小檗堿對急性腦梗死患者神經(jīng)功能及血清丙二醛和過氧化氫酶的影響

柴美靜　王佩　李迎　楊凡　盧丹丹　王歡　李紅閃

[摘 要] 目的：探討小檗堿對急性腦梗死患者神經(jīng)功能及血清丙二醛（Malondialdehyde ， MDA）和過氧化氫酶（catalase ， CAT）的影響。方法：102例急性腦梗死患者被隨機分為小檗堿組52例、對照組50例。對照組給予改善循環(huán)、營養(yǎng)神經(jīng)、抗血小板聚集及調脂等基礎治療；小檗堿組在給予對照組治療的基礎之上加用鹽酸小檗堿片0.5 g，每日3次，連續(xù)口服14 d。治療前和治療后7 d、14 d采用美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）進行神經(jīng)功能缺損評分并抽取靜脈血檢測血清中MDA、CAT的水平。結果：治療后7 d，小檗堿組NHISS評分、MDA水平較對照組明顯下降（P<0.01），CAT水平明顯升高（P<0.01）。治療后14 d，小檗堿組NHISS評分、MDA水平較對照組降低，但統(tǒng)計學無差異（P>0.05），CAT水平升高（P<0.001）。結論：小檗堿能提升急性腦梗死患者血清中CAT水平、降低MDA表達水平，改善神經(jīng)功能缺損程度。

[關鍵詞] 急性腦梗死；小檗堿；丙二醛；過氧化氫酶

中圖分類號：R743.33 文獻標識碼：A 文章編號：2095-5200（2017）05-091-03

DOI：10.11876/mimt201705037

由于急性腦梗死高發(fā)病率、高殘疾率、高復發(fā)率、高死亡率特點，其已經(jīng)成為我國中老年人首要死亡和致殘原因[1]。積極探尋更加有效、經(jīng)濟的治療方法，對減輕患者后遺癥，減輕家庭、社會負擔具有重要作用[2]。氧化應激是急性腦梗死的主要生理病理過程之一，缺血后再灌注損傷產(chǎn)生的大量氧自由基引起神經(jīng)細胞凋亡，加重腦梗死患者腦組織的損傷[3]。缺血后氧自由基的產(chǎn)生和清除過程不平衡，產(chǎn)生的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、過氧化氫酶（CAT）對卒中病程的發(fā)展及預后起著重要作用。小檗堿別名黃連素，動物實驗[4]證實小檗堿可以通過抗氧化應激機制對缺血再灌注損傷起到保護作用，且廉價，副作用小，值得進一步臨床研究。本研究檢測血清中MDA及CAT等指標，探討小檗堿對急性腦梗死患者神經(jīng)功能的影響及其機制。

1 資料與方法

1.1 入選與排除標準

符合第四屆腦血管病會議制定的診斷標準[5]；首次卒中急性起病，發(fā)病72小時內(nèi)入院；符合醫(yī)學倫理學的要求，經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會同意；均向患者及家屬告知，簽署知情同意書。排除發(fā)病前任何原因導致的生活不能自理，有癡呆、記憶障礙、昏迷等無法合作者；持續(xù)性難治的惡性高血壓（持續(xù)收縮壓≧200mmHg 或舒張壓≥120mmHg）和心力衰竭者；頭顱CT及核磁證為腦實質出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血、出血性腦梗死及顱內(nèi)占位性病變等；院外接受營養(yǎng)神經(jīng)、清除自由基治療者；有溶栓指征進行溶栓治療者；對鹽酸小檗堿藥物過敏者；心源性缺血性腦梗死；后循環(huán)腦梗死。

1.2 一般資料

選取我院2015年4月至2016年1月住院急性腦梗死患者102例。隨機數(shù)字表法分為兩組，對照組50例，男26例，女24例，年齡37～76（60.32±8.87 ）歲；梗死部位：腦葉25例，丘腦3例，放射冠6例，半卵圓中心6例，基底節(jié)10例。小檗堿組52例，男25例，女27例，年齡35～72（61.02±9.01）歲；梗死部位：腦葉26例，放射冠8例，半卵圓中心4例，丘腦5例，基底節(jié)9例。兩組一般資料差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。兩組均給予改善循環(huán)、營養(yǎng)神經(jīng)、抗血小板聚集及調脂等基礎治療。對照組患者只給予基礎治療。小檗堿組在基礎治療上加用鹽酸小檗堿片0.5克（東北制藥集團沈陽第一制藥有限公司鹽酸小檗堿片）日三次，連續(xù)治療2周。

