魯北地區(qū)全株玉米青貯飼料霉菌毒素檢測(cè)分析

李思齊，呂素芳，李 峰，唐世云，徐倩倩

（1.山東省北鎮(zhèn)中學(xué)，濱州 256600；2.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，濱州 256600）

全株玉米青貯飼料是將乳熟期至蠟熟期帶穗整株玉米切碎后，在密閉無(wú)氧環(huán)境下，通過(guò)微生物厭氧發(fā)酵和化學(xué)作用，制成的一種適口性好、消化率高、營(yíng)養(yǎng)豐富的飼料。全株玉米青貯飼料品質(zhì)受品種、刈割期、鍘碎長(zhǎng)度及添加劑等因素影響。其品質(zhì)的評(píng)定方法可概括為感官評(píng)定、理化評(píng)定、微生物評(píng)定、霉菌毒素安全評(píng)價(jià)等［1］，其中霉菌毒素因關(guān)系動(dòng)物生產(chǎn)、食品安全，乃至人類(lèi)健康，備受關(guān)注和重視。為了評(píng)估魯北地區(qū)全株玉米青貯飼料霉菌毒素含量及危害情況，筆者等于2017年11—12月，隨機(jī)抽取了魯北地區(qū)18家規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，采集樣品，開(kāi)展了嘔吐毒素（DON）、黃曲霉毒素 B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、T-2、赭曲霉毒素（OTA）等5種常見(jiàn)霉菌毒素檢測(cè)分析。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

樣品采集自魯北地區(qū)18家規(guī)?；馀ｐB(yǎng)殖場(chǎng)，其中6家養(yǎng)殖場(chǎng)全株玉米青貯制作過(guò)程中，添加了某公司生產(chǎn)的青貯用乳酸菌制劑，標(biāo)記為A組；另外12家未添加任何添加劑，標(biāo)記為B組。均采用半地上青貯池存放，容量300～1 500 m3。每場(chǎng)按照青貯池橫斷面上中下不同位置，采集3個(gè)樣品，混合后用四分法縮減取樣200～300 g，作為檢測(cè)樣品。

1.2 檢測(cè)項(xiàng)目與方法

采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法測(cè)定樣品中嘔吐毒素（DON）、黃曲霉毒素 B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、T-2、赭曲霉毒素（OTA）含量。上述ELISA檢測(cè)試劑盒均為山東綠都生物科技有限公司生產(chǎn)，其檢測(cè)靈敏度分別為 0.05 μg/kg、5.0 μg/kg、0.1 μg/kg、0.5 μg/kg、0.5 μg/kg。

1.3 結(jié)果判定

參照 GB/T 13078—2001、GB/T 13078.2—2006、GB/T 13078.3—2007、GB/T 13078.2—2006等資料，將黃曲霉毒素 B1≤20 μg/kg、嘔吐毒素≤1 000 μg/kg、玉米赤霉烯酮≤500 μg/kg、赭曲霉毒素≤100 μg/kg、T-2≤300 μg/kg作為超標(biāo)臨界標(biāo)準(zhǔn)［2］。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS13.0進(jìn)行差異分析，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)（CV/%）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 全部樣品霉菌毒素檢測(cè)情況

共采集檢測(cè)18家養(yǎng)殖場(chǎng)飼料樣品，其檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。從檢出率看，嘔吐毒素、T-2毒素檢出率均為100%，黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮檢出率分別為55.56%、27.78%，赭曲霉毒素檢出率僅為5.56%。從超標(biāo)率看，僅有1例黃曲霉毒素B1超出20 μg/kg的限量標(biāo)準(zhǔn)，超標(biāo)率5.56%；其他項(xiàng)目均沒(méi)有超出限量標(biāo)準(zhǔn)。從檢測(cè)平均含量看，嘔吐毒素平均含量最高，達(dá)128.84 μg/kg；赭曲霉毒素平均含量?jī)H0.05 μg/kg，接近于沒(méi)有檢出。

