雞傳染性法氏囊病新型疫苗的研究進(jìn)展

楊宵玥，陳 玲，宋亞芬，蔣桃珍

(中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京 100081)

雞傳染性法氏囊病(IBD)是由傳染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的急性、高度接觸性傳染病，主要感染3～6周齡雛雞[1]。法氏囊為IBDV的靶器官，法氏囊內(nèi)未成熟的B淋巴細(xì)胞為病毒增殖的靶細(xì)胞，病毒感染后可導(dǎo)致細(xì)胞和細(xì)胞核碎裂、細(xì)胞壞死、凋亡等，造成機(jī)體B淋巴細(xì)胞大量減少，破壞機(jī)體正常免疫應(yīng)答能力[2]。因此，易感雞群感染后除導(dǎo)致發(fā)病死亡外，還可引起免疫抑制，增加機(jī)體對(duì)其他病原的易感性，引起繼發(fā)感染[3]。

疫苗接種是養(yǎng)禽業(yè)預(yù)防IBD流行的最主要措施。目前應(yīng)用最為廣泛的疫苗主要是傳統(tǒng)弱毒活疫苗和滅活疫苗[4]。利用活疫苗進(jìn)行接種可誘導(dǎo)雞群在較短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生主動(dòng)免疫，但由于其易受母源抗體(MDA)的干擾，往往在不同雞群或同一雞群不同個(gè)體間產(chǎn)生不同的免疫效果，有時(shí)還可導(dǎo)致免疫失敗。因此，為了達(dá)到更好的免疫效果，臨床上往往會(huì)使用一些毒力偏強(qiáng)的商品化疫苗，但使用后會(huì)引起法氏囊組織損傷，導(dǎo)致免疫抑制，同時(shí)也帶來(lái)毒力返強(qiáng)和散毒等生物安全風(fēng)險(xiǎn)[5]。此外，由于大多數(shù)商品化的IBDV活疫苗都是基于經(jīng)典毒株研制的，對(duì)臨床流行的IBDV超強(qiáng)毒株或變異株感染的雞不能產(chǎn)生完全保護(hù)。與弱毒疫苗相比，滅活疫苗更加安全，但免疫效果低于活疫苗，并且需要反復(fù)多次加強(qiáng)免疫，導(dǎo)致免疫成本增加，因此，迫切需要研究與流行毒株完全匹配的新型疫苗。許多研究已經(jīng)表明，IBDV抗原性主要取決于A節(jié)段上VP2基因，其編碼的VP2蛋白是唯一能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體的蛋白[6]。因此，以病毒VP2基因?yàn)榘心繕?biāo)，結(jié)合已有的分子生物學(xué)技術(shù)和DNA重組技術(shù)開(kāi)展新型疫苗研究已成為IBD疫苗研究的主要發(fā)展方向。

1 基因缺失/替換活疫苗

近年來(lái)，由于對(duì)IBDV基因組A、B節(jié)段的研究不斷深入，其細(xì)胞嗜性、毒力、復(fù)制等重要性狀的分子基礎(chǔ)已獲得較為明確的結(jié)論[7-9]。VP2高變區(qū)內(nèi)222A、256I、279D、284A、294I和299S等氨基酸位點(diǎn)與IBDV毒力有關(guān)。利用反向遺傳技術(shù)，對(duì)毒株進(jìn)行基因突變或缺失，可以獲得能與田間流行毒株抗原相匹配、又不會(huì)對(duì)法氏囊導(dǎo)致病理?yè)p傷的IBDV弱毒疫苗。高立等[10]將流行毒株HLJ0504的VP2基因253和284位氨基酸進(jìn)行突變后，將其替換Gt弱毒株VP2相應(yīng)片段，利用RNA聚合酶II拯救出嵌合病毒rGtVP2株，用rGtVP2免疫SPF雞后，其產(chǎn)生的抗體滴度明顯高于親本株Gt株。祁小樂(lè)等[11]通過(guò)對(duì)vvIBDV VP2基因的主要毒力位點(diǎn)進(jìn)行三點(diǎn)突變，使得病毒毒力致弱，不僅致死率降為零，而且感染雞的法氏囊沒(méi)有出現(xiàn)明顯萎縮和損傷，與強(qiáng)毒株相比，拯救毒可適應(yīng)CEF，對(duì)雞無(wú)致病性，且能夠獲得良好的免疫效果。秦立廷等[12]以中等毒力毒株為骨架構(gòu)建的VP5基因缺失病毒，對(duì)雞的致病力顯著降低，免疫后能刺激機(jī)體產(chǎn)生較高滴度的抗體和較好的免疫保護(hù)。因此，通過(guò)基因突變或替換，可以在較短時(shí)間內(nèi)將田間流行毒株致弱成可以商品化使用的疫苗株，確保疫苗免疫保護(hù)性抗原與田間流行毒株一致，提高疫苗臨床應(yīng)用后的免疫保護(hù)效果。盡管該類(lèi)疫苗似乎有更好的臨床應(yīng)用前景，但至目前為止，還沒(méi)有商品化的疫苗上市。

