蘋果粉中五氯硝基苯的能力驗(yàn)證研究

趙麗 張瑞雨 李文廷 趙勇

摘要 [目的]建立蘋果粉中五氯硝基苯能力驗(yàn)證的氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用檢測方法。[方法]通過采用不同的考核樣品前處理方法，選用不同的萃取溶劑和凈化方式，探索最有利于考核樣品檢測的前處理方法。[結(jié)果]在0.01～0.05 μg/mL濃度范圍內(nèi)，該方法線性關(guān)系良好，在0.01～0.05 μg/mL加標(biāo)范圍內(nèi)其回收率為98.90%～110.00%。[結(jié)論]采用該方法進(jìn)行五氯硝基苯的能力驗(yàn)證，能有效提高考核樣品檢測的準(zhǔn)確度。

關(guān)鍵詞 果蔬粉；五氯硝基苯；能力驗(yàn)證

中圖分類號 TS207.5+3 文獻(xiàn)標(biāo)識碼

A 文章編號 0517-6611（2018）14-0179-03

Study on the Ability to Verify the Quintozene in Apple Powder

ZHAO Li，ZHANG Ruiyu，LI Wenting et al （Kunming Municipal Center for Disease Control and Prevention，Kunming，Yunnan 650228）

Abstract [Objective]A multiresidue analytical ability was developed for determination of quintozene in apple by gas chromatomatographymass spectrometry （GCMS）.[Method]By using different pretreatment methods， different extraction solvents and purification methods were selected to explore the most favorable pretreatment method for sample inspection.[Result]In the concentration range of 0.01-0.05 μg/mL， this method had good linearity，in the 0.01-0.05 μg/mL standard within the scope of the recovery rate was 98.90%-110.00%.[Conclusion]Employing the method to verify quintozene can effectively improve the detection accuracy of test samples.

Key words Fruit and vegetable powder；Quintozene；Proficiency testing

隨著國家對食品安全關(guān)注度的提高，食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測已成為每年度檢測工作的重要內(nèi)容，而農(nóng)藥殘留檢測仍是食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測的重要項(xiàng)目。近2年來果蔬中的五氯硝基苯（PCNB） 仍是農(nóng)殘檢測的重要項(xiàng)目。五氯硝基苯屬含氯有機(jī)氮保護(hù)性殺菌劑，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不易揮發(fā)、氧化和分解，也不易受陽光和酸堿的影響，主要用于土壤和種子處理，在土壤中殘效期長，使蔬菜、水果、中藥材和飼料中時(shí)有殘留[1-3]。

目前檢測五氯硝基苯的方法有氣相色譜法[4]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC- MS）[5] 、高效液相色譜法[6]。前處理方法通常為運(yùn)用正己烷 （或石油醚）-丙酮多次提取，濃硫酸磺化法凈化[7]，或采用硅鎂吸附劑預(yù)處理小柱[8]、固相萃取或中空纖維膜液相微萃取技術(shù)[9]，雖然都取得了較好的效果，但由于反復(fù)提取的試劑較多，需經(jīng)較長時(shí)間旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，預(yù)處理柱也需經(jīng)活化和淋洗，固相萃取及微萃取成本較高，在檢測大批次樣品時(shí)仍顯不足。近年 QuEChERS前處理技術(shù)因其操作簡單，成本低廉，有機(jī)試劑用量少，檢測時(shí)間短，被廣泛應(yīng)用于大批次農(nóng)藥殘留檢測中[10 -11]。2016 年，朱惠芳等[3]在農(nóng)殘分析中采用QuEChERS為樣品前處理方法。該方法是運(yùn)用一些高效的提取和凈化試劑，通過簡單的離心或柱分離，將農(nóng)藥成分與樣品基質(zhì)分離并通過此方法對樣品進(jìn)行提取和凈化，但針對蘋果粉中農(nóng)藥殘留能力驗(yàn)證來說，以上方法仍不能有效提高樣品檢測的準(zhǔn)確度[12]。因此針對基質(zhì)相對簡單的能力驗(yàn)證樣品來說，以上方法都存在一定的提取損耗。筆者在以上研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化了蘋果粉中農(nóng)藥殘留能力驗(yàn)證樣品檢測的相關(guān)方法，以尋找到最有效、最有利于能力驗(yàn)證的方法，從而提高能力驗(yàn)證的準(zhǔn)確度。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

果汁中五氯硝基苯內(nèi)標(biāo)質(zhì)控樣品（CFAPA-QC062B-12，大連中食國實(shí)檢測技術(shù)有限公司）；五氯硝基苯（GSB05-1845-2016，批號201705）、順式-環(huán)氧七氯（SB05-291-2015，批號201701）標(biāo)準(zhǔn)溶液100 mg/L，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所研制；乙腈、正己烷，色譜純。

Agilent 7890B-7000C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國Agilent公司）；KQ-500DE型超聲儀（昆山市超聲儀器有限公司）；VORTEX SHAKER型渦旋儀（Qilinbeier公司）。

1.2 色譜條件

DB-35S毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）。色譜柱溫度：初始溫度130 ℃，保持1 min，10 ℃/min速率升至195 ℃，保持10 min；離子源溫度230 ℃；進(jìn)樣口溫度260 ℃；傳輸線溫度280 ℃。載氣高純氦氣（純度99.999%）1.2 mL/min；進(jìn)樣量1.0 μL；定量方法：峰面積內(nèi)標(biāo)法。

