人乳頭瘤病毒、超薄液基細(xì)胞學(xué)檢測與宮頸病變的相關(guān)性研究

劉萍

[摘要] 目的 研究宮頸人乳頭瘤病毒（HPV-DNA）感染現(xiàn)狀及聯(lián)合超薄液基細(xì)胞學(xué)（TCT）檢測在宮頸病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值。 方法 選取2014年10月～2015年12月期間在我院接受宮頸癌篩查的患者2239例，行人乳頭瘤病毒（HPV-DNA）檢測，對(duì)HPV陽性者行超薄液基細(xì)胞學(xué)檢測（TCT），對(duì)HPV、TCT均陽性者行陰道鏡下病理活檢，并以病理結(jié)果為診斷宮頸病變的金標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果 2239例婦女HPV檢測陽性率為9.74%（218/2239），其中高危型HPV占8.98%（201/2239），低危型占0.76%（17/2239）。對(duì)HPV陽性患者行宮頸超薄液基細(xì)胞學(xué)（TCT）檢測，HPV陽性者TCT檢測陽性率為40.37%（88/218）。對(duì)HPV、TCT均陽性的患者行陰道鏡下定位宮頸活組織檢查，陽性率為72.72%（64/88）。 結(jié)論 不同年齡段HPV感染陽性率不同，HPV檢測在宮頸病變篩查中的敏感性高，HPV聯(lián)合TCT篩查明顯提高了宮頸病變的陽性率，對(duì)降低宮頸癌的發(fā)生具有重要意義。

[關(guān)鍵詞] 人乳頭瘤病毒；超薄液基細(xì)胞學(xué)檢測；宮頸病變；陰道鏡檢查

[中圖分類號(hào)] R737.33 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2018）30-0054-03

[Abstract] Objective To study the current status of cervical human papillomavirus（HPV-DNA） infection and the application value of combined ultra-thin liquid-based cytology（TCT）detection in cervical lesion screening. Methods A total of 2239 patients who were screened for cervical cancer in our hospital from October 2014 to December 2015 were enrolled in the study. Papillomavirus（HPV-DNA）detection was performed. Ultrathin liquid-based cytology（TCT）was detected for HPV-positive individuals. Colposcopy biopsy was performed on both HPV and TCT positive patients， and pathological results were used as the gold standard for diagnosing cervical lesions. Results The positive rate of HPV detection in 2239 women was 9.74% （218/2239）， of which high-risk HPV accounted for 8.98% （201/2239）， and low-risk type accounted for 0.76% （17/2239）. Ultrathin liquid-based cytology （TCT） was detected for HPV-positive individuals. The positive rate of TCT in HPV-positive patients was 40.37% （88/218）. Patients with positive HPV and TCT were examined by colposcopy for cervical biopsy. The positive rate was 72.72%（64/88）. Conclusion The positive rate of HPV infection in different age groups is different. The sensitivity of HPV detection in cervical lesion screening is high. HPV combined with TCT screening significantly improves the positive rate of cervical lesions， which is of great significance for reducing the incidence of cervical cancer.

[Key words] Human papillomavirus；Ultra-thin liquid-based cytology；Cervical lesions；Colposcopy