1.3 觀察指標

于治療前及治療7 d、14 d用美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）進行評分并分別檢測血清中MDA及CAT水平。所有研究對象均在晨起抽肘空腹靜脈血5mL，由專人一次性檢測。MDA測定采用硫代巴比妥酸法，CAT測定采用可見光分度法測定，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，按照酶聯(lián)免疫試劑盒說明書進行操作。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用統(tǒng)計軟件SPSS 19.0進行統(tǒng)計學分析，計量資料，以均數(shù)±標準差表示，進行正態(tài)性分析及方差齊性檢驗，采用方差分析，兩兩比較用SNK-q或LSD檢驗比較，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 2組患者神經(jīng)功能NIHSS評分比較

治療前2組患者NIHSS評分比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；治療后7 d小檗堿組NIHSS評分低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；治療14d后小檗堿組NIHSS評分低于對照組，但統(tǒng)計學無差異（P>0.05）

2.2 2組血清MDA、CAT水平比較

治療前2組患者MDA、CAT比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；治療后7 d小檗堿組MDA明顯低于對照組（P<0.01）；治療14 d后小檗堿組MDA低于對照組，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；治療后7 d、14 d患者血清中CAT小檗堿組高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）

3 討論

腦梗死的發(fā)病機制十分復雜，氧化應激作用機制越來越受到關注[3]。氧化應激本質是缺血再灌注時期產(chǎn)生大量氧自由基，自由基與脂質、蛋白質及核酸發(fā)生反應，引起一系列過氧化損傷，導致膜脂質、蛋白質、DNA等生物大分子的損傷，引起神經(jīng)元細胞凋亡[6]。腦缺血再灌注產(chǎn)生的氧自由基中以 MDA 毒性作用最大。MDA是脂質過氧化反應的終產(chǎn)物之一，由氧自由基和細胞膜不飽和脂肪酸作用產(chǎn)生，損害細胞膜蛋白，它與含有游離氨基的蛋白質、多肽交聯(lián)，形成 schiff 堿，阻礙細胞的正常代謝，損害膜受體，造成神經(jīng)細胞可逆或不可逆損傷[7]。血清CAT屬于一種酶類清除劑，一般存在于組織內(nèi)的過氧化體中或者是紅細胞中，可以將機體內(nèi)過氧化氫分解成分子氧及水，并將過氧化氫清除，從而避免了H2O2對細胞的毒害[8]。降低缺血腦組織的毒性自由基含量成為治療急性缺血性腦卒中的一個重要靶點。endprint

鹽酸小檗堿是一種重要的生物堿，是我國應用很久的中藥。近年國內(nèi)外研究證實小檗堿具有抗動脈粥樣硬化、保護腦缺血的作用，并對其機制作了一定的研究探討。小檗堿可通過抑制PI3K/Akt/mTOR信號通路[9]、阻斷核轉錄因子NF-kB信號通路[10]、細胞外調節(jié)蛋白肌酶（ERK1/2）通路[11]、抑制p38 MAPK通路[12]、抑制LDL-C的氧化修飾及ox-LDL造成的內(nèi)皮功能紊亂[13]、調節(jié)過氧化物體增殖劑活化受體（PPAR）系統(tǒng)調節(jié)炎癥反應[14]等機制對急性腦梗死患者起到抗炎、抗氧化作用。朱華旭等[15]利用“電凝法”制備的局部腦缺血模型實驗證實：小檗堿可以通過升高SOD水平、降低MDA水平，從而抗缺血性腦損傷作用。馬冬影等[16]研究證實小檗堿可升高CAT活性、GSH水平，降低血糖，降低氧化應激，增加神經(jīng)營養(yǎng)因子表達發(fā)揮腦組織保護作用。于丁等[17]利用新西蘭大白兔制作“在體制作心肌缺血再灌注損傷模型”發(fā)現(xiàn)小檗堿可以通過降低心肌組織MDA含量，提高SOD及GSH-Px生物活性對家兔心肌缺血再灌注損傷發(fā)揮保護作用。研究發(fā)現(xiàn)[18]小檗堿可通過增加模型大鼠SOD活性，減少MDA等途徑減少糖尿病模型大鼠認知障礙及海馬組織病理改變發(fā)揮腦保護作用。

本實驗結果顯示，小檗堿治療急性腦梗死患者可以降低7d、14d患者MDA水平，提高7d、14d患者CAT水平，改善患者神經(jīng)功能NHISS評分，且與對照組相比，小檗堿組改善明顯。本實驗在第14dNHISS評分及MDA量小檗堿組與對照組相比降低，但差異無統(tǒng)計學意義，其原因可能與氧化應激作用在急性腦梗死14d后下降，藥物作用不明顯及本實驗樣本量小有關。因此關于小檗堿治療急性腦梗死的確切效果尚需要大樣本隨機雙盲對照實驗進一步證實，進一步闡述其藥物作用機制及確切效果。

參 考 文 獻

[1] CAST Collaborative Group.CAST：a randomized placebo-conrolled trial of early aspirin use in 20，000 patients with acute ischaemic stroke[J].Lancet ，1997，349（9066）：1641-1649.