2 亞單位疫苗

VP2蛋白是IBDV的主要保護(hù)性抗原，具有中和活性。由于其具有良好的免疫原性和穩(wěn)定性，是IBD亞單位疫苗研究的重點(diǎn)。構(gòu)建表達(dá)VP2亞單位蛋白的系統(tǒng)主要有大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)[13]、酵母系統(tǒng)[14]和桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)[15]。在原核表達(dá)系統(tǒng)中，可利用含特殊密碼子的宿主菌BL21 PLUS或去除VP2基因N端親水區(qū)，提高表達(dá)蛋白量[16]，因此采用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)亞單位疫苗，相比全病毒滅活疫苗而言，生產(chǎn)成本低且無(wú)潛在的生物安全風(fēng)險(xiǎn)。目前國(guó)內(nèi)已有多個(gè)商品化疫苗上市，但國(guó)外還沒(méi)有商品化的VP2亞單位疫苗。由于VP2的抗原中和表位具有構(gòu)象依賴(lài)性，大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)無(wú)法對(duì)VP2蛋白進(jìn)行加工、修飾，利用該系統(tǒng)表達(dá)的VP2蛋白免疫雞群后誘導(dǎo)產(chǎn)生的中和抗體水平明顯低于全病毒滅活疫苗。由于真核表達(dá)系統(tǒng)可對(duì)表達(dá)的重組蛋白正確折疊，通過(guò)真核生物系統(tǒng)表達(dá)的VP2蛋白可能比原核系統(tǒng)的表達(dá)產(chǎn)物有更好的免疫原性，Liu等[17]利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)，將VP2蛋白與能夠增強(qiáng)免疫的雞IL-2進(jìn)行融合表達(dá)，結(jié)果表明，融合蛋白比單獨(dú)使用VP2提供了更好的保護(hù)，提高了亞單位疫苗的免疫原性，但目前為止，還沒(méi)有該類(lèi)商品化的VP2亞單位疫苗。此外，也有嘗試?yán)弥参锉磉_(dá)系統(tǒng)研制適用于口服的亞單位疫苗，如吳建祥等[18]用IBDV的VP2基因和擬南芥成功構(gòu)建轉(zhuǎn)基因植物表達(dá)系統(tǒng)，為亞單位疫苗研究帶來(lái)新思路。