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤之一，位于女性惡性腫瘤的第2位[1]，而我國宮頸癌的發(fā)病率和死亡人數(shù)約占世界的1/3。宮頸癌發(fā)病趨向于年輕化，嚴(yán)重危害女性健康[2-3]，有研究提示70%以上有性生活的婦女感染HPV[4-5]。HPV的持續(xù)感染是導(dǎo)致宮頸病變的主要病因。通過篩查HPV感染，聯(lián)合超薄液基細(xì)胞學(xué)（TCT）檢測，及時(shí)發(fā)現(xiàn)宮頸病變并給予治療，能有效降低宮頸癌的發(fā)生率。本文通過對(duì)2239例18～65歲婦女行人乳頭瘤病毒（HPV-DNA）檢測，HPV陽性者行超薄液基細(xì)胞學(xué)（TCT）檢測，二者聯(lián)合作為篩查方法，并以病理結(jié)果為診斷宮頸病變的金標(biāo)準(zhǔn)，研究婦女HPV感染現(xiàn)狀，及與TCT聯(lián)合檢測在宮頸病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年 10月～2015 年 12 月期間在我院婦科門診初次就診接受宮頸癌篩查的患者 2239例，患者年齡18～65歲，平均37.86歲。對(duì)2239例患者首先行HPV檢測，對(duì)HPV陽性者行TCT檢測，二者均陽性者行陰道鏡+宮頸活組織檢查，并以病理組織學(xué)診斷為金標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 HPV-DNA檢測 采樣前72 h不使用陰道內(nèi)藥物，24 h內(nèi)禁止性行為，避免經(jīng)期采樣。用專用的宮頸刷刷取一定數(shù)量的宮頸脫落細(xì)胞，經(jīng)過提取 HPV-DNA，最后根據(jù)顯現(xiàn)的斑點(diǎn)情況來判定HPV基因型。

1.2.2 超薄液基細(xì)胞學(xué)檢測（TCT） 采樣前72 h不使用陰道內(nèi)藥物，24 h內(nèi)禁止性行為，避免經(jīng)期采樣。用宮頸刷于宮頸管中收集脫落細(xì)胞，然后將宮頸刷放入裝有 Thinprep 保存液的瓶中漂洗，經(jīng)Thinprep處理儀對(duì)樣本進(jìn)行處理。

1.2.3 病理學(xué)檢查 陰道鏡下對(duì)病變最嚴(yán)重處多點(diǎn)取材活組織檢查，如無異常，則常規(guī)取移行帶第3、6、9、12點(diǎn)4處，以病理結(jié)果為診斷金標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 HPV檢測 目前公認(rèn)的高危型HPV病毒亞型15種16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73、82，低危型HPV病毒亞型10種如6、11、40、42等。標(biāo)本光量讀數(shù)與陰性測定值比值（RLU/CO）≥1.0 判為 HPV 陽性。

1.3.2 TCT結(jié)果評(píng)定 采用國際癌癥協(xié)會(huì)2006年制訂的 TBS 分級(jí)系統(tǒng)，具體分為正常、良性反應(yīng)性改變，不典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamous cell，ASC）包括意義不明的非典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamous cells of undetermined significance，ASC-US）、非典型鱗狀細(xì)胞不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變（atypical squamous cells cannot exclude HSIL，ASC-H）兩類，鱗狀上皮內(nèi)低度病變（low scaly intradermal lesions，LSIL），鱗狀上皮內(nèi)高度病變（height scaly intradermal lesions，HSIL），鱗狀細(xì)胞癌（squamous cell carcinoma，SCC），不典型腺細(xì)胞癌（atypical adenocarcinoma，AGUS），腺癌（adenocarcinoma，AC）。TCT檢查的陽性結(jié)果為≥ASCUS。

1.3.3 宮頸組織病理學(xué)檢查 對(duì) HPV陽性者和 TCT 檢測陽性者（≥ASCUS）行陰道鏡檢查，并在陰道鏡下行多點(diǎn)活組織病理檢查。宮頸組織病理學(xué)活檢≥CINⅠ判定為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本文的數(shù)據(jù)主要運(yùn)用 SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV-DNA檢測結(jié)果

門頭溝區(qū)2239例18～65歲女性參加宮頸癌篩查，HPV陽性患者218例，總感染率為9.74%（218/2239），其中高危型HPV占8.98%（201/2239）、低危型HPV占0.76%（17/2239）。不同年齡組HPV感染情況見表1。對(duì)各年齡組HPV感染率進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)21～60歲年齡組感染率高于其他年齡組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 TCT檢測結(jié)果