[2] Wei JW，Heeley EL，Wang JG. et al.Comparison of recovery patterns and prognostic indicators for ischemic and hemorrhagic stroke in China： the ChinaQUEST （QUality Evaluation of Stroke Care and Treatment） Registry study[J]. Stroke， 2010， 41（9）： 1877-1883.

[3] 孔祥溢， 關健， 王任直. 氧化應激在急性腦缺血病程中的分子生物學作用[J]. 中國醫(yī)學科學院學報， 2016， 38（2）：222-227.

[4] 盛明薇， 周園， 喻文立. 小檗堿預處理激活PI3K/Akt/mTOR信號通路減輕大鼠肝臟冷缺血再灌注損傷[J]. 中華器官移植雜志， 2015， 36（1）： 34-39.

[5] 全國第四屆腦血管疾病學術會議.各類腦血管疾病診斷要點（1995）[J].中華神經(jīng)科雜志，1996，29（6）：379.

[6] Liu YQ， Wang ZW， Wei SC， et al. The influences of ultrafiltration and alcohol sedimentation on protective effects of Radix Astragali and Radix Hedyseri against rats cerebral ischemia[J]. Zhongguo Ying Yong Sheng Li Xue Za Zhi， 2015， 31（2）： 132-135. .

[7] Lee JM， Kim CH， Cho HM， et al. Association between serum uric acid level and metabolic syndrome[J]. Prev Med Public Health. 2012，45（3）：182-187.

[8] 孟彥麗，王切，王素玲，等. Prxv和CAT在大鼠腎缺血再灌注損傷模型的表達變化[J].河北醫(yī)科大學學報，2013，5（34）：508-511.

[9] Chai YS， Hu J， Lei F， et al. Effect of berberine on cell cycle arrest and cell survival during cerebral ischemia and reperfusion and correlations with p53/cyclin D1 and PI3K/Akt[J]. Eur J Pharmacol， 2013， 708（1-3）： 44-55.

[10] Zhang X， Zhang X， Wang C， et al. Neuroprotection of early and short-time applying berberine in the acute phase of cerebral ischemia： up-regulated pAkt， pGSK and pCREB， down-regulated NF-κB expression， ameliorated BBB permeability[J].Brain Res，2012，1459：61-70.

[11] Hu J， Chai Y， Wang Y， et al. PI3K p55γ promoter activity enhancement is involved in the anti-apoptotic effect of berberine against cerebral ischemia-reperfusion[J].Eur J Pharmacol， 2012， 674（2-3）： 132-142.

[12] 萬強， 周鳳華， 賈鈺華， 等. 小檗堿抑制p38 MAPK通路降低visfatin誘導HUVEC損傷的研究[J].中藥新藥與臨床藥理， 2015， 26（5）： 586-590.

[13] 鄧翔， 尹凱，涂劍，等. 小檗堿調節(jié)肝X受體α去乙?；龠MTHP-1巨噬細胞ATP結合盒轉運體A1表達及其膽固醇流出[J]. 中國動脈硬化雜志， 2012， 20（12）： 1074-1078.

[14] Chen FL， ZH Yang， Y Liu， et al .Berberine inhibits the expression of TNF-α，MCP-1， and IL-6 in AcLDL-stimulated macrophages through PPAR γ pathway[J]. Endocrie. 2008，33（3）：331-337.

[15] 朱華旭，張新龍，曾明飛.黃連解毒湯中小檗堿在腦缺血模型大鼠體內(nèi)藥動學與藥效學相關性研究[J]. 中草藥， 2012， 43（3）： 546-551.

[16] 馬冬影， 劉繼平， 吉薇薇， 等.小檗堿對糖尿病腦病大鼠海馬組織氧化應激及BDNF表達的影響[J].中藥藥理與臨床，2012， 5（28）： 39-41.

[17] 于丁， 于永燕， 馬千里， 等. 小檗堿對兔缺血再灌注心肌損傷的保護作用[J].山東醫(yī)藥，2012， 15（52）： 51-53.

[18] 馬冬影，劉繼平，吳金婕，等.小檗堿對糖尿病大鼠認知障礙及海馬組織病變的影響[J].中藥新藥與臨床藥理，2012， 6（23）： 631-636.endprint