3 免疫復(fù)合物疫苗

免疫學(xué)的研究表明，在對(duì)某種外來(lái)抗原的免疫應(yīng)答過(guò)程中，最初產(chǎn)生的特異性抗體與該抗原結(jié)合后，可形成一種免疫復(fù)合物。由于復(fù)合物中抗體分子的Fc片段與抗原遞呈細(xì)胞的Fc受體有很高的親和性，使得與抗體結(jié)合的抗原更易有效地與遞呈細(xì)胞結(jié)合。一旦抗原-抗體復(fù)合物被遞呈細(xì)胞吞噬和內(nèi)質(zhì)化，即可激活并刺激B淋巴細(xì)胞成為抗體分泌細(xì)胞，從而引起強(qiáng)烈的體液免疫反應(yīng)。已有研究表明，在體外構(gòu)成的免疫復(fù)合物對(duì)機(jī)體所刺激的體液免疫反應(yīng)是自然抗原的100倍。將IBDV疫苗株與高免血清特異性結(jié)合制備的IBDV免疫復(fù)合物(Icx)疫苗是依據(jù)這一原理研制成功的商品化疫苗[19]，該復(fù)合物能延遲病毒在雞體內(nèi)的復(fù)制，當(dāng)母源抗體降低到一定水平時(shí)，IBDV-Icx中的病毒開(kāi)始釋放復(fù)制并產(chǎn)生免疫保護(hù)力[20]。其主要優(yōu)勢(shì)在于不受母源抗體干擾，可用于胚內(nèi)免疫，且免疫效果優(yōu)于常規(guī)病毒活疫苗。章振華等[21]用雞傳染性法氏囊病免疫復(fù)合物疫苗和活疫苗分別免疫1日齡SPF雛雞，9 d后發(fā)現(xiàn)，免疫復(fù)合物疫苗組雞法氏囊正常，弱毒活疫苗組雞法氏囊全部明顯萎縮，免疫21 d和28 d后，疫苗免疫組均100%保護(hù)。另有研究發(fā)現(xiàn)，雞胚接種IBDV-Icx疫苗后，在脾臟內(nèi)發(fā)現(xiàn)更多的生發(fā)中心，大量的IBDV被局限在脾臟和粘液樣的樹(shù)突細(xì)胞內(nèi)[5]，減少了病毒在體內(nèi)其他組織中的復(fù)制，降低了疫苗免疫后對(duì)外排毒量，從而也降低了疫苗毒釋放至環(huán)境中與野毒重組的可能，進(jìn)一步減少了活疫苗使用后可能存在的生物安全風(fēng)險(xiǎn)。

4 DNA疫苗

自從上個(gè)世紀(jì)90年代初研究發(fā)現(xiàn)，編碼具有免疫原性蛋白的裸DNA進(jìn)入宿主細(xì)胞后可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生對(duì)特定病原體的免疫應(yīng)答，DNA疫苗就迅速成為研究熱點(diǎn)，尤其是對(duì)于一些體外難以培養(yǎng)的病原體，研制DNA疫苗似乎比研究其他類(lèi)型疫苗更有發(fā)展前景。國(guó)外已有商品化的DNA疫苗，如美國(guó)已批準(zhǔn)了用于預(yù)防大馬哈魚(yú)傳染性造血組織壞死病的DNA疫苗，中國(guó)農(nóng)科院哈爾濱獸醫(yī)研究所已研制成功高致病性禽流感(H5亞型)DNA疫苗[22]。由于DNA疫苗不受母源抗體干擾，且穩(wěn)定性好，甚至保藏運(yùn)輸可以不需要冷鏈等潛在優(yōu)勢(shì)[23]，目前已有許多關(guān)于雞傳染性法氏囊病DNA疫苗的研究報(bào)道。Satya等[24]利用真核表達(dá)載體pVAX1構(gòu)建了含VP2基因的pVAX-VP2質(zhì)粒，將該質(zhì)粒經(jīng)肌肉注射接種2周齡雛雞，利用RT-PCR方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)不同臟器內(nèi)均能檢測(cè)到質(zhì)粒DNA，且免疫雞可獲得高水平的抗VP2蛋白抗體，用 IBDV強(qiáng)毒株攻毒可獲得75%的免疫保護(hù)率。Hsieh等[23]將含有VP2、VP3和VP4基因的質(zhì)粒DNA分別在1日齡、1周齡和2周齡時(shí)經(jīng)肌肉3次接種母源抗體陽(yáng)性的肉雞，免疫3周后攻毒，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，接種劑量為7.5和10 mg的免疫組雞可獲得95%和100%保護(hù)率。但也有研究表明， DNA疫苗免疫后，再采用滅活苗進(jìn)行加強(qiáng)免疫才能獲得較好的免疫保護(hù)作用[25]。至今，用于預(yù)防IBD的DNA疫苗仍處于試驗(yàn)性階段，由于其不受母源抗體干擾、生產(chǎn)過(guò)程中不需要操作活病毒，使用后不存在散毒風(fēng)險(xiǎn)等，仍然是疫苗研究的熱點(diǎn)之一。

