.3 Hz，H-27），0.86（3H，t，J =7.2Hz，H-29）。13C-NMR（CDCl3）δ：36.8（C-1），31.2（C-2），71.5（C-3），41.9（C-4），141.1（C-5），121.9（C-6），31.3（C-7），31.7（C-8），49.8（C-9），36.2（C-10），20.1（C-11），40.2（C-12），42.1（C-13），57.2（C-14），22.9（C-15），27.8（C-16），56.2（C-17），11.9（C-18），19.6（C-19），36.3（C-20），18.4（C-21），35.1（C-22），25.8（C-23），45.5（C-24），28.8（C-28），11.9（C-29）。以上數(shù)據(jù)文獻報道[8]的一致，故鑒定化合物5為β-谷甾醇。

3 討論

本實驗采用硅膠柱色譜、聚酰胺柱色譜和TLC法對燈盞細辛乙醚提取物進行了系統(tǒng)的化學成分研究，豐富了燈盞細辛的化學成分內(nèi)容。研究結(jié)果表明從燈盞細辛乙醚提取物分離得到6個化合物，其中3個化合物為脂肪族類化合物，2個化合物為黃酮類化合物，1個化合物為萜類（薁類）化合物。現(xiàn)代藥理學研究表明，新發(fā)現(xiàn)染料木素可以抑制軟骨細胞的凋亡，從而緩解關(guān)節(jié)軟骨的退變。新發(fā)現(xiàn)的化合物是否與燈盞細辛抗癌、抗炎作用有關(guān)，還待于進一步科學的研究。

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作者簡介：李君（1983-），男，生藥學碩士，副教授，現(xiàn)為湘潭醫(yī)衛(wèi)職業(yè)技術(shù)學院教師，主要從事中藥化學成分研究及質(zhì)量標準研究。