對(duì)HPV檢測陽性患者行超薄液基細(xì)胞學(xué)（TCT）檢測，結(jié)果異常88例，占總篩查人群3.93%，其中意義不明的非典型鱗狀細(xì)胞（ASC-US）68例，占3.04%、鱗狀上皮內(nèi)低度病變（LSIL）11例，占0.49%、鱗狀上皮內(nèi)高度病變（HSIL）5例，占0.22%、不典型腺細(xì)胞癌 （ AGUC）1例，占0.04%、非典型鱗狀細(xì)胞不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變（ASC-H）3例，占0.13%。對(duì)各年齡組TCT異常者進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)21～60歲年齡組TCT陽性率總體高于其他年齡組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 組織病理學(xué)結(jié)果

對(duì)HPV-DNA陽性、宮頸細(xì)胞學(xué)異常的88例患者進(jìn)行陰道鏡+活組織檢查，其中慢性炎癥24例，占總篩查人群的1.07%、CINⅠ33例，占1.47%、CINⅡ13例，占0.58%、CINⅡ～Ⅲ12例，占0.54%、CINⅢ4例，占0.18%、宮頸鱗癌2例，占0.09%。

3 討論

宮頸癌的發(fā)生是長時(shí)間漸進(jìn)的過程，患者從出現(xiàn)宮頸病變到發(fā)展成為宮頸癌往往需要10年左右，因此，加強(qiáng)宮頸癌癌前病變的篩查、早期診斷、及時(shí)治療，對(duì)于預(yù)防宮頸癌的發(fā)生并不是難題[6-8]，而早期篩查質(zhì)量的保證又離不開有效的篩查技術(shù)[9]。有研究認(rèn)為高危型HPV持續(xù)感染可引起95%以上宮頸癌，從而證實(shí)了HPV感染是宮頸病變的主要致病因子[10-12]。HPV屬于乳頭多瘤空泡病毒科乳頭瘤病毒屬，是一種環(huán)狀的雙鏈DNA病毒，有多種基因型，目前已有120余種基因型被確定，其中約30種涉及生殖道感染。不同類型的HPV感染可導(dǎo)致不同臨床病變，根據(jù)生物學(xué)特性和致癌潛能，分為高危險(xiǎn)和低危型，高危險(xiǎn)與癌及癌前病變相關(guān)，低危型主要與輕度鱗狀上皮損傷和泌尿生殖系統(tǒng)疣、復(fù)發(fā)性呼吸道息肉相關(guān)。因此，HPV感染的早期發(fā)現(xiàn)、準(zhǔn)確分型和病毒定量對(duì)于子宮頸癌防治具有重要意義，將HPV感染檢測作為子宮頸癌及其癌前病變的常規(guī)手段已經(jīng)逐漸在臨床上應(yīng)用。

本研究通過對(duì)2239例患者做不同年齡組HPV感染發(fā)現(xiàn)：2239例患者中HPV陽性者為218例，陽性率為9.74%。對(duì)各年齡組HPV感染率進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)21～60歲年齡組感染率總體高于其他年齡組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在218例HPV陽性標(biāo)本中，TCT檢測異常者88例，陽性率為40.37%（88/218）。對(duì)HPV-DNA和TCT檢測均陽性的88例婦女行陰道鏡+病理活組織檢查，結(jié)果異常為64例，陽性率為72.72%（64/88），提示HPV-DNA檢測敏感性高于TCT檢測，而TCT檢測特異性高于HPV-DNA檢測，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。有研究亦發(fā)現(xiàn)，年輕組患者對(duì)HPV-DNA檢測有著高度的敏感性，可以有效降低細(xì)胞學(xué)的漏診率，但特異性較低；而年長組HPV感染率與不同級(jí)別的CIN間有明顯的相關(guān)性[13-15]。宮頸細(xì)胞學(xué)篩查，尤其是傳統(tǒng)的宮頸巴氏涂片檢查，存在相當(dāng)比例的假陰性結(jié)果。高危型HPV檢測對(duì)宮頸上皮病變的陰性預(yù)測值達(dá)99.7%，可減低或消除由于細(xì)胞學(xué)篩查假陰性所造成的漏診。本研究顯示，將HPV和TCT聯(lián)合檢測能夠明顯提高宮頸病變篩查的準(zhǔn)確性，降低漏診率。同時(shí)，在HPV陽性及TCT結(jié)果≥ASC-US時(shí)，再選擇進(jìn)行陰道鏡+宮頸活組織檢查，可以使宮頸癌早期篩查更有針對(duì)性。TCT和HPV均陰性者，發(fā)生宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)較低，可適當(dāng)延長其篩查的間隔時(shí)間，減低檢測費(fèi)用，減少患者不必要的宮頸損失和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