5 活病毒載體疫苗

活病毒載體是將目的基因插入病毒載體基因組復(fù)制非必需區(qū)，當(dāng)重組病毒感染宿主時(shí)，外源基因隨病毒載體共同在宿主體內(nèi)復(fù)制、表達(dá)外源蛋白，激發(fā)宿主免疫應(yīng)答反應(yīng)[26]。病毒載體可同時(shí)插入多個(gè)外源基因，構(gòu)成多價(jià)疫苗，降低了制備和接種成本，而表達(dá)VP2蛋白的重組病毒活載體疫苗接種雞后不會(huì)導(dǎo)致法氏囊損傷，從而避免了活疫苗免疫后可能導(dǎo)致的免疫抑制風(fēng)險(xiǎn)[27]。活病毒載體疫苗的研究已近30年，多種病毒如禽痘病毒、禽腺病毒、新城疫病毒和火雞皰疹病毒等均可作為疫苗載體，國(guó)外已有多種商品化的表達(dá)IBDV-VP2蛋白的載體疫苗上市。

5.1 禽痘病毒載體 禽痘病毒具有某些特征，如在細(xì)胞漿內(nèi)復(fù)制、基因組大以及特征性的病毒酶和轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)，使其可以正確表達(dá)外源基因，因此成為早期載體疫苗研究的主要病毒載體之一。目前在美國(guó)以痘病毒為載體的禽流感、新城疫、雞傳染性喉氣管炎、支原體重組禽痘病毒活疫苗均已上市[28]，多年臨床使用后也被證明是安全有效的[5]，但至今未見(jiàn)有表達(dá)IBDV-VP2禽痘病毒活載體疫苗成功的報(bào)道。Bayliss等[29]將 IBDV 52/70株編碼VP2的基因插入禽痘病毒(FPV)構(gòu)建了重組病毒fpIBD1，以融合蛋白形式表達(dá)VP2，將構(gòu)建的載體病毒活疫苗分別在1日齡和14日齡時(shí)免疫SPF雞，28日齡時(shí)用52/70或CS89強(qiáng)毒接種，免疫雞僅可獲得臨床保護(hù)，但法氏囊仍有損傷。Tsukamoto等[30]構(gòu)建了表達(dá)VP2基因的rFPV重組病毒，將該病毒免疫SPF雞后30 d用vvIBDV攻毒，雖然可以提供臨床保護(hù)，但法氏囊仍出現(xiàn)嚴(yán)重的肉眼病變，其組織病理學(xué)評(píng)分結(jié)果與攻毒對(duì)照相似，該結(jié)果也表明表達(dá)VP2基因的重組禽痘病毒不能夠提供有效的免疫保護(hù)效果。因此，從2000年以后未見(jiàn)采用重組禽痘病毒作為載體研制IBD疫苗的報(bào)道。

5.2 禽腺病毒載體 腺病毒由于宿主廣泛，其雙鏈DNA可以有效表達(dá)插入的外源基因，且以其為載體構(gòu)建的疫苗可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生良好的細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)[31-32]，不同血清型的禽腺病毒均可作為載體用于構(gòu)建載體疫苗[31]。Sheepard等[33]首次將IBDV經(jīng)典毒株002-73的VP2基因插入到血清10型禽腺病毒(FAV-10)的非編碼區(qū)，構(gòu)建了表達(dá)VP2基因的重組腺病毒，該病毒經(jīng)靜脈、腹腔、皮下和肌肉途徑接種SPF雞，免疫21 d后能誘導(dǎo)雞產(chǎn)生針對(duì)VP2的抗體，用中等毒力的經(jīng)典毒株IBDV V877攻擊4 d后，法氏囊組織勻漿用ELISA方法檢測(cè)不到病毒抗原。Francois等[34]用屬于禽腺病毒I型的雞胚致死孤兒病毒(CELO)作為載體，構(gòu)建了表達(dá)IBDV-VP2基因的重組病毒CELOa-VP2，通過(guò)口鼻途徑接種SPF雞后用vvIBDV攻擊，僅產(chǎn)生非常低的保護(hù)效果，而通過(guò)皮下和皮內(nèi)途徑一次接種后攻毒，可產(chǎn)生100%的臨床保護(hù)。盡管以禽腺病毒為載體構(gòu)建的表達(dá)IBDV-VP2基因的重組疫苗研究報(bào)道較少，但隨著分子生物技術(shù)的發(fā)展，禽腺病毒載體構(gòu)建技術(shù)會(huì)逐步簡(jiǎn)單化，面對(duì)我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)中腺病毒感染越來(lái)越嚴(yán)重的流行現(xiàn)狀，研制IBD禽腺病毒載體活疫苗將會(huì)有較大的臨床應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。