1.3 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制 準(zhǔn)確吸取每種標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00 mL于10 mL的容量瓶內(nèi)，用正己烷定容至刻度，即配成濃度為10.0 μg/mL的儲備液。以標(biāo)準(zhǔn)儲備液為基礎(chǔ)分別配制濃度為0.01、0.02、0.03、0.04、0.05 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4 考核樣品的前處理

該試驗(yàn)中考核樣品為蘋果粉，蘋果粉樣品的前處理均采用如下3種方法。

1.4.1 方法一。稱取蘋果粉考核樣0.5 g（精確至0.000 1 g），加入5.0 mL純水和300 μL濃度為1.0 μg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液，浸泡20 min，準(zhǔn)確加入5.0 mL乙腈溶液，超聲10 min，加入3～5 g氯化鈉和5 g無水硫酸鈉，渦旋混勻，離心3 min，將上清液完全轉(zhuǎn)移至雞心瓶中，于30 ℃水浴中減壓蒸餾濃縮至凈干，加入正己烷溶液進(jìn)行定容，定容后進(jìn)行GC-MS檢測分析。

1.4.2 方法二。稱取蘋果粉考核樣0.5 g（精確至0.000 1 g），加入5.0 mL純水和300 μL濃度為1.0 μg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液，浸泡20 min，準(zhǔn)確加入5.0 mL乙腈溶液，超聲10 min，加入3～5 g氯化鈉，渦旋混勻，離心3 min，加入5 g 無水硫酸鈉，取上清液直接進(jìn)行GC-MS分析測定。

1.4.3 方法三。稱取蘋果粉考核樣0.5 g（精確至0.000 1 g），加入5.0 mL純水和300 μL濃度為1.0 μg/mL 的內(nèi)標(biāo)溶液，浸泡20 min，準(zhǔn)確加入5.0 mL正己烷溶液，超聲10 min，離心3 min，加入5 g 無水硫酸鈉，取上清液直接進(jìn)行GC-MS分析測定。

1.5 內(nèi)控樣品果汁的前處理 準(zhǔn)確稱取果汁內(nèi)控樣2.0 g（精確至0.000 1 g），加入300 μL濃度為1.0 μg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液，浸泡20 min，按照考核樣品前處理方法后續(xù)步驟進(jìn)行處理，待GC-MS檢測分析。

1.6 研究方法 分別考察3種前處理方法對考核樣品和內(nèi)控樣品檢測準(zhǔn)確度的影響，并探究最有利于提高樣品檢測準(zhǔn)確度的前處理方法，以提高檢測的準(zhǔn)確度。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關(guān)系與檢出限 試驗(yàn)結(jié)果表明，在所選標(biāo)準(zhǔn)濃度0.01、0.02、0.03、0.04、0.05 μg/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。五氯硝基苯線性方程為y=0.531 88x-0.037 20，相關(guān)系數(shù)r為0.999 5。該方法的檢出限為五氯硝基苯0.002 mg/kg。樣品色譜圖及質(zhì)譜圖見圖1、2。

2.2 樣品前處理方法對回收率的影響

分別稱取考核樣品 和已知樣品，采用3種前處理方法進(jìn)行處理，考察檢測的精密度和加標(biāo)回收率，經(jīng)測定，采用方法一處理的考核樣及內(nèi)控樣品，其回收率為50.31%～62.35%；采用方法二處理的考核樣及內(nèi)控樣品，其回收率為83.23%～90.56%，并且乙腈對色素的提取能力較強(qiáng)，所以提取液經(jīng)凈化處理后，待測樣液的顏色相對較深，對質(zhì)譜和色譜柱的污染相對較大；采用方法三處理的考核樣及內(nèi)控樣品，其回收率為98.90%～110.00%，且提取液經(jīng)凈化后，待測樣液顏色相對較淺。

由表1可知，采用方法三進(jìn)行前處理所得到的樣品檢測結(jié)果與指定值更吻合，結(jié)果更準(zhǔn)確。

由表2可知，無論對于考核樣品還是內(nèi)控樣品，經(jīng)過方法三處理后其加標(biāo)回收率均比另外2種方法更高，所以采用方法三進(jìn)行前處理更有利于果蔬中五氯硝基苯的檢測。

2.3 超聲及渦旋條件的選擇

該試驗(yàn)在加入提取試劑后分別采用渦旋10 min、超聲10 min、超聲10 min+渦旋5 min的方式對樣品進(jìn)行處理，試驗(yàn)結(jié)果表明，單獨(dú)采用超聲和渦旋提取的效果遠(yuǎn)沒有采用超聲再渦旋的提取效果好。因此，提取時(shí)宜先進(jìn)行超聲提取10 min，再進(jìn)行渦旋5 min，這樣更有利于目標(biāo)物進(jìn)入提取試劑中，其提取效果比較見圖3。

3 結(jié)論

在果蔬五氯硝基苯殘留檢測過程中，采用正己烷直接提取，并采用超聲后渦旋處理方式能在最大程度上提高樣品檢測的準(zhǔn)確度。因此，樣品前處理過程越簡單越能有效提高提取效率，同時(shí)讓試劑與樣品充分接觸的處理方式能有效提高

提取效果，從而提高檢測的準(zhǔn)確度。

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