綜上所述，通過篩查高危型HPV感染，陽性者再行超薄液基細(xì)胞學(xué)檢測，有針對(duì)性的進(jìn)行陰道鏡+宮頸活組織病理檢查，能提高宮頸病變篩查的靈敏度，減少細(xì)胞學(xué)檢查的假陰性，有效地預(yù)防和減少宮頸癌的發(fā)生。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 曹軍，邱建學(xué)，陳玉，等.高危型HPV檢測技術(shù)在提高宮頸癌前病變檢出率中的臨床價(jià)值[J].浙江醫(yī)學(xué)，2014（17）：1486-1488.

[2] 陳憶，吳丹，李柱南，等.宮頸液基細(xì)胞學(xué)和高危型HPV-DNA檢查在宮頸環(huán)形電切術(shù)后宮頸上皮內(nèi)高度病變切緣累及患者隨訪中的價(jià)值[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2015， 95（17）：1331-1334.

[3] Tao X，Griffith CC，Zhou X，et al.History of high-risk HPV and paptest results in a large cohort of patients with invasive cervical carcinoma：experience from the largest womens hospital in china[J].Cancer Cytopathol，2015，123（7）：421-427.

[4] Andrawiss M，Cervical cancer vaccines avilable in 2007 cases[J].Drug Discov Today，2005，10（14）：949.

[5] Rao PH，Arias-Pulido H，Lu XY.Chromosomal amplifications，3q gain and deletions of 2q33-q37 are the frequent genetic changes in cervical carcinoma[J].BMC Cancer，2004，4（1）：5-8.

[6] 許曼，魏麗春，石梅，等.宮頸癌術(shù)后放射治療232例回顧性臨床分析[J].中華腫瘤防治雜志，2011，18（16）：1286-1289.

[7] 鐘紅梅，羅超.912例宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（15）：1904-1905.

[8] 勞芝英.HPV、TCT及陰道鏡對(duì)宮頸癌篩查的意義[J].實(shí)用癌癥雜志，2014，29（7）：826-831.

[9] Wright TC，Cox JT，Massad S，et al. 2001 Consensus guidelines for the management of women with cervical intraepithelial neoplasia[J]. J Low Genit Tract Dis，2003， 1（89）：295.

[10] 齊艷紅.宮頸病變篩查中宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查與HPV DNA檢測的聯(lián)合應(yīng)用觀察[J].山東醫(yī)藥，2016，56（19）：58-59.

[11] 郭菲菲，南蓓蓓.高危型HPV感染與宮頸病變的關(guān)系[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2017，24（3）：86-88.

[12] Lee B，Suh DH，Kim K，et al.Utility of human papillomavirus genotyping for triage of patients with atypical squamous cells of undetermined significance by cervical cytology[J]. Anticancer Res，2015，35（7）：4197-4202.

[13] Agorastos T，Diinas K，Lloveras B，et al.Human papillomavirus testing for primary screening in women at low risk of developing cervical cancer.The Greek experience[J].Gynecol Oncol，2005，96（3）：714-720.

[14] Bergeron C，Cas F，F(xiàn)agnani F，et al. Assessment of human papillomavirus testing on liquid-based Cyto-screen system for women with atypical squamous cells of undetermined significance. Effect of age[J]. Gynecol Obstet Fertil，2006，34（4）：312-316.

[15] 鄔蘭娜，張禮婕，劉志紅，等.人乳頭瘤病毒檢測在宮頸癌篩查中的作用[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，26（6）：611～613.

（收稿日期：2018-06-17）