5.3 新城疫病毒載體 隨著反向遺傳技術(shù)的發(fā)展，許多RNA病毒已研制作為疫苗載體[35]，新城疫病毒是其中應(yīng)用最為廣泛的一種RNA病毒載體。雖然新城疫病毒(NDV)可感染多種哺乳動(dòng)物和禽類(lèi)，但由于其僅在細(xì)胞漿內(nèi)復(fù)制，在動(dòng)物體內(nèi)不形成持續(xù)感染，且?guī)缀醪话l(fā)生如基因插入、缺失或重組等基因變化現(xiàn)象，此外NDV能夠誘導(dǎo)機(jī)體在局部和全身產(chǎn)生很強(qiáng)的體液免疫和細(xì)胞免疫作用，同時(shí)又具有一定的佐劑活性，所以它作為疫苗載體是非常安全有效的。許多以NDV為載體的人類(lèi)疫苗和動(dòng)物疫苗已被研制，如人的流感(rNDV/B1-HA)、SARS(NDV-VF/S)、埃博拉(NDV/GP)和人副流感(NDV-LS/HN, NDV-BC/HN)等，這些疫苗的免疫效果已在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中得到證實(shí)[36]，也研制出用于牛羊、豬、狗和馬的病原體的載體疫苗，如牛皰疹病毒-1型(BHV-1)[37]、裂谷熱病毒(RVFV)[38]、犬瘟熱病毒 (CDV)[39]和狂犬病毒 (RV)[40]。

有多種以NDV為載體的禽用疫苗已研制成功，如禽流感、傳染性喉氣管炎、傳染性支氣管炎、雞傳染性法氏囊等[41]。其中禽流感NDV活載體疫苗已在中國(guó)和墨西哥獲得商品化應(yīng)用[42]。盡管以NDV為載體的活病毒載體疫苗研究較多，但關(guān)于NDV載體表達(dá)IBDV-VP2的活載體疫苗研究資料較少。2004年，Huang等[43]首次將IBDV GLS-5 株的VP2基因插入到 NDV Lasota株基因組的3'端，拯救出重組病毒rLaSota/VP2，將重組病毒免疫2日齡的SPF雞3周后用IBDV GLS-5和NDTexas GB株攻毒，結(jié)果表明rLaSota/VP2能對(duì)免疫雞產(chǎn)生90%以上的免疫保護(hù)。2014年，Jin等[44]構(gòu)建了表達(dá)IBDV-VP2的ND嵌合病毒rLaC30L-VP2，18日齡胚內(nèi)接種后可以對(duì)vvIBDV毒株提供83.3%的保護(hù)。2017年，Sohini等[45]用NDV F株構(gòu)建表達(dá)IBDV-VP2的重組病毒rNDV F/VP2，免疫效力試驗(yàn)結(jié)果表明可以對(duì)IBDV強(qiáng)毒株提供100%保護(hù)，對(duì)NDV強(qiáng)毒株攻擊可以提供80%保護(hù)。雖然上述實(shí)驗(yàn)室研究結(jié)果均表明采用NDV疫苗毒株構(gòu)建的表達(dá)IBDV-VP2的重組病毒對(duì)IBDV強(qiáng)毒均可以提供良好保護(hù)，但由于ND活疫苗的免疫受到母源抗體干擾影響較大，且ND載體病毒活疫苗的免疫效果均低于其N(xiāo)D疫苗親本毒株，因此ND-IBDV-VP2二聯(lián)活疫苗的商品化還有待進(jìn)一步研究和發(fā)展。

5.4 火雞皰疹病毒/馬立克載體 馬立克病毒(MD)和火雞皰疹病毒(HVT) 均屬于α皰疹病毒科，目前已在MD/HVT病毒基因組中發(fā)現(xiàn)了多個(gè)病毒體外復(fù)制非必需基因，其中包括US1、US2、US6、US7、US10、UL23、UL40、UL43、UL44、UL45、UL46等，可供多種外源基因插入。MD/HVT接種雞會(huì)引起持續(xù)性的感染，同時(shí)刺激體液和細(xì)胞免疫，接種該載體的單一疫苗能引起長(zhǎng)期免疫[46]。由于其良好的安全性，且疫苗不受母源抗體干擾，使得以MD/HVT為載體研制禽用疫苗成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)，目前國(guó)外已有多個(gè)商品化疫苗上市。Raphael Darteil等[47]首次報(bào)道構(gòu)建表達(dá)IBDV-VP2的HVT載體病毒，使用不同劑量(103～105PFU/羽)接種1日齡雞21 d后，用IBDV強(qiáng)毒株攻擊，105PFU/羽接種組可以提供100%保護(hù)，隨后許多研究報(bào)道均表明表達(dá)VP2蛋白的HVT載體疫苗對(duì)IBDV可以提供良好的保護(hù)。Tsukamoto等[48]構(gòu)建了含不同啟動(dòng)子的rHVT-VP2重組病毒，即rHVT-cmvVP2和rHVT-pecVP2，對(duì)比結(jié)果發(fā)現(xiàn)，攜帶Pec啟動(dòng)子的重組病毒VP2蛋白表達(dá)量是CMV啟動(dòng)子的4倍，對(duì)免疫雞產(chǎn)生100%保護(hù)，而含CMV啟動(dòng)子的重組病毒，免疫效果較差，這表明HVT重組載體病毒的啟動(dòng)子對(duì)疫苗的免疫效果和抗原表達(dá)量有重要影響。Bulbot等[49]使用表達(dá)IBDV-VP2的HVT載體疫苗經(jīng)胚內(nèi)接種或1日齡皮下接種高母源抗體雞群，免疫雞法氏囊沒(méi)有任何損傷，且疫苗能夠提供對(duì)不同IBDV強(qiáng)毒株的保護(hù)，該結(jié)果表明載體疫苗具有高度的安全性和有效性。Roh等[50]用商品化的VAXXITEK HVT-IBD疫苗對(duì)商品肉雞進(jìn)行的免疫接種試驗(yàn)表明，該載體疫苗可以對(duì)肉雞提供良好的免疫保護(hù)，且對(duì)免疫雞法氏囊不引起任何損傷，不誘導(dǎo)免疫抑制。從目前相關(guān)表達(dá)IBDV-VP2載體疫苗的研究和臨床應(yīng)用效果看，表達(dá)VP2的HVT載體疫苗是免疫效果最好，且臨床應(yīng)用最廣泛的載體疫苗。

6 展 望

至目前為止，預(yù)防和控制IBD最經(jīng)濟(jì)最有效的措施仍然是采用疫苗進(jìn)行免疫接種。盡管有許多不同類(lèi)別的商品化疫苗上市，對(duì)IBD的控制和減少養(yǎng)禽業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失也起到了至關(guān)重要地作用，但目前可用于IBD預(yù)防的商業(yè)疫苗仍然存在著一定的局限性，因此新型疫苗研究仍是方興未艾?？梢哉雇S著免疫學(xué)技術(shù)和分子生物技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，快速研制與流行毒株抗原結(jié)構(gòu)相匹配的疫苗成為可能。當(dāng)抗IBDV的母源抗體較高時(shí)，胚內(nèi)接種的免疫復(fù)合物疫苗或重組皰疹病毒載體疫苗可用于規(guī)避母源抗體對(duì)疫苗的干擾問(wèn)題。然而，不建議同時(shí)使用兩種重組皰疹病毒疫苗，因?yàn)榘捳畈《靖腥炯?xì)胞之間的相互干擾會(huì)導(dǎo)致對(duì)一種或兩種目標(biāo)病原體的免疫效果降低，在將來(lái)，也許IBD-DNA疫苗是解決這個(gè)問(wèn)題的途徑。如果能開(kāi)發(fā)新型佐劑和改進(jìn)疫苗接種途徑并使之方便于群體免疫，可提高亞單位、亞病毒顆粒和模擬表位疫苗在養(yǎng)禽業(yè)的實(shí)際應(yīng)用前景?？傊糜陬A(yù)防IBD的新型疫苗必須安全有效，生產(chǎn)成本低廉，且對(duì)大規(guī)模化養(yǎng)禽業(yè)而言使用經(jīng)濟(jì)，只有這類(lèi)疫苗才能成功獲得市場(chǎng)。

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