表1 魯北地區(qū)全株玉米青貯飼料霉菌毒素檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同制備工藝下霉菌毒素檢測(cè)結(jié)果比較

按照青貯全株玉米制備過(guò)程是否添加乳酸菌制劑分A、B組統(tǒng)計(jì)比較，經(jīng)采用SPSS 13.0對(duì)A、B兩組不同檢測(cè)項(xiàng)目含量進(jìn)行ANOVA分析，差異均不顯著（P＞0.05）。其中，赭曲霉毒素、T-2毒素兩組在平均含量、檢出率等指標(biāo)上接近一致；但嘔吐毒素、黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮平均含量A組明顯低于B組；特別是玉米赤霉烯酮在A組6個(gè)樣品中均未檢出。詳見(jiàn)表2。

表2 A組和B組霉菌毒素檢測(cè)結(jié)果比較

2.3 多重霉菌毒素檢出情況

對(duì)同一樣品不同霉菌毒素檢出情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，全部樣品均有2種或以上不同霉菌毒素檢出。其中二重霉菌毒素檢出的樣品為3/18，三重霉菌毒素檢出的樣品為10/18，四重霉菌毒素檢出的樣品為5/18；以DON+T-2+AFB1三種霉菌毒素的組合檢出率最高，達(dá)38.89%。詳見(jiàn)表3。

表3 魯北地區(qū)全株玉米青貯飼料多重霉菌毒素檢出情況

3 小結(jié)與討論

（1）本次采樣檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，17/18養(yǎng)殖場(chǎng)青貯全株玉米飼料5項(xiàng)霉菌毒素檢測(cè)結(jié)果均在限量范圍之內(nèi)，1/18樣品僅存在黃曲霉毒素超出限量標(biāo)準(zhǔn)；黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素3種霉菌毒素的檢出率分別為55.56%、22.78%、5.56%，檢出率較低。較未經(jīng)青貯的玉米秸、青貯全株玉米霉菌毒素的檢出率和含量均較低［3］，主要是全株玉米在青貯過(guò)程中產(chǎn)生了有機(jī)酸，降低了pH值，抑制了霉菌毒素生長(zhǎng)。同時(shí)，本次霉菌毒素檢測(cè)數(shù)值較低，與開(kāi)窖時(shí)間普遍較短也有一定關(guān)系［4-5］。

（2）對(duì)制備過(guò)程中添加乳酸菌制劑的青貯全株玉米飼料檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，嘔吐毒素、黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮3種霉菌毒素檢測(cè)平均含量均低于制備過(guò)程中未添加乳酸菌制劑的樣品組，其中嘔吐毒素含量降低了84.27%，黃曲霉毒素B1含量降低了34.29%，與周磊等［6］試驗(yàn)結(jié)果基本一致。李寶明等［7-8］研究認(rèn)為，乳酸菌的添加能夠加快玉米青貯的發(fā)酵酸化進(jìn)程，不僅快速降低了pH值，縮短腐敗菌有氧發(fā)酵3～5 d，而且還降低了5%～10%營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失，最大程度地抑制了有害污染物的產(chǎn)生。不僅如此，李旭業(yè)等［9］研究發(fā)現(xiàn)，添加乳酸菌制備青貯全株玉米能顯著提高飼料的粗蛋白含量。

（3）本研究檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，嘔吐毒素、T-2毒素檢出率均達(dá)100%，且100%樣品為二重及以上霉菌毒素檢出。其中二重霉菌、三重霉菌、四重霉菌毒素檢出率分別為27.78%、55.55%、16.67%。研究表明［10-11］，多種霉菌毒素并存會(huì)引起霉菌毒素加性效應(yīng)，對(duì)動(dòng)物健康產(chǎn)生一定的危害。因此，開(kāi)展青貯玉米飼料霉菌毒素檢測(cè)工作，積極研究尋找有效降低霉菌毒素危害的技術(shù)方法，對(duì)推動(dòng)畜牧業(yè)健康發(fā)展具有